神经酰胺作为结构骨架可构成各种复杂鞘脂，是脂毒性发挥作用的核心鞘脂代谢物。近年来多项研究表明，肠源神经酰胺在多种代谢性疾病进程中发挥重要作用，可以通过激活不同组织和细胞的线粒体氧化应激、内质网稳态失调及炎性反应机制等影响疾病进程。肠组织能够直接感知肠道微环境变化(如饮食结构变化、菌群结构及其代谢产物改变等)，响应多种不同的信号刺激(如胆汁酸、低氧和炎性反应信号等)，激活包括法尼酯衍生物X受体(FXR)、缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)等信号调节通路，以直接或间接的方式调控神经酰胺代谢。因此，深入探究肠源神经酰胺对不同代谢性疾病发展过程的影响，将为预防和治疗相关疾病提供重要的理论和实践依据。

目的:探讨6尿素神经酰胺对结肠癌细胞增殖的影响及其分子生物学机制。方法:体外培养人源低分化结肠癌细胞系RKO细胞(购自美国典型菌种保藏中心)，经过5(低剂量组)、10(中剂量组)、20 μmol/L(高剂量组)不同浓度的6尿素神经酰胺分别诱导处理RKO细胞24、48、72 h，同时设立空白对照组。分别利用噻唑蓝(MTT)、流式细胞术检测各组细胞相对生存率、凋亡率；蛋白免疫印迹(Western blot)检测各组细胞中Wnt信号通路相关蛋白表达情况。采用SPSS 23.0软件中方差分析和 t检验进行数据统计学分析。 结果:随着药物浓度升高和药物作用时间延长，RKO细胞相对生存率[空白组为100%、100%、100%；低剂量组为(85.35±12.52)%、(72.95±10.11)%、(53.55±8.56)%；中剂量组为(70.75±10.74)%、(56.33±7.05)%、(40.05±10.11)%；高剂量组为(50.55±7.42)%、(35.58±5.75)%、(20.98±7.11)%]显著降低( F＝23.803， P<0.05)，凋亡率显著升高( F＝18.284， P<0.05)，差异均有统计学意义；各组细胞在相应条件下培养24 h后总蛋白激酶B(Akt)、糖原合成酶激酶3(GSK3β)蛋白表达量差异无统计学意义( F＝1.093， P>0.05)，但随着药物浓度增加磷酸化Akt、磷酸化GSK3β和β-连环蛋白(β-catenin)表达量显著降低( F＝6.824， P<0.05)，差异有统计学意义。 结论:6尿素神经酰胺可以通过抑制Akt磷酸化，从而抑制GSK3β磷酸化，减少β-catenin表达，抑制结肠癌细胞增殖。

目前已发现塑料相关内分泌干扰物（endocrine disrupting chemicals，EDCs）暴露与人类心血管疾病（cardiovascular diseases，CVD）风险增加相关，但潜在的机制尚不清楚。孕烷X受体（pregnane X receptor，PXR）是一种具有外源物质感应作用的核受体，且具有促动脉粥样硬化作用。已有研究发现许多EDC具有PXR配体功能，提示PXR介导EDC暴露所致生理病理变化的可能性。该研究从塑化剂邻苯二甲酸二环己酯（dicyclohexyl phthalate，DCHP）暴露对CVD风险因素和脂质稳态产生的不良影响出发，探究PXR的参与机制和作用。该研究使用了多种在体和离体实验模型和方法，包括细胞体外试验、原代类器官培养、PXR条件敲除小鼠和PXR人源化小鼠模型。另外，靶向脂质组学被用于测量循环型神经酰胺水平，作为一种新型预测指标用于CVD的风险评估。研究结果发现DCHP是一种强效PXR选择性激动剂，可致野生型小鼠血浆胆固醇水平升高。肠上皮细胞特异性PXR敲除小鼠实验结果表明DCHP通过激活肠道PXR诱发高血脂症状。DCHP对循环神经酰胺升高的影响具有PXR依赖的特征。此外，DCHP所致PXR激活引起肠道脂肪生成和神经酰胺合成相关基因的表达上调。鉴于PXR在受体药理学方面表现出显著的物种差异，人源化PXR小鼠被用于验证并重复了上述发现。该研究发现了DCHP通过激活PXR致小鼠高胆固醇血症和神经酰胺生成的相关机制，提示了PXR在塑料相关EDC心血管健康风险中的重要作用，以及PXR用于邻苯二甲酸盐等其他EDC风险评估的意义和潜力。

目的 揭示轻度无症状钩虫感染对中老年人群肠道菌群与代谢的影响,为蠕虫-肠道菌群相互作用的研究提供参考.方法 以2022年10月-11月安徽省黄山市祁门县、黄山区乡村土源性线虫病监测点居民检出钩虫感染者(改良加藤厚涂片法钩虫虫卵阳性)为感染组,以钩虫虫卵阴性者为对照组.采集受检者新鲜粪样,提取肠道菌群DNA,扩增16S rRNA基因并测序.计算基于丰度的覆盖估计值(ACE)、PD-wholetree、Chao指数和Shannon指数等多样性指数,采用主坐标分析(PCoA)和不加权算术平均对方法(UPGMA)层次聚类分析的β多样性分析,比较感染组和对照组肠道菌群分布的差异,通过指示值分析筛选两组的指示性菌群.用甲醇-水萃取粪样中的代谢物,进行气相色谱-质谱(GC-MS)和液相色谱-质谱(LC-MS)双平台非靶向测序的代谢组学分析,用正交偏最小二乘方判别分析(OPLS-DA)建立筛选感染组与对照组差异代谢物的模型,制作火山图.根据P值、变量权重值和差异倍数筛选差异代谢产物.通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库检索差异代谢物的相关代谢通路,对差异代谢物进行富集分析.两个代谢物之间的线性相关程度采用Pearson相关分析.结果 研究对象共22人,其中感染组11人,对照组11人.感染组平均年龄72.2岁,均为轻度无症状带虫者;对照组平均年龄53.1岁.测序共获得1 755 649条16SrRNA序列,经序列质控和拼接后聚类为1 245条扩增序列变体.共鉴定出15个门22个纲58个目94个科191个属389个菌种.多样性指数分析结果显示,感染组肠道菌群多样性的ACE、PD-wholetree、Chao和 Shannon指数分别为 188.768、16.533、192.667 和 5.195,对照组分别为 167.829、15.294、157.371 和 4.898,两组间差异均无统计学意义(t=1.266、0.952、1.266、0.962,均P＞0.05).PcoA分析结果显示,感染组与对照组的肠道菌群有不同程度的重叠,但仍可分为两个不同的类群.UPGMA层次聚类分析结果显示,感染组和对照组均先在本组中聚类,再与另一组聚类,两组间仅有1例重叠.多元变量统计分析显示,感染组的优势菌群有7个,分别为普雷沃菌、普氏粪杆菌、变栖克雷伯菌、Parasutteralla、粪球菌、梭菌UCG-014和肠杆菌;对照组的优势菌仅1种,为普通拟杆菌.指示值分析结果显示,感染组指示值居前的菌群依次是普雷沃菌、克雷伯菌、拟杆菌、小杆菌、肠杆菌、粪球菌、UCG-002、粪杆菌;对照组则依次为变形菌门的Clade_Ⅰ a和Clade_Ⅲ、布劳特菌、另枝菌、Lachnoclostridium、嗜胆菌和苏黎世杆菌.建立的OPLS-DA模型能有效区分感染组和对照组的粪样代谢物,共鉴定出400个有差异粪样代谢物,其中156个显著上升,244个显著下降.KEGG富集分析结果显示,差异粪样代谢物显著富集在蛋白质的消化与吸收(P=0.000)、中心碳代谢(P=0.000)、矿物质吸收(P=0.000)、氨酰基-tRNA合成(P=0.000)、神经活性的配体-受体相互作用(P=0.003)等代谢通路上.粪样代谢物中delta 2-三己胺与(22E)-3β-经基-5α-胆甾-7,22-二烯酸(r=0.935,P＜0.01)等15对代谢物呈正相关关系,棕榈酰溶血磷脂酰乙醇胺与氨基戊酸甜菜碱(r=-0.500,P＜0.05)等9对代谢物呈负相关关系.结论 安徽省黄山市乡村中老年人群无症状钩虫感染可影响肠道菌群的组成和代谢,有利于营造有益菌的共生和定植环境.

目的 调查产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的大肠杆菌的流行情况及是否存在交叉感染,为进一步采取有效的护理防控提供参考.方法 将210例患者临床分离的大肠杆菌运用ESBLs表型确证试验确定产ESBLs的大肠杆菌的流行率和科室分布;运用基因外重复回文序列聚合酶链反应对产ESBLs大肠杆菌分布最广泛的科室(泌尿外科)的临床分离株进行同源性分析.结果 产ESBLs的大肠杆菌共122株(流行率58.1％)、泌尿外科24株(流行率68.6％);产ESBLs的大肠杆菌主要分布在泌尿外科(19.7％)、胰腺外科(7.4％)、神经外科(6.6％);泌尿外科检出24株产ESBLs的大肠杆菌标本22例来自于尿液、1例来自于血液、1例来自于咽喉分泌物;24株产ESBLs的大肠杆菌同源性分析结果显示,在泌尿外科共有10个亚型的流行株,以E2(6株克隆株)、E5(4株克隆株)亚型最为流行.结论 产ESBLs的大肠杆菌的流行率较高,泌尿外科感染较为严重.应关注与留取尿标本密切相关的护理操作各环节及留置尿管护理等操作,制定有效的护理防控措施,预防产ESBLs大肠杆菌的暴发流行.

腹泻型肠易激综合征(IBS-D)属于肠易激综合征(IBS)和功能性消化不良(FD)的重叠病情,常累及患者神经系统及内分泌系统[1].复方谷氨酰胺是小肠黏膜细胞、快速增生细胞及免疫细胞的主要能源物质,可在一定程度上缓解肠道损伤所致的炎性反应,保护肠黏膜,促进机体肠道功能恢复[2].益生菌制剂可通过补充肠道有益菌群,恢复肠道微生态平衡,且有报道[3]称,目前IBS-D的发病机制尚未明确且尚无单一药物对IBS-D完全有效,因此本研究拟采用复方谷氨酰胺与益生菌制剂联合治疗IBS-D,旨在探讨其对IBS-D患者肠黏膜屏障功能、机体炎症反应、胃肠功能及免疫功能恢复的影响,现报道如下.

目的 了解我院2013年4月—2014年3月临床分离的30株耐碳青霉烯类肠杆菌科(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)菌株blaNDM-1基因型检出情况,感染患者的临床特征,以及对常用抗菌药物的耐药特点.方法 临床分离菌株由美国BD公司生产的Phoenix-100全自动细菌鉴定/药敏系统进行菌株鉴定和药敏试验.改良Hodge试验检测产碳青霉烯酶,EDTA协同试验筛查金属β-内酰胺酶.利用特异性引物进行blaNDM-1基因PCR扩增,采用双脱氧末端终止法进行DNA测序,所测序列与GenBank基因库中的已知序列进行BLAST比对.结果 (1)菌株分布情况:我院2013年4月—2014年3月临床标本中分离出对碳青霉烯类抗生素耐药肠杆菌科细菌共30株,其中肺炎克雷伯菌16株,占53.3％;阴沟肠杆菌12株,占40.0％;布氏柠檬酸杆菌和弗氏柠檬酸杆菌各1株,blaNDM-1基因确证,共有5株为产NDM-1酶菌株,5株菌包括肺炎克雷伯菌2株,阴沟肠杆菌2株,布氏柠檬酸杆菌l株,这些细菌来自不同的科室,但主要分布在重症医学科(15/30,50.0％),神经内科重症病房(8/30,26.7％).标本主要来源于痰(20/30,66.7％),其次为尿液(5/30,16.7％),血液4株(13.3％),引流液1株(3.3％).5株产NDM-1酶菌株分离自4例患者,3株分离自患者尿液标本,2株分离自患者痰标本;感染患者平均年龄为73岁,平均住院时间10个月,2例死亡.(2)药物敏感性试验结果:30株CRE对碳青霉烯类抗生素亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为100％和86.7％,对其他β-内酰胺类抗生素耐药率均为100％;对氯霉素、庆大霉素、左氧氟沙星、环丙沙星的耐药率在76.7％～93.3％之间;对多黏菌素和替加环素敏感率高达100％,其次为复方磺胺甲噁唑和阿米卡星,敏感率分别为66.7％和46.7％.5株产NDM-1酶菌株对多黏菌素和替加环素均敏感,3株对复方磺胺甲噁唑敏感,2株对阿米卡星敏感;而对β-内酰胺类抗生素以及喹诺酮类、氯霉素类等均耐药.结论 我院流行的CRE菌株主要分离自重症医学科和神经内科重症病房患者,对多种抗生素呈高度耐药,其中产NDM-1酶菌株主要来自长期住院的高龄患者,且死亡率较高,应对其感染的风险因素进行调查,并有针对性的采取感染预防措施进行防控.

目的 研究检验科微生物室多药耐药菌检出种类及分布特点.方法 选取2015年2月-2017年2月医院检验科微生物室检测并报告为细菌等培养阳性的住院患者临床资料,由合格标本中分离出多药耐药菌400株,进行接种和分离培养,并进行细菌鉴定和药敏试验.试验过程中,统计计算多药耐药菌标本的来源及分布、多药耐药菌的种类分布、在不同标本中分布及其在不同科室中的分布情况.结果 检验科微生物室共检出400株多药耐药菌,标本主要来源于患者痰或气道分泌物及尿液中,分别为165株占412.5％ 、167株占417.5％;400株多药耐药菌中,检出革兰阳性菌72株占180.0％,革兰阴性菌328株占820.0％;痰或气道分泌物、血液、尿液及分泌物或引流物等各类标本中检出均以产超广谱 β-内酰胺酶大肠埃希菌(ESBLs-ECO)为主,共检出237株占592.5％;多药耐药菌分布的科室以重症监护室为主,为140株占350.0％,其次为神经外科和泌尿外科,分别为67株占167.5％ 和43株占107.5％.结论 多药耐药菌感染主要以产ESBLs-ECO为主,但患者不同病发位置、医院不同科室感染病原菌的种类各有不同.

[目的]通过RNAi技术分析明确对马铃薯甲虫Leptinotarsa decemlineata黑色素形成重要的N-β-丙酰多巴胺(NBAD)水解酶基因的功能.[方法]NBAD水解酶基因通过马铃薯甲虫转录组数据分析和RT-PCR克隆获得,分别利用序列比对和系统发育分析确定该基因的完整性和系统发育;通过qPCR检测其在马铃薯甲虫各发育阶段和4龄幼虫不同组织及成虫精巢和卵巢中的表达量;采用喂食幼虫dsRNA的方法,观察该基因在马铃薯甲虫幼虫的生长发育过程中对体色的影响,并测定保幼激素和蜕皮激素对该基因表达的影响.[结果]克隆得到马铃薯甲虫NBAD水解酶基因,命名为Ldtan(GenBank登录号:KY221866),其编码蛋白的氨基酸序列与鞘翅目赤拟谷盗Tribolium castaneum和山松大小蠹Dendroctonus ponderosae同源蛋白的氨基酸序列的一致性最高,聚为一支.Ldtan在马铃薯甲虫4龄幼虫腹神经索(99.36±0.95)、后肠(17.79±3.11)和表皮(9.21±0.12)中的相对表达量较高;在幼虫期随幼虫生长发育表达量逐渐升高,在成虫期的表达量最高.通过喂食2龄幼虫Ldtan的dsRNA能有效降低靶标基因的表达量,使幼虫体色变深呈一定的棕褐色,并且具有一定的致死效应.通过RNAi技术干涉保幼激素合成和信号途径相关基因,发现Ldtan表达量降低,而干扰蜕皮激素合成和信号途径相关基因,Ldtan表达量增加.[结论]结果提示Ldtan参与了马铃薯甲虫的黑色素合成,并且蜕皮激素和保幼激素可能影响其表达.

目的 对南方医科大学南方医院的细菌耐药性进行连续监测和报告,及时了解该院临床常用抗生素的耐药率及其发展动态趋势.方法 纳入该院2013—2017年临床分离菌株,分析其检出率、标本来源、科室分布情况、抗菌药物耐药性及对碳青霉烯类抗菌药物耐药性的变化趋势.结果 5年临床分离菌共25731株,革兰阴性菌12097株(47.0％),革兰阳性菌13634株(53.0％).其中最常见的菌种依次为:大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌等.检出标本主要来源于呼吸道(痰、咽拭子等)33.88％、分泌物20.40％、中段尿19.19％;主要集中在神经内科17.71％、神经外科14.25％ 和呼吸内科9.71％.送检标本中产超广谱 β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率呈逐年上升趋势,差异有统计学意义(χ2=11.171,P=0.025;χ2=28.797,P<0.001).此外,肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南和美罗培南的耐药性亦呈逐年上升趋势.结论 该院大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的耐药性整体呈上升趋势,其中耐碳青霉烯类及产ESBLs的菌株检出率上升较为明显,应提高临床合理使用抗菌药物的水平,加强细菌耐药监测,避免耐药菌在院内流行或泛滥.