目的 构建胰岛素抵抗(IR)小鼠小肠类器官模型,研究两色金鸡菊黄酮类成分黄诺玛苷对肠黏膜屏障的保护作用.方法 ①构建C57BL/6J和db/db小鼠小肠类器官模型,3D免疫荧光染色观察小肠类器官细胞核核抗原(Ki-67)、上皮细胞E钙黏蛋白(E-cad)、溶菌酶(Lyz)和黏蛋白2(MUC-2)表达,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测纤连蛋白(Fn)、胰高血糖素样肽1(GLP-1)和肽YY(PYY)mRNA表达;Western印迹法检测Fn,GLP-1和PYY蛋白表达;ELISA检测Lyz分泌水平.② 将构建的小鼠小肠类器官分为5组:以C57BL/6J小鼠小肠类器官为正常对照组,db/db小鼠小肠类器官为IR模型组,db/db小鼠小肠类器官用黄诺玛苷25,50和100 μmol·L-1处理48h为IR模型+黄诺玛苷组,RT-qPCR检测各组类器官Lyz mRNA表达,Western印迹法检测Lyz蛋白表达.结果 ①C57BL/6J和db/db小鼠小肠类器官培养第6天形成管腔结构清晰的环状结构,IR小鼠小肠类器官模型建立成功.3D免疫荧光检测结果显示,建立的小肠类器官均表达Ki-67,E-cad,Lyz和MUC-2;RT-qPCR结果显示,与正常对照组相比,IR模型组Fn mRNA表达显著升高(P<0.05),GLP-1和PYY mRNA表达显著降低(P<0.05);Western印迹法结果显示,与正常对照组相比,IR模型组Fn蛋白表达显著升高(P<0.01),GLP-1(P<0.01)和PYY(P<0.05)蛋白表达显著降低;ELISA结果显示,与正常对照组相比,IR模型组Lyz分泌量显著降低(P<0.01).②RT-qPCR结果显示,与正常对照组相比,IR模型组Lyz mRNA表达水平显著降低(P<0.01);与IR模型组相比,IR模型+黄诺玛苷50和100 μmol·L-1组Lyz mRNA表达水平显著增加(P<0.05,P<0.01);Western印迹法结果显示,与正常对照组相比,IR模型组Lyz蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与IR模型组相比,IR模型+黄诺玛苷50和100 μmol·L-1组Lyz蛋白表达显著增加(P<0.05,P<0.01).结论 构建的IR小鼠小肠类器官模型为探讨药物干预修复肠黏膜屏障的病理生理机制提供了更完善的体外研究模型.黄诺玛苷可能通过逆转IR小鼠Lyz表达水平的降低维护肠黏膜屏障,进而发挥改善IR作用.

胰升糖素肽-1(GLP-1)是主要由肠道L细胞分泌的一种胃肠道激素,其对2型糖尿病患者具有多重影响,促进胰岛素分泌、改善β细胞功能、降低胰高血糖素分泌、延缓胃排空、增强饱腹感和减少食欲,给2型糖尿病患者治疗带来新的契机.GLP-1及其相关药物对2型糖尿病血管并发症具有保护作用,加强这方面的研究可能会为2型糖尿病及其相关的微血管、大血管病变的治疗带来新的希望.现综述GLP-1及其相关药物对2型糖尿病血管并发症的影响研究进展.

[目的]探讨二甲双胍联合利拉鲁肽对2型糖尿病(T2DM)患者胰岛α和β细胞、细胞因子及细胞免疫功能的影响.[方法]选择2016年4月至2017年4月本院诊治的 T2DM患者102例,按照随机表法分为观察组和对照组,每组51例.观察组采用二甲双胍联合利拉鲁肽治疗,对照组仅采用二甲双胍治疗.两组疗程均为12周.比较两组治疗前后空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、空腹胰高血糖素(FGlg)、白介素-6(IL-6)、胰岛素生长因子-1 (IGF-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、CD3+、CD4+和CD4+/CD8+变化.[结果]两组治疗后FPG、2 hPG和HbA1c均较治疗前下降(P <0.05);观察组治疗后FPG、2hPG和HbA1c低于对照组(P <0.05).两组治疗后HOMA-IR和FGlg降低而HOMA-β增加(P <0.05);观察组治疗后HOMA-IR和FGlg低于对照组而HOMA-β高于对照组(P <0.05).两组治疗后IL-6、IGF-1、TNF-α水平降低(P <0.05);观察组治疗后IL-6、IGF-1、TNF-α水平低于对照组(P <0.05).两组治疗后CD3+、CD4+和CD4+/CD8+增加(P <0.05);观察组治疗后CD3+、CD4+和CD4+/CD8+高于对照组(t =10.8227、5.9040、7.1660,P<0.05).两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P >0.05).[结论]二甲双胍联合利拉鲁肽治疗 T2DM患者疗效显著,改善患者胰岛α和β细胞、细胞因子及细胞免疫功能,值得临床推广应用.

糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病,发病率极高,并发症较多,目前已成为世界范围内日益严重的公共健康问题,严重影响人民的生活质量.磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路是胰岛素信号转导的主要途径,也是调控血糖的主要信号通道,其信号分子的异常可引起信号转导途径异常,从而影响相应组织器官细胞的增殖、凋亡、转移和侵袭,导致疾病的发生.研究PI3K/Akt信号通道对于考察中药是否具有明确而稳定的降血糖作用具有积极的意义.目前,治疗糖尿病的中药、西药相对较多,但多数药物尤其是西药对于并发症的控制相对较差,为了解中药在治疗糖尿病方面的进展,以期更好地研究中药在糖尿病方面的综合治疗作用及机制,进一步发挥中医药在糖尿病治疗方面的多靶点、多途径、多通道、标本兼治的优势与特色,本文就近年来基于PI3K/Akt信号通路的中药治疗糖尿病体内、外研究进行了较为系统的分析,包括基于该信号通道的对糖尿病产生直接原因的胰岛素分泌的影响、对胰岛素3个主要靶器官(肝、骨骼肌、脂肪)及对糖尿病4个主要并发症相应部位(脑、肾、心、睾丸)的影响,也为研究中药单味药及复方的降血糖机制研究提供一定的思路及指导.

目的:交泰丸为中医治疗失眠的经典方剂,目前临床采用异病同治理念治疗糖尿病,且有较好的疗效,明确其潜在作用机制具有重要意义.方法:该研究基于整合药理学策略及平台(integrative pharmacology platform of traditional Chinese medicine TCMIP)研究交泰丸的作用靶点及机制等,构建其治疗糖尿病的核心靶点网络,进一步对获取靶点进行基因功能及通路富集分析,构建可视化的“交泰丸-活性成分-核心靶点-关键通路”的多层次关联网络.结果:共得到交泰丸中活性成分28个.这些成分治疗糖尿病涉及核心靶点187个,包括疾病靶点15个,如精氨酸加压素受体2(vasopressin V2 receptor,AVPR2),受体活性修饰蛋白1(receptor activity-modifying protein 1,RAMP1),受体活性修饰蛋白1(receptor activity-modifying protein 3,RAMP3),胰岛索受体(insulin receptor,INSR)及胰岛素样生长因子受体1(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF1 R)等;潜在药物靶点71个,如细胞周期蛋白依赖性激酶9 (cyclin-dependent kinase 9,CDK9),葡萄糖激酶(glucokinase,GCK),核转录因子-κB抑制剂α(NF-kappa-B inhibitor alpha,NF-κB1α),核转录因子-κB p100亚型(NF-kappa-B p100 subunit,NFKB2)及缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1 alpha,HIF1α)等.结论:交泰丸治疗糖尿病的机制涉及活化腺苷酸环化酶活性、细胞胰高血糖素反应、激活丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)活性、内分泌系统、促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)信号通路、趋化因子及磷脂酰肌醇三激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶(phosphatidylinositol 3-kinase-serine/threonine kinases,PI3K-Akt)等生物过程和信号通路等.该研究为深入探讨交泰丸治疗糖尿病的潜在机制提供了科学依据.

研究表明,在一些特定的条件如糖尿病、胰岛素抵抗、肥胖、妊娠等代谢应激过程中,胰岛α细胞可被诱导表达激素原转换酶1/3,进而产生有生物活性的胰高血糖素样肽-1(GLP-1).这种在代谢应激条件下被激活的胰岛内源性GLP-1信号可能通过局部旁分泌形式作用于邻近的β细胞,作为保护胰岛β细胞免受代谢应激损伤的内源性适应性代偿性机制.而且,多种生理及病理因素如GLP-1、葡萄糖依赖性促胰岛素释放肽、胰岛素、胆囊收缩素及细胞因子如白细胞介素-6、基质细胞衍生因子-1等都可以通过多种细胞内信号机制调节胰岛内源性GLP-1信号的表达.以增强内源性GLP-1信号为靶点的药物可能用于糖尿病的治疗.

目的:利用网络药理学探索小陷胸汤治疗2型糖尿病(T2DM)的药理机制.方法:在中药系统药理学技术平台(TCMSP)网站检索小陷胸汤的主要活性成分、对应的作用靶点及靶标基因,通过人类基因数据库(Gene Cards)获得T2DM的相关靶标基因,将药物活性成分靶点与T2DM靶点相映射,获得交集靶点即为小陷胸汤作用于T2DM的预测靶点.利用Cytoscape 3.7.1软件构建药物活性成分-交集靶点网络模型,选出关键活性成分.利用STRING网站构建交集靶点蛋白相互作用网络(PPI),选出关键靶点基因.利用DAVID 6.8在线工具对交集靶点进行基因本体(GO)分析和基于京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.结果:小陷胸汤作用于T2DM的活性成分有30个,相关靶点156个,关键有效成分14个,关键靶点基因18个.GO分析显示,小陷胸汤治疗T2DM潜在基因的生物功能主要涉及转录调控、氧化应激、蛋白结合和炎症反应等;KEGG通路富集显示小陷胸汤治疗T2DM影响的通路主要有缺诱导因子-1(HIF-1)信号通路,肿瘤坏死因子(TNF)信号通路,Toll样受体信号通路,甲状腺激素信号通路,磷脂酰肌醇氧3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路,乙肝,丙肝,酪氨酸激酶受体2(ErbB)信号通路,钙离子信号通路和核转录因子-κB(NF-κB)信号通路等.结论:小陷胸汤治疗T2DM机制可能是通过抑制炎症因子分泌,参与抗炎反应,降低氧化应激,升高细胞内钙离子浓度,阻断胰高血糖素信号通路,激活PI3K/Akt通路等来改善胰岛素抵抗,提高胰岛素敏感性,降低血糖.

目的 探讨新型胰高血糖素样肽1和葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽双受体激动剂(DA3-CH)对糖尿病大鼠脑缺血再灌注模型炎性反应的影响.方法 将54只SD大鼠随机分为5组:对照组6只、模型组12只、单模组12只、实验组12只、药物组12只.后4组用改良线栓法造脑缺血再灌注模型,其中模型组和药物组于脑缺血再灌注模型前先用链脲佐菌素造糖尿病模型,实验组和药物组造模前给腹腔注射DA3-CH 10 nmol/(kg·d),连续14 d.测定各组血糖、体质量及Longa评分,氯化2,3,5-三苯基四氮唑染色法测定脑梗死体积比,采用Western blot测定TNF-α、白细胞介素(IL)-1β、NF-κB蛋白表达.结果 与对照组和单模组比较,模型组血糖明显升高[(22.82±7.04) mmol/L vs (5.58±1.09) mmol/L和(5.29±0.78)mmol/L,P＜0.01];体质量明显下降[(292.6±10.1)g vs(303.6±10.7)g和(301.2±12.8)g,P＜0.05].模型组较单模组和药物组Longa评分明显升高(P＜0.05,P＜0.01).模型组较单模组脑梗死体积比明显增大(0.44±0.02 vs 0.16±0.02,P＜0.01);实验组较药物组脑梗死体积比明显减小(0.12±0.01 vs 0.37±0.02,P＜0.01);药物组较模型组脑梗死体积比亦明显减小(P＜0.05).模型组TNF-α和IL-1β及NF-κB蛋白表达较单模组和药物组增加(P＜0.01);实验组TNF-α和IL-1β及NF-κB蛋白表达较单模组减少(P＜0.05).结论 糖尿病加重脑缺血再灌注损伤,炎性反应在糖尿病加重脑缺血再灌注损伤中有重要作用;DA3-CH可能通过减轻神经炎症对合并糖尿病的脑缺血再灌注损伤起保护作用.

近年来的研究发现,与糖尿病并发的多种神经系统疾病,可随着治疗糖尿病的胰高血糖素样肽1受体激动剂(GLP?1RA)的使用而得到改善,但其具体机制尚不完全清楚.天然的GLP?1是进食诱导刺激回肠和结肠的L细胞分泌的肠肽类激素,其可促进胰岛素的合成和分泌.为克服GLP?1半衰期短而开发的多种长效GLP?1RA已经在临床上广泛应用,如艾塞那肽、利拉鲁肽、阿必鲁肽、度拉糖肽等,这些药物表现出在控制血糖水平和体重上的优势.由于GLP?1受体广泛分布于胰腺、肺、脑、心脏、肾和胃肠等组织细胞膜上,因此GLP?1RA的作用不仅仅在治疗糖尿病方面.已有的报道表明,GLP?1RA还具有显著的神经、心血管、肾脏保护,以及抗呼吸道炎症和减脂等多种作用.GLP?1受体在脑中亦有广泛分布,且GLP?1RA可有效通过脑血管屏障.GLP?1RA与相应受体结合,可激活PKA、PI3K/AKT、ERK、MEK等多个激酶信号通路,调节神经递质传递,这可能是GLP?1RA实现抗炎、减少氧化应激、抑制凋亡、减少DNA损伤、神经细胞修复,最终达到神经保护的途径.该文结合基础及临床研究,对GLP?1RA在缺血性脑卒中、认知功能障碍、帕金森病等多种神经系统疾病中神经保护方面的研究进展进行综述,以期总结其作用机制,并讨论其作为神经保护药物的可能性.