-
外源性小肠类器官对坏死性小肠结肠炎新生小鼠肠道损伤的保护作用
编辑人员丨5天前
目的:探讨外源性小肠类器官(intestinal organoid,IO)肠道内灌注对坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)新生小鼠肠道损伤的影响及相关机制,为探索NEC新型防治方法及临床转化提供依据。方法:取9日龄健康C57BL/6新生小鼠末端回肠组织体外培养IO,培养7 d后鉴定IO并将其重悬于磷酸盐缓冲溶液用于干预实验。选用5日龄C57BL/6新生小鼠,按照随机数字法随机分成4组:正常对照组(control组,仅母鼠母乳喂养,无其他干预措施)、实验对照组(control+IO组,母鼠母乳喂养,于生后第6天进行类器官干预)、NEC组(于生后第5至9天之间,诱导新生鼠NEC发生)、实验干预组(NEC+IO组,诱导NEC同时于生后第6天进行类器官干预),每组5只小鼠。生后第9天收集各组新生小鼠末端回肠组织,分析比较各组小鼠肠道损伤程度,肠道炎症反应,肠道干细胞活性、肠上皮细胞增殖能力变化并进一步比较各组Wnt/β-catenin通路活性。计量资料多组间比较采用ANOVA检验,单因素方差分析后进一步两两比较使用LSD检验;计数资料多组比较采用Kruskal-Wallis非参数检验;生存分析采用Log-rank(Mantel-cox)检验。结果:与control组相比,NEC组小鼠累积存活率显著降低(NEC组比control组:100.00%比42.42%, P<0.001),肠道组织病理评分[NEC组比control组:3(2.5~3)比0(0~0.5), P<0.01]与IL-6 mRNA表达水平[NEC组比control组:(4.52±0.82)比(1.01±0.23), P<0.001]均明显升高,而Lgr5 mRNA表达水平[NEC组比control组:(0.02±0.01)比(1.03±0.40), P<0.001]、Ki-67 mRNA表达水平[NEC组比control组:(0.18±0.06)比(1.00±0.15), P<0.001]显著下降,单个隐窝内Ki-67 +细胞个数[NEC组比control组:(3.17±2.04)比(9.17±1.47), P<0.001]明显减少,β-catenin mRNA表达水平[NEC组比control组:(0.01±0.01)比(1.23±0.42), P<0.05]及β-catenin蛋白活化水平(即非磷酸化β-catenin)[NEC组比control组:(0.14±0.04)比(0.92±0.41), P<0.001]明显降低。而相较于NEC组,NEC+IO组小鼠累积存活率显著提高(NEC组比NEC+IO组:42.42%比69.84%, P<0.001),NEC病理评分[NEC组比NEC+IO组:3(2.5~3)比0(0~1.5), P<0.05]与IL-6 mRNA表达水平[NEC组比NEC+IO组:(4.52±0.82)比(1.04±0.18), P<0.001]均显著降低,Ki-67 mRNA表达水平[NEC组比NEC+IO组:(0.18±0.06)比(0.37±0.10), P<0.05]升高,单个隐窝内Ki-67 +细胞个数明显增加[NEC组比NEC+IO组:(3.17±2.04)比(12.67±1.51), P<0.001]。此外,肠道β-catenin mRNA表达水平[NEC组比NEC+IO组:(0.01±0.01)比(2.44±1.19), P<0.001]及β-catenin蛋白活化水平[NEC组比NEC+IO组:(0.14±0.04)比(0.54±0.25), P<0.05]均升高。 结论:外源性IO可以缓解NEC肠道损伤,抑制肠道炎症反应,提高肠道内细胞增殖水平,改善肠道干细胞活性,Wnt/ β-catenin信号通路可能参与介导了上述IO干预作用。
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
基于国家手术部位感染监测网2018—2021年中国急诊腹部术后手术部位感染发生情况调查及其因素分析
编辑人员丨5天前
目的:调查中国急诊腹部手术(EAS)后发生手术部位感染(SSI)的情况,进一步探讨其风险因素,为EAS后防控SSI的出现提供参考依据。方法:采用观察性研究的方法。对国家SSI监测网2018—2021年期间前瞻性录入接受EAS的患者信息数据进行回顾性分析,所有患者随访至术后30 d。分析数据包括患者的一般资料,围手术期相关临床数据包括术前血红蛋白和白蛋白及血糖水平、美国麻醉医师协会(ASA)评分、手术切口等级、是否肠道准备及其方式、是否备皮、手术部位、手术方式以及手术时间等资料。主要结局指标为EAS术后30 d内SSI的发生情况,包括SSI发生率、感染类型[浅部切口感染、深部切口感染和器官(腔隙)感染]以及分泌物及脓液培养结果;次要结局指标为术后30 d内病死率、术后重症监护室(ICU)入住率和入住时间、术后总住院时间以及住院费用。依据是否发生感染,将患者分为SSI组和非SSI组,采用单因素及多因素logistic回归分析EAS后SSI发生的风险因素。结果:共纳入5 491例接受EAS的患者,其中男性3 169例,女性2 322例。168例(3.1%)EAS术后发生SSI(SSI组),非SSI组患者5 323例。SSI组中,浅部切口感染69例(41.1%),深部切口感染51例(30.4%),器官(腔隙)感染48例(28.6%);分泌物及脓液培养结果阳性者115例(68.5%),其中大肠埃希菌检出率最高为40.9%(47/115)。SSI组与非SSI组比较,性别及体质指数差异无统计学意义(均 P>0.05);但SSI组年龄≥60岁者的比例[49.4%(83/168)比27.5%(1 464/5 323),χ 2=38.604, P<0.001]、伴有糖尿病和高血压患者的比例[11.9%(20/168)比4.8%(258/5 323),χ 2=16.878, P<0.001;25.6%(43/168)比12.2%(649/5 323),χ 2=26.562, P<0.001]以及术前血红蛋白<110 g/L者[27.4%(46/168)比13.1%(697/5 323),χ 2=28.411, P<0.001]和白蛋白<30 g/L者[24.4%(41/168)比5.9%(316/5 323),χ 2=91.352, P<0.001]比例均偏高;术前备皮占比偏低[66.7%(112/168)比75.9%(4 039/5 323),χ 2=7.491, P=0.006];术前ASA评分1~2分者比例同样偏低[56.0%(94/168)比88.7%(4 724/5 323),χ 2=162.869, P<0.001];手术污染和感染切口的比例高[63.1%(106/168)比38.6%(2 056/5 323),χ 2=40.854, P<0.001];SSI组与非SSI组手术部位比较,小肠29.8%(50/168)比10.6%(565/5 323),结直肠26.2%(44/168)比5.6%(298/ 5 323),阑尾24.4%(41/168)比65.1%(3 465/5 323),差异有统计学意义(χ 2=167.897, P<0.001);腹腔镜或机器人手术比例明显低于非SSI组[24.4%(41/168)比74.2%(3 949/5 323),χ 2=203.199, P<0.001];手术持续时间<2 h患者的比例较低[35.7%(60/168)比77.4%(4 119/5 323),χ 2=155.487, P<0.001]。而在临床结局上,与非SSI组比较,SSI组术后30 d病死率更高[3.0%(5/168)比0.2%(10/5 323),χ 2=36.807, P<0.001],术后ICU入住率也高[41.7%(70/168)比19.7%(1 046/5 323),χ 2=48.748, P<0.001],ICU中位住院时间[0(2)d比0(0)d, U=328 597, P<0.001]、术后中位总住院时间[16(13)d比6(5)d, U=128 146.000, P<0.001]和中位住院费用[4.7(4.4)万元比1.7(1.8)万元, U=175 965.000 ,P<0.001]均显著增加。多因素logistic回归分析显示,术前未备皮(OR=2.435,95%CI:1.690~3.508, P<0.001)、术前白蛋白<30 g/L(OR=1.680,95%CI:1.081~2.610, P=0.021)、污染或感染切口(OR=3.031,95%CI:2.151~4.271, P<0.001)和开腹手术(OR=3.436,95%CI:2.123~5.564, P<0.001)是发生SSI的独立危险因素;手术持续时间<2 h(OR=0.465,95%CI:0.312~0.695, P<0.001)及ASA评分1~2分(OR=0.416,95%CI:0.289~0.601, P<0.001)是SSI的独立保护因素。 结论:针对接受EAS的患者,在围手术期应重点关注患者的营养状态,做好术前皮肤准备,尽量选择腹腔镜或机器人辅助的手术方式,在保证手术质量的前提下,尽可能缩短手术时间,对于切口污染或感染严重的患者应加强护理。
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
脓毒症科学计量学图谱特征
编辑人员丨5天前
目的:阐明我国在脓毒症领域的研究内容、当下热点及未来趋势等相对完整的知识体系,以帮助重症领域学者把握其科研方向与临床重心。方法:基于科学网(Web of Science)来源数据,筛选出1985至2019年我国脓毒症研究的关联文献;借助CiteSpace 5.6.R2和VOSviewer 1.6.13可视化软件,运用数据挖掘、信息处理和知识计量方法,绘制脓毒症研究的网络知识图谱,呈现脓毒症相关研究内容,分析我国脓毒症研究的历史演变进程并预测其发展趋势。结果:共纳入我国学者发表的有关脓毒症论著及综述类文献8 189篇,1985至2019年我国脓毒症发文量逐年递增,2019年达发文高峰(1 276篇)。在研究方法上,形成了以脓毒症流行病学研究和动物实验为中心的两大支撑点。通过聚类分析发现,脓毒症研究热点主要集中在脓毒性大鼠、坏死性小肠结肠炎、脓毒症相关性脑病、急性肾损伤、肠源性脓毒症和炎性介质六大主题,涉及肠、脑、肝、肾等器官损伤的科研工作较多,而心、肺研究较为边缘化。此外,基于突现关键词强度与时间,内毒素、内毒素休克等为持续关注热点,炎症、免疫、多器官功能障碍综合征(MODS)关联研究为核心研究热点,诊断、化学疗法等综合管理为新增研究热点。结论:我国脓毒症研究现状偏于动物实验、流行病学等基础层面,其研究内容多围绕炎症反应、免疫功能或某一器官功能障碍展开。预测在流行病学、诊断、危险因素、发病机制、治疗等科研基础上,有关儿童脓毒症、MODS相关器官损伤机制和干预挖掘,以及中西医结合实行综合管理脓毒症研究或为未来研究方向。
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
活体小肠移植的历史、现状与未来
编辑人员丨5天前
小肠移植是救治肠功能衰竭患者的重要手段。活体小肠移植是将健康捐献者的部分小肠切除移植给受者,该方法具有器官缺血时间短、组织相容性好、排斥反应低以及术前准备充分等优势。目前全球共施行此类手术超过100例,受者和器官存活率优于遗体捐献小肠移植、中远期存活率等同于家庭肠内营养,而受者生存质量更有优势。随着经验积累和技术提高,活体小肠移植已经成为肠衰竭患者的重要治疗选择,如家庭肠外营养(home parenteral nutrition, HPN)治疗失败,小肠移植是挽救患者生命的唯一手段。本文进一步阐明小肠移植排斥反应的发生机制,探讨敏感性、特异性强的早期肠功能监测新技术、进一步研究防治抗体介导的排斥反应的新方法、阐明肠道菌群与预后的关系以及降低小肠的缺血再灌注损伤,对于提高小肠移植的远期疗效意义重大。
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
对空盆腔综合征的认识及其防治
编辑人员丨5天前
随着现有手术技术、器械设备及治疗理念的不断更新进步,越来越多的医疗中心开始对于累及盆腔多器官及复发性盆腔恶性肿瘤的患者开展更加积极的扩大切除手术。扩大手术范围可以提高切缘阴性比率,实现肿瘤的R 0切除,有效改善患者预后并延长生存时间。因此,盆腔脏器联合切除术对于局部晚期的盆腔恶性肿瘤患者,已经逐渐成为标准的手术方式。目前,在开展盆腔脏器联合切除手术过程中,面临的主要问题仍然是患者术中和术后并发症发生率及病死率偏高以及长期生活质量较低。对于盆腔脏器联合切除术后并发症的相关研究,现逐渐聚焦于盆腔术后残存的巨大空腔,这可能是此类并发症的重要诱因,并由此提出了“空盆腔综合征”这一概念。本文在汇总空盆腔综合征相关文献基础上,分析其发生的原因可能为盆腔脏器联合切除术后,封闭的盆腔残腔随着空腔内空气被逐渐吸收、细菌繁殖及积液富集等过程而形成持续存在的负压,进而对整个腹盆腔内器官分布产生影响;同时,物理过程在参与空盆腔综合征的发生过程中是否也发挥着作用,有待探讨。汇总提出,其诊断主要依据患者病史、临床表现及影像学征象,而盆腔脏器切除手术史是病史诊断中最重要的指标。在预防措施上,首先应识别空盆腔综合征发生的高危人群,进而采取精准而个体化的预防措施;各种新型生物材料较传统的人体组织填充,在预防性盆腔填充方面更具优势;肠系膜对于小肠形态、蠕动和排列具有重要作用,通过保护肠系膜结构、恢复或重建肠系膜形态等方法,减少小肠异位入盆腔的机会,应获得更多关注。在治疗措施上,目前尚缺乏空盆腔综合征的标准治疗路径。
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
切除小肠确诊成人过敏性紫癜一例
编辑人员丨5天前
过敏性紫癜好发于儿童,发生于成年人的病例非常罕见,不容易确诊,特别是出现消化道出血和穿孔时,诊断更加困难。该文报道1例发生于西藏地区藏族成年男性的过敏性紫癜病例,患者病情危重、复杂,多系统器官受累,以消化道出血为主要表现,临床诊断困难。因发现小肠穿孔行急诊手术切除病变段小肠,经病理检查证实为血管炎并多学科会诊讨论,最终明确诊断为IgA血管炎(过敏性紫癜)。此类病例较少见,总结此类病变的临床病理特征,旨在加深对该疾病的认识,对临床及病理医师有所启发。
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
新型培养体系下小肠类器官模型的构建
编辑人员丨5天前
目的:构建具有损伤再生能力的新型小肠类器官,体外模拟肠道损伤、再生和修复过程。方法:分离6~8周龄、18~24 g无特定病原体动物级C57BL/6小鼠回肠黏膜隐窝结构,设计ENR、ENR+肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和8C培养体系,分别构建肠道稳态、炎症损伤和损伤再生条件下的小肠类器官并观察形态。通过免疫荧光染色检测类器官包含的细胞类型和空间排布,以及损伤再生基因凝集素蛋白( Clu)、膜联蛋白A1( Anxa1)、干细胞抗原1( Sca1)和小鼠再生胰岛衍生蛋白3β( Reg3 b)的蛋白质表达情况。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测 Clu、 Anxa1、 Sca1、 Reg3 b的mRNA表达情况。统计学方法采用独立样本 t检验。 结果:8C和ENR培养体系下的小肠类器官均包含肠道干细胞、杯状细胞、潘氏细胞和肠道内分泌细胞,细胞空间排布与肠上皮基本一致。8C培养体系下的新型小肠类器官的扩增能力较ENR、ENR+TNF-α培养体系下的小肠类器官明显增强,生长速度更快,结构更大、更复杂。qRT-PCR结果显示,8C培养体系下的新型小肠类器官再生基因 Clu、 Anxa1和 Sca1的mRNA相对表达水平均高于ENR和ENR+TNF-α培养体系(0.68±0.31比0.20±0.07、0.36±0.19,0.48±0.13比0.07±0.02、0.18±0.11,0.56±0.20比0.02±0.01、0.08±0.04),差异均有统计学意义( t=4.82、2.77,8.62、4.89,8.58、7.50;均 P<0.05)。免疫荧光检测显示,8C培养体系下的新型小肠类器官再生基因 Clu、 Anxa1、 Sca1和 Reg3 b的蛋白质表达水平均高于ENR、ENR+TNF-α培养体系(31.62±1.69比9.73±2.39、15.11±2.16,42.65±1.85比19.70±1.18、24.97±2.82,63.80±2.73比37.10±1.59、43.27±2.53,53.26±1.84比27.75±3.78、33.16±3.50),差异均有统计学意义( t=12.95、10.41,18.13、9.09,14.63、9.56,10.51、8.80;均 P<0.001)。 结论:新型培养体系下建立的小肠类器官具备损伤再生特征,为研究上皮组织器官再生提供了新的体外模型。
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
胃肠间质瘤破裂定义相关问题
编辑人员丨5天前
肿瘤破裂是胃肠间质瘤(GIST)发生、发展和诊疗过程中常见的临床事件,与肿瘤复发、转移及预后不良密切相关。其诱因包括腹腔压力升高、挤压、碰撞、不适当手术操作等;肿瘤巨大、小肠GIST、核分裂象高和 KIT 11外显子557/558缺失突变等不良生物学行为以及伊马替尼新辅助治疗反应良好、迅速使肿瘤液化、坏死等为其高危因素。当前指南认为,肿瘤破裂是GIST完整切除后复发的一个重要风险因素,是确定服用伊马替尼时间、甚至终身辅助治疗的指征。然而,肿瘤破裂的界定尚未达成共识或缺乏公认的定义,因此,肿瘤破裂发生率的报道差异很大,缺少相应流行病学资料,也很难评估肿瘤破裂的临床意义。根据相关文献和国际指南,将肿瘤破裂分为自发性及医源性破裂,并根据Oslo criteria标准,将肿瘤破裂分为6类:(1)肿瘤破裂或破碎;(2)血性腹水;(3)肿瘤部位胃肠道穿孔;(4)邻近器官镜下肿瘤浸润;(5)经病灶切除或分块切除病灶;(6)切取活检。如下的肿瘤完整性轻微缺损不视为破裂,即(1)肿瘤引起的胃肠道黏膜缺损或肿瘤破溃到胃肠道;(2)镜下肿瘤穿透腹膜或肿瘤腹膜医源性损伤;(3)无并发症经腹腔穿刺活检;(4)R 1切除。此外,我们进一步强调识别GIST破裂的高危因素、预防和积极干预肿瘤破裂的重要性。
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
胆碱能抗炎途径在小儿外科消化系统疾病中的研究进展
编辑人员丨5天前
胆碱能抗炎通路(cholinergic anti-inflammatory pathway,CAP)是一种新近发现的神经-免疫通路。在此通路中,迷走神经通过释放胆碱能神经递质,作用于巨噬细胞等免疫细胞来调控炎症反应。在过去二十年里,胆碱能抗炎通路在全身性和特定组织或器官炎症中的作用得到了广泛研究,但在小儿外科领域中的研究尚少,但这一类探索研究可为疾病的诊疗提供新的策略。本研究就CAP在小儿外科消化系统疾病(新生儿坏死性小肠结肠炎、先天性巨结肠、儿童梗阻性黄疸等)中作用的研究进展进行叙述。
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
"微肠"类器官的构建与新视角下的肠道疾病研究
编辑人员丨5天前
肠道类器官是指利用隐窝干细胞的增殖和自组装的特性,在体外重建出的多种小肠上皮细胞类型和类似生理结构,也被称为"微肠"。类器官研究起始于不同肠段中Lgr5阳性隐窝干细胞的发现,而小肠/结肠干细胞微环境中EGF、Wnt、BMP/TGF-β、Notch等信号通路对干细胞特性的体外维持同样起关键作用。"微肠"类器官不仅可以实现隐窝-绒毛极性结构的重建,也可以重现分化型细胞组分和上皮功能。自2009年Sato等构建起小肠类器官培养体系以来,相较于主要由遗传变异细胞所构成的常规细胞培养体系,肠道类器官展现出诸多优点,并成为胃肠道疾病研究领域的热点。此外,类器官研究通过与基因组学、材料学、工程学相结合,在各医学研究领域大放异彩。"微肠"类器官作为临床前模型已广泛应用于肠道发生、肠道转运生理、肠屏障、病原体-宿主相互作用等基础研究领域,以及囊性纤维化、感染性腹泻、溃疡性结肠炎、克罗恩病和肠道肿瘤等疾病的临床研究中。本综述主要讨论肠道类器官的构建方法及其在肠道疾病中的研究及应用进展。
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
