目的:探讨脂氧素受体激动剂(BML-111)通过调节核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎症激活活性氧(ROS)产生来介导COPD的对于抗炎的作用的影响。方法:SPF级雄性小鼠32只随机数字法分成4组，正常组、COPD模型组、BML-111低剂量组、BML-111高剂量组，每组8只，应用脂多糖和烟熏的方式建模，观察小鼠的COPD情况，通过HE染色观察小鼠的炎性细胞浸润情况，通过Western blot检测NLRP3、1L-1β、转化生长因子β(TGF-β)的蛋白的表达情况，通过支气管肺泡灌洗液(BALF)制备观察不同的细胞计数情况，氧化应激测定超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的活性。结果:正常组建模前后差异无统计学意义( P＝0.719)，COPD模型组、BML-111低剂量组、BML-111高剂量建模后体质量明显低于建模前的体质量( P＝0.027)；COPD模型组的NLRP3、1L-1β、TGF-β的蛋白表达明显高于正常组( P＝0.009)，BML-111低剂量组的NLRP3、1L-1β、TGF-β的蛋白表达低于COPD模型组( P＝0.032)，BML-111高剂量组的NLRP3、1L-1β、TGF-β的蛋白表达显著低于COPD模型组( P＝0.006)；模型组中的白细胞计数明显高于正常组( P＝0.017)，BML-111高剂量组淋巴细胞计数显著低于模型组( P＝0.036)；COPD模型组的SOD的活性明显低于正常组( P＝0.011)，BML-111低剂量组的SOD的活性高于COPD模型组( P＝0.028)，BML-111高剂量组的SOD的活性显著高于COPD模型组( P＝0.009)；COPD模型组的MDA的活性明显高于正常组( P＝0.013)，BML-111低剂量组的MDA的活性低于COPD模型组( P＝0.026)，BML-111高剂量组的MDA的活性显著低于COPD模型组( P＝0.005)。 结论:BML-111可以通过抑制NLRP3炎性小体的活化介导ROS产生来抵抗COPD的炎症发生。

目的:探究竹节参总皂苷(TSPJ)对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌细胞铁死亡的作用及调控机制。方法:实验1：将SD大鼠分为对照组、DCM组、TSPJ低剂量组、TSPJ高剂量组、二甲双胍组(Met)，每组各10只。实验2：将SD大鼠分为对照组、DCM组、TSPJ组、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂Compound C组、TSPJ＋AMPK激动剂AICAR组，每组各10只。除对照组外，其余各组大鼠均采取腹腔注射链脲佐菌素构建DCM模型。各组大鼠给予对应药物干预8周后，检测各组大鼠体重及糖脂代谢水平；超声心动图检测大鼠心功能指标；酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)水平；苏木精-伊红(HE)染色和电镜观察心肌组织病理变化；试剂盒检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、丙二醛、活性氧簇(ROS)及Fe 2＋水平；Western印迹法检测心肌组织铁死亡、铁自噬以及AMPK/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/UNC-51样激酶1(mTOR/ULK1)信号通路相关蛋白表达。 结果:与对照组相比，DCM组大鼠左心室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)、舒张早期与晚期血流速度峰值比值(E/A)均显著降低，舒张末期左心室内径(LVEDd)增加，血清LDH、cTnI、CK-MB升高，心肌组织SOD、GSH降低，丙二醛、ROS和Fe 2＋增加，转铁蛋白受体1(TFR1)、核受体共激活因子4(NCOA4)、LC3-II/LC3-I、Beclin-1、磷酸化AMPK及磷酸化ULK1表达水平升高，谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、磷酸化mTOR表达水平降低。与DCM组相比，各治疗组大鼠上述指标均得到显著改善。与TSPJ组相比，AMPK激动剂AICAR能够逆转TSPJ对DCM大鼠心肌细胞铁死亡及AMPK/mTOR/ULK1通路介导的铁自噬作用。 结论:TSPJ能够通过调控AMPK/mTOR/ULK1介导的铁自噬抑制DCM大鼠心肌细胞铁死亡，改善心肌损伤。

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是以肝脏脂质过度沉积为基础发生单纯性非酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝硬化和肝细胞癌的系列疾病，常伴发肥胖、2型糖尿病、高脂血症等代谢紊乱，心血管疾病为其主要致死因素，其治疗措施主要针对NAFLD的致病因素、发病与进展关键环节和相关代谢紊乱，推荐药物包括吡格列酮、二甲双胍、利拉鲁肽、卡格列净等改善胰岛素抵抗，他汀类降脂药物、ω-3长链脂肪酸，以及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α和PPARγ激动剂等调节糖脂代谢、减少肝脏脂质沉积，维生素E、奥贝胆酸和复方中药等抗氧化、抗炎、抗纤维化，肠道微生态调节制剂调节肠道菌群。多种正在研究中的新型靶向脂代谢调节、抗炎和抗纤维化的药物有待临床验证。

目的 探究大黄素对急性呼吸衰竭大鼠炎症反应、肺损伤的影响以及对NOD样受体蛋白3(NLRP3)/白细胞介素-1β(IL-1β)/CXC趋化因子配体1(CXCL1)信号通路的调控作用.方法 支气管滴入大肠杆菌脂多糖构建急性呼吸衰竭大鼠模型,成功造模70只,随机分成模型组,大黄素低(10 mg/kg)、中(20 mg/kg)、高(40 mg/kg)剂量组,大黄素+NLRP3激动剂[40 mg/kg大黄素+10 mg/kg NLRP3激动剂(BMS-986299)]组;每组14只.另取14只健康大鼠以相同方法支气管滴入等量生理盐水设为对照组.各组大鼠以相应方法连续干预7 d(每日1次).肺功能仪和全自动血气分析仪检测大鼠呼吸频率、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、动脉血氧分压(PaO2);酶联免疫吸附法检测肺组织炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)];苏木素-伊红染色观察肺组织病理学;荧光定量PCR和蛋白印迹法检测肺组织NLRP3、IL-1β、CXCL1信使RNA(mRNA)和蛋白表达.结果 与对照组比较,模型组肺组织结构被破坏,肺泡壁充血,大量炎性细胞浸润,肺泡水肿,呼吸频率、PaCO2及肺组织TNF-α、IL-8、NLRP3、IL-1β、CXCL1 mRNA和蛋白表达显著升高,PaO2显著降低(P＜0.05);与模型组比较,大黄素低、中、高剂量组肺组织病变逐渐减轻,肺泡结构逐渐完整,炎性细胞浸润逐渐减少,呼吸频率、PaCO2及肺组织TNF-α、IL-8、NLRP3、IL-1β、CXCL1 mRNA和蛋白表达呈剂量依赖性降低,PaO2呈剂量依赖性升高(P＜0.05);大黄素高剂量组比较,大黄素高剂量+NLRP3激动剂组肺组织损伤明显加重,炎性细胞浸润增加,呼吸频率、PaCO2及肺组织TNF-α、IL-8、NLRP3、IL-1β、CXCL1 mRNA和蛋白表达显著升高,PaO2显著降低(P＜0.05).结论 大黄素可能通过抑制NLRP3/IL-1β/CXCL1信号通路,改善急性呼吸衰竭大鼠血气指标、炎症反应和肺损伤,发挥对肺的保护作用.

目的 通过观察κ-阿片受体(KOR)激动剂U50488H对心肺转流(CPB)大鼠肺组织NLRP3炎症小体和细胞焦亡的影响,探讨U50488H减轻CPB致急性肺损伤(ALI)的可能机制.方法 24只成年雄性清洁级SD大鼠,350～450 g,随机分为假手术组(Sham组)、CPB组和CPB+KOR激动剂组(U50448H组),每组8只.U50448H组于CPB前30 min静脉注射1.5 mg/kg U50488H.分别于CPB后0 h、1 h和2 h各时点行动脉血气分析,计算肺泡-动脉氧分压差(AaDO2)和呼吸指数(RI).三组大鼠均在停CPB后2 h时处死,取完整右肺下叶,采用重力法测定血管外肺水(EVLW),HE染色观察肺组织形态学变化.采用ELISA方法检测血浆脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-6和IL-4 的含量,Western blot测定肺组织GSDMD-C、GSDMD-N和NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸酶前体(pro-Caspase-1)蛋白的表达.结果 CPB组大鼠在CPB后 0 h、1 h和 2 h各时点的AaDO2 和RI、LPS明显高于Sham组(P<0.05);U50488 组三个时点的AaDO2 和RI、LPS明显低于CPB组(P<0.05).与Sham组比较,CPB组大鼠EVLW、血浆TNF-a 和IL-6、肺组织GSDMD-C、GSDMD-N和NLRP3、pro-Caspase-1表达明显增高,血浆IL-4水平明显降低,其差异有统计学意义(P<0.05);而U50488组上述指标与Sham组无明显差异(P>0.05).CPB组大鼠出现了严重的肺损伤和肺泡内充血/出血,并伴有广泛的炎症细胞浸润,U50448H组肺损伤明显减轻.结论 KOR激动剂U50488H对CPB所致ALI期间NLRP3炎性小体诱导的细胞焦亡具有抑制作用,从而减轻了CPB后的肺损伤.

糖尿病心肌病(DCM)是糖尿病患者独立于其他主要心血管风险因素(如高血压和冠心病)而发展的心脏功能障碍,是其发生心力衰竭的相关原因.DCM发病机制复杂,包括改变糖脂代谢、胰岛素抵抗(IR)、氧化应激、炎症反应等.法尼醇X受体属于核受体超家族成员,胆汁酸是其内源性配体.研究表明法尼醇X受体特异性激动剂或拮抗剂在调节脂质和葡萄糖代谢、氧化应激和炎症中起着关键作用.本文对糖尿病心肌病与法尼醇X受体的研究进展进行综述.

目的:探讨吡格列酮对β1肾上腺素能受体自身抗体(β1AAb)诱导的大鼠室性心律失常治疗作用及电生理机制.方法:将 48 只SD大鼠按随机数字表法等分为四组:对照组(佐剂注射)、β1AAb组[β1 肾上腺素能受体细胞外第二环功能表位肽段(β1AR-ECLⅡ)配以佐剂背部多点注射进行主动免疫,2 mg/(kg·次)]、吡格列酮组[与β1AAb组同等主动免疫 8 周后,吡格列酮灌胃 2 周,4 mg/(kg·d)]、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ特异性抑制剂GW9662 组[与β1AAb组同等主动免疫 8 周后吡格列酮灌胃+GW9662 腹腔注射 2 周,其中吡格列酮予以 4 mg/(kg·d),GW9662 予以 1 mg/(kg·d)].每 2 周Powerlab多通道生理仪记录心电图,取血.基线和第 10 周记录超声心动图,10 周后进行心电生理、组织病理、免疫组化染色及电镜检查.结果:相较于对照组,β1AAb组室性心律失常诱发率较高、心室有效不应期(VERP)缩短、激动-恢复间期(ARI)延长;左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS)低;葡萄糖转运蛋白 1(GLUT1)和肉碱棕榈酰转移酶 1a(CPT1a)阳性染色面积占比较低;线粒体形态异常及网络损伤明显,P均＜0.05.而吡格列酮组较β1AAb组,室性心律失常诱发率降低、VERP延长、ARI缩短;LVEF和LVFS恢复;GLUT1 和CPT1a阳性染色面积占比增加;线粒体形态异常及网络损伤改善,P均＜0.05.GW9662 组较吡格列酮组室性心律失常诱发率较高、VERP缩短、ARI延长;LVEF和LVFS较低;GLUT1 和CPT1a阳性染色面积占比低;线粒体形态异常及网络损伤未恢复,P均＜0.05.结论:吡格列酮可降低β1AAb诱导的室性心律失常,改善心室电传导和激动恢复时间异质性;并可在组织病理水平缓解β1AAb所致心室重塑,并伴随心室肌糖脂转运通道蛋白的上调和受损线粒体网络的修复.

铁代谢在多种代谢性疾病中发挥调控作用,过量铁积累会增加代谢性疾病尤其是2型糖尿病(T2DM)的发生风险.铁沉积、铁过载和铁死亡等病理过程可激活氧化应激、脂质过氧化、细胞自噬等,促进机体炎症反应级联放大和抗氧化能力降低,使胰岛β细胞功能逐渐衰退,从而促进T2DM的发生发展.胰高血糖素样肽-1(GLP-1)是由肠道L细胞分泌的一种生理性激素,GLP-1类似物或GLP-1受体激动剂可调节机体铁代谢过程,抑制铁沉积、铁过载和铁死亡相关炎症反应,促进胰岛β细胞增殖及分化,进而减轻胰岛素抵抗,抑制内皮细胞损伤,在T2DM及其并发症的防治中发挥重要作用.

采用网络药理学结合体内、外实验验证探讨黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AST Ⅳ)配伍三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)调控血管生成治疗脑缺血的作用机制.运用网络药理学预测AST Ⅳ和PNS通过介导血管生成治疗脑缺血的可能机制.体内实验:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、AST Ⅳ(10 mg·kg-1)+PNS(25 mg·kg-1)组,大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法建立脑缺血模型.AST Ⅳ及PNS灌胃给药,每天2次.采用Longa法测定神经功能缺损症状;苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织病理损伤;免疫组化测定血友病因子(von Willebrand factor,vWF)的表达;免疫荧光测定血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)的表达;蛋白质印迹法检测脑组织血管内皮生长因子受体 2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)、VEGFA、磷酸化磷脂酰肌醇 3-激酶(phosphorylated phosphatidyli-nositol 3-kinase,p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)的表达.体外实验:原代培养并鉴定脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs),取第 3 代 rBMECs,设置对照组、模型组、AST Ⅳ+PNS(50 μmol· L-1+30 μmol·L-1)组、LY294002(PI3K/AKT 信号通路抑制剂)组、740Y-P 组(PI3K/AKT 信号通路激动剂)、AST Ⅳ+PNS+LY294002 组及 AST Ⅳ+PNS+740Y-P 组,氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/re-oxygenation,OGD/R)建立缺血再灌注损伤模型.CCK-8检测rBEMCs存活情况,划痕实验检测rBEMCs迁移能力;人工基底膜(matrigel)检测rBEMCs成管数;内皮细胞渗漏实验检测内皮细胞渗透率;蛋白质印迹检测rBEMCs中VEGFR2、VEGFA、p-PI3K、p-AKT蛋白的表达.网络药理学结果显示,AST Ⅳ及PNS可调节脑梗死血管生成的21个靶点,包括VEGFA、AKT1等,大部分涉及PI3K/AKT信号通路.体内实验发现,与模型组比较,AST Ⅳ+PNS配伍能降低脑缺血后神经功能缺损评分(P＜0.05)及脑组织细胞损伤率(P＜0.05),增加vWF及VEGFA蛋白的表达(P＜0.01),促进血管新生,且显著升高PI3K/AKT通路相关蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).体外实验发现,与模型组比较,AST Ⅳ+PNS、740Y-P、AST Ⅳ+PNS+LY294002 及 AST Ⅳ+PNS+740Y-P 均能增加 OGD/R 后 rBEMCs 存活率,增强rBEMCs迁移率,增加rBEMCs成管数,增强PI3K/AKT通路相关蛋白表达,降低内皮细胞渗透率(P＜0.05,P＜0.01);与LY294002组比较,AST Ⅳ+PNS+LY294002组rBEMCs存活率、迁移率、成管数及PI3K/AKT通路相关蛋白表达显著增加,内皮细胞渗透率显著减少(P＜0.05,P＜0.01);与AST Ⅳ+PNS组和740Y-P组比较,AST Ⅳ+PNS+740Y-P组rBEMCs存活率、迁移率、成管数及PI3K/AKT通路相关蛋白表达显著增加,内皮细胞渗透率显著降低(P＜0.01).该研究表明,AST Ⅳ和PNS在脑缺血后能促进血管生成,机制可能与激活PI3K/AKT信号通路有关.

目的:探究大麻素受体激动剂WIN55212-2(WIN)对脓毒症小鼠急性肺损伤(ALI)的影响,并探讨其通过糖酵解发挥作用的可能机制.方法:采用腹腔注射脂多糖(LPS)创建小鼠脓毒症ALI模型.将雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组:对照(control)组、LPS组(腹腔注射10 mg/kg LPS)、LPS+WIN组(注射LPS前30 min腹腔注射1 mg/kg WIN)和LPS+WIN+MHY1485[哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)活化剂]组(LPS造模前1 d腹腔注射10 mg/kg MHY1485,并在造模前30 min腹腔注射1 mg/kg WIN和10 mg/kg MHY1485),每组6只.造模24 h后取材,计算肺指数;HE染色观察肺组织病理变化;ELISA检测肺组织炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)和IL-10表达水平,以及血清乳酸和乳酸脱氢酶A(LDHA)水平;Western blot检测mTOR/缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-双磷酸酶3(PFKFB3)信号通路相关蛋白水平.结果:相比于control组,LPS组小鼠肺指数增加,HE染色显示肺组织受损,肺组织中IL-10水平降低(P＜0.05),IL-1β水平升高(P＜0.05),血清乳酸和LDHA水平升高(P＜0.05),磷酸化mTOR(p-mTOR)、HIF-1α和PFKFB3蛋白水平升高(P＜0.05).相较于LPS组,LPS+WIN组肺指数降低(P＜0.05),HE染色显示肺组织受损减轻,肺组织IL-1β水平降低(P＜0.05),IL-10水平升高(P＜0.05),血清乳酸和LDHA水平降低(P＜0.05),p-mTOR、HIF-1α和PFKFB3蛋白水平降低(P＜0.05).相较于LPS+WIN组,LPS+WIN+ MHY1485组肺指数增加,HE染色显示肺组织受损,肺组织IL-1β水平升高(P＜0.05),IL-10水平降低(P＜0.05),血清乳酸和LDHA水平升高(P＜0.05),p-mTOR、HIF-1α和PFKFB3蛋白水平升高(P＜0.05).结论:WIN55212-2可以减轻脓毒症小鼠ALI,其机制可能是通过调控mTOR/HIF-1α/PFKFB3信号通路,抑制糖酵解,减轻炎症反应.