目的:通过分析特发性肺纤维化(IPF)患者肺组织的单细胞转录组测序(scRNA-seq)数据，联合芪白平肺胶囊的网络药理学，探索IPF患者中与芪白平肺胶囊调控相关的免疫细胞、靶基因及其潜在机制。方法:从基因表达综合数据库(GEO)下载IPF患者(IPF组)和正常者(对照组)的scRNA-seq数据，采用随机数字表法在2组中各选取20个样本用于分析IPF的免疫细胞群及其比例变化。对各免疫细胞群进行差异基因分析，将 P<0.05和|logFC|>0.6的基因鉴定为差异基因。对差异基因进行基因本体论(GO)-生物过程富集分析，探索参与IPF疾病进程的潜在分子功能及机制。基于中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)获取芪白平肺胶囊主要活性成分和靶基因，并对靶基因进行GO和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。通过将芪白平肺胶囊靶基因映射到IPF免疫细胞差异基因，构建"活性成分-靶基因-免疫细胞"网络。通过GO和KEGG富集分析探索芪白平肺胶囊用于治疗IPF患者的潜在作用机制。通过STRING数据库和Cytoscape软件对"活性成分-靶基因-免疫细胞"网络中靶基因进行蛋白质互作分析并寻找关键靶基因。 结果:在IPF组和对照组的肺组织中共发现B细胞、T细胞和先天淋巴细胞等18个免疫细胞群。与对照组比较，IPF组中经典2型树突状细胞、肥大细胞、浆细胞样树突细胞和调节性T细胞比例均增加，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。18个免疫细胞群共包含534个差异基因，参与了淋巴细胞的活化、抗原的加工和呈递、白细胞的迁移和趋化作用等免疫相关生物过程。芪白平肺胶囊包含18个有效活性成分和239个靶基因，其中联苯双酯、槲皮素、毛异黄酮等9个活性成分靶向IPF中除浆细胞样树突细胞外的17个免疫细胞群与IL-1B、VEGFA、FOS等42个差异基因。这些靶向差异基因主要富集于活性氧或氧化应激相关通路与多个免疫信号通路，包括IL-17、MAPK、TNF通路等。 结论:芪白平肺胶囊可能靶向多种免疫细胞，并通过活性氧或氧化应激相关通路与IL-17、MAPK、TNF等免疫信号通路，调控IPF患者的免疫炎症反应。

观察不同低氧时段下,原代大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs) ATP敏感性钾通道(ATP-sensitive potassium channel,KATP通道)蛋白的表达,探讨芪白平肺胶囊含药血清(简称QBPF)调控PASMCs KATP通道蛋白表达与一氧化氮(nitric oxide,NO)的相关性.清洁级SD大鼠给予芪白平肺胶囊颗粒连续灌胃10 d,制备芪白平肺含药血清.采用组织块贴壁法,体外培养原代大鼠肺动脉平滑肌细胞;Western blot检测不同低氧时间下Kir6.1和SUR2B的表达,以及在一氧化氮合酶抑制剂——Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(Nω-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)和KATP通道抑制剂——格列本脲(glyburide,GLYB)分别干预下,QBPF对其表达的影响.低氧6h后Kir6.1和SUR2B蛋白表达开始上调,在低氧24 h达到高峰,低氧48,72 h的蛋白表达出现不同程度下调.在低氧24h条件下,QBPF能进一步上调KATP通道Kir6.1和SUR2B蛋白表达,且这种上调作用能分别被KATP通道阻断剂GLYB和NO特异性阻断剂L-NAME所阻断,提示芪白平肺胶囊具有明确的KATP通道开放作用,其机制可能通过介导NO相关途径上调KATP通道蛋白表达,参与肺血管舒张作用,缓解COPD的发生发展.

目的 观察芪白平肺胶囊联合孟鲁司特对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞表达的影响.方法 采用随机数字表法将患者94例随机分为两组,对照组在常规治疗的基础上给予孟鲁司特钠治疗,观察组在对照组的基础上给予芪白平肺胶囊治疗.观察两组治疗前后第1秒用力呼气量(FEV1)、用力肺活量(FVC)、FEV1占FVC的百分比(FEV 1/FVC％)、呼吸困难评分(MMRC)、动脉血氧分压(PaO2)、二氧化碳分压(PaCO2)水平、外周血Th17、CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg水平.结果 治疗后观察组FEV1、FEV1/FVC、PaO2、CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg水平均高于对照组(P＜0.05),MM-RC评分、PaCO2、Th17、Th 17/CD4+CD25+Foxp3+Treg水平均低于对照组(P＜0.05).结论 芪白平肺胶囊联合孟鲁司特可改善AECOPD患者肺功能,提高血氧饱和度,下调Th17表达和上调CD4+CD25+Foxp3+Treg表达可能是其重要作用机制.

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)气虚痰瘀证大鼠的氧化应激及炎症反应与沉默信息调节因子1/叉头框转录因子O3a(SIRT1/FoxO3a)通路的调节及芪白平肺胶囊对其影响.方法 雄性SD大鼠80只,随机分组为正常组、模型组、芪白平肺胶囊组及金水宝对照组,每组20只;采用复合因素建立COPD气虚痰瘀证病证结合大鼠模型,药物处理后,使用ELISA测定各组大鼠血清中超氧化物气化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-2的水平,荧光定量PCR检测大鼠肺组织SIRT1 mRNA及FoxO3a mRNA水平,采用Western blot法测量各组大鼠肺组织SIRT1及FoxO3a蛋白.结果 与正常组比较,模型组的MDA、IL-1β、IL-2的水平显著升高、SOD水平显著降低,SIRT1的mRNA和蛋白水平降低,FoxO3a的mRNA和蛋白水平升高;与金水宝对照组比较,芪白平肺胶囊组MDA、IL-1β、IL-2水平降低,SOD水平升高,SIRT1的mRNA和蛋白表达升高,FoxO3a的mRNA和蛋白表达降低.结论 芪白平肺胶囊能够通过调节SIRT1/FoxO3a通路改善COPD气虚痰瘀证炎症及氧化应激状态.

目的:探讨芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道黏液高分泌大鼠的保护作用.方法:通过复制COPD气道黏液高分泌大鼠模型,给予芪白平肺胶囊、氨溴索、泼尼松干预,ELISA检测肺泡灌洗液(BALF)及血清中IL-6、血小板源生长因子A(PDGF-A)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1).Western Blot检测肺组织HMGB1的表达.结果:芪白平肺组较模型组及氨溴索组BALF及血清中IL-6、PDGF-A、MCP-1、HMGB1均明显减少(P＜0.01).芪白平肺组较模型组肺组织HMGB1表达显著减少(P＜0.01).结论:研究表明芪白平肺胶囊可以减少COPD模型大鼠炎症细胞的浸润,对COPD气道黏液高分泌模型大鼠有保护作用.

目的 观察芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)痰瘀阻肺证模型大鼠肺部炎症和肺功能的影响.方法 将80只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、脾氨肽组、芪白平肺胶囊组.采用强迫游泳、被动吸烟和低氧环境复合方法复制COPD模型.观察大鼠一般状态;检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中细胞总数和炎症细胞比例;光学显微镜下观察肺组织形态变化;ELISA法检测大鼠血清白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-8及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;检测各组大鼠第0.3秒用力呼气容积(forced expiratory volume in 0.3 seconds,FEV0.3)、用力肺活量(forced vital capacity,FVC)、FEV0.3占FVC比值(FEV0.3/FVC).结果 与正常组比较,模型组大鼠一般情况较差,肺功能明显降低,肺组织可见大量炎症细胞浸润,肺泡间隔明显增厚,支气管壁可见明显黏液腺增生,管腔变窄;BALF中细胞总数、单核-巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞比例均明显升高(P<0.05);血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平明显升高(P<0.05).与模型组比较,芪白平肺胶囊组及脾氨肽组大鼠肺组织病理变化明显改善;BALF中细胞总数和单核-巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞比例及血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平明显降低(P<0.05);FEV0.3、FVC、FEV0.3/FVC均明显升高(P<0.05).其中芪白平肺胶囊组上述指标的改善程度明显大于脾氨肽组.结论 芪白平肺胶囊可明显改善COPD痰瘀阻肺证大鼠肺部炎症,改善大鼠肺功能,其机制可能与下调血清相关炎症指标及肺部炎症细胞浸润有关.

目的 从细胞水平探讨芪白平肺胶囊通过磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-ki-nasePI3K/蛋白激酶B(protein kinas B,Akt)通路对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmona-ry arterial smooth muscle cells,PASMCs)凋亡的影响.方法 采用组织贴块法分离培养大鼠PASMCs,制备含药血清作用于低氧诱导的大鼠PASMCs,将细胞分为常氧组、低氧组、低氧+芪白平肺胶囊含药血清组、低氧+芪白平肺胶囊含药血清组+LY294002组.采用细胞计数试剂盒检测芪白平肺胶囊含药血清对低氧诱导的大鼠PASMCs活性的影响;蛋白免疫印迹法检测芪白平肺胶囊含药血清单独及加入LY294002对Akt、磷酸化Akt(phosphorylated-Akt,p-Akt)、B淋巴细胞瘤2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cysteine contai-ning aspartate protein hydrolase-3,Caspase-3)蛋白表达水平的影响;Hoechst 33258染色观察芪白平肺胶囊含药血清对低氧诱导的大鼠PASMCs凋亡的影响.结果 20％芪白平肺胶囊含药血清能明显降低低氧诱导的大鼠PASMCs的活力(P<0.05),并显著上调Caspase-3蛋白的表达水平(P<0.05),下调Bcl-2、p-Akt蛋白的表达水平(P<0.05).加入LY294002后p-Akt蛋白的表达水平下降,且Bcl-2表达水平下降,Caspase-3蛋白表达水平上调(P<0.05).结论 芪白平肺胶囊可能通过抑制PI3K/Akt信号通路促进低氧诱导的大鼠PASMCs凋亡,减缓低氧性肺动脉高压的进程.

目的:研究芪白平肺胶囊改善COPD痰瘀阻肺证大鼠肺血管重构与增殖/凋亡相关分子Bax/Bcl-2的关系.方法:雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、芪白平肺胶囊组,采用烟熏联合低氧法复制COPD痰瘀阻肺证大鼠模型,芪白平肺胶囊组给予1 g/kg芪白平肺胶囊灌胃,正常组和模型组给予等体积生理盐水灌胃.HE染色法观察肺组织形态学特征,ELISA法检测大鼠血清中VEGF水平,荧光定量PCR及Western blot法检测肺血管中Bax和Bcl-2的mRNA和蛋白表达.结果:与正常组相比,模型组肺血管中Bax的mRNA及蛋白表达降低(P<0.01),Bcl-2的mRNA及蛋白表达升高(P<0.01),血清中VEGF表达水平升高(P<0.01);与模型组比,芪白平肺胶囊组Bax的mRNA及蛋白表达升高(P<0.01),Bcl-2的mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.01),VEGF表达水平降低(P<0.01).结论:芪白平肺胶囊可能通过提高COPD痰瘀阻肺证大鼠肺血管中Bax的mRNA及蛋白水平、降低Bcl-2的mRNA及蛋白和血清VEGF水平,调整肺血管的凋亡/增殖失衡状态,从而促进肺血管内皮细胞凋亡,改善COPD肺血管重构.

目的 通过分析慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺组织单细胞转录组测序(scRNA-seq)数据,并联合芪白平肺胶囊网络药理学,探讨芪白平肺胶囊调控COPD相关免疫细胞群及其可能的机制.方法 下载基因表达数据集(GEO)中COPD患者肺组织scRNA-seq数据用于挖掘COPD免疫细胞群及其差异表达RNA;并基于中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)获取芪白平肺胶囊的主要活性成分及其靶基因.通过COPD免疫细胞群的差异表达RNA与芪白平肺胶囊的靶基因映射,构建芪白平肺胶囊的"活性成分-免疫细胞群-靶基因"网络,并经基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)、蛋白质相互作用(PPI)分析靶基因的分子作用机制.结果 芪白平肺胶囊中槲皮素(quercetin)、山奈酚(kaempferol)、刺芒柄花素(formononetin)等主要的12个活性成分靶向COPD巨噬细胞、肺泡巨噬细胞、T细胞等多个免疫细胞群及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)、应激活化蛋白激酶(JUN)、血红素加氧酶1(HMOX1)、低氧诱导因子1α(HIF1A)等基因,且这些基因主要富集于白细胞介素17(IL-17)信号通路、核因子κB(NF-κB)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路等.结论 芪白平肺胶囊可能靶向多种免疫细胞,干预炎症免疫相关通路,调控COPD的炎症免疫反应.

目的:研究芪白平肺胶囊基于JAK1/STAT3信号通路对慢性阻塞性肺疾病(COPD)继发肺动脉高压(PAH)大鼠的影响.方法:将120只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、脾氨肽组、芪白平肺胶囊组,每组30只.建立COPD继发PAH大鼠模型.药物干预后观察大鼠的一般状态;检测大鼠肺功能指标;ELISA法检测大鼠血浆中白介素(IL)-1β、IL-6、γ-干扰素(IFN-γ)、血管内皮生长因子(VEGF)、结缔组织生长因子(CTGF)表达水平;右心导管法测定右心室压(RVSP)及平均肺动脉压(mPAP);免疫组化检测肺组织中P-JAK1、P-STAT3蛋白含量;Western blot法检测肺组织中P-JAK1、P-STAT3蛋白表达水平.结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中IL-1 β、IL-6、IFN-γ、VEGF、CTGF表达水平及mPAP、RVSP显著升高(P＜0.01);肺功能指标FEV0.3、FEV0.3/FVC、FVC显著下降(P＜0.01);肺组织中P-JAK1、P-STAT3蛋白表达显著上调(P＜0.05,P＜0.01).与模型组比较,脾氨肽组及芪白平肺胶囊组各炎症因子表达水平及mPAP、RVSP显著降低(P＜0.01,P＜0.05);肺功能指标显著升高(P＜0.01);P-JAK1、P-STAT3蛋白表达显著下调(P＜0.05);且芪白平肺胶囊组优于脾氨肽组(除IL-1β外)(P＜0.05,P＜0.01).结论:芪白平肺胶囊可能通过抑制JAK1/STAT3信号通路的转导,降低下游炎症因子的表达,从而减轻全身或局部的炎症损伤,抑制肺血管性相关细胞VEGF、CTGF的增殖,延缓COPD继发PAH的形成与发展.