目的:本研究采用体外氧糖剥夺（OGD）模型探讨右美托咪定（Dex）在缺血性脑卒中（IS）对人脑星形胶质细胞（HA）中的作用，并揭示其潜在机制。方法:以HA为研究对象，按照随机数字表法分为10组（每组3孔）：对照组（Control组），OGD组，分别使用0.5、1.0、2.0 μmol/L Dex处理OGD模型组（0.5 μmol/L Dex+OGD组、1.0 μmol/L Dex+OGD组、2.0 μmol/L Dex+OGD组），在OGD模型细胞中添加200 nmol/L K-252a[脑源性神经营养因子（BDNF）抑制剂]组（OGD+K-252a组），在OGD模型细胞中添加1.0 μmol/L Dex组（OGD+Dex组），在OGD模型细胞中联合使用1.0 μmol/L的Dex和200 nmol/L K-252a组（OGD+Dex+K-252a组），在正常细胞中添加200 nmol/L K-252a组（K-252a组），正常细胞中联合使用200 nmol/L K-252a和5 μmol/L的BAY11-7082[NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）抑制剂]组（K-252a+BAY11-7082组）。以上细胞处理24 h后，采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测细胞中BDNF、NLRP3、活性胱天蛋白酶-1（caspase-1）和消皮素D（GSDMD）蛋白N端（GSDMD-N）的蛋白水平，酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测白细胞介素（IL）-1β和IL-18的含量，2′,7′-二氯荧光素二乙酸盐（DCFDA）法检测细胞中活性氧（ROS）的水平，流式细胞仪检测细胞焦亡情况。结果:与Control组比较：OGD组IL-1β、IL-18含量，ROS荧光强度，细胞焦亡率，NLRP3、活性caspase-1、GSDMD-N蛋白水平均升高（均 P<0.05），BDNF蛋白水平降低（ P<0.05）；0.5 μmol/L Dex+OGD组IL-18含量、ROS荧光强度、细胞焦亡率均升高（均 P<0.05）；1.0 μmol/L Dex+OGD组和2.0 μmol/L Dex+OGD组ROS荧光强度、细胞焦亡率均升高（均 P<0.05）；K-252a组IL-1β、IL-18含量，细胞焦亡率，NLRP3、活性caspase-1、GSDMD-N蛋白水平均升高（均 P<0.05）。与OGD组比较：0.5 μmol/L Dex+OGD组、1.0 μmol/L Dex+OGD组、2.0 μmol/L Dex+OGD组IL-1β、IL-18含量，ROS荧光强度，细胞焦亡率均降低（均 P<0.05）；1.0 μmol/L Dex+OGD组、2.0 μmol/L Dex+OGD组BDNF蛋白水平升高（均 P<0.05）；0.5 μmol/L Dex+OGD组、1.0 μmol/L Dex+OGD组NLRP3蛋白水平降低（均 P<0.05）；1.0 μmol/L Dex+OGD组、2.0 μmol/L Dex+OGD组活性caspase-1蛋白水平降低（均 P<0.05）；0.5 μmol/L Dex+OGD组、1.0 μmol/L Dex+OGD组、2.0 μmol/L Dex+OGD组GSDMD-N蛋白水平降低（均 P<0.05）；OGD+K-252a组IL-1β、IL-18含量，ROS荧光强度，细胞焦亡率，NLRP3、活性caspase-1、GSDMD-N蛋白水平均升高（均 P<0.05），BDNF蛋白水平降低（ P<0.05）；OGD+Dex组IL-1β、IL-18含量，ROS荧光强度，细胞焦亡率，NLRP3、活性caspase-1、GSDMD-N蛋白水平均降低（均 P<0.05），BDNF蛋白水平升高（ P<0.05）。与OGD+Dex组比较，OGD+Dex+K-252a组IL-1β、IL-18含量，ROS荧光强度，细胞焦亡率，NLRP3、活性caspase-1、GSDMD-N蛋白水平均升高（均 P<0.05），BDNF蛋白水平降低（ P<0.05）。与K-252a组比较，K-252a+BAY11-7082组IL-1β、IL-18含量，细胞焦亡率，NLRP3、活性caspase-1、GSDMD-N蛋白水平均降低（均 P<0.05）。 结论:Dex通过诱导BDNF的释放，阻断NLRP3通路的过度活化从而减轻由OGD诱导的星形胶质细胞炎症和细胞焦亡。

目的:评价食欲素A对吗啡致小鼠胃肠道功能障碍的影响。方法:SPF级C57B/6小鼠40只，6~8周龄，雌雄各半，体重18~22 g，采用随机数字表法分为5组( n＝8)：对照组(C组)、吗啡组(M组)和吗啡+不同剂量食欲素A组(MOH组、MOM组和MOL组)。C组每天皮下注射生理盐水8 ml/kg，其余4组每天皮下注射吗啡注射液6 mg/kg，同时MOH组、MOM组和MOL组分别每天腹腔注射食欲素A 75、50和25 μg/kg，共10 d。计算每日粪便含水率，取平均值；末次给药后用黑色营养糊灌胃，30 min后检测胃排空率和小肠推进率；眼眶取血标本，采用ELISA法检测血清胃泌素(GAS)浓度；然后处死小鼠，取结肠组织，采用免疫组化法测定结肠Cajal间质细胞特异性标记物c-kit阳性细胞面积，Western blot法检测结肠组织c-kit、P物质(SP)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)的表达。 结果:与C组比较，M组粪便含水率、胃排空率、小肠推进率和血清GAS浓度降低，结肠组织c-kit阳性细胞面积减小，c-kit和SP表达下调，nNOS表达上调( P<0.05)；与M组比较，MOH组小肠推进率和血清GAS浓度升高，结肠组织c-kit阳性细胞面积增大，c-kit表达上调，MOM组粪便含水率、胃排空率、小肠推进率和血清GAS浓度升高，c-kit阳性细胞面积增大，c-kit和SP表达上调，nNOS表达下调，MOL组血清GAS浓度升高，c-kit阳性细胞面积增大( P<0.05)。 结论:50 μg/kg食欲素A可有效缓解吗啡致小鼠胃肠道功能障碍，其机制可能与促进GAS分泌、Cajal间质细胞增长和促进SP释放、抑制NO释放有关。

目的:观察腧穴"解郁方"对慢性不可预测轻度应激(CUMS)抑郁大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴和脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶 B受体(TrkB)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响.方法:40 只无特定病原体(SPF)级Sprague Danley(SD)雄性大鼠随机分为空白组(10只)、模型组(10只)、西药组(10只)、针刺组(10 只),除空白组外,其余 3 组连续28d构建CUMS抑郁大鼠模型,造模成功后,西药组连续 14d灌胃盐酸帕罗西汀混悬液,每日 1次;针刺组针刺百会、太冲、神门,每日 1次,每次 20 min,连续针刺 14 d.苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠海马病理变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)水平;免疫组化(IHC)检测海马 BDNF、TrkB表达情况,蛋白质免疫印迹法(Western Blot)及实时荧光定量-聚合酶链式反应(PCR)测定海马BDNF、TrkB、CREB蛋白及mRNA的表达.结果:与空白组比较,模型组血清 CRH、ACTH和 CORT含量上升(P<0.01),海马病理损伤严重,海马BDNF、TrkB 平均光密度降低(P<0.01),BDNF、TrkB、CREB蛋白及 mRNA明显下降(P<0.05或P<0.01).与模型组比较,针刺组血清 CRH、ACTH、CORT含量下降(P<0.05),海马病理损害明显减轻,BDNF、TrkB平均光密度明显增加(P<0.05),BDNF、CREB、TrkB蛋白及 mRNA表达水平上升(P<0.05).结论:腧穴"解郁方"可能通过调节 HPA轴和调控 BDNF/TrkB/CREB信号通路,改善 CUMS诱导的大鼠抑郁样行为.

目的:观察参苓白术散干预对肺脾两虚型慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠生长激素释放肽(Ghrelin),肥胖抑制素(Obestatin)蛋白表达的影响,基于Ghrelin/Obestatin信号调节通路从分子水平探讨培土生金法治疗COPD的作用机制和科学内涵.方法:60只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、肺脾两虚模型组、参苓白术散组(根据药物干预时间不同,分为28,35,42 d组),每组12只.采用病证结合造模法复制肺脾两虚型COPD大鼠,空白组大鼠吸入空气+气管内注射等量生理盐水+灌服等量生理盐水;模型组及参苓白术散组采用烟熏+气管内滴注脂多糖+灌服冰冷番泻叶浸液建立肺脾两虚型COPD大鼠模型;参苓白术散组给予参苓白术散灌胃,分别于药物干预第28,35,42天处死大鼠,利用免疫组化法及蛋白免疫印迹法测定大鼠下丘脑组织及胃组织中Ghrelin,Obestatin蛋白表达变化.结果:与空白组比较,肺脾两虚模型组大鼠下丘脑及胃组织中Ghrelin,Obestatin蛋白表达及积分吸光度均显著降低(P＜0.01);与肺脾两虚模型组比较,参苓白术散组(28,35,42天)大鼠胃、下丘脑组织Ghrelin,Obestatin蛋白表达及积分吸光度均有不同程度升高(P＜0.05).结论:参苓白术散可调节肺脾两虚型COPD模型大鼠能量代谢,改善其营养不良状况,其机制可能通过调节Ghrelin,Obestatin动态平衡从而维持机体能量稳态来实现.

目的:观察肺脾两虚型慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠下丘脑组织、胃组织中生长激素释放肽(Ghrelin)及其受体GHS-R的变化,结合脑肠轴调节作用探究其在COPD肺脾两虚型大鼠模型中的作用.方法:48只Wistar大鼠随机分为空白组、肺脾两虚型COPD观察组(根据造模时间不同,分为28,35,42 d组),每组12只.空白组大鼠吸入空气+气管内注射等量生理盐水+灌服等量生理盐水;观察组烟熏+气管内滴注脂多糖(造模第1,14天)+灌服冰冷番泻叶浸液至造模结束.于造模28,35,42 d末将大鼠处死,取大鼠胃组织及下丘脑组织,分别采用蛋白免疫印迹法(Western blot),免疫组化法及实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)检测大鼠各组织中脑肠肽Ghrelin及其受体GHS-R的蛋白含量及mRNA水平,观察其在疾病过程中的动态表达.结果:与空白组比较,模型组大鼠随着造模时间的增长,其下丘脑、胃组织中Ghrelin及其受体GHS-R的蛋白表达逐渐减少(P＜0.05);同时,模型组各组大鼠下丘脑、胃组织Ghrelin及GHS-R的平均吸光度呈不同程度减少(P＜0.05);另外,模型组大鼠下丘脑组织、胃组织的mRNA表达水平也不同程度降低(P＜0.05).结论:Ghrelin及其受体在下丘脑组织、胃组织中的表达变化或许是引起COPD合并营养不良的原因之一,脑肠轴的调节作用在COPD营养状况不良状况中起着重要作用.

2003 年三峡水库蓄水后, 香溪河入库区段形成典型的水库型库湾, 磷污染严重, 导致水华频发.异养细菌是水体物质循环的重要参与者, 其中无机磷细菌释放结合态磷加重了水体富营养化.为了研究异养细菌和无机磷细菌对水体富营养化的影响, 在库湾设置7个采样点, 2015年4月、6月、9月和12月分别采集水样, 测定样品总氮(TN)、总磷(TP)、磷酸盐(PO4-P)及表层(水面下方0.5 m)水体叶绿素a(Chl.a)浓度, 实验室培养异养细菌及无机磷细菌.利用SPSS 17.0对水体可培养异养细菌和无机磷细菌的时空变化进行单因素方差分析, 并用SPSS软件分析细菌含量与总氮浓度、总磷浓度、磷酸盐浓度和叶绿素a浓度的相关性.结果显示: 异养细菌和无机磷细菌含量与叶绿素a浓度无显著相关性;无机磷细菌与氮磷相关性均高于异养细菌, 说明香溪河库湾无机磷细菌与水体氮磷关联性大于异养细菌.

目的 探讨重复经颅磁刺激(rTMS)联合盐酸帕罗西汀对卒中后抑郁症(PSD)患者HAMD评分及血清神经肽Y(NPY)、促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)、脑源性神经营养因子(BDNF)水平变化的影响.方法 选取郑州大学第二附属医院2014年11月至2017年2月PSD患者68例,随机数字表法分组,各34例.对照组采用盐酸帕罗西汀,观察组采用盐酸帕罗西汀+rTMS,两组均持续治疗2个月.入院时及治疗结束后统计对比两组抑郁评分(HAMD、MARDS、SDS)、血清NPY、BDNF、CRF水平、临床疗效及不良反应发生率.结果 ①两组治疗后MARDS、HAMD及SDS分值低于治疗前,且观察组较对照组低( P＜0.05);②两组治疗有效率比较,观察组94.12%(32/34)较对照组64.71%(22/34)高(P＜0.05);③两组治疗后血清CRF水平低于治疗前,BDNF及NPY水平高于治疗前,且观察组各指标优于对照组(P＜0.05);④两组不良反应发生率比较,观察组14.71%(5/34)与对照组8.82%(3/34)间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 联合采用盐酸帕罗西汀及rTMS治疗卒中后抑郁症效果显著,可有效改善血清NPY、BDNF、CRF水平,降低HAMD评分,减轻患者抑郁程度,提高治疗效果,且不会增加不良反应发生风险,具有安全性.

目的:探讨大黄附子汤辅助早期肠内营养(EEN)对重症急性胰腺炎(SPA)大鼠肝脏的保护作用.方法:健康成年雄性SD大鼠80只,随机分为对照组、SPA组、EEN组和大黄附子汤辅助早期肠内营养治疗组(EEN+DF组),每组20只,其中对照组开腹后轻微翻动胰腺数次,行空肠造瘘后关腹;SPA组在对照组的基础上行经胆胰管逆行注入4％牛磺胆酸钠(1 mL/kg),建立SPA模型;EEN+DF组在此基础上于造模后0、6和30 h于造瘘口匀速注入大黄附子汤2 mL,而EEN组在同时间点于造瘘口注入2 mL生理盐水;EEN组和EEN+DF组于造模后12、24、36 h注入肠内营养液2 mL.分别于造模后6、24、36 h取各组大鼠静脉血测定并比较血清谷丙转氨酶(ALT)和内毒素(LPS)水平,之后处死动物,取肝脏组织,研磨制备肝脏匀浆,测定组织中髓过氧化物酶(MPO)活性;再取肝脏组织进行切片、染色、观察.结果:造模前血清ALT和LPS的水平,4组之间差异无统计学意义(P>0.05),在6、24和36小时显示对照组和EEN组明显高于SAP组,EEN+DF组明显低于于单用EEN组(P<0.05);在造模后36 h,EEN+DF组肝脏组织的MPO活性明显较EEN组和SAP组降低(P<0.05).结论:大黄附子汤辅助肠内营养较单纯使用早期肠内营养可明显抑制SAP炎症介质的释放,减轻肝脏的伤程度,减少肠道内毒素移位,MPO活性下降,从而保护肝脏及胰腺组织,有助于SAP的治疗及减少并发症.

通过测定养殖箱内(24 cm×17 cm×16 cm))的沉积物管道数量和水体氮磷指标,研究方格星虫生物扰动对沉积物氮磷物质释放和表层物质迁移的影响.养殖箱底部铺设粗沙(3200 g,有机质含量27.6 mg·g–1),上层为细沙(2200 g,有机质含量11.0 mg·g–1),星虫密度分别为0条·箱–1(T0))、1条·箱–1(T1))、2条·箱–1(T2))和4条·箱–1(T4)),各组均设4个重复,实验时间为11 d.数据显示:1)方格星虫组沉积物侧面和底部的管道数量增加,并且表层细沙向下迁移,方格星虫密度越大,管道数量越多.实验期间水体悬浮颗粒物无明显变化(P>0.05)),且处理组之间亦无显著差异(P>0.05)),表明方格星虫扰动对表层沉积物的再悬浮作用无明显影响.2)实验前3天水体中的亚硝态氮、硝态氮、氨氮和总无机氮均无明显增加,而在第4天亚硝态氮、硝态氮、总无机氮表现增加趋势,并且星虫密度越大含量越高(P<0.05)).实验期间,各组活性磷含量呈现下降趋势,并且T0组平均含量低于其他三组.结果表明,底层有机质含量高于表层时,方格星虫生物扰动可以促进底层含氮物质的释放,并且密度越大促氮释放作用越明显;方格星虫对沉积物含磷物质的释放影响较小,可能与其含量较低和转化过程有关.

目的 探讨氧糖剥夺(OGD)条件下p75神经营养素受体(p75NTR)在人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中的表达变化和作用.方法 SH-SY5Y细胞OGD模型的建立采用三气培养箱无糖无血清培养方法.模型成功建立后设立3组:无血清常规培养组(对照组)、OGD组和OGD+ p75NTR竞争性阻断剂LM11A-31处理组(OGD+LM11A-31组).在细胞培养12 h时用利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测3组细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)活力检测试剂盒测定LDH释放活力,流式细胞术检测凋亡细胞比例,蛋白质印迹法检测p75NTR的蛋白表达.结果 成功构建SH-SY5Y细胞OGD模型.细胞培养12h时,对照组、OGD组和OGD+ LM11A-31组细胞存活率分别为(94.80±4.06)％、(50.34±5.55)％、(64.68±4.59)％,LDH释放活力分别为(46.93±5.49) U/L、(353.09±30.67) U/L和(282.20±25.60) U/L,凋亡细胞比例分别为(1.82±0.45)％、(14.98±2.59)％和(7.36±1.98)％,p75NTR蛋白相对表达量分别为0.06±0.01、0.41±0.02和0.19±0.03,差异均有统计学意义(F=67.94、142.10、36.28、221.20,P均＜0.05).多重比较显示,OGD组细胞存活率低于对照组,LDH释放活力高于对照组,凋亡细胞比例高于对照组,p75NTR蛋白表达高于对照组,差异均有统计学意义(Bonferroni法,P'均＜0.05);而LM11A-31处理后OGD+LM11A-31组细胞存活率高于OGD组,LDH释放活力低于OGD组,凋亡细胞比例低于OGD组,p75NTR蛋白表达低于OGD组,差异均有统计学意义(Bonferroni法,P'均＜0.05).结论 OGD条件下p75NTR在入神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y中表达增加,可能促进了神经损伤和凋亡.