移虫育王是大量培育蜜蜂蜂王的有效手段.近年来,大量研究表明人工移虫育王会对蜂王的发育和质量造成不良影响,并且改变其表观遗传修饰和基因表达.然而,移虫育王是否会改变蜂王体内的miRNA表达尚不清楚.本试验以西方蜜蜂Apis mellifera为研究对象,通过miRNA测序比较移虫育王(2日龄幼虫)与对照组移卵育王所培育蜂王的miRNA表达情况.结果表明:移虫育王与移卵育王培育的2种蜂王存在7个差异表达的miRNA,而这7个差异的miRNA可注释到651个靶基因.GO功能分析结果显示,这些靶基因主要富集在基因转录调控、转录因子活性、DNA结合、细胞核调控类型等方面;KEGG信号通路分析结果显示,靶基因主要富集在Wnt、Hippo信号通路和糖类代谢等方面.因此,本研究结果表明移虫育王可改变蜂王体内的miRNA表达,并可能通过调控Wnt、Hippo和糖代谢等信号通路上的靶基因来影响蜂王发育和质量.

[目的]本实验旨在研究3个低浓度氟胺氰菊酯对西方蜜蜂Apis mellifera育王质量的影响.[方法]控制蜂王产卵8h,孵化后进行人工育王,从移虫第2天起每天用微量进样器分别给王台中小幼虫饲喂2μL含有0.05,0.5和5 mg/kg氟胺氰菊酯的糖水,以饲喂纯糖水作为对照组并进行标记.连续饲喂3d后,记录王台的封盖数,待蜂王出房时,统计出房数,测其初生重、胸宽;利用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测蜂王卵巢中卵黄蛋白原基因(vg)、储存蛋白基因(hex110和hex7Ob)的相对表达量.[结果]5 mg/kg氟胺氰菊酯处理组王台封盖率显著低于0.05和0.5 mg/kg剂量组及对照组,但后3组之间差异不显著;5 mg/kg和0.5 mg/kg剂量组蜂王出房率显著低于0.05 mg/kg剂量组及对照组;4个试验组之间蜂王初生重及胸宽差异不显著.qPCR结果显示,5mg/kg剂量组蜂王卵巢中vg和hex110基因的相对表达量均显著低于0.05和0.5 mg/kg剂量组及对照组,但后3组之间差异不显著;0.5 mg/kg剂量组和5 mg/kg剂量组蜂王卵巢hex70b基因相对表达量显著低于对照组,但0.05 mg/kg剂量组蜂王卵巢hex70b基因相对表达量与0.5和5 mg/kg剂量组及对照组均差异不显著.[结论]本研究结果说明,食物中氟胺氰菊酯含量超过0.5 mg/kg时,会影响西方蜜蜂育王培育质量.

[目的]基于免移虫育王技术,探究幼虫信息素酯类混合物在育王中对中华蜜蜂Apis cerana cerana 蜂王质量的影响,为优质蜂王的培育奠定基础.[方法]利用中华蜜蜂免移虫育王生产器培育蜂王,在幼虫60 - 64 h 时向王台内注入1 μL 不同酯类组成的混合物(酯类混和物的浓度梯度分别为0,0. 1％,1. 0％和10. 0％),待蜂王出房后测定蜂王初生重、胸重、胸宽以及单侧卵巢管数量;并利用荧光定量PCR 测定蜂王卵巢卵黄原蛋白基因Vitellogenin (Vg),昆虫储存蛋白基因 hexamerin70b (hex70b) 和hexamerin110 (hex110) 的表达量.[结果]免移虫育王过程中添加3 种信息素酯类混合物3E(1. 0％甲基亚油酸酯、16. 0％ 甲基亚麻酸酯和35. 0％ 甲基油酸酯),不同浓度处理时蜂王的初生重较对照(石蜡油) 均显著增加,但蜂王胸宽和胸重均无显著变化; 0. 1％ 和 1. 0％浓度处理组蜂王单侧卵巢管数显著增加; 不同浓度处理组Vg 和hex70b 的表达量均无显著变化,但1. 0％和10. 0％浓度处理组蜂王卵巢的hex110 表达量显著升高.4 种信息素酯类混合物4E(4. 5％甲基棕榈酸酯、1. 0％ 甲基亚油酸酯、16. 0％ 甲基亚麻酸酯和35. 0％ 甲基油酸酯) 试验组只有10. 0％浓度处理组蜂王的初生重和单侧卵巢管数较对照显著上升(P ＜ 0. 05),0. 1％和1. 0％浓度处理对蜂王的个体发育指标均无显著影响(P ＞ 0. 05); 0. 1％和1. 0％浓度处理组Vg 的表达量、 10. 0％浓度处理组hex70b 的表达量以及1. 0％和10. 0％ 浓度处理组hex110 的表达量均显著上升(P ＜ 0. 05).10 种信息素酯类混合物10E(4. 5％ 甲基棕榈酸酯、2. 5％ 甲基硬脂酸、35. 0％ 甲基油酸酯、1. 0％甲基亚油酸酯、16. 0％甲基亚麻酸酯、3. 5％乙基棕榈酸酯、1. 5％乙基硬脂酸酯、18. 0％乙基油酸酯、0. 5％ 乙基亚油酸酯和17. 5％ 乙基亚麻酸酯) 试验组,各个浓度处理蜂王的初生重以及Vg 和hex110 的表达量均显著下降(P ＜ 0. 05),但蜂王的单侧卵巢管数和胸部指标无显著变化(P ＞ 0. 05),10. 0％浓度处理时hex70b 的表达量也显著降低(P ＜ 0. 05).[结论]中华蜜蜂育王过程中添加1. 0％的3E 和10. 0％的4E 幼虫信息素酯类可以在一定程度上提高蜂王质量.

蜂王质量的好坏决定了蜂群的群势和生产性能.培育优质的蜂王有利于蜂群的饲养管理及提高经济效益.在育王过程中,育王框所处位置对王台接受率以及蜂王质量均有所影响.本研究基于免移虫育王技术,以中华蜜蜂为研究对象,探究育王框在不同类型子脾之间的位置(封盖子脾之间、幼虫脾之间以及混合脾之间)对王台接受率、蜂王个体形态指标及蜂王卵巢卵黄原蛋白基因表达的影响研究结果表明,育王框置于幼虫脾之间蜂王幼虫接受率和蜂王卵黄原蛋白表达量显著高于封盖子脾,但对蜂王个体指标无影响.

目的:研究六苓扶正方对环磷酰胺致免疫低下小鼠免疫功能的影响.方法:将72只Babl/c小鼠随机分为6组:正常对照组,模型对照组,六苓扶正方低、中、高剂量组(1,2,4 g·kg-1)和阳性对照组(人参蜂王浆,2 g·kg-1),每组12只.六苓扶正方各剂量组及阳性对照组分别灌胃给予相应药物,正常对照组和模型对照组给予等量蒸馏水,1次/d,连续30 d.给药第25d和26d,以40 mg·kg-1腹腔注射环磷酰胺复制免疫低下模型,观察小鼠体质量及精神状态变化,考察六苓扶正方对血常规、免疫球蛋白G(IgG)、细胞白介素-2(IL-2)、胸腺指数、脾脏指数、脾淋巴细胞增殖及自然杀伤(NK)细胞活性的影响.结果:各组小鼠体质量差异无统计学意义(P>0.05),正常对照组小鼠精神及饮食状态良好,模型对照组小鼠精神萎靡,但饮食无明显变化,给予六苓扶正方干预后小鼠精神状态有明显改善.与正常对照组相比,模型对照组的白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白浓度(Hb)、血小板计数(Plt)、IgG和IL-2水平、脾脏指数和胸腺指数、脾淋巴细胞增殖、NK细胞活性显著降低(P<0.05或P<0.01).与模型对照组相比,六苓扶正方中、高剂量组的WBC和IgG水平显著升高(P<0.05或P<0.01),六苓扶正方高剂量组脾淋巴细胞增殖和NK细胞活性显著升高(P<0.05),六苓扶正方作用均呈剂量依赖性.六苓扶正方低剂量组的WBC和IgG水平及六苓扶正方高剂量组的脾淋巴细胞增殖和NK细胞活性与阳性对照相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论:六苓扶正方具有增强免疫低下小鼠免疫功能的作用.

[目的]本实验旨在研究王台中残留啶虫脒对西方蜜蜂Apis mellifera蜂王培育质量的影响.[方法]通过融化蜂蜡并添加啶虫脒药液制作王台,使各王台中分别含4个不同剂量的啶虫脒(0,10,100和1 000 μg/kg蜂蜡).同时,控制蜂王产卵6h,3d后,将孵化为1日龄的幼虫分别移入各组王台中,并放入蜂群哺育.移虫后第3和6天分别统计各组王台中幼虫的接受率和封盖率,待蜂王出房时,计算其出房率,测定蜂王个体初生重、胸重和胸宽指标;采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术测定蜂王卵巢中卵黄原蛋白基因(Vg)、储存蛋白基因(hex1 10和hex70b)的相对表达量.[结果]100 μg/kg蜂蜡和1 000 μg/kg蜂蜡这两个啶虫脒剂量组西方蜜蜂蜂王的出房率都显著低于0 μg/kg蜂蜡和10 μg/kg蜂蜡剂量组,而0μg/kg蜂蜡与10 μg/kg蜂蜡剂量组之间及100μg/kg蜂蜡与1 000 μg/kg蜂蜡剂量组之间出房率均差异不显著;这4个剂量组的王台幼虫接受率和封盖率以及蜂王的初生重、胸重和胸宽均无显著差异.qPCR结果显示,Vg基因的相对表达量随啶虫脒浓度的增加而下降,其中,1 000μg/kg蜂蜡剂量组Vg基因的相对表达量显著低于10 μg/kg蜂蜡剂量组和0 μg/kg蜂蜡剂量组,其余各剂量组之间差异不显著;这4个剂量组之间hex110和hex70b基因的表达量差异不显著.[结论]西方蜜蜂王台中啶虫脒残留超过100 μg/kg蜂蜡剂量时,会对蜂王培育产生不利影响.

为研究育王过程中添加蜜蜂幼虫信息素成分甲基硬脂酸酯和E-β-罗勒烯对中华蜜蜂育王质量的影响,本试验结合免移虫育王技术,在幼虫60～64 h时向王台内注入1μL配置好的信息素(浓度梯度分别为0％、0.1％、1.0％、10.0％),待蜂王出房后测定蜂王个体指标及蜂王卵巢Vg、hex70b和hex110基因的表达水平.与空白对照相比,添加10.0％浓度的E-β-罗勒烯组蜂王的初生重和单侧卵巢管数显著增加,同时Vg、hex70b和hex110基因表达水平也显著上升;添加1.0％的E-β-罗勒烯蜂王单侧卵巢管数量显著增加,Vg和hex110基因的表达量也显著上升;添加甲基硬脂酸酯对培育蜂王的初生重、胸部指标和卵巢相关基因表达均无显著影响,但1.0％和10.0％的甲基硬脂酸酯使蜂王卵巢管数量显著减少.结果表明在中蜂育王过程中添加E-β-罗勒烯可以在一定程度上提高蜂王的质量.

作为重要的传粉昆虫,蜜蜂蜂群损失现象受到广泛关注.研究表明,蜂王问题是导致蜂群损失的主要因素之一.蜂王是蜂群中唯一雌性生殖器官发育完全的个体,是维持蜂群存续的关键.蜂王质量决定了蜂群的群势以及生产性能,对蜂群的发展和存活至关重要.本文详细介绍了表征蜂王质量的相关指标及其在蜂王选育过程中的应用,深入论述了幼虫日龄、营养、交尾、环境温度、病虫害以及农药等相关因素对蜂王质量及其性状表现的影响,以期为蜂王的培育和使用以及蜜蜂资源的保护和利用提供参考.

[目的]驯化本土熊蜂为农作物授粉,是现代农业与生态保护协同发展的高质量之路.本研究旨在探明诱导云南本土优势熊蜂种——短头熊蜂Bombus breviceps蜂王滞育与出蛰方法对繁育特性的影响,以优化饲养关键技术,提高繁育效率.[方法]通过对短头熊蜂蜂王不同滞育期体重及存活率变化的统计,以及饲养不同体重、不同滞育期(滞育历时30,60,90,120和150 d)和不同诱导出蛰方法(未经处理对照组、5℃冷藏90 d以及C02处理5和30 min)处理的蜂王,记录蜂群发育(蜂王产卵前期、始见工蜂历时、始见子代蜂王历时、始见雄性蜂历时、蜂群工蜂数量达到6头历时、蜂群工蜂数量达到30头历时、蜂群工蜂数量达到60头历时及建群蜂王寿命)、群势(工蜂数量和子代蜂王数量)、繁育效率[蜂王产卵率、蜂群可应用率(工蜂数量50头以上的蜂群比例)和子代蜂王生产率]等繁育特性指标,并进行比较分析.[结果]短头熊蜂成功交尾的蜂王体重符合正态分布,范围在0.4513～1.1928 g之间,平均为(0.8969±0.1219)g,出现频率最高的体重范围是0.8733～0.9788 g,占比61.2％.滞育期蜂王存活率与体重呈极显著正相关,二者均随滞育历时的延长而下降,滞育历时超过120 d时,蜂王存活率急剧下降.蜂王滞育前体重分别与蜂王产卵前期、蜂群始见工蜂历时、始见子代蜂王历时、始见雄性蜂历时、蜂群工蜂数量达到6头历时、蜂群工蜂数量达到30头历时、蜂群工蜂数量达到60头历时、建群蜂王寿命、工蜂数量及子代蜂王数量相关性都不显著,但是中等体重(0.8733～0.9788 g)的蜂王建群后子代蜂王生产率更高;蜂王滞育前体重和滞育历时对蜂群发育和群势的影响不产生交互作用,滞育历时与蜂群产生的工蜂数量和子代蜂王数量相关性不显著,但与蜂王产卵前期、始见工蜂历时、始见子代蜂王历时、始见雄性蜂历时、蜂群工蜂数量达到6头历时、蜂群工蜂数量达到30头历时、蜂群工蜂数量达到60头历时和建群蜂王寿命呈极显著负相关,随滞育历时的延长,蜂群发育期缩短.虽然滞育90 d的蜂王产卵率与滞育60和120 d的相近,但建群后工蜂数量多,蜂群可应用率及子代蜂王生产率高于滞育60,120和150 d的蜂王的.5℃冷藏90 d和CO2处理的蜂王产卵前期、蜂群始见工蜂历时、蜂群工蜂数量达到6头历时、蜂群工蜂数量达到30头历时和蜂群工蜂数量达到60头历时极显著短于对照组;CO2处理30 min组蜂群的工蜂数量最多(496.4±101.1头),显著高于CO2处理5 min组的(364.4±132.1头)、5℃冷藏90 d组的(398.2±117.2头)和对照组的(253.0±44.0头),蜂王产卵率(100.0％)、蜂群可应用率(86.7％)和子代蜂王生产率(86.7％)依次高于5℃冷藏90 d组和C02处理5 min组的,对照组的最低.[结论]短头熊蜂成功交尾的蜂王必须经历滞育才能正常建群繁育后代,且滞育前体重在0.8733～0.9788 g的蜂王繁育特性较好;5℃冷藏90 d和CO2处理均能诱导蜂王出蛰产卵建群.本研究结果可为短头熊蜂的高效繁育技术集成提供参考,对于本土熊蜂的保护和授粉应用具有重要意义.

目的 为含蜂王浆的保健食品研发和生产,提供控制产品质量的建议.方法 梳理全国近22年(1996-2017)批准的含蜂王浆原料的保健食品,对该类保健食品不同剂型的储存温度进行分类整理;归纳蜂王浆保健食品的不同灭菌方式.结果 全国近22年共批准蜂王浆保健食品278件;此类保健食品的储存温度要求不统一,要求阴凉储存、冷冻储存和常温储存者分别占77.0％、9.4％、4.3％,另有9.3％的产品未明确产品的储存温度要求;蜂王浆保健食品包含灭菌工序的产品较少,仅13.8％(17/123)的产品在生产加工时含灭菌工序;针对原料蜂王浆灭菌的产品占6.5％(8/123).结论 含有蜂王浆保健食品应科学确定产品的储存条件和温度;应综合考虑蜂王浆的抑菌特性及热不稳定性等特性,研究产品灭菌工序的必要性,选择非热效应原理的灭菌方式,以保证控制产品微生物指标的同时,保证产品中的生物活性不受破坏.