目的:对病例报告文献报道的草药和膳食补充剂（HDS）增强华法林的抗凝作用进行分析和评价。方法:检索国内外相关数据库（截至2021年10月10日），选择HDS与华法林相互作用致抗凝作用增强的病例报告文献。根据病例报告中患者国际标准化比值升高程度和出血事件发生情况评价HDS增强华法林抗凝作用的程度。根据HDS与华法林抗凝作用增强的因果关系评价结果、病例报告数量和其他证据（国家相关机构发布警告、临床研究、药代动力学/药效动力学研究、动物实验研究等），建立HDS与华法林相互作用可靠性评分标准，评价HDS增强华法林抗凝作用的可靠性。总得分≥9分为高度可靠，6~8分为较可靠，3~5分为可能可靠，≤2分为可疑可靠。结果:共收集到41篇文献，涉及56例患者、26种HDS。轻度增加华法林抗凝作用的HDS有5种，包括当归、草木犀流浸液片、南瓜籽、鱼油和水飞蓟；中度者6种，包括生姜、芒果、蜂花粉、斯卡珀农葡萄、核桃和灰树花；重度者15种，包括蔓越莓、丹参、甘草、红花、蒲公英、枸杞、葡萄柚、洋甘菊、石榴汁、虾青素胶囊、苦艾、蜂王浆、越橘、红枣和贯叶连翘。增强华法林抗凝作用可靠性评价为高度可靠的HDS有1种，为蔓越莓（评分为11分）；较可靠者8种，包括丹参、甘草、红花、蒲公英、枸杞、葡萄柚、洋甘菊和石榴汁（评分分别为8、7、7、7、7、6、6、6分）；可能可靠者12种，包括当归、生姜、草木犀流浸液片、芒果、虾青素胶囊、蜂花粉、苦艾、蜂王浆、斯卡珀农葡萄、核桃、越橘和灰树花（评分分别为5、5、5、5、4、4、4、3、3、3、3、3分）；可疑可靠者5种，包括南瓜籽、红枣、鱼油、水飞蓟和贯叶连翘（评分分别为2、2、2、0、-1分）。结论:蔓越莓、丹参、甘草、红花、蒲公英、枸杞、葡萄柚、洋甘菊和石榴汁等HDS增强华法林抗凝作用的程度和可靠性均较高，应避免在华法林治疗期间使用。

目的 研究蜂王浆水溶蛋白对高糖诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用及其机制.方法 采用CCK-8法检测蜂王浆水溶蛋白对HUVEC细胞增殖活性的影响;酶标法检测蛋白对超氧化物歧化酶(SOD)分泌的影响;酶联免疫吸附法检测蛋白对肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-4(IL-4)分泌的影响;流式细胞术检测蛋白对活性氧分泌的影响;Hoechst-PI双染法检测蛋白对细胞凋亡及坏死的影响.结果 高糖损伤的HUVEC经蜂王浆水溶蛋白处理后,细胞的形态明显改善,增殖活性提高,SOD分泌增加,清除活性氧的能力提高,TNF-α、IL-4的分泌减少,细胞凋亡减少,但对细胞坏死率无影响.结论 蜂王浆水溶蛋白能抗高糖所致HUVEC的损伤,其机制可能与提高细胞抗氧化能力、减轻炎症反应有关.

移虫育王是大量培育蜜蜂蜂王的有效手段.近年来,大量研究表明人工移虫育王会对蜂王的发育和质量造成不良影响,并且改变其表观遗传修饰和基因表达.然而,移虫育王是否会改变蜂王体内的miRNA表达尚不清楚.本试验以西方蜜蜂Apis mellifera为研究对象,通过miRNA测序比较移虫育王(2日龄幼虫)与对照组移卵育王所培育蜂王的miRNA表达情况.结果表明:移虫育王与移卵育王培育的2种蜂王存在7个差异表达的miRNA,而这7个差异的miRNA可注释到651个靶基因.GO功能分析结果显示,这些靶基因主要富集在基因转录调控、转录因子活性、DNA结合、细胞核调控类型等方面;KEGG信号通路分析结果显示,靶基因主要富集在Wnt、Hippo信号通路和糖类代谢等方面.因此,本研究结果表明移虫育王可改变蜂王体内的miRNA表达,并可能通过调控Wnt、Hippo和糖代谢等信号通路上的靶基因来影响蜂王发育和质量.

目的:基于网络药理学探讨王浆酸(10-HDA)对人结肠癌SW620细胞增殖和迁移的影响,阐明其相关分子机制.方法:利用中药系统药理学(TMSCP)数据库和中医药综合数据库(TCMID)以关键词"蜂王浆"进行检索得到 10-HDA等活性成分及对应靶点,采用Swiss Target Prediction数据库预测小分子靶点.采用GeneCards数据库和在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库以关键词"Colon Cancer"获得靶点,利用String数据库和Cytoscape 3.8.0 软件构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络,筛选核心靶点;利用Metascape数据库对基因本体(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路进行富集分析,筛选特有成分10-HDA进行体外活性实验.将生长状态良好的人结肠癌SW620细胞分为对照组和不同剂量(1、5、10、15和20 mmol·L-1)10-HDA组,采用MTT法检测各组细胞活性并计算细胞存活率.SW620细胞分为对照组、低剂量(5 mmol·L-1)10-HDA 组、中 剂 量(10 mmol·L-1)10-HDA 组 和 高 剂 量(15 mmol·L-1)10-HDA 组,Hoechst33342染色法观察各组细胞形态表现,细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率,流式细胞术检测各组不同细胞周期细胞百分率,生化法检测各组细胞中总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,Western blotting法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤 2(Bcl-2)、Bcl-2 相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶 3(Caspase-3)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶 9(Caspase-9)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、β-连环蛋白(β-catenin)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)蛋白表达水平.结果:TCMSP数据库筛选得到蜂王浆6种活性成分,10-HDA治疗结肠癌核心靶点28个.GO功能富集分析主要涉及细胞增殖和细胞凋亡等信号通路;KEGG信号通路富集分析涉及细胞周期、前列腺癌、细胞衰老和p53等信号通路,GSK3β/β-catenin信号通路与细胞周期有密切关联.与对照组比较,5、10、15和20 mmol·L-1 10-HDA组细胞存活率呈剂量依赖性降低(P<0.05或P<0.01).与对照组比较,不同剂量10-HDA组细胞中凋亡细胞数明显增多,细胞划痕愈合率明显降低(P<0.05 或P<0.01),中和高剂量 10-HDA组细胞中S期细胞百分率明显升高(P<0.05 或P<0.01),不同剂量 10-HDA组细胞中T-AOC和SOD活性明显降低(P<0.05或P<0.01).与对照组比较,低剂量10-HDA组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.01),GSK3β蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与对照组比较,中和高剂量 10-HDA组细胞中 Bax、Caspase-3、Caspase-9 和GSK3β蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),Bcl-2、β-catenin和CyclinD1蛋白表达水平明显降低(P<0.01).结论:10-HDA可明显抑制结肠癌细胞增殖和迁移,并可促进结肠癌细胞的凋亡和氧化水平,其作用机制可能与激活GSK3β/β-catenin信号通路有关.

作为社会性昆虫,蜜蜂是研究社会行为和学习记忆的理想模式生物.王浆主蛋白(Major royal jelly protein,MRJP)是蜂王浆中蛋白质的主要成分,该家族一共有9个成员,MRJP1～MRJP9.所有mrjps均以串联排列的形式位于蜜蜂11号染色体上一个大约60 kb的DNA片段上.mrjp的同源体也存在于其他的膜翅目昆虫,均是通过yellow进化而来的.随着不断地进化,MRJPs家族进化出许多重要功能,其中最主要的就是营养功能.本文从MRJPs家族的基因及蛋白质结构、mRNA表达情况、进化和功能等方面进行综述,为今后开展相关研究提供理论支持.

目的 探讨免疫调节2号方对环磷酰胺(CY)和氢化可得松(HY)诱导的免疫低下模型小鼠免疫功能的影响.方法 本研究设置6个组别,分为正常组、模型组、免疫调节2号方低中高剂量组以及阳性对照组,免疫调节2号方和人参蜂王浆原液灌胃给予小鼠,每日一次,连续30 d,正常组和模型组给予生理盐水;除正常组外,其他组别于给药第25、26天,小鼠腹腔注射CY40 mg/kg/d,诱导免疫低下模型,检测血清白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)含量和血清溶血素水平.除正常组外,于给药的第21天开始,小鼠肌肉注射HY40 mg/kg,隔天一次,共5次,检测淋巴细胞功能和巨噬细胞功能.结果 与模型组相比,免疫调节2号方中、高剂量可提高免疫低下小鼠血清IL-1、TNF-α、IFN-γ水平,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比较,免疫调节2号方中、高剂量可提高免疫低下小鼠血清溶血素水平,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,免疫调节2号方中高剂量可同时增加NK细胞活性、耳片重量差值、吞噬指数和廓清指数,差异有统计学意义(P<0.05).结论 免疫调节2号方对CY和HY诱导的免疫低下模型小鼠具有保护作用.

[目的]本实验旨在研究3个低浓度氟胺氰菊酯对西方蜜蜂Apis mellifera育王质量的影响.[方法]控制蜂王产卵8h,孵化后进行人工育王,从移虫第2天起每天用微量进样器分别给王台中小幼虫饲喂2μL含有0.05,0.5和5 mg/kg氟胺氰菊酯的糖水,以饲喂纯糖水作为对照组并进行标记.连续饲喂3d后,记录王台的封盖数,待蜂王出房时,统计出房数,测其初生重、胸宽;利用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测蜂王卵巢中卵黄蛋白原基因(vg)、储存蛋白基因(hex110和hex7Ob)的相对表达量.[结果]5 mg/kg氟胺氰菊酯处理组王台封盖率显著低于0.05和0.5 mg/kg剂量组及对照组,但后3组之间差异不显著;5 mg/kg和0.5 mg/kg剂量组蜂王出房率显著低于0.05 mg/kg剂量组及对照组;4个试验组之间蜂王初生重及胸宽差异不显著.qPCR结果显示,5mg/kg剂量组蜂王卵巢中vg和hex110基因的相对表达量均显著低于0.05和0.5 mg/kg剂量组及对照组,但后3组之间差异不显著;0.5 mg/kg剂量组和5 mg/kg剂量组蜂王卵巢hex70b基因相对表达量显著低于对照组,但0.05 mg/kg剂量组蜂王卵巢hex70b基因相对表达量与0.5和5 mg/kg剂量组及对照组均差异不显著.[结论]本研究结果说明,食物中氟胺氰菊酯含量超过0.5 mg/kg时,会影响西方蜜蜂育王培育质量.

为探究蜕皮激素早期应答因子ecr和usp在不同级型的西方蜜蜂体内的表达及其他相关生物学功能和作用,本研究通过荧光定量PCR技术对不同级型、发育时期的西方蜜蜂中的ecr与usp表达水平进行检测.结果表明,ecr、usp在工蜂小幼虫体内的表达与参照相同,随后稍有增加,但在变态期急剧降至最低水平,而后的蛹期又逐步增加,在成年蜂时期的表达持续维持在较高水平;蜂王体内的变化趋势与工蜂基本类似,所不同的是各阶段的表达量都显著高于工蜂,且在产卵王体内的表达显著高于处女蜂王;雄蜂体内ecr的表达在小幼虫时期稍高,但此后至蛹期都一直处于较低的表达水平,至蛹后期才稍有增加,但羽化后水平较低,老龄雄蜂体内又稍有提高.但usp在雄蜂体内的表达却基本呈现出与发育时期无关的高表达,大致为参照的283倍.ecr与usp在三型蜂体内的这种表达模式揭示了MH不仅调控蜜蜂生长发育、蜕皮变态,还可能与蜜蜂的生殖有关,而usp在雄蜂体内的表达说明USP除了与EcR组成活性复合体参与MH调控蜕皮与生殖外,还可能具有其他的生物学功能.该结果为进一步研究蜕皮激素及其效应因子的生物学功能提供了依据.

[目的]基于免移虫育王技术,探究幼虫信息素酯类混合物在育王中对中华蜜蜂Apis cerana cerana 蜂王质量的影响,为优质蜂王的培育奠定基础.[方法]利用中华蜜蜂免移虫育王生产器培育蜂王,在幼虫60 - 64 h 时向王台内注入1 μL 不同酯类组成的混合物(酯类混和物的浓度梯度分别为0,0. 1％,1. 0％和10. 0％),待蜂王出房后测定蜂王初生重、胸重、胸宽以及单侧卵巢管数量;并利用荧光定量PCR 测定蜂王卵巢卵黄原蛋白基因Vitellogenin (Vg),昆虫储存蛋白基因 hexamerin70b (hex70b) 和hexamerin110 (hex110) 的表达量.[结果]免移虫育王过程中添加3 种信息素酯类混合物3E(1. 0％甲基亚油酸酯、16. 0％ 甲基亚麻酸酯和35. 0％ 甲基油酸酯),不同浓度处理时蜂王的初生重较对照(石蜡油) 均显著增加,但蜂王胸宽和胸重均无显著变化; 0. 1％ 和 1. 0％浓度处理组蜂王单侧卵巢管数显著增加; 不同浓度处理组Vg 和hex70b 的表达量均无显著变化,但1. 0％和10. 0％浓度处理组蜂王卵巢的hex110 表达量显著升高.4 种信息素酯类混合物4E(4. 5％甲基棕榈酸酯、1. 0％ 甲基亚油酸酯、16. 0％ 甲基亚麻酸酯和35. 0％ 甲基油酸酯) 试验组只有10. 0％浓度处理组蜂王的初生重和单侧卵巢管数较对照显著上升(P ＜ 0. 05),0. 1％和1. 0％浓度处理对蜂王的个体发育指标均无显著影响(P ＞ 0. 05); 0. 1％和1. 0％浓度处理组Vg 的表达量、 10. 0％浓度处理组hex70b 的表达量以及1. 0％和10. 0％ 浓度处理组hex110 的表达量均显著上升(P ＜ 0. 05).10 种信息素酯类混合物10E(4. 5％ 甲基棕榈酸酯、2. 5％ 甲基硬脂酸、35. 0％ 甲基油酸酯、1. 0％甲基亚油酸酯、16. 0％甲基亚麻酸酯、3. 5％乙基棕榈酸酯、1. 5％乙基硬脂酸酯、18. 0％乙基油酸酯、0. 5％ 乙基亚油酸酯和17. 5％ 乙基亚麻酸酯) 试验组,各个浓度处理蜂王的初生重以及Vg 和hex110 的表达量均显著下降(P ＜ 0. 05),但蜂王的单侧卵巢管数和胸部指标无显著变化(P ＞ 0. 05),10. 0％浓度处理时hex70b 的表达量也显著降低(P ＜ 0. 05).[结论]中华蜜蜂育王过程中添加1. 0％的3E 和10. 0％的4E 幼虫信息素酯类可以在一定程度上提高蜂王质量.

[目的]外来物种与本土亲缘关系较近的物种可能会发生交尾竞争,干扰本土物种的正常繁衍.欧洲地熊蜂Bombus terrestris 是全球范围内商业化应用最广的传粉蜂种,但在许多国家造成了生物入侵.本研究旨在明确欧洲地熊蜂对我国本土熊蜂产生生殖干扰的可能性.[方法]采用四级杆飞行时间-气质联用系统(gas chromatography-quadrupole time of flight mass spectrometry,GC-QTOF/MS) 测定了欧洲地熊蜂和我国本土9 种熊蜂的雄蜂头部分泌物的成分,并进行聚类分析; 在人工控制环境下比较了欧洲地熊蜂对我国重要熊蜂种类的交尾影响.[结果]雄蜂头部分泌物气质色谱图在同一熊蜂种内基本一致,而在不同熊蜂种之间差异明显; 我国红光熊蜂B. ignitus、兰州熊蜂B. lantschouensis 与欧洲地熊蜂的雄蜂头部分泌物成分相似性分别为58. 49％ 与49. 23％; 在人工控制环境下欧洲地熊蜂雄蜂可以与兰州熊蜂蜂王杂交,并能够显著降低兰州熊蜂的交尾成功率(P ＜ 0. 01).[结论]欧洲地熊蜂与我国一些熊蜂种的雄蜂头部分泌物成分相似性较高,能够干扰其正常交尾,具有较高的生殖干扰风险.为了保护我国本土熊蜂资源与生态系统平衡避免造成生物入侵,我们应该谨慎使用外来熊蜂物种.