目的 鉴定银蓝调脂胶囊化学成分,并对其进行药材归属.方法 该药物 50%乙醇提取液的分析采用Waters ACQUITY BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量 0.3 mL/min;柱温 30℃;电喷雾离子源;正负离子扫描,通过高分辨质谱数据、相关文献、对照品进行鉴定.结果 共鉴别出 77种成分,包括 42 种黄酮、16 种皂苷、4 种香豆素、4 种内酯、10 种有机酸、1 种柠檬苦素,并且 20 种归属于绞股蓝,12 种归属于化橘红,14 种归属于银杏叶,38 种归属于蜂胶,7 种为共有成分.结论 本实验基本明确了银蓝调脂胶囊化学物质基础,可为该制剂质量控制及药效物质基础研究提供实验依据和理论支撑.

目的:观察蜂胶液、利福平粉剂及灭菌凡士林纱布外敷治疗Ⅱ期压疮的临床疗效.方法:将Ⅱ期压疮患者76例随机分为3组,蜂胶液组26例,利福平组25例,凡士林组25例,3组创面均用35~36℃生理盐水冲洗,创面周围皮肤常规消毒后分别外涂蜂胶液、利福平粉及灭菌凡士林纱布湿敷,以患者创面完全愈合为观察截止时间,对2组治疗效果及换药时疼痛评分、创面愈合时间进行比较.结果:蜂胶液组有效率为92.3%,高于其他2组(P<0.01).蜂胶液组疼痛评分为(0.56±1.54)分,低于其他2组(P<0.01);治愈时间为(11.38±8.21)天,短于其他2组(P<0.01).结论:蜂胶液治疗Ⅱ期压疮疗效优于利福平及凡士林,而且换药时疼痛评分低.

目的 了解贵州保健食品企业生产现状和保健食品销售情况,为贵州保健食品产业的发展提供对策.方法 在贵州省内对持有保健食品生产批件企业和部分非保健食品生产企业进行问卷调查.同时在贵阳市随机抽取保健食品销售点,了解贵州本地保健食品销售情况.结果 贵州生产的保健食品种类排在前3位的是增强免疫力、辅助降血脂和缓解体力疲劳;剂型以胶囊剂、口服液、片剂为主;年生产量主要在500吨以内;37.50％企业保健食品销售额占企业总销售额的10％以内;贵州共有24家持有保健食品批件的企业,生产以自加工为主;生产面积大多在1 000m2之内;82.35％企业参加保健食品生产的工人数多在50人以下;各销售点销售的本地品牌主要为夜郎蜂胶、圣济堂;在受调查的企业中,44.23％有开发保健食品的意愿;平均每个企业参与研发人员13人;每个项目投入金额多在50万以上.结论 贵州保健食品生产企业数量少、生产量小、品种单调,不能满足市场需求,应加快推进贵州保健食品产业的发展.

目的 根据原卫生部2003年发布的《保健食品检验与评价技术规范》要求,探索蜂胶软胶囊对小鼠免疫调节功能的影响.方法 经口给予小鼠不同剂量的受试物蜂胶软胶囊30 d后,通过抗体生成细胞数和血清溶血素含量测定,观察其对小鼠体液免疫的影响;通过迟发型变态反应和ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验,研究受试物对小鼠细胞免疫的影响;通过碳粒廓清试验和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验以及NK细胞的活性测定,评价蜂胶软胶囊对小鼠非特异性免疫功能的影响.结果 与溶剂对照组比较,受试物高剂量组小鼠溶血空斑数和血清溶血素水平显著提高(P＜0.01),中剂量组小鼠仅溶血空斑数增加明显(P＜0.01);受试物高剂量组小鼠DTH和脾淋巴细胞增殖能力显著增强(P＜0.05);中剂量组仅小鼠脾淋巴细胞增殖能力增强(P＜0.05);受试物高剂量组、中剂量组小鼠单核巨噬细胞吞噬能力显著提高(P＜0.01).结论 本试验条件下,蜂胶软胶囊可能是通过提高小鼠的特异性和非特异性免疫功能从而增强机体免疫力.

目的 对糖尿病大鼠肠黏膜屏障功能检测方法进行分析评价,并以此为靶点探讨蜂胶是否通过修复肠黏膜屏障发挥降血糖作用.方法 建立糖尿病大鼠模型,以80及160 mg/kg蜂胶进行干预,持续4周.罗氏血糖仪检测尾血血糖(FBG);高效液相色谱法检测红细胞糖化血红蛋白(HbA1c)含量;ELISA实验检测血浆D-乳酸(D-LA)及连蛋白(zonulin)含量;透射电镜观察肠组织上皮细胞间连接装置超微结构变化,Western Blotting检测其紧密连接相关蛋白表达水平.结果 成功建立糖尿病大鼠模型,80、160 mg/kg蜂胶干预4周后,大鼠血糖值分别达到17.57 mmol/L和18.24 mmol/L,HbA1c含量分别达到8.94％及8.22％,均较模型组明显降低(P<0.05).补充蜂胶后,糖尿病大鼠回肠及结肠组织上皮细胞间紧密连接、黏着连接间隙异常增宽等现象得到有效缓解.补充蜂胶使回肠和结肠组织中claudin-1、occludin及ZO-1蛋白表达水平显著升高,且具有剂量依赖性(P<0.05).80及160 mg/kg蜂胶干预后,血清D-LA含量分别为160.03 ng/mL及151.18 ng/mL,zonulin含量分别为650.14μg/mL及647.60μg/mL,均较模型组降低,但各组间比较,均未见显著性差异(P>0.05).结论 肠黏膜屏障超微结构观察及肠组织紧密连接相关蛋白表达水平检测较肠黏膜屏障功能血清学检测可能具有更高的灵敏性,可作为可靠的实验手段应用于蜂胶降糖的肠黏膜屏障修复机制研究.

目的:比较矿物三氧化物凝聚体(mineral trioxide aggregate,MTA)与山东蜂胶乙醇提取物对牙髓成纤维细胞活性、矿化和趋化能力以及抗炎效应的影响.方法:利用CCK-8法检测山东蜂胶提取物和MTA浸出液作用牙髓成纤维细胞1、5、7、9d时的细胞毒性,各组同时作用15 h,Transwell法检测不同组的迁移细胞数目.矿化诱导21 d后,各组进行茜素红染色比较诱导硬组织沉积能力.按照1 mg/L浓度将脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)加入两种材料后刺激细胞3h,采用实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法检测不同组细胞肿瘤坏死因子-0(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)三种炎症因子的表达量.采用单因素方差分析及非参数检验对组间差异进行分析(P＜0.05).结果:蜂胶的细胞毒性大于MTA,蜂胶组迁移细胞数目(26.67±2.52)明显少于对照组(61.33 ±4.93)及MTA组(80.00 ±2.65),茜素红染色显示蜂胶组相较MTA组的钙沉积更多.LPS刺激细胞3h后,蜂胶相比MTA可以显著降低IL-Iβ和IL-6的表达量.结论:山东蜂胶相比MTA对牙髓细胞有一定的细胞毒性,对细胞迁移的促进作用不明显,但蜂胶具有良好的抗炎效果及诱导牙髓细胞成牙本质分化的能力,经处理后有望应用于感染牙髓的活髓保存治疗.

目的 采用精准、可量化的方法筛选蜂胶影响PXR/CYP3A4通路调控血脂的质量标志物.方法 采用人结肠癌LS174T细胞给予一定浓度的咪达唑仑注射液,同时给予不同浓度的蜂胶已知成分对照品溶液,孵育后提取样品,采用UHPLC-MS法测定生成的1'-羟基咪达唑仑含量,根据测定结果筛选出对PXR/CYP3A4通路有显著调控作用的成分,以这些成分为指标,建立同时定量方法,根据结果初步确定蜂胶中影响PXR/CYP3A4通路调控血脂代谢的质量标志物.结果 所评价的蜂胶成分中,白杨素、高良姜素、异绿原酸A、槲皮素、咖啡酸苯乙酯均能够显著提高或降低1'-羟基咪达唑仑的量(与对照组和阳性对照组比较),提示上述成分能够显著影响PXR/CYP3A4表达;UHPLC-MS-MS含量测定结果显示,蜂胶中上述成分除异绿原酸A和乔松素外,均具有适宜的含量以达到显效.结论 白杨素、高良姜素、咖啡酸苯乙酯和槲皮素可能是蜂胶影响PXR/CYP3A4通路调控血脂的质量标志物,且均具有抑制相关靶标表达,进而调节血脂水平的活性;同时,本研究所用质量标志物筛选、评价方法快速、高效、可量化,能够适应基于PXR/CYP3A4的大通量活性成分筛选研究.

目的 探讨蜂胶牙泰联合米诺环素治疗急性牙周炎的临床效果.方法 选取2018年6月—2020年6月上海市嘉定区安亭医院收治的90例急性牙周炎患者(121颗患牙),随机分成对照组(45例,62颗患牙)和治疗组(45例,59颗患牙).对照组口服盐酸米诺环素片,50 mg/次,2次/d.治疗组在对照组的基础上给予蜂胶牙泰,1次/d.两组患者均连续治疗3 d.观察两组临床疗效,比较治疗前后两组患者牙周袋深度、菌斑指数,龈沟液前列腺素E2(PGE2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)水平,疼痛视觉模拟量表(VAS)评分和血清C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平.结果 治疗后,治疗组总有效率为95.16％,较对照组的79.66％显著提高(P<0.05).治疗后,两组牙周袋深度均较治疗前显著变浅,菌斑指数则均显著降低(P<0.05);且与对照组比较,治疗组牙周袋水平显著更浅,菌斑指数显著更低(P<0.05).治疗后,两组龈沟液PGE2、MMP-9、VEGF水平均较本组治疗前显著降低(P<0.05),但治疗组下降更显著(P<0.05).治疗后,两组疼痛VAS评分和血清CRP、TNF-α、IL-1β浓度均显著降低(P<0.05),但治疗组比对照组降低作用更显著(P<0.05).结论 蜂胶牙泰联合米诺环素治疗急性牙周炎的总体疗效满意,可安全有效地改善患者临床症状及牙周组织状况,明显减轻患者牙周组织局部及全身炎症反应,具有一定的临床推广应用价值.

目的:基于GS/β AR/cAMP/PKA信号通路探讨蜂胶总黄酮(TFP)对异丙肾上腺素(ISO)诱导心肌肥厚大鼠保护作用及分子机制.方法:将50只SD大鼠随机分为空白组(Control)组、模型组(ISO组)、阳性组(Positive组)及蜂胶总黄酮低、高剂量组(TFPL组、TFPH组).TFPL组、TFPH组大鼠分别灌胃TFP 25、100mg/kg,灌胃14d;Positive组灌胃复方丹参片290mg/kg,灌胃14d;其余组灌胃相同剂量的0.9％氯化钠溶液.第8天除Control组外,其余组均皮下注射ISO 7d建立心肌肥厚模型.观察记录大鼠状态并绘制生长曲线;流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况;HE、Masson染色观察心脏病理情况;检测血清中TG、T-CHO、LDL-C、HDL-C以及ATP含量;Western blot法检测GS/β AR/cAMP/PKA信号通路相关蛋白表达情况.结果:TFPH组可显著降低心肌细胞总凋亡率(P＜0.01),缓解心肌肥厚大鼠心肌损伤,改善心肌结构,抑制胶原纤维化;降低心肌肥厚大鼠血清中TG、T-CHO、LDL-C含量,升高HDL-C、ATP含量(P＜0.05);心肌组织中GS/β AR/cAMP/PKA信号通路相关蛋白表达水平显著上升(P＜0.01,P＜0.05).结论:TFP对ISO诱导心肌肥厚大鼠具有一定的保护作用,抑制心肌纤维化,降低心肌细胞凋亡,其作用机制与激活GS/β AR/cAMP/PKA信号通路相关蛋白表达有关.

目的 优选大孔树脂联合Sephadex LH-20葡聚糖凝胶分离纯化蜂胶总黄酮的最佳工艺参数.方法 采用硝酸铝-醋酸钾比色法定量,通过比较9种大孔吸附树脂对蜂胶总黄酮的吸附率和解吸率,筛选出最佳大孔吸附树脂型号,通过动态吸附与解吸试验优选大孔树脂最佳纯化工艺参数,采用Sephadex LH-20葡聚糖凝胶进一步纯化.结果 优选大孔树脂型号为HPD-722型.最佳纯化工艺:上样液浓度2.5 mg/mL,比上样量0.43 g/g(药材/湿树脂),上样容积流量为每小时2倍床体积(bed volume,BV),径高比1:9;先以30％乙醇3 BV除杂,再用80％乙醇4 BV洗脱,洗脱容积流量1 BV/h,洗脱液浓缩、干燥,得蜂胶总黄酮Ⅰ,纯度为41.42％;取蜂胶总黄酮Ⅰ1.2 g,用少量甲醇超声溶解,上样于Sephadex LH-20层析柱,以甲醇洗脱,洗脱流速0.75 mL/min,7.5 mL作为一个流份收集,以三氯化铝为显色剂,聚酰胺薄层色谱检识各流份,合并、干燥得蜂胶总黄酮Ⅱ,纯度为68.48％.结论 HPD-722型大孔吸附树脂联合Sephadex LH-20葡聚糖凝胶可有效纯化蜂胶总黄酮.