[目的]探讨剪切修复基因D(XPD)在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)促血管平滑肌细胞增殖中的作用及分子机制.[方法]将重组质粒pEGFP-N2/XPD利用脂质体转染人脐静脉平滑肌细胞(HUVSMC),沉默哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因,用MTT、EdU法测定各组细胞的增殖;流式细胞仪检测各组凋亡率;利用Western blot检测XPD、血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)、mTOR、p-mTOR、Bcl-2及Bax的表达.[结果]与对照组比较,ox-LDL组XPD表达明显下调(P＜0.05),Bax蛋白表达下调(P＜0.05),Bcl-2蛋白、Bcl-2/Bax、mTOR磷酸化活性及LOX-1蛋白表达升高(P＜0.05);MTT、BdU结果显示,ox-LDL组细胞增殖较对照组上调(P＜0.05).转染pEGFP-N2/XPD重组质粒能上调Bax蛋白表达(P＜0.05)并抑制Bcl-2蛋白、mTOR磷酸化活性及LOX-1蛋白表达(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值下调(P＜0.05);流式细胞仪检测结果显示,转染pEGFP-N2/XPD重组质粒后,细胞凋亡率较对照组增加(P＜0.05);MTT、BdU结果显示,转染pEGFP-N2/XPD重组质粒后,细胞增殖较对照组下调(P＜0.05).沉默mTOR基因后,与对照组相比,siRNA mTOR组HUVSMC中LOX-1蛋白表达被抑制(P＜0.05).[结论]XPD能抑制HUVSMC的增殖并且促进其凋亡,下调mTOR和LOX-1蛋白表达,抑制ox-LDL的促HUVSMC增殖和抗凋亡作用,有可能成为抗动脉粥样硬化治疗的靶点.

目的 探讨烟酸注射液联合硝酸甘油注射液治疗不稳定型心绞痛的临床疗效.方法 回顾性分析 2019 年 2 月—2023 年 2 月在西安交通大学附属红会医院治疗的 118 例不稳定型心绞痛患者的临床资料.根据用药种类的不同分为对照组和治疗组,每组各 59 例.对照组静脉输入硝酸甘油注射液,20 mL加入 5%葡萄糖注射液 50 mL,初始剂量 5 μg/min,根据病情调整剂量,1 次/d;在此基础上,治疗组肌肉注射烟酸注射液,100 mg/次,5 次/d.两组患者均进行 7 d治疗.观察两组患者临床疗效,比较治疗前后两组患者心绞痛发作次数及持续时间,血凝素样氧化低密度脂蛋白受体 1(Lox-1)、I 型胶原吡啶交联终肽(ICTP)、心肌营养素-1(CT-1)、血栓烷素B2(TXB2)、B淋巴细胞瘤/白血病-2(Bcl-2)、脂联素(APN)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、肌酸激酶(CK)、α-羟基丁酸脱氢酶(HBDH)、肌酸激酶同功酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)水平.结果 治疗后,治疗组临床有效率(98.31%)明显高于对照组(81.36%,P＜0.05).治疗后,两组心绞痛发作次数、每次持续时间均减少(P＜0.05),且治疗组减少最显著(P＜0.05).治疗后,两组患者血清Lox-1、ICTP、CT-1、TXB2、TC、TG、LDL-C、CK、HBDH、CK-MB和LDH水平均明显下降,而Bcl-2、APN、HDL-C水平明显增高(P＜0.05),且治疗组这些指标比对照组改善更明显(P＜0.05).结论 烟酸注射液联合硝酸甘油注射液治疗不稳定型心绞痛可有效缓解临床症状,促进心功能、血脂、血清细胞因子水平改善.

目的 构建载血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1 (lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1,LOX-1)-siRNA靶向超声微泡,研究其对大鼠动脉粥样硬化斑块的生物学作用.方法 薄膜-水化-超声乳化法构建载LOX1-siRNA纳米级超声微泡(nanobubbles,NBs-siRNA).从Wistar大鼠体内分离、培养动脉平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs).通过凝胶迁移阻滞实验与siRNA细胞内化实验验证超声微泡可运载siRNA进入靶细胞内;qRT-PCR及Western blot检测LOX1的mRNA和蛋白表达水平;油红O染色观察细胞内脂质聚集情况.构建Wistar大鼠动脉硬化模型,实验组经鼠尾静脉注射含有LOX-1-siRNA的NBs-siRNA微泡100 μg,并使用超声仪照射.治疗15 d后,取标本HE染色后与对照组对比动脉硬化斑块病变程度;免疫组化法检测斑块组织中LOX-1表达情况.结果 凝胶迁移阻滞实验结果显示,证实NBs与siRNA结合成功.激光共聚焦显微镜观察证实NBs可通过超声照射介导siRNA内化入VSMCs之中.qRT-PCR及Western blot实验结果显示实验组VSMCs LOX-1 mRNA及蛋白表达水平降低(P＜0.01).油红O染色显示实验组细胞泡沫化较oxLDL组减弱.组织标本HE染色表明实验组大鼠动脉斑块病变中内膜增厚、中膜萎缩及炎细胞浸润情况较对照组减轻;免疫组化实验结果显示,实验组动脉斑块中LOX-1表达水平较各对照组降低(P＜0.01).结论 成功制备能够有效运载LOX-1-siRNA的超声微泡,体内外实验证实该微泡可以在超声辐照下内化入靶细胞内部,下调LOX-1表达,减少泡沫细胞形成,降低动脉硬化斑块病变的严重程度.

目的 研究自拟脉痹方对糖尿病大鼠后肢动脉血凝素样氧化低密度脂蛋白受体(LOX)-1表达的影响及机制.方法 60只Sprauge-Dawley大鼠按照随机数字表法随机取10只作为正常对照组,50只予高糖、高脂饮食联合尾静脉注射链脲佐菌素(25 mg/kg)建立糖尿病模型,成模后按照随机数字表法分为非药物干预组、西洛他唑干预组(10 mg· kg-1 ·d-1)、低剂量脉痹方干预组(12g·kg-1·d-1)、中剂量脉痹方干预组(24g· kg-1 ·d-1)、高剂量脉痹方干预组(48g· kg-1·d-1),每组10只.灌胃4周后,测定大鼠的体重、血糖、肝功能、肾功能、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白-胆固醇、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C);HE染色观察后肢动脉内膜组织的形态;Western印迹法检测后肢动脉LOX-1、核因子-KB p65、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)蛋白的表达.结果 造模后糖尿病大鼠较非糖尿病大鼠体重下降明显,血糖升高(F =4.63、120.27,P均＜0.05),药物干预4周后各组肝、肾功能无差异(P均＞0.05).与非药物干预组相比,中、高剂量脉痹方干预组血清总胆固醇、LDL-C明显下降,正常对照组、西洛他唑干预组及低、中、高剂量脉痹方干预组血清甘油三酯较非药物干预组明显下降(F=4.10、4.97、17.23,P均＜0.01).HE染色可见非药物干预组后肢动脉中膜细胞黏液变性,经药物干预后,各组均有不同程度的改善,其中中剂量脉痹方干预组和高剂量脉痹方干预组改善较明显.低、中、高剂量脉痹方干预组及西洛他唑干预组后肢动脉LOX-1、VCAM-1蛋白表达均较非药物干预组下降(F=13.25、43.01,P均＜0.01),西洛他唑干预组、高剂量脉痹方干预组核因子-KB p65较非药物干预组下降明显(F=13.83,P＜0.01).结论 自拟脉痹方可下调糖尿病大鼠后肢动脉LOX-1的表达,并通过降低核因子-KB p65抑制VCAM-1的表达.

目的 探讨氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)表达的影响及血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1,Lox-1)介入表达的过程.方法 制各氧化低密度脂蛋白,体外培养人脐静脉内皮细胞,分如下5组进行试验:对照组用普通培养基培养;25、50、100ng/L ox-LDL组培养基中分别加入相应浓度ox-LDL培养24小时;100ng/L ox-LDL联合多聚肌苷酸组预先加入250ng/ml多聚肌苷酸预先作用2小时,再加入100ng/L ox-LDL培养24小时.反转录聚合酶链反应检测MMP-2 mRNA及Lox-1 mRNA的表达,并观察予以Lox-1抑制剂作用后,人脐静脉内皮细胞MMP-2 mRNA、Lox-1 mRNA表达的变化.结果 加入ox-LDL培养24小时后,与对照组比较,各浓度ox-LDL组MMP-2 mRNA、Lox-1 mRNA表达均增加,且25ng/L ox-LDL组、50ng/Lox-LDL组、100ng/L ox-LDL组MMP-2 mRNA、Lox-1 mRNA表达逐渐增强:与100ng/L ox-LDL组比较,100ng/L ox-LDL联合多聚肌苷酸组MMP-2 mRNA、Lox-1 mRNA表达明显下降.结论 ox-LDL能促进内皮细胞MMP-2 mRNA、Lox-1 mRNA的表达,Lox-1参与了ox-LDL诱导内皮细胞MMP-2 mRNA表达的过程.

目的 观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对所诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡基因Bcl-2、Bax mRNA表达的影响及高选择性过氧化物酶体增生物激活受体α(PPARα)激动剂k-877的干预作用.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,采取ox-LDL刺激,应用k-877干预,逆转录聚合酶链反应检测凋亡基因Bcl-2、Bax mRNA的表达.结果 与对照组比较,ox-LDL组Bcl-2 mRNA表达下降,Bax mRNA表达增加(P＜0.05);与ox-LDL组比较,k-877组Bcl-2 mRNA表达增加,Bax mRNA表达降低(P＜0.05);与k-877组比较,k-877联合多聚肌甘酸组Bcl-2 mRNA表达增加,Bax mRNA表达降低更加明显(P＜0.05).结论 k-877可抑制ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞凋亡基因Bax mRNA表达、促进抗凋亡基因Bcl-2 mRNA的表达,血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1参与了该表达过程.

目的:体外模拟高脂血症小鼠心肌梗死(myocardial infarction,MI)和肾素-血管紧张素系统(RAS)被激活的内环境,研究氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)能否在血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)的基础上进一步诱导树突状细胞(dendriticcells,DCs)的成熟、迁移和炎症反应,并探讨可能参与其中的信号通路.方法:诱导C57BL/6J小鼠骨髓细胞分化成DCs,然后加入坏死心肌细胞上清,分别给予Ang Ⅱ和ox-LDL+Ang Ⅱ干预48 h.流式细胞仪检测DCs的成熟标志物(CD83)和协同共刺激分子(CD86)的表达,用qPCR、ELISA方法测定炎性因子的表达.Western印迹法检测核因子κB(NF-κB)和IκB磷酸化程度,以及血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)和Toll样受体(TLR)4信号通路的表达.结果:ox-LDL能够在AngⅡ基础上进一步诱导CD83和CD86的表达,增强炎性因子和趋化因子的表达,增强NF-κB和IκB磷酸化程度(P＜0.05).ox-LDL能够在Ang Ⅱ基础上进一步上调LOX-1的表达,同时激活了TLR4-MyD88-NF-κB通路(P＜0.05).结论:ox-LDL可能在Ang Ⅱ的基础上进一步诱导DCs免疫成熟、迁移和炎症反应;LOX-1-TLR4-MyD88-NF-κB信号通路可能参与DCs成熟,以及DCs在高脂血症合并心肌梗死发生和发展中引起炎症反应的过程.

目的 观察替罗非班对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)表达的影响.方法 向培养的HUVECs中加入氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL) 80 mg/L共同孵育12h,后加入固定浓度的替罗非班(替罗非班用量根据体重计算)分别作用12h、24 h、36h,逆转录-聚合酶链反应检测LOX-1mRNA表达,流式细胞仪间接免疫荧光法测定HUVECs LOX-1阳性细胞数.结果 与对照组比较,ox-LDL组LOX-1mRNA的表达显著升高(P＜0.05);替罗非班抑制HUVECs LOX-1mRNA的表达作用呈时间依赖性.与ox-LDL组比较,应用替罗非班后12h、24 h、36 h LOX-1mRNA表达降低8％、64％和73％,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,ox-LDL组HUVECsLOX-1阳性细胞数明显增加(P＜0.05);固定浓度的替罗非班作用后HUVECsLOX-1阳性细胞数的表达量随替罗非班的作用时间延长而减低,其作用呈时间依赖性.结论 替罗非班可显著抑制ox-LDL诱导的HUVECs LOX-1表达,可通过抑制ox-LDL诱导的HUVECsLOX-1表达从而发挥其血管内皮细胞保护效应.

目的 观察复方芪麻胶囊联合辛伐他汀对气虚痰浊型颈动脉粥样硬化(CAS)患者血管损伤的影响并评价其用药安全性.方法 采用随机平行对照研究方法,将广东省第二中医院2016年1月至12月收治的99例气虚痰浊型CAS患者分为西药组(给予辛伐他汀)、中药组(给予复方芪麻胶囊,由黄芪、天麻、茯苓、白术、法半夏、陈皮、杜仲、川芎等组成)和联合治疗组(给予辛伐他汀联合复方芪麻胶囊),每组33例.12周为1个疗程,每2周随访1次.比较各组患者治疗前后血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙氨酸转氨酶(ALT)等的变化,并监测治疗前后各组患者双侧颈动脉内膜-中膜厚度(IMT)、血清脂联素(APN)、氧化修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)、血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)水平的变化;同时观察用药期间患者不良反应发生情况.结果 各组治疗12周后血清TG、TC、LDL-C、IMT、ox-LDL、LOX-1水平均较治疗前明显降低,且以联合治疗组的下降程度较中药组和西药组更显著〔TG(mmol/L):1.50±0.15比2.34±0.31、1.98±0.22,TC(mmol/L):4.62±0.46比5.39±0.52、5.01±0.59,LDL-C(mmol/L):1.96±0.11比2.41±0.17、2.12±0.19,IMT(mm):1.11±0.13比1.16±0.12、1.14±0.12,ox-LDL(μg/L):3.72±0.39比4.37±0.51、4.13±0.43,LOX-1(mg/L):154.28±18.37比173.46±19.25、167.09±18.90,均P<0.05〕,西药组治疗后ALT较治疗前明显升高,中药组治疗前后ALT无明显差异,联合治疗组治疗后ALT较治疗前明显降低,故联合治疗组治疗后ALT明显低于中药组和西药组(U/L:24.61±4.22比31.26±4.87、40.64±3.96,P<0.05).各组治疗后APN和HDL-C水平均较治疗前明显升高,以联合治疗组的升高程度较中药组和西药组更显著〔APN(mg/L):7.96±1.20比7.02±0.84、7.34±0.98,HDL-C(mmol/L):1.41±0.12比1.12±0.19、1.25±0.14,P<0.05〕.各组治疗前后ALT水平均在正常参考值范围,且治疗期间无不良反应发生.结论 复方芪麻胶囊联合辛伐他汀可有效降低IMT,并可能通过降脂、保护血管内皮功能等机制减轻CAS患者血管损伤程度,且安全性良好.

目的:初步探讨血浆血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1,LOX-1)及人外周血单核细胞LOX-1 mRNA表达水平在冠状动脉病变中可能存在的机制及与病变程度的相关性.方法:选取本院心内科住院并首次接受冠脉造影的患者共156例,根据造影结果分为冠心病组(n=113)及排除冠心病的对照组(n=43),冠心病组再计算SYNTAX评分,根据评分结果分为:低分组0～22分(39例);中分组23～32分(41例);高分组≥33分(33例).用ELISA法和RT-PCR法检测患者血浆中LOX-1及单核细胞LOX-1 mRNA的表达.结果:LOX-1、LOX-1mRNA与SYNTAX评分之间呈正相关(P<0.05);LOX-1、LOX-1mRNA(t=5.930,t=4.040,P<0.01)是SYNTAX评分的独立影响因素.结论:冠心病患者血浆LOX-1、外周血单核细胞的LOX-1 mRNA的表达水平均与冠状动脉病变严重程度呈正相关,可作为反映冠脉病变程度的新指标.