目的:以氯化镉（CdCl 2）染毒青春前期雄性SD大鼠和睾丸支持细胞（TM4细胞），研究镉暴露对睾丸自噬水平和血睾屏障完整性的影响。 方法:于2021年7月，将9只4周龄雄性SD大鼠随机分为3组：对照组（生理盐水）、低剂量组（1 mg/kg体重CdCl 2溶液）、高剂量组（2 mg/kg体重CdCl 2溶液），采用腹腔注射的方式进行染毒。24 h后采用HE染色法观察大鼠睾丸组织形态学变化，生物示踪法观察血睾屏障的完整性，并检测睾丸组织中微管相关蛋白轻链3（LC3）-Ⅰ、LC3-Ⅱ的表达水平。0、2.5、5.0和10.0 μmol/L CdCl 2溶液处理TM4细胞24 h检测镉的毒作用，将细胞分为空白组（未染毒）、染毒组（10 μmol/L CdCl 2）、实验组[10 μmol/L CdCl 2+60 μmol/L 3-甲基腺嘌呤（3-MA）]和抑制剂组（60 μmol/L 3-MA），处理24 h后，Western blot分析LC3-Ⅱ、泛素结合蛋白p62、紧密连接蛋白ZO-1和黏附连接蛋白N-cadherin的表达情况。 结果:高剂量组大鼠睾丸组织形态结构发生明显变化，曲细精管分布不均匀，形态不规则，生精上皮变薄，结构疏松，细胞排列紊乱，细胞核异常深染，支持细胞出现空泡；生物示踪法结果显示低剂量组和高剂量组大鼠血睾屏障完整性受到破坏；Western blot结果发现与对照组比较，低、高剂量组大鼠睾丸组织中LC3-Ⅱ表达水平升高，差异有统计意义（ P<0.05）。与0 μmol/L比较，5.0、10.0 μmol/L CdCl 2染毒后，TM4细胞中ZO-1和N-cadherin表达水平明显下降，p62表达水平和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显升高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与染毒组比较，实验组TM4细胞p62表达水平、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显下降，ZO-1和N-cadherin相对表达量明显升高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:镉对雄性SD大鼠生殖系统的毒性作用机制可能与影响睾丸组织细胞自噬水平和破坏血睾屏障完整性有关。

ABCC1基因广泛表达于人体的多种器官中，能够转运药物、重金属、有毒物质、有机阴离子等多种底物。过去对其的研究集中在肿瘤多药耐药等方面。最近ABCC1首次被提议为遗传性耳聋的致病基因，其机制可能与生物屏障有关。本文从血睾屏障、胎盘屏障、血脑屏障、血迷路屏障等方面阐述了ABCC1相关研究的进展，为探索其功能提供了新的思路。

血-睾屏障由相邻支持细胞间多种蛋白质复合体组成，它通过在生精上皮参与构建生精微环境、提供免疫屏障并赋予细胞极性来维持正常精子发生。血-睾屏障的结构与功能易受外界不良环境因素影响，但血-睾屏障损伤的影响因素及其相关机制尚未系统阐明。本综述概括血-睾屏障的结构、功能及生理调控机制，总结损伤血-睾屏障的化学、物理、生物因素，并归纳不良环境因素通过影响表观遗传修饰、信号通路表达、细胞因子与内分泌激素含量损伤血-睾屏障结构与功能的相关机制，这对于保障精子质量、避免睾丸损伤具有重要的指导意义，也为预防男性不育提供理论依据。

目的:探究缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）介导TGF-β/Smad通路对精索静脉曲张（VC）大鼠血睾屏障（BTB）的影响机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为对照组（C组）、VC组、VC+感染慢病毒降低HIF-1α（H组）、VC+感染荧光素酶载体（L组）。采用免疫印迹与免疫组化法检测睾丸组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）、Smad2/3、紧密连接蛋白[密封蛋白（Claudin）-11、闭合蛋白（Occludin）和闭锁连接蛋白（ZO）-1]的表达。提取大鼠原代支持细胞，将其分为常氧对照组（N组）、缺氧24 h组（24 h组）、缺氧培养24 h+感染腺病毒降低HIF-1α（H1组）、缺氧培养24 h+感染空病毒载体（L1组）、TGF-β1抑制剂组（SB组）、缺氧24 h+TGF-β1抑制剂组（24 h+SB组）。采用免疫印迹检测细胞TGF-β1、Smad2/3、Occludin与ZO-1蛋白的表达，免疫荧光法检测ZO-1蛋白表达。结果:VC大鼠睾丸缺氧培养24 h后的原代支持细胞TGF-β1、Smad2/3蛋白表达含量显著上调（ P<0.05），Claudin-11、Occludin、ZO-1表达含量显著下调（ P<0.05）；H与H1组TGF-β1、Smad2/3蛋白表达含量显著下调（ P<0.05），Claudin-11、Occludin、ZO-1表达含量显著上调（ P<0.05）；加入TGF-β1抑制剂后的原代支持细胞TGF-β1、Smad2/3蛋白表达含量出现显著下调（ P<0.05），Occludin、ZO-1蛋白表达含量上调（ P<0.05）。 结论:VC导致睾丸缺氧，HIF-1α表达升高，激活TGF-β/Smad通路来调节BTB。

目的 探究雌激素受体α(estrogen receptor alpha,ERα)下调导致的小鼠睾丸TM4支持细胞连接功能损伤是否与自噬相关.方法 不同浓度ERα抑制剂ICI182780(ICI)处理TM4细胞,CCK-8法检测细胞增殖活性;将细胞分为正常对照组、不同浓度ICI处理组.光镜观察细胞数量及形态变化;Western blot法检测ERα蛋白、连接功能相关蛋白、自噬标志物蛋白表达变化;免疫荧光法检测缝隙连接蛋白43(Cx43)表达与定位;氯喹(chloroquine,CQ)与ICI联合作用细胞24 h,Western blot法检测自噬及连接功能相关蛋白表达水平.结果 ICI50 nmol·L-1及以上浓度时,细胞活力明显下降;光镜观察ICI组细胞空泡增多;与正常对照组相比,ICI用药组ERα、闭锁小带蛋白1(ZO-1)、闭锁蛋白(occludin)、紧密连接蛋白 11(claudin-11)、β-联蛋白(β-cate-nin)及Cx43表达水平均下降,而神经钙黏蛋白(N-cadher-in)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)表达无明显变化;微管相关蛋白轻链3(LC3)上升,p62表达下降;免疫荧光结果显示,ICI用药组Cx43荧光表达量明显下降,位置无明显变化;与ICI 组相比,CQ+ICI 组 LC3 Ⅱ、p62、ZO-1、β-catenin、Cx43 表达水平均上升.结论 ERα下调可导致TM4细胞连接功能损伤,其机制可能与激活自噬有关.

目的:探究自噬在氯化镉致小鼠睾丸血-睾屏障(BTB)损伤中的作用.方法:将20 只4 周龄雄性C57BL/6 小鼠随机分为对照组[0 mg/(kg·d)]、低剂量组[0.5 mg/(kg·d)]、中剂量组[1.0 mg/(kg·d)]和高剂量组[2.0 mg/(kg·d)],腹腔注射氯化镉,连续28 d.采用HE染色法分析睾丸组织形态学变化,生物示踪法观察BTB的完整性,Western印迹检测BTB组分ZO-1 和N-Cadherin蛋白的表达.采用0、2.5、5 和 10 μmol/L CdCl2处理睾丸支持细胞株(TM4 细胞)24 h,Western印迹检测ZO-1 和N-Cadherin蛋白,以及自噬相关蛋白LC3II和p62 的变化情况.在含CdCl2(10 μmol/L)的细胞培养液中分别加入自噬抑制剂氯喹(CQ)(5 μmol/L)或自噬激动剂雷帕霉素(Rap)(50 nmol/L)处理细胞24 h,Western印迹检测LC3II、p62、ZO-1 和N-Cadherin蛋白表达.结果:与对照组小鼠相比,镉染毒组小鼠的生精小管间隙增大、生精细胞内空洞形成,层次减少、排列紊乱,BTB完整性受到破坏;中、高剂量CdCl2组小鼠的睾丸组织中ZO-1 和N-Cadherin蛋白表达含量显著下调(P＜0.05).与对照组细胞相比,CdCl2染毒组细胞中ZO-1 和N-Cadherin蛋白表达显著下调(P＜0.01),而LC3II和p62 蛋白表达则显著上调(P＜0.05).与CdCl2组细胞相比,自噬抑制剂CQ和CdCl2共处理组细胞中ZO-1、N-Cadherin、LC3II和p62 蛋白表达均显著上调(P＜0.01);自噬激动剂Rap和CdCl2共处理组细胞中ZO-1、N-Cadherin和p62 蛋白表达显著下调(P＜0.05),而LC3II蛋白表达上调(P＜0.05).结论:氯化镉可破坏小鼠BTB的完整性,其机制可能与镉能够增强睾丸支持细胞中自噬水平,调控BTB蛋白表达含量相关.

目的 原发睾丸弥漫大B细胞淋巴瘤全球发病率逐年增长,且因为血睾屏障的存在,死亡率高,目前尚缺乏多中心的大型回顾性分析数据进行疾病的预后研究.方法 从SEER数据库的22个中心机构获取2000-2019年期间,诊断为原发睾丸弥漫大B细胞淋巴瘤的患者资料进行回顾性分析,共纳入816例患者,按7:3的比例随机分为建模组和验证组.采用多变量COX逐步回归联合XGBoost机器学习模型筛选预后特征变量,将二者筛选出的共同预后因子构建列线图并对其重要度进行排序;时间依赖性ROC曲线验证模型的预测性能,校准曲线确定模型的一致性,决策曲线(decision curve analysis,DCA)评估模型的临床实用性与有效性.结果 COX回归结合XGBoost筛选出的共同预后因子为:年龄、手术、放疗、双侧发病、化疗、系统治疗、Ann Arbor分期;将其按照重要度排序,由大到小依次为:年龄、系统治疗、Ann Arbor分期、手术、双侧发病、化疗、放疗.基于联合模型筛选出的共同预后因子构建列线图,ROC曲线、校准曲线和DCA曲线显示模型具有良好的预测性能和临床实用性.结论 本研究构建的机器学习模型结合回归模型能准确预测原发睾丸DLBCL患者的预后,为临床的精准诊疗提供科学依据.

目的 探寻48,XXYY发生原因及其在中孕期的病理改变.方法 对夫妇双方外周血淋巴细胞及胎儿羊水细胞进行培养并制作中期染色体片进行G显带分析.对流产胎儿进行尸体检查,对胎儿睾丸组织作病理切片分析.结果 孕妇核型为46,XX,胎儿父亲为46,XY,inv (9) (p12q13),胎儿核型为48,XXYY.病理检查胎儿外观未见异常,体长大于同孕周胎儿,尸体检测未发现有器官异常;睾丸病理切片检查未发现有纤维化情况,血睾屏障正常.结论 48,XXYY综合征患者在胎儿期器官无器质性变化,睾丸无纤维化,综合之前报道的此类病人成年期睾丸的变化,我们可以推断该类病人睾丸发育异常应该发生在出生后的时期,早期发现该类病人尽早治疗可能会有较好的效果.

目的 观察高脂饮食诱导C57BL/6雄性小鼠血糖升高对睾丸微血管功能及雄性生殖的影响.方法 将小鼠随机分为对照组(control)和高脂组 (HFD),各20只.HFD组高脂饮食20周,每周测血糖及体质量;腹腔注射伊文思蓝观察血睾屏障通透性;激光多普勒检测睾丸微循环血流量及微血管自 律运动频率和振幅;HE染色观察睾丸组织形态;免疫组化检测睾丸微血管血小板内皮细胞黏附分子-1(CD31)及生精细胞增殖细胞核抗原PCNA表达; TUNEL染色法观察生精细胞凋亡.结果 HFD组小鼠体质量及血糖均高于对照组(P＜0.01);血睾屏障完整性破坏,生精小管通透性增高;睾丸平均血流 灌注水平及微血管自律运动频率和振幅均低于对照组(P＜0.01);生精上皮细胞数量减少、生精上皮变薄;微血管内皮细胞CD31及生精细胞PCNA表达 水平均低于对照组(P＜0.01);生精细胞凋亡水平高于对照组(P＜0.01).结论 高脂饮食可诱导小鼠血糖水平增高致睾丸微血管损伤破坏血睾屏障完整 性使小鼠生精上皮结构受损.

目的 探讨维甲酸改善氟他胺诱导隐睾大鼠生精功能的相关机制,为临床预防隐睾患儿发生不育提供动物实验基础.方法 30只雌性SD大鼠合笼成功后采用随机数字表法平均分为:对照组10只,孕期第12～20天皮下注射1mg/ml的玉米油25mg·kg+1·d-1;氟他胺诱导隐睾组10只,孕期第12～20天皮下注射玉米油配制的氟他胺25mg·kg-1·d-1;维甲酸干预组10只,在氟他胺诱导隐睾组处理基础上,予子代雄鼠生后1～10d及28～30d玉米油配制的维甲酸1mg·kg-1·d-1.于生后30d及60d观察子代雄鼠睾丸组织病理、精子数量及质量,免疫组织化学及蛋白质印迹法检测氧化应激水平蛋白、凋亡水平蛋白及血睾屏障相关连接蛋白水平改变.结果 对照组无隐睾发生,睾丸重量为(0.56±0.17)g,体积为(0.44+0.12)cm3,精子数量为(2.25±0.14)个/ml;睾丸组织各级生精细胞排列整齐,层次清楚,可见较多精子细胞;氧化应激蛋内SOD1、HO-1、Gpx表达量分别为0.92±0.02和0.62±0.06,0.93±0.12,凋亡蛋白Bax及Bcl-2表达量分别为0.67±0.06和0.80±0.04,血睾屏障相关连接蛋白Cx43及Zo-1表达量分别为1.44±0.07和3.84±0.10.氟他胺诱导隐睾组隐睾发生率为62.50%(20/32),睾丸重量为0.13±0.03)g、体积为(0.07±0.02)cm3,精子数量为(0.65±0.17)个/ml,上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);睾丸组织各级生精细胞排列紊乱,层次不清,结构破坏;氧化应激蛋白SOD1、HO-1、GPx表达量分别为1.23±0.07和0.90±0.09、1.70±0.01,凋亡蛋白Bax及Bcl-2表达量分别为0.87±0.01和0.53±0.20,血睾屏障相关连接蛋白Cx43及Zo-1表达量分别为0.51+0.07和1.48±0.25,上述指标与对照组比较,差异亦均有统计学意义(P<0.05).维甲酸干预组睾丸重量为(0.29±0.11)g、体积为(5.21±0.30)cm3,精子计数为(1.49±0.31)个/ml,与对照组比较差异无统计学意义,但较氟他胺诱导隐睾组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).维甲酸于预组隐睾发生率为61.76%(21/34),与氟他胺诱导隐睾组比较差异无统计学意义;睾丸组织各级生精细胞排列相对整齐,整体表现更接近于对照组;氧化应激蛋白SOD1,HO-1、Gpx表达量分别为0.94±0.01、0.76±0.02和0.96+0.02,凋亡蛋白Bax及Bcl-2表达量分别为0.68±0.02和0.76±0.06,血睾屏障相关连接蛋白Cx43及Zo-l表达量分别为1.12±0.04和2.07±0.17,与对照组比较,差异无统计学意义,但较氟他胺诱导隐睾组明显降低/升高,且差异均有统计学意义(P<0.05).结论 氟他胺诱导的隐睾大鼠基础上,予以生后维甲酸干预可通过明显降低隐睾睾丸组织内的氧化应激及凋亡水平,部分修复已受损的血睾屏障,进而使隐睾大鼠生精功能得到部分改善.