目的:探讨噪声作业工人谷胱甘肽硫转移酶（glutathione S-transferase，GST）P1基因的rs1695和rs6591256位点单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）与噪声性听力损失（noise-induced hearing loss，NIHL）易感性的关系。方法:于2019年7月，采用1：2匹配的巢式病例对照研究方法，选择某钢铁厂于2006年1月1日至2015年12月31日完成随访并完成两次以上健康检查和听力测定的6 297名接触噪声作业工人为队列研究的源人群，在该队列中筛选纯音听力测试双耳高频平均听阈≥40 dB者292例作为听力损失组；并按照同性别、同工种、年龄相差<5岁，接触噪声工龄相差≤2年的标准匹配，选择纯音听力测试双耳高频平均听阈<35 dB，且任一耳语频的任一频段听阈均≤25 dB，584例作为对照组。采用高通量SNP分型检测技术（SNPscan TM）法检测GSTP1基因的rs1695和rs6591256位点的多态性，检验对照组人群的哈迪一温伯格平衡（Hardy-Weinberg equilibrium）。应用logistic回归方法探讨基因单个位点SNP与NIHL易感性的关系。 结果:各工种接触噪声的L Aeq，8 h范围为80.2~98.8 dB（A）。rs1695位点携带G等位基因的个体发生NIHL的风险是携带A等位基因的1.291倍（95% CI：1.042~1.598， P<0.05），rs6591256位点携带G等位基因的个体发生NIHL的风险是携带A等位基因的1.390倍（95% CI：1.119~1.728， P<0.05），携带AG+GG基因型的个体发生NIHL的风险是携带AA基因型个体的1.437倍（95% CI：1.057~1.952， P<0.05）。随着接噪工龄的延长，与rs6591256位点携带AA基因型个体比较，携带AG+GG基因型的个体患NIHL的风险高（HR=1.273，95% CI：1.002~1.616， P<0.05）。 结论:GSTP1基因rs1695和rs6591256位点的等位基因G可能是发生NIHL的危险因素。

目的:探讨术后非人类白细胞抗原(HLA)抗体与肾移植体液性排斥反应(HR)的相关性。方法:回顾性分析上海交通大学医学院附属仁济医院2019年9月至2021年1月检测了非HLA抗体水平的40例肾移植受者资料，选取活检证实发生HR，并且发生HR时供者特异性HLA抗体阴性或者弱阳的受者入组HR组(11例)，选取术后2周至检测非HLA抗体时移植肾功能稳定的受者入组稳定组(29例)。采用Luminex单抗原微珠法检测HLA抗体、MHCⅠ类链相关基因A(MICA)抗体、32种非HLA抗体的水平，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)抗体水平。分析两组受者非HLA抗体阳性率和阳性非HLA抗体数量的差异。结果:24例受者具有阳性非HLA抗体，剩余16例受者的非HLA抗体全为阴性。HR组分别有3例受者的肌动蛋白(ACTIN)抗体、Ⅲ型胶原蛋白(Collagen Ⅲ)抗体、谷胱甘肽硫转移酶θ1(GSTT1)抗体和γ干扰素(IFN-γ)抗体阳性，而稳定受者的这4种非HLA抗体都是阴性，两组比较，差异有统计学意义( P＝0.017)。4例HR受者的Collagen Ⅱ抗体阳性，而仅1例稳定受者的Collagen Ⅱ抗体阳性，HR受者的Collagen Ⅱ抗体阳性率高于稳定受者( P＝0.023)。HR受者的平均阳性非HLA抗体数为2.36个，而稳定受者为0.90个，两组之间的差异有统计学意义( P＝0.008)。 结论:高水平非HLA抗体增加肾移植HR的发生风险。

目的:探讨谷胱甘肽硫转移酶M1（GSTM1）和谷胱甘肽硫转移酶M2（GSTM2）在甲状腺滤泡癌（FTC）中的表达及其临床意义。方法:收集基因表达综合（GEO）数据库中甲状腺滤泡性肿瘤基因芯片GSE82208数据，共52例样本，包括FTC 27例，甲状腺滤泡性腺瘤（FA）25例。提取基因矩阵数据并整理，利用R语言Limma包筛选出FTC和FA间差异表达基因。收集2000年1月至2020年12月辽宁省丹东市第一医院手术切除的FTC及FA标本各56例。采用免疫组织化学SABC法检测FTC和FA标本中GSTM1、GSTM2蛋白的表达水平，分析二者与FTC患者临床病理因素间的关系及二者间的相互关系。结果:基于GEO数据库数据，共获得40个FTC和FA间差异表达基因；其中FTC中表达上调9个，分别为GSTM1、GSTM2、COL6A2、CUX2、CLUH、TSC2、OGDHL、ACADVL、SDHA；表达下调31个。免疫组织化学法检测显示，在手术切除FTC标本中，GSTM1、GSTM2阳性率分别为71.4%（40/56）、80.4%（45/56），在FA中阳性率分别为23.2%（13/56）、14.3%（8/56），差异均有统计学意义（ χ2值分别为26.11、49.03，均 P<0.01）。FTC中GSTM1和GSTM2蛋白表达与临床分期、浸润程度及远处转移均有关（均 P<0.05），与性别、年龄和肿瘤长径均无关（均 P>0.05）。FTC中GSTM1和GSTM2表达呈正相关（ r=0.384， P=0.004）。 结论:FTC中GSTM1和GSTM2表达水平升高，二者可能相互作用，参与FTC的发生、发展。

1例40岁女性患者因乳腺疼痛、结节自行口服乳块消颗粒10 g、3次/d。服药约1个半月后，患者出现间断性右上腹胀痛、小便色深黄，伴乏力、厌油、恶心、呕吐等症状；服药2个半月后上述症状加重，实验室检查示总胆红素（TBil）98.8 μmol/L、直接胆红素（DBil）51.5 μmol/L、丙氨酸转氨酶（ALT）962 U/L、天冬氨酸转氨酶（AST）1 213 U/L、γ-谷氨酰转移酶（GGT）196 U/L、碱性磷酸酶（ALP）124 U/L。考虑为乳块消颗粒所致肝损伤，停用该药，给予谷胱甘肽、促肝细胞生长素、硫普罗宁、降酶灵、水飞蓟素、熊去氧胆酸等治疗，10 d后患者症状逐渐好转；13 d后患者消化道症状消失，TBil 20.5 μmol/L、DBil 6.2 μmol/L、ALT 43 U/L、AST 58 U/L、GGT 53 U/L、ALP 60 U/L。停用谷胱甘肽、促肝细胞生长素、硫普罗宁，继续服用降酶灵、水飞蓟素、熊去氧胆酸2周，6周后患者肝功能恢复正常。患者的肝损伤可能与乳块消颗粒中的川楝子成分有关。

目的 探讨北桑寄生总黄酮(total flavonoids of Loranthus tanakae,LTF)对硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)诱导的斑马鱼急性肝损伤(acute liver injury,ALI)的保护作用.方法 采用TAA诱导AB品系与转基因品系斑马鱼建立ALI模型,通过对斑马鱼的生长发育、肝脏形态、肝功能酶活性、脂质积累情况及氧化应激指标进行检测,考察LTF是否具有保肝活性.结果 25、50 μg/mL LTF可以明显抑制TAA引起的斑马鱼发育毒性,促进幼鱼生长及减缓卵黄囊的吸收滞后现象(P＜0.05、0.01).与模型组比较,LTF可以明显增加斑马鱼幼鱼肝脏面积,提高肝脏的荧光强度(P＜0.05、0.01).苏木素-伊红染色结果显示,LTF处理后斑马鱼肝脏病理状态得到缓解,空泡化现象明显减少.LTF显著降低TAA诱导的斑马鱼丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)活性(P＜0.05、0.01).油红O染色结果显示,LTF显著降低幼鱼肝脏区域脂质积累程度(P＜0.05、0.01).氧化应激指标测定结果显示,LTF处理后幼鱼体内的活性氧(reactive oxygen species,ROS)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平明显降低(P＜0.05、0.01),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(catalase,CAT)和还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)含量显著升高(P＜0.05、0.01).结论 LTF在防治ALI方面具有较大的潜力,其肝脏保护活性可能与抗氧化作用有关.

目的 基于核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smad3信号通路探讨醋制前后蓬莪术改善硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)诱导斑马鱼急性肝损伤的作用机制.方法 以醋制前后的蓬莪术为研究对象,建立TAA诱导斑马鱼急性肝损伤模型,将醋制前后蓬莪术水煎液分别设置高、中、低剂量(8、4、2mg/mL)组,以异甘草酸镁为阳性对照药物组,斑马鱼培养水为对照组,给药72h后观察斑马鱼幼鱼肝脏形态,通过苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化;采用试剂盒检测斑马鱼幼鱼中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)活性及谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;利用 qRT-PCR 检测斑马鱼幼鱼Nrf2、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、Smad3和 Smad7基因表达;Western blotting测定斑马鱼幼鱼Nrf2/HO-1和TGF-β/Smad3信号通路相关蛋白表达.结果 醋制前后蓬莪术对TAA导致的肝组织细胞形态损伤具有保护作用.生化结果表明,与模型组比较,醋制前后蓬莪术水煎液组ALT、AST活性及GSH水平均显著升高(P＜0.05、0.01、0.001),MDA水平均显著降低(P＜0.001).qRT-PCR结果表明,与模型组比较,醋制前后蓬莪术水煎液组Nrf2、IL-10、Smad7 mRNA表达水平显著升高(P＜0.05、0.01、0.001),醋蓬莪术水煎液高剂量组Smad3 mRNA表达水平显著降低(P＜0.001);其中,与等剂量蓬莪术组相比,醋蓬莪术高剂量组显著抑制Nrf2、Smad3的mRNA表达(P＜0.05、0.001),且醋蓬莪术具有促进IL-10和Smad7 mRNA表达的趋势,但没有显著性差异.Western blotting结果表明,与模型组比较,蓬莪术水煎液高、中剂量组和醋蓬莪术水煎液各剂量组Nrf2蛋白表达水平显著升高(P＜0.001),蓬莪术高剂量组和醋蓬莪术各剂量组Smad3蛋白表达水平显著降低(P＜0.05、0.01、0.001),蓬莪术水煎液高剂量组和醋蓬莪术水煎液高、中剂量组TGF-β蛋白表达水平显著降低(P＜0.05、0.01、0.001);其中,与等剂量蓬莪术组相比,醋蓬莪术各剂量组Nrf2蛋白表达水平显著升高(P＜0.001),且醋蓬莪术具有抑制Smad3和TGF-β蛋白表达的趋势,但没有显著性差异.结论 醋制前后的蓬莪术可以不同程度地改善TAA诱发的急性肝损伤,其作用机制可能与调控Nrf2/HO-1和TGF-β/Smad3信号通路有关.

目的 探究利多卡因(LID)对原位肝移植(OLT)大鼠缺血再灌注损伤的影响,并分析其作用机制.方法 随机将60只大鼠平均分为维替泊芬(Verteporfin)组、LID高剂量组、LID中剂量组、LID低剂量组、模型组和对照组,除对照组大鼠外的其余大鼠构建OLT模型.苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织的病理变化,检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝组织炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-6、IL-1β和IL-10水平,荧光探针法检测活性氧(ROS),硫代巴比妥酸显色法检测丙二醛(MDA),氮蓝四唑显色法检测超氧化物歧化酶(SOD),分光光度计法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),原位末端标记法(TUNEL)检测肝组织细胞凋亡,蛋白印迹法(Western blot)检测Hippo-YAP信号通路相关蛋白哺乳动物STE20样蛋白激酶(MST1)、磷酸化(p)-MST1、大肿瘤抑制因子1(LATS1)、p-LATS1、Yes相关蛋白(YAP)、p-YAP以及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达.结果 与对照组相比,模型组大鼠肝组织出现损伤,肝细胞坏死且大量炎性细胞浸润,细胞凋亡率、血清 AST、ALT、TBIL、LDH 活性、肝组织 TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、ROS、Bax 水平显著升高,肝组织 IL-10、SOD、GSH-Px及 Bcl-2、p-MST1/MST1、p-LATS1/LATS1、p-YAP/YAP 蛋白表达降低(P＜0.05);与模型组相比,LID 低、中、高剂量组的肝组织损伤减轻,细胞凋亡率、血清AST、ALT、TBIL、LDH活性、肝组织TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、ROS、Bax水平显著降低,肝组织 IL-10、SOD、GSH-Px 及 Bcl-2、p-MST1/MST1、p-LATS1/LATS1、p-YAP/YAP 蛋白表达的水平显著升高(P＜0.05);Hippo-YAP信号通路抑制剂Verteporfin逆转了 LID对OLT大鼠缺血再灌注损伤的改善作用(P＜0.05).结论 LID可能通过激活Hippo-YAP通路,减少炎症反应、氧化应激和肝细胞凋亡,对OLT大鼠肝缺血再灌注损伤发挥改善作用.

目的 探讨分析谷胱甘肽硫转移酶(GST)M1、GSTT1及GSTP13种基因的多态性与汉族育龄女性胚胎停育易感性的关系.方法 采用病例-对照研究方法,选取2019年7月—2020年11月在济南市第二妇幼保健院就诊的育龄女性320例为研究对象,其中胚胎停育组125例,对照组195例.以受试者口腔黏膜上皮细胞为样本,提取基因组DNA,检测获取GSTM1、GSTT1及GSTP1基因多态性结果.统计分析GST基因多态性分布与胚胎停育发生的相关性.结果 病例组GSTM1基因缺失型频率(65.6％)高于对照组(48.7％),差异有统计学意义(x2=8.783,P＜0.05).该基因缺失型是胚胎停育易感性的危险因素(OR=2.01,95％CI=1.26～3.19).病例组GSTT1基因缺失型频率(55.2％)高于对照组(31.8％),差异有统计学意义(x2=17.256,P＜0.05).该基因的缺失型是胚胎停育易感性的危险因素(OR=2.63,95％CI=1.66～4.20).对GSTMI、GSTT1基因联合分析后发现,2个基因中有1个及以上为缺失型,与2个基因均为非缺失型相比,两组胚胎停育发生率比较,差异有统计学意义(P＜0.05).GSTM1(+)/GSTT1(-)基因型的育龄女性发生胚胎停育的危险性是GSTM1(+)/GSTT1(+)基因型的2.68倍,其95％CI=1.29～5.59;GSTM1(-)/GSTT1(+)基因型的育龄女性发生胚胎停育的危险性是GSTM1(+)/GSTT1(+)基因型的2.04倍,其95％CI=1.06～3.90.当2个基因均为缺失型时,胚胎停育的发生风险进一步增加,GSTM1(-)/GSTT1(-)的育龄女性发生胚胎停育的危险性是GSTM1(+)/GSTT1(+)的5.37倍,其95％CI=2.70～10.67.对照组GSTP1 A313G位点AA、AG及GG基因型分布频率分别为67.7％、27.7％及4.6％,病例组分别为53.6％、42.4％及4.0％,两组基因型分布频率比较,差异有统计学意义(x2=7.430,P＜0.05).对照组中A等位基因的分布频率为81.5％,G等位基因的分布频率为18.5％,病例组中A等位基因分布频率为74.8％,G等位基因分布频率为25.2％,两组基因A、G等位基因频率分布比较,差异有统计学意义(x2=4.160,P＜0.05).GSTP1 313AG基因型是胚胎停育易感性的危险因素(OR=1.93,95％CI=1.20～3.12).结论 GSTM1缺失型、GSTT1缺失型及GSTP1 313AG基因型均为育龄女性发生胚胎停育的危险因素.

目的 基于微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)建立一种检测前列腺癌(prostatic cancer,PCa)尿液谷胱甘肽硫转移酶P1(glutathione S-transferase pi-1,GSTP1)基因甲基化的方法,并对其进行优化.方法 本研究收集20例前列腺癌尿液样本,设计并筛选引物和探针,通过调整亚硫酸氢盐转化时间及ddPCR反应体系中引物浓度、探针浓度、退火温度、循环次数、变性时间和退火延伸时间对ddPCR检测方法进行优化.结果 尿液DNA亚硫酸氢盐转化的最佳时间是2h 10min,最佳引物浓度是700nmol/L,最佳扩增温度为58.3℃,最佳循环次数是50次,最佳变性时间是30s,最佳退火延伸时间是60s,本研究范围内探针浓度对ddPCR影响不大,可根据实验自行调整探针浓度.结论 本研究建立并优化了ddPCR检测前列腺癌尿液样本GSTP1基因甲基化方法,提高了ddPCR检测尿液中痕量DNA的性能.

目的 探讨谷胱甘肽硫转移酶P1 基因(GSTP1)和切除修复交叉互补基因 1(ERCC1)基因多态性与食管癌患者放疗敏感性及预后的关系.方法 选取接受多西他赛单药化疗和同期放疗的食管癌患者 200 例,放疗 1个疗程后根据完全缓解、部分缓解、稳定、进展情况将患者分为放疗敏感组(完全缓解、部分缓解)、放疗不敏感组(稳定、进展),进行 3a随访,记录患者生存情况.采集患者外周静脉血,提取基因组DNA并进行PCR扩增,分析GSTP1 基因G28152A位点和ERCC1 基因C118T位点的单核苷酸多态性(SNP).取适量的患者食管癌组织,组织匀浆后应用酶联免疫吸附法测定髓磷脂碱性蛋白 1(MBP-1)、磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)、G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)、磷脂酶Cε1(PLCE1)基因蛋白浓度.结果 GSTP1 基因携带杂合型GA和突变型AA的食管癌患者放疗后完全缓解、部分缓解的比例明显高于野生型GG的患者,稳定、进展的比例明显低于野生型GG的患者(P＜0.01).ERCC1 基因携带野生型CC的食管癌患者放疗后完全缓解、部分缓解的比例明显高于携带杂合型CT和突变型TT的患者(P＜0.01).GSTP1 基因携带杂合型GA和突变型AA的食管癌患者放疗后生存率升高(P＜0.05);ERCC1 基因携带野生型CC的食管癌患者放疗后生存率明显升高(P＜0.05).放疗不敏感组凋亡相关基因MBP-1、PTEN表达水平明显降低,增殖相关基因Cyclin D1、PLCE1 表达水平明显升高(P＜0.05).GSTP1 基因携带杂合型GA和突变型AA的食管癌患者MBP-1、PTEN表达水平明显升高,Cyclin D1、PLCE1 表达水平明显降低(P＜0.01).ERCC1 基因携带野生型CC的食管癌患者MBP-1、PTEN表达水平明显升高,Cyclin D1、PLCE1 表达水平明显降低(P＜0.05).结论 GSTP1 基因携带杂合型GA和突变型AA、ERCC1 基因携带野生型CC的食管癌患者放疗预后较好,可能与上调凋亡相关基因MBP-1、PTEN表达,下调增殖相关基因Cyclin D1、PLCE1 表达有关.