目的:探索用连二亚硫酸钠还原法进行尿液半定量比色在敌草快中毒诊疗中的临床价值。方法:回顾性分析2020年12月3日至2022年11月23日在本院救治的49例急性敌草快中毒患者资料，观察尿比色结果与血浆敌草快浓度相关性；评价尿比色结果对靶器官损伤、及预后的预测价值。结果:尿比色结果与血浆敌草快浓度具有显著相关性，相关系数 r=0.89， P <0.01；尿比色结果预测消化道、肝脏、肾脏、及中枢神经系统损伤的临界值分别为2.5、3.5、3.5、5.5,其中尿比色结果预测消化道损伤的敏感性最高[ AUC 0.93 (95% CI: 0.89~1.00)]；尿比色结果预测死亡结局的临界值为4.5，阳性预测值为64.2%，阴性预测值为95.2%。 结论:尿半定量比色法可用于快速预测入院时血浆敌草快浓度范围；尿比色结果也可有效预测敌草快中毒相关脏器损伤的发生及临床结局，为临床诊治提供参考。

目的:对临床分离的致关节感染的两株皮疽诺卡菌（ Nocardia farcinica）进行全基因组测序并分析其耐药性。 方法:2020年1月收集两株导致老年患者膝关节感染的皮疽诺卡菌菌株，采用全基因组测序对细菌进行鉴定，根据CLSI M24推荐的微量肉汤稀释法和E-test法进行药物敏感性分析，通过ABRicate工具比对获得性耐药和毒力基因，Snippy等生物信息学工具进行同源性等基因特征分析。结果:本研究的临床分离株均为皮疽诺卡菌，对头孢曲松、头孢吡肟、头孢噻肟、甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲噁唑（TMP/SMX）耐药，对亚胺培南、利奈唑胺和含有酶抑制剂类抗生素阿莫西林/克拉维酸敏感。携带A类β内酰胺酶基因 far-1、RNA聚合酶结合蛋白基因 RbpA、多耐药外排泵转录激活因子基因 MtrA和调节转录因子基因 vanR-O，分别介导对β内酰胺抗生素、利福平、大环内酯类药物和万古霉素的耐药性。不含有获得性TMP/SMX耐药基因，二氢叶酸还原酶家族基因存在多个错义突变，均携带与结核分枝杆菌同源的 icl、 mbtH、 phoP、 relA毒力基因，SNP同源分析表明两株皮疽诺卡菌具有很近的亲缘关系，两株菌仅存在10个SNP位点、6个复合基因和1段基因缺失变异。 结论:全基因测序技术有助于研究诺卡菌的分子特征和耐药机制；皮疽诺卡菌对TMP/SMX耐药现象需要重视，参与二氢叶酸代谢途径的酶基因突变有可能是TMP/SMX耐药的原因之一。

目的:系统评价视网膜静脉阻塞(RVO)的危险因素以对其进行有效的预防和治疗。方法:检索Cochrane图书馆、PubMed数据库、Embase数据库。文献检索起止时间均从建库至2018年12月，收集有关RVO危险因素的研究报道。采用NOS评价方法评价文献质量，提取有效数据后，采用Stata 12.0软件进行Meta分析。结果:共纳入31篇文献，其中病例组4 370例，对照组6 534例。Meta分析结果显示，高血压[优势比(OR)＝3.08，95%置信区间(CI)：2.22～4.28]、糖尿病(OR＝1.61，95% CI：1.11～2.32)、高脂血症(OR＝1.73，95% CI：1.27～2.36)、高水平脂蛋白A(OR＝2.72，95% CI：1.06～6.97)、高同型半胱氨酸血症(OR＝1.86，95% CI：1.47～2.35)、凝血因子V Leiden基因突变(OR＝1.89，95% CI：1.17～3.06)是RVO发病的风险因素，而亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)C677T突变(OR＝1.41，95% CI：0.93～2.14)、凝血酶原基因G20210A突变(OR＝1.20，95% CI：0.81～1.79)非RVO发病的风险因素。亚组分析显示，高血压及糖尿病因素异质性在年龄≥60岁的人群中，分别从88.9%、75.7%降至59.8%、63.2%，高同型半胱氨酸血症因素异质性在年龄<60岁人群中从85.6%降至64.3%。敏感性分析结果显示，改变分析模型后分析结果无明显改变。所纳入研究的文献间均无发表偏倚。结论:高血压、高脂血症、糖尿病、高水平脂蛋白a、高同型半胱氨酸血症、凝血因子V Leiden基因突变是RVO发生的危险因素。

目的:探讨药物相关性分子靶标检测对儿童恶性实体肿瘤个体化治疗的指导作用。方法:回顾性分析2017年6月至2019年3月首都医科大学附属北京同仁医院40例恶性实体肿瘤患儿的临床资料。应用免疫组织化学、聚合酶链反应及测序方法对相关的肿瘤药物分子靶标的表达量及突变进行测定，比较不同靶标所对应的抗肿瘤药物对实体肿瘤的化疗有效率及毒副反应发生率。结果:40份肿瘤组织样本中，共检测出4个肿瘤药物相关靶点，分别为DNA拓扑异构酶-ⅡA(TOPOⅡA)、β 3-微管蛋白（Tubulinβ 3）、DNA拓扑异构酶-Ⅰ（TOPOⅠ）和二氢叶酸还原酶基因位点多态性[DHFR (C829T)]。铂类、甲氨喋呤、伊立替康、长春碱类和蒽环类化疗药物对儿童恶性实体肿瘤的化疗有效率分别为90.0% (36/40)、85.0% (34/40)、70.0% (28/40)、67.5% (27/40)、62.5% (25/40)。伊立替康、甲氨蝶呤、长春碱类对间叶源性肿瘤的化疗有效率分别为68.9%(20/29)、62.1%（18/29）、68.9%（20/29），显著高于非间叶源性肿瘤的18.2%（2/11）、36.4%（4/11）、36.4%（4/11），差异均有统计学意义（χ 2=5.487、15.345、17.278，均 P<0.05)，铂类药物对非间叶源性肿瘤的化疗有效率为72.3%（8/11），显著高于间叶源性肿瘤的58.6%（17/29），差异有统计学意义（χ 2=11.231， P<0.05)。毒副反应强度从大到小依次为蒽环类>铂类>甲氨喋呤>长春碱>伊立替康。 结论:对不同肿瘤药物相关分子靶标、不同源性肿瘤对同一抗肿瘤药物的敏感性及毒副反应进行了预测，为个体化治疗儿童恶性肿瘤提供了一定的理论基础与临床依据。

目的:研究体内微进化对阿萨希毛孢子菌生物膜相关表型及耐药性的影响。方法:阿萨希毛孢子菌标准株源自荷兰真菌多态性保藏中心，阿萨希毛孢子菌原代株TO（氟康唑敏感）为解放军总医院第七医学中心皮肤科1例毛孢子菌病的临床分离株，进化株TEVO（氟康唑耐药）在该患者2014年复诊时分离。体外构建上述菌株的生物膜，使用四甲基氮盐（XTT）还原法及激光共聚焦扫描显微镜评估生物膜生长动力学并测定生物膜厚度；体外测定氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑对不同生长阶段生物膜的最低抑菌浓度（SMIC），评估生物膜的耐药性。多组间比较采用单因素方差分析，Hartley检验对数据进行方差同质性检验，若方差齐，选用LSD检验进行组间多重比较，若方差不齐，选用Tamhane′ T2检验进行组间多重比较。 结果:在阿萨希毛孢子菌生物膜黏附（0 h）及形成阶段（4 ~ 24 h），进化株TEVO代谢活性最弱（ F黏附 = 35.705， P < 0.001； F形成 = 15.042， P < 0.001）。而黏附后第48小时生物膜成熟，此时生物膜代谢活性最弱的菌株为TO株（ F = 10.985， P < 0.001）。生物膜厚度测量结果显示，成熟阶段TEVO株生物膜厚度[（26.1 ± 1.18）μm]大于TO株[（22.8 ± 1.73）μm， P = 0.001]，但小于标准株[（29.5 ± 1.28）μm， P = 0.001]。药物敏感性实验结果显示，在阿萨希毛孢子菌生物膜黏附及形成阶段，唑类抗真菌药物对TEVO株的SMIC值大于TO株；生物膜成熟阶段，3株菌生物膜的SMIC值均大于1 024 mg/L。 结论:在宿主内环境和抗真菌药物的双重压力下，阿萨希毛孢子菌生物膜相关表型发生了适应性改变，并增强了对唑类抗真菌药物的耐药性。

N 6-甲基腺苷(N 6-methyladenosine，m 6A)是哺乳动物中最丰富的RNA碱基修饰，尤其是在真核信使RNA(mRNA)中。m 6A修饰可调节RNA的剪接，易位和稳定性，进而影响蛋白质的合成。m 6A修饰被RNA甲基转移酶(writers)催化；通过去甲基酶(erasers)还原；还可以被甲基化识别酶(readers)识别。基因的m 6A水平异常变化与肿瘤的发生和发展密切相关，即包括增殖、生长、侵袭和转移等。在肿瘤的放射治疗过程中，m 6A修饰通过影响DNA损伤、肿瘤干细胞生成、以及肿瘤细胞辐射敏感性等，进而影响放疗疗效。本文就RNA的m 6A修饰的表观遗传调控在恶性肿瘤中的作用以及在肿瘤放疗中作用机制的研究进展进行了综述，旨在为临床肿瘤分子靶向疗法和放射增敏剂的研发提供新的思路。

目的:研究泛醌氧化还原酶复合物组装因子4（NDUFAF4）的表达与肝癌患者临床预后的相关性，探究NDUFAF4对人肝癌细胞系的辐射敏感性的影响及其机制。方法:通过数据库及肝癌组织样本探究NDUFAF4在肝癌中的表达及其表达水平与临床预后的相关性。通过脂质体将敲减NDUFAF4基因的质粒si-NDUFAF4转入HepG2和Huh7细胞，克隆形成实验检测辐射敏感性。同时通过裸鼠开展荷瘤实验，免疫荧光法检测β联蛋白（β-catenin），蛋白质印迹法检测上皮钙黏素（E-cadherin）和神经钙黏素（N-cadherin）的蛋白表达。结果:生物信息学分析结果证实，NDUFAF4在肝癌组织中显著高表达，其表达水平越高，患者预后越差（ P＜0.05）。NDUFAF4在肝癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织；克隆形成实验证实，敲减NDUFAF4显著降低肝癌细胞的生存率（ P＜0.01）；体内实验证实，敲减NDUFAF4可以减慢癌细胞增殖，减少β-catenin及Ki-67的表达。敲减NDUFAF4显著减少肝癌细胞系核内β-catenin的蛋白水平，提示NDUFAF4可以激活Wnt/β-catenin通路。敲减NDUFAF4显著上调E-cadherin和下调N-cadherin的蛋白表达水平。 结论:敲减NDUFAF4可以通过抑制Wnt/β-catenin通路增强人肝癌细胞系的辐射敏感性，并且与临床预后紧密相关，或可为克服肝癌的辐射抗性提供新的靶点。

目的:探讨拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)和核糖核苷酸还原酶亚基M1(RRM1)与吡柔比星、吉西他滨药物治疗非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)中的效果。方法:选取2018年1月至2021年1月在本院收治的85例NMIBC患者的临床资料，根据不同化疗药物行膀胱灌注治疗将患者分为吡柔比星组(45例)和吉西他滨组(40例)。通过转染TopoⅡα shRNA质粒在BIU-87细胞中敲除TopoⅡα(TopoⅡα shRNA组)，并以未转染TopoⅡα shRNA质粒的BIU-87细胞作为对照(BIU-87对照组)；通过转染RRM1 cDNA质粒在KK47细胞中过表达RRM1(PCDNA RRM1组)，并以未转染RRM1 cDNA质粒的KK47细胞作为对照(KK47对照组)。采用免疫组化技术检测组织中的蛋白表达，采用逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot法检测细胞内的mRNA和蛋白水平。采用MTT法检测细胞的半抑制浓度值。结果:在吡柔比星组中，TopoⅡα高表达患者的复发率为25%，而TopoⅡα低表达患者的复发率为61.5%( P<0.05)。吉西他滨组中，RRM1高表达的复发率为66.7%，而低表达的复发率为27.3%( P<0.05)。BIU-87细胞系中TopoⅡα、RRM1的mRNA和蛋白水平均高于KK47细胞系中水平( P＝0.024、0.031)。与BIU-87对照组比较，TopoⅡα shRNA组的TopoⅡα mRNA和蛋白水平显著降低( P＝0.012)；与KK47对照组比较，PCDNA RRM1组的RRM1 mRNA和蛋白水平均升高( P＝0.028)。吡柔比星对BIU-87和KK47细胞系的IC50值分别为(0.84±0.22)μg/mL和(1.82±0.31)μg/mL。吉西他滨对BIU-87和KK47细胞系的IC50值分别为(4.94±0.31)μg/mL和(3.45±0.32)μg/mL。 结论:TopoⅡα高表达或RRM1低表达可以预测吡柔比星或吉西他滨对NMIBC治疗的敏感性，对临床上选择更有效的化疗药物治疗NMIBC具有指导意义。

患者男，86岁，因背部结节伴疼痛1个月就诊。患者1个月前无明显诱因背部出现结节，初起为鸡蛋黄大小，表面微红，有触痛，后皮损逐渐增大。患者自行口服头孢氨苄和甲硝唑并外用聚维酮碘溶液、酒精，效果欠佳，红肿加重，疼痛加剧。患者有糖尿病病史半年，未规律控制；脑梗死病史4年，现左侧肢体活动不利；有青霉素过敏史。体检：生命体征平稳，左侧肢体活动受限，肌力3级，浅表淋巴结未触及肿大。皮肤科检查：右背上部见1个长径约5 cm红色结节，表面微隆起，散在脓疱及结痂，边界欠清；皮损中央质软，触痛明显，挤压后有黄白色、脓性及血性分泌物溢出，未见"硫磺样颗粒"（图1A）。实验室检查：中性粒细胞百分比81.3%（参考值：40% ~ 75%，下同），C反应蛋白40.04 mg/L（0 ~ 5 mg/L），血白蛋白34.4 g/L（40 ~ 55 g/L），血糖9.54 mmol/L（3.9 ~ 6.1 mmol/L）。抽取脓液送细菌分离培养，3 d后在哥伦比亚血平板（法国梅里埃公司）上培养出奶油色菌落，其他微生物未生长。细菌涂片示革兰阳性杆菌。生化鉴定：耐氧试验阳性，过氧化氢酶试验阴性，脲酶试验阴性，硝酸盐还原试验阴性，七叶苷水解试验阳性，葡萄糖苷酶阳性，半乳糖苷酶阳性，β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶阴性，不产生色素，发酵麦芽糖，不发酵甘露醇，协同凝集试验阴性。基质辅助激光解吸-飞行时间质谱仪（法国梅里埃公司）初步鉴定为欧洲放线菌。16S rRNA基因测序和比对结果显示，与欧洲放线菌（AF355191.1）的同源性为99.35%。根据CLSI的M45标准行药物敏感性试验（e-test条法），对克林霉素、阿莫西林克拉维酸钾、头孢曲松敏感，对克拉霉素耐药。

目的:研究外源性一氧化氮(NO)对鼻咽癌5-8F放疗抵抗细胞株(5-8FRs)放射效应的影响，为寻找合适的鼻咽癌放射增敏剂提供实验依据。方法:体外培养5-8FRs细胞株，使用不同浓度NO供体药物硝普钠(SNP)干预5-8FRs细胞，CCK-8法检测细胞增殖抑制率筛选出一个对5-8FRs细胞增殖无明显影响的IC 01 SNP浓度(细胞增殖抑制率为1%的SNP浓度)；使用1、2、4、6 Gy和8 Gy放射线干预5-8FRs细胞，确定IC 15放射剂量(细胞增殖抑制率为15%的放射剂量)。用IC 01SNP浓度、IC 15放射剂量放疗单独干预及二者联合干预5-8FRs细胞，高倍镜下观察细胞形态学变化，CCK-8法检测各分组细胞增殖抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡情况，硝酸还原法检测细胞上清液中NO浓度。 结果:⑴SNP以浓度依赖方式、放射线以剂量依赖方式抑制5-8FRs细胞的增殖，其中SNP IC 01为(513.89±14.69)μmol/L(SNP组)；放射剂量IC 15为(3.96±0.33)Gy(放疗组)；⑵联合组(SNP＋放疗)与单独SNP组和放疗组相比，5-8FRs细胞形态学差异显著，漂浮细胞显著增多，贴壁细胞数量逐渐减少并失去原有形态；⑶IC 01的SNP浓度对5-8FRs细胞增殖无明显影响，然而联合组较单独放疗组细胞抑制率显著提高( t＝7.708， P<0.01)；并且联合组中NO浓度显著高于单组放疗组[(310.03±5.76)μmol/L vs (77.34±2.60)μmol/L， P<0.05]；⑷5-8FRs自发凋亡率为(1.35±0.06)%，SNP组凋亡率为(2.22±0.37)%，SNP组细胞凋亡无明显变化，放疗组凋亡率为(15.37±0.65)%，联合组为(50.27±2.24)%，联合组较放疗组促凋亡能力显著增强( t＝-21.459， P＝0.001)。 结论:合适浓度的外源性NO可在对细胞本身不产生明显毒性的情况下可显著增加5-8FRs细胞株放射敏感性。