目的 分析成人尿邻苯二甲酸盐代谢物与高血压的相关性.方法 从2003-2012年美国国家健康和营养检查调查(NHANES)中提取包括八种尿液邻苯二甲酸酯代谢物的水平,以及邻苯二甲酸2-乙基已酯代谢产物(ΣDEHP)的汇总.根据2017年美国心脏病学会/美国心脏协会指南,高血压被定义为收缩压≥130 mm Hg或舒张压≥80 mm Hg.在控制年龄、性别、种族/民族、教育水平、尿肌酐、体质量指数和糖尿病后,通过二元逻辑回归模型估计邻苯二甲酸酯代谢物与高血压的比值比(OR).进行受试者操作特征(ROC)曲线分析,以检验ΣDEHP对高血压的预测.结果 ΣDEHP高的参与者有更高的高血压患病率.二元Logistic逻辑回归显示,ΣDEHP水平与高血压存在相关性(P<0.05).ROC分析显示,ΣDEHP可以预测整个人群以及男性和女性人群的高血压.结论 ΣDEHP与成人高血压患病率密切相关.

[目的]探讨哈尔滨市小学生邻苯二甲酸酯类(PAEs)的暴露水平及其影响因素.[方法]选取哈尔滨市某小学一年级和五年级学生,按照随机抽样原则,各抽取100名小学生,收集每名小学生的尿液样品并进行问卷调查,问卷内容包括一般情况、生活习惯及生长发育情况等信息.采用正己烷萃取气相色谱-质谱法测定小学生尿液中的3种PAEs代谢物[邻苯二甲酸单乙酯(MEP)、邻苯二甲酸单丁酯(MBP)、邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)]的暴露水平.[结果] 回收并匹配尿液样本和有效调查问卷共168份.尿液样本中MEP、MBP、MEHP的检出率分别为20.83％、13.69％和95.24％.五年级学生MBP检出率(7.79％)低于一年级(18.68％),差异具有统计学意义(P=0.045).使用塑料材质杯子的小学生MBP检出率为23.81％,高于使用其他材质杯子的小学生(11.11％,P=0.003).家庭每天打扫房间的小学生尿液中MEP检出率(12.96％)低于家庭两天或以上打扫1次房间的小学生(38.33％)(P=0.000).此外,每周在外吃饭≥3次的小学生尿液中MEP检出率(31.48％)高于每周在外吃饭＜3次的小学生(P=0.026).多因素logistic回归分析发现,每周在外吃饭次数多是MEP暴露的危险因素(OR=2.663,95％CI:1.587～4.469),打扫频率高是MEP暴露的保护因素(OR=0.314,95％CI:0.133～0.741);使用塑料材质杯子是MBP和MEHP暴露的危险因素(OR=15.873,95％CI:4.902～52.632;OR=5.682,95％CI:1.277～25.641).[结论]儿童可通过多种途径暴露于PAEs,家庭的不同生活方式和习惯对儿童暴露PAEs有一定影响.

邻苯二甲酸酯(PAEs)是环境中普遍存在的有机污染物,具有环境雌激素效应,对人体健康和生态安全造成严重威胁.菌株YC-JY1分离自受石油长期污染的土壤中,可以利用邻苯二甲酸二丁酯(DBP)作为唯一的碳源进行生长;经16S rDNA 鉴定,确定其属于黄色杆菌属(Xanthobacter sp.).菌株YC-JY1降解DBP的最适条件为30℃,pH 7.0,无NaCl添加;在此条件下,100 mg/L DBP 在5 d内能被完全降解.随着DBP浓度的升高,菌株YC-JY1在5 d内对200 mg/L - 400 mg/L DBP的降解率在94%以上;通过底物谱实验发现,菌株YC-JY1对其它邻苯二甲酸酯具有广泛的利用能力,其中邻苯二甲酸二戊酯(DPeP),邻苯二甲酸二己酯(DHP)的降解率均在90%以上;通过高效液相色谱-质谱联用确定DBP中间代谢产物为邻苯二甲酸单丁酯(MBP),邻苯二甲酸(PA).由此推断,在菌株YC-JY1的作用下,DBP的起始代谢途径为DBP首先水解为MBP,继而水解为PA.

[目的]目前对于邻苯二甲酸酯的研究多集中于其原型,但有学者认为,邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二乙基己基酯的毒性作用可能是其在体内的代谢产物邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)所致.本研究拟探讨MBP和MEHP对小鼠睾丸间质细胞(TM-3)自噬的影响以及与第10号染色体缺失的同源性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)的相关研究.[方法]体外培养TM-3并取其对数生长期,预实验设置毒物浓度梯度为0(对照组)、50、100、200、400、800 μmol/L,染毒24h后,利用改良寇氏法计算MBP、MEHP的半数致死浓度(IC50)后,确定实验染毒浓度为0(对照组)、200、400、800 μmol/L.分别采取CCK-8法检测不同毒物剂量和不同染毒时间对细胞存活率的影响;透射电镜观察400 μmol/L的MBP、MEHP诱导24h后具有双层膜状结构的自噬小体;单丹黄酰尸胺(MDC)免疫荧光法检测细胞自噬囊泡的荧光信号强度;采用Western blot技术检测自噬标志蛋白LC3、p62和自噬调节相关蛋白PTEN的表达水平.[结果] CCK-8结果显示:与对照组相比,随着MBP、MEHP染毒剂量增高,细胞存活率降低(P＜0.05).透射电镜结果显示:400 μmol/L MBP、MEHP染毒24h后细胞内可见具有双层膜状结构的自噬小体.MDC法检测结果显示:与对照组相比,200 μmol/L MBP、MEHP染毒组荧光信号强度差异无统计学意义(P＞0.05);400、800 μmol/L MBP染毒组荧光信号强度分别增加了9.0、16.8倍;400、800 μLmol/L MEHP染毒组荧光信号强度增加了16.3、26.4倍,差异均有统计学意义(P＜0.01).Western blot结果显示:200 μmol MBP、MEHP染毒组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、PTEN表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05);400、800 μmol/L MBP染毒组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平分别增加了7.5、13.6倍,PTEN表达水平增加了4.8、15.4倍;400、800 μmol/L MEHP染毒组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平增加了4.5、9.8倍,PTEN表达水平增加了5.7、14.4倍(P＜0.05);200 μmol/L MBP染毒组p62表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05),400、800 μmol/LMBP染毒组p62蛋白表达水平分别降低了43％、72％;200、400、800μmol/L MEHP染毒组p62蛋白表达水平也分别降低了55％、80％、88％ (P＜0.01).[结论]一定剂量的MBP、MEHP可提高TM-3细胞自噬水平,并且PTEN表达水平与细胞自噬水平呈正相关趋势.

目的 通过扩增邻苯二甲酸二丁酯(DBP)降解菌L6的关键基因并分析代谢产物,了解该菌株的降解机制.方法 以DBP降解菌L6基因组为模板,PCR扩增邻苯二甲酸双加氧酶基因和邻苯二甲酸酯脱羧酶基因,PCR产物用2％琼脂糖凝胶电泳检测,再进行测序和分析;将DBP降解菌L6接种于含DBP浓度为800 mg/L的基础培养基中培养120 h,采用超高效液相色谱法(UPLC)和气相色谱-质谱联用法(GC-MS)检测培养基中的残留物质,确定降解产物.结果 通过PCR扩增成功获得DBP降解菌L6的邻苯二甲酸双加氧酶基因和邻苯二甲酸酯脱羧酶基因,经NCBI比对发现,分别与甲基杆菌属菌株arboreus clone SY117 (Accession No.KM041246.1)的邻苯二甲酸双加氧酶基因和邻苯二甲酸酯脱羧酶基因具有较高的相似性.L6培养基中尚残留部分DBP,浓度为135 mg/L;0.7 min时出现一个新的色谱峰,浓度为95.6 mg/L,经GC-MS确认该物质为邻苯二酚.结论 DBP降解菌L6的基因组内存在邻苯二甲酸双加氧酶基因和邻苯二甲酸酯脱羧酶基因,与同属菌株arboreus clone SY117的基因有较高同源性,DBP降解菌L6降解DBP的产物为邻苯二酚.

目的 了解重庆市某农村地区5～6岁年龄组儿童邻苯二甲酸酯的暴露水平.方法 于2010年3-6月,通过分层整群随机抽样方法,随机抽取了重庆市某县6个乡镇中心幼儿园的210名5～6岁儿童(其中,男性108人,女性102人),检测随机尿液中邻苯二甲酸酯(PAEs)五种一级代谢产物[邻苯二甲酸单甲酯(MMP)、邻苯二甲酸单丁酯(MBP)、邻苯二甲酸单乙酯(MEP)、邻苯二甲酸单苄基酯(MBzP)和邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)]的浓度.结果 除MBzP未检出外,尿中其余4种PAEs代谢产物的检出率依次为MEHP(84.76％)＞MBP(73.8 1％)＞MMP(6.67％)＞MEP(4.76％).不同性别儿童尿中MMP、MEP、MBP、MEHP的浓度和检出率间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 该地区5～6岁儿童受MBP和MEHP原型物邻苯二甲酸二甲酯(DBP)和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)的污染较为严重.

目的 检测孕妇尿液中环境内分泌干扰物邻苯二甲酸酯(phthalate acid esters,PAEs)代谢物的水平,并分析其与孕期抑郁的关系.方法 连续收集100名孕妇的尿液,采用固相萃取-高效液相色谱法测定孕妇尿液中四种PAEs代谢产物的水平;采用基线资料调查表,抑郁自评量表(self-rating depression scale,SDS)对孕妇进行问卷调查.结果 100名孕妇中,非抑郁者64人,抑郁者36人;尿液中4种PAEs代谢物检出率由高到低依次是邻苯二甲酸单丁酯(MBP) (90.00％)、邻苯二甲酸乙酯(MEP)(88.00％)、邻苯二甲酸单苄基酯(MBzP) (85.00％)、邻苯二甲酸单甲酯(MMP) (70.00％),其中MEP的浓度(215.31 μg/L)最高,其次是MMP(83.02 μg/L)、MBzP(31.75 μg/L)、MBP (26.82μg/L);孕妇体内MBP水平与抑郁有关,OR (95％CI)为3.45 (1.07～11.05).结论 孕期PAEs的暴露水平较高,孕期抑郁的发生与环境内分泌干扰物相关.

目的 通过检测人体尿液邻苯二甲酸二(2-己基乙基)酯(DEHP)代谢产物和动物模型中相关指标的表达,探讨DEHP在变应性鼻炎(AR)发病机制中的作用.方法 选取2018年5月至7月于重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科门诊就诊患者64名,根据ARIA2008指南AR诊断标准分为AR组与非AR(NAR)组,每组各32名.采用高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)检测其尿液中DEHP主要代谢产物MEHHP、MECPP、MEOHP、MEHP水平.建立AR动物模型,24只小鼠分为4组;A组:对照(生理盐水)组,B组:卵清蛋白(OVA)组,C组:DEHP组,D组:OVA+DEHP组.HE染色观察鼻黏膜病理变化并计数嗜酸性粒细胞(EOS),ELISA检测小鼠血清中IFN-γ、 IgE、IL-4、IL-5、IL-6、IL-13、IL-33水平.用SPSS 17.0软件进行统计学分析.结果 患者AR组尿液中DEHP代谢产物水平高于NAR组(P＜0.05);A组小鼠鼻黏膜形态优于B、C、D组,B、C、D组慢性炎症浸润程度显示出不同程度改变.B、C、D组EOS浸润明显高于A组,D组EOS浸润明显高于B、C组,且差异具有统计学意义(P＜0.05).与A组相比,B、C、D组小鼠血清IFN-γ水平较低;且D组血清IFN-γ水平较B、C组低.B、C、D组IgE、IL-4、IL-5、IL-6、IL-13、IL-33水平较A组高,且D组IgE、IL-4、IL-5、IL-6、IL-13、IL-33水平较B、C组高.差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 环境污染物DEHP导致AR更加严重的病理改变和炎症反应,推进了AR的发生发展.

为了获得邻苯二甲酸酯(PAEs)生物降解菌,从农田土壤筛选出一株能够以PAEs为唯一碳源和能源生长的微生物,命名为SD2.采用聚合酶链式反应(PCR)扩增得到其16S rDNA并构建分子系统发育树,可鉴定出其为冢村菌(Tsukamurella).研究该菌株在不同的温度、pH值和转速条件下对邻苯二甲酸二丁酯(DBP)的降解情况,同时采用高效液相色谱(HPLC)测定该菌株对DBP的降解能力.结果表明,SD2对DBP的最佳降解条件为:温度为30℃,pH值为9,转速为150 r/min.在该最佳条件下,SD2在72 h内可以完全降解500 mg/L的DBP.底物广谱试验表明,该菌能够降解长短链的PAEs化合物及常见的代谢产物.同时采用气相质谱联用仪(GC-MS)检测发现,DBP在降解的过程中产生了中间代谢产物邻苯二甲酸丁基甲酯和邻苯二甲酸(PA),预示着该菌具备完全降解DBP的能力.这是首次关于冢村菌降解PAEs污染物的报道,能够为PAEs污染环境的生物降解及修复提供新的微生物资源.

目的 分析增塑剂邻苯二甲酸酯类(phthalates,PAEs)中具有参考剂量值(reference doses,RfD)的邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二正丁酯(DnBP)、邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)、邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBzP)与男性精液参数和性激素水平的关联,并对RfD的安全性进行评估.方法 研究对象来源于2013年重庆大学生男性生殖健康研究队列(male reproductive health in Chongqing college students,MARHCS).检测796名研究对象尿中PAEs代谢产物,估算PAEs摄入量,采用最优尺度回归分析其与精液参数、性激素水平的关联;Joinpoint回归模型分析上述关联中是否存在拐点,并与RfD比较.结果 除BBzP代谢产物在大部分个体低于检出限外,其余3种PAEs(DEP、DnBP、DEHP)暴露中位数分别为0.1、1.0、4.3 μg/(kg-d),低于相应RfD[800、100、20 μg/(kg-d)]和健康指导值[30、10、50 μg/(kg ? d)].DEP的代谢产物MEP与精子前向运动、正常形态率和睾酮水平相关(P＜0.01);DnBP的代谢产物MnBP与精子正常形态率相关(P＜0.05);DEHP的4种代谢产物中,MEHHP和MECPP与雌激素水平相关(P＜0.05),MEOHP和MEHP与雌激素和孕酮水平相关(P＜0.01);其中仅DEHP与部分参数关联中存在拐点[阈剂量为2.9～3.6、5.0～5.8 μg/(kg ? d)].结论 重庆市大学生PAEs暴露与精液参数和性激素水平存在12项关联,PAEs低于RfD仍可能导致男性生殖损害.