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基于HPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术的异绿原酸A体内代谢产物分析
编辑人员丨1周前
异绿原酸A(ICA)为茵陈等多种中药的主要药效成分.该研究旨在鉴定口服给药ICA的大鼠血浆、尿液和粪便中的代谢产物,并推测其潜在的代谢途径.ICA灌胃大鼠后,收集不同时间点(段)的血浆、尿液和粪便样品,利用高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱(HPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)技术,结合对照品比对保留时间、裂解规律总结和文献数据,对生物样品中代谢产物进行结构鉴定.从大鼠样品中初步鉴定了 ICA的39个代谢产物(M1~M39),其中31个来自于血浆(M1~M10、M12~M24、M26~M28、M30、M34~M35、M38~M39)、34 个来自于尿液(M1~M11、M13~M15、M19~M25、M27~M39)、11个来自于粪便(M2~M3、M6、M15、M21~M23、M32、M34、M36~M37),主要代谢途径包括水解、葡萄糖醛酸化、甲基化和磺酸化反应等.该研究揭示了 ICA在大鼠血浆、尿液和粪便中的代谢情况,对深入阐明其药理活性成分提供参考.
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编辑人员丨1周前
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血液和尿液多种微量元素的电感耦合等离子质谱法
编辑人员丨1周前
目的 建立人体血液和尿液中多种微量元素的电感耦合等离子质谱法.方法 采用1%硝酸+0.1%Triton X-100+2%异丙醇将血液或尿液样品直接稀释后进样,采用内插入模式校正干扰,用氦气碰撞模式分析样品中19种金属元素.结果 各元素在1~200 μg/L线性范围内,所得回归方程的线性关系良好,r>0.999.该方法检出限为0.002~1.699 μg/L,定量下限为0.01~5.66 μg/L;血液、尿液的加标回收率分别为86.2%~115.6%和81.8%~105.6%,RSD<6.3%.结论 该方法前处理操作简便、分析速度快、灵敏度高,可同时测定多种金属元素,适用于血液和尿液中19种元素的测定.
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编辑人员丨1周前
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尿液中2种全氟化合物测定的液相色谱串联质谱法
编辑人员丨1周前
目的:建立液相色谱串联质谱法快速测定尿液中全氟辛烷磺酸和全氟辛酸含量的方法。方法:于2022年11月,将尿液样品经酸性甲醇提取,WAX固相萃取柱净化,甲醇水洗脱后,采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),以1.0 mmol/L乙酸铵溶液和甲醇为流动相,进行梯度洗脱;以电喷雾负离子多反应监测模式进行检测,内标法定量。结果:全氟辛酸和全氟辛烷磺酸在0.5~50.0 μg/L浓度范围内均具有良好的线性关系,相关系数均>0.999,方法的检出限为0.017 μg/L,定量限为0.005 μg/L,平均加标回收率分别为96.3%和101.8%,日内精密度分别为3.5%~6.2%和3.1%~7.4%,日间精密度分别为4.3%~6.8%和4.7%~8.1%。结论:液相色谱串联质谱方法灵敏度高、准确度好,可用于人体尿液中全氟辛烷磺酸和全氟辛酸的测定。
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编辑人员丨1周前
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尿中钴和钨测定的电感耦合等离子体质谱法
编辑人员丨1周前
目的:建立电感耦合等离子体质谱法测定尿液中钴和钨的方法。方法:于2021年10月至12月,利用1%硝酸为稀释剂,使用电感耦合等离子体质谱法测定尿液中钴和钨,本次研究利用控制单因素变量实验的方法优化选择样品稀释倍数和内标元素,并比较测定工作曲线与标准曲线间的差异。结果:该方法利用工作曲线同时测定尿液中的钴和钨含量,线性范围为0.0~10.0 μg/L,相关系数为0.999 9,尿钴和钨检出限分别为0.005 μg/L和0.09 μg/L,样品加标回收率分别为87.0%~100.2%和89.4%~104.8%,相对标准偏差分别为0.4%~4.4%和0.6%~3.8%。结论:本方法建立了一种简便快捷的测定尿液中钴和钨的方法,该法操作简单、灵敏度高、检出限低、稳定性好,适合各类人群中尿中钴和钨的测定。
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编辑人员丨1周前
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儿茶酚胺及其代谢物的检测现状及标准化期望
编辑人员丨1周前
儿茶酚胺包括多巴胺、去甲肾上腺素和肾上腺素,其主要的代谢物有3-甲氧基酪胺、甲氧基去甲肾上腺素、甲氧基肾上腺素、高香草酸和香草扁桃酸。儿茶酚胺及其代谢物的检测是诊断来源于神经嵴的神经内分泌肿瘤如嗜铬细胞瘤、副神经节瘤及神经母细胞瘤的基石。液相色谱串联质谱法因其高灵敏度、高特异性等优点逐渐广泛用于儿茶酚胺及其代谢物的检测,但不同实验室间液相色谱串联质谱法的检测结果差异大,缺乏可比性。由于儿茶酚胺及其代谢物易氧化降解、存在众多干扰物及在血浆和尿液样品中浓度低,因此准确测定血浆及尿液中儿茶酚胺及其代谢物是当前临床检测领域的一项挑战。
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编辑人员丨1周前
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福建省首株黄热病毒株的分离鉴定和全基因组序列分析
编辑人员丨1周前
目的:从福建省2016年输入性黄热病病例标本中分离黄热病毒(YFV)并分析其生物学特征。方法:将16份黄热病毒核酸阳性血清、尿液、唾液样品分别接种C6/36细胞,YFV实时荧光RT-PCR法鉴定检测培养物中特异性病毒核酸,通过高通量测序获得病毒全基因序列并绘制系统进化树。结果:从1例患者发病后3天的血清样品分离到一株病毒,通过YFV实时荧光RT-PCR鉴定为YFV病毒;BLAST分析显示该毒株全基因序列与2016年我国首例输入性黄热病病例中分离得到的毒株CNYF01R/2016(KX268355)序列完全一致;系统进化树显示该毒株与1971年安哥拉流行株Angola71分属同一进化树分支,与疫苗株17D vaccine strain(X03700)存在明显的差异,表明本研究分离到的YFV毒株是属于安哥拉型YFV野毒株。结论:福建省成功从2016年输入性黄热病病例样品分离到一株安哥拉型YFV毒株。
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编辑人员丨1周前
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尿中锰测定的直接稀释-电感耦合等离子体质谱法
编辑人员丨1周前
目的:建立直接稀释-电感耦合等离子体质谱法测定尿中锰的方法。方法:以1%硝酸溶液为稀释剂,采用单因素轮换实验确定尿液的稀释倍数和内标元素,分析尿中锰测定的直接稀释-电感耦合等离子体质谱法的线性范围、相关系数、精密度、准确度和检出限。结果:该方法测定尿中锰含量的线性范围为0.0~20.0 μg/L,相关系数为0.999 9,检出限为0.02 μg/L,样品加标回收率为84.65%~103.40%,相对标准偏差为0.26%~8.17%。结论:该法操作简单、灵敏度高、检出限低,可以与其他元素同时进行检测,适用于职业接锰作业工人及普通人群尿锰的测定。
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编辑人员丨1周前
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UHPLC-LTQ-Orbitrap测定异类叶升麻苷在大鼠尿液中的代谢产物
编辑人员丨1周前
目的:采用超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨组合质谱技术(ultra-performance liquid chromatography-linear ion trap/orbitraphigh resolution mass spectrometry, UHPLC-LTQ-Orbitrap)分析异类叶升麻苷在大鼠尿液中的代谢产物,并归纳其代谢途径。方法:将大鼠按随机数字表法分为给药组、空白组。给药组大鼠灌胃异类叶升麻苷生理盐水溶液100 mg/kg,空白组灌胃等体积生理盐水。连续收集大鼠尿液12 h,经纯化处理后,采用Thermo Scientific BDS Hypersil C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,2.4 μm),以0.1%甲酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.3 ml/min,柱温30 ℃。在负离子检测模式下对给药组及空白组尿液进行分析。结果:通过分析高分辨质谱提供的准分子离子峰和碎片离子信息,结合对照品与文献报道结果,从给药组大鼠尿液样品中共鉴定得到8个代谢产物,主要代谢途径为葡萄糖醛酸化、水解、甲基化、磺酸化。结论:应用UHPLC-LTQ-Orbitrap高分辨液质联用技术可分析异类叶升麻苷在大鼠体内主要的代谢产物和代谢途径,为其进一步的药效及药理机制研究提供参考。
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编辑人员丨1周前
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基于超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱的苯与甲苯和二甲苯联合接触尿液代谢组学研究
编辑人员丨1周前
目的:探讨苯、甲苯、二甲苯联合职业接触相关的生物标志物,探索苯、甲苯、二甲苯联合职业接触致机体早期健康效应的机制。方法:于2018年5月,选择某制鞋厂的40名女性职工,其中从事苯、甲苯、二甲苯联合接触岗位职工作为接触组,共20人;该企业后勤行政人员作为对照组,共20人。用自制调查问卷进行基本信息收集,并收集研究对象的尿液。利用液相色谱飞行时间质谱联用仪采集样品的代谢轮廓,采用专业代谢组学和多变量统计分析软件建立无监督主成分分析(PCA)和有监督正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)模型筛选潜在的生物标志物并对潜在生物标志物进行鉴定。结果:与对照组比较,接触组的年龄、BMI、吸烟和饮酒情况的差异无统计学意义( P>0.05)。尿液代谢组学分析结果显示,对照组和接触组的代谢轮廓存在明显的差异,筛选并鉴定出与苯、甲苯、二甲苯联合接触密切相关的潜在生物标志物27个。这些潜在生物标志物在16条代谢通路中富集,其中3条通路明显富集( P<0.05),分别为赖氨酸代谢、氨基糖代谢和核苷酸糖代谢。 结论:代谢组学方法较好的反映职业人群受苯、甲苯、二甲苯联合接触后尿样代谢组改变的状况。
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编辑人员丨1周前
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尿中三氯卡班和三氯生测定的QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法
编辑人员丨1周前
目的:建立QuEChERS净化后超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用(UPLC-MS/MS)法测定尿液中三氯卡班(TCC)和三氯生(TCS)含量。方法:于2022年5月,将尿液样品经乙腈提取,QuEChERS净化,Waters Acquity UPLC BEH C18柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)分离,以水-乙腈体系为流动相梯度洗脱,流速为0.3 ml/min,采用电喷雾负离子模式和多反应监测扫描方式检测,内标法定量分析,对建立的方法进行方法学验证。结果:TCC和TCS的线性范围为分别为0.5~100.0 μg/L和1.0~100.0 μg/L,相关系数分别为0.999 7、0.999 1;方法检出限分别为0.17和0.33 μg/L,定量限分别为0.5和1.0 μg/L;在2.0、10.0、80.0 μg/L 3个加标水平下,TCC和TCS的加标回收率分别为100.1%~102.8%和96.7%~108.6%,相对标准偏差分别为4.9%~6.7%和4.1%~8.3%。结论:QuEChERS-UPLC-MS/MS法操作简便、快速、灵敏、重现性好,可用于职业人群TCC和TCS暴露水平的同时快速准确检测。
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编辑人员丨1周前
