目的:优化野蔷薇根总黄酮提取及纯化工艺.方法:L9(34)正交试验回流提取确定最适提取剂乙醇浓度、料液比、提取时间组合;从静态吸附-解吸、动态吸附-解吸两方面筛选最佳树脂型号,单因素考察最佳纯化条件.结果:UV 508 nm检测波长下,最佳提取条件为50%乙醇溶剂,料液比1:10,进行90 ℃、90 min回流提取;14种大孔树脂中,HPD-400型大孔树脂对野蔷薇根总黄酮的吸附-解吸能力最好,树脂纯化最佳上样浓度为浸膏母液稀释1.5倍;上样量35 mL,流速3 s/滴;除杂用水量40 mL,流速1 s/滴;50%乙醇32 mL洗脱,流速2 s/滴.结论:最优提取纯化条件下,总黄酮回收率达50%以上.

目的 研究小果蔷薇Rosa cymosa根的化学成分.方法 采用多种色谱方法进行分离纯化,结合波谱技术与化学方法进行结构鉴定.结果 从小果蔷薇根的70％乙醇提取物中分离得到16个化合物,分别鉴定为2-乙酰基-洋委陵菜酸(1)、2-氧代-坡模酸(2)、2α,3α,19α-三羟基齐墩果烷-12-烯-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、构莓苷F1(4)、野蔷薇亭(5)、23-羟基-委陵菜酸(6)、阿江榄仁亭(7)、2α,3α,19α,23-四羟基乌苏烷-12-烯-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、1β,3α,19α,23-四羟基乌苏烷-12-烯-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、儿茶素(10)、3,4-二羟基苯乙醇8-O-β-D-葡萄糖苷(11)、3,4,5-三甲氧基苯酚-O-β--芹糖-(1→6)-O-β-D-葡萄糖苷(12)、4-羟基-3-甲氧基-1-苯基-O-(6'-O-没食子酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(13)、没食子酸乙酯(14)、3,4,5-三甲氧基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(15)、3,4,5-三甲氧基苄基β-D-吡喃葡萄糖苷(16).结论 化合物9、11～13、15、16为首次从蔷薇属植物中分离得到,化合物3、9、11～16为首次从小果蔷薇中分离得到.

目的:研究藏药人参果的化学成分.方法:采用减压硅胶柱色谱、中压反相ODS柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备高效液相色谱和高压快速制备色谱等手段等方法分离纯化,并根据理化性质和NMR、MS波谱等现代波谱技术对所得化合物的结构进行鉴定.结果:从人参果中分离得到13个化合物,分别鉴定为:crotonine(1)、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、野蔷薇苷(3)、刺梨苷(4)、arjunetin(5)、覆盆子酸(6)、人参皂苷Rg1(7)、号角树酸-3-甲酯(8)、2-氧代坡模酸(9)、坡模酸(10)、dehydrodigallic acid monomethyl ester (11)、对羟基苯甲酸(12)、没食子酸甲酯(13).结论:其中,化合物1、2、7、8、11为首次从委陵菜属植物中分离得到.

目的 研究野蔷薇根总黄酮(Total Flavonoids from Rosa multiflora Thunb,TF-RM)对过氧化氢(H2O2)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的影响.方法 将SD大鼠随机分为3组,每组10只:空白对照组,维生素C(Vit C)组(0.08 g·kg-1),TF-RM组(2.5 g·kg-1),连续灌胃给药7 d,制备含药血清.采用H2O2诱导HUVEC损伤,分别加入Vit C、TF-RM低、中、高剂量含药血清,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,微量酶标法检测乳酸脱氢酶(LDH)含量,硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测内皮素-1(ET-1)含量.结果 与模型组比较,Vit C组、TF-RM低、高剂量组细胞活力明显提高(P<0.05,P<0.01);Vit C组、TF-RM中、高浓度组正常细胞增加,早、晚期凋亡、坏死细胞减少;Vit C组、TF-RM高剂量组LDH含量显著降低(P<0.05,P<0.01);TF-RM高浓度组NO含量显著提高(P<0.05),ET-1含量显著降低(P<0.01).结论 TF-RM对H2O2诱导损伤的血管内皮细胞具有明显保护作用.

目的 研究蔷薇科植物金樱子Rosa laevigata根的化学成分.方法 采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS柱色谱、重结晶及半制备液相分离和纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构,并运用MTT法对所分离化合物对人宫颈癌HeLa、人胃腺癌BGC823、人结肠癌HCT-116及人肝癌HepG-2细胞的细胞毒活性进行检测.结果 从金樱根乙醇提取物中分离得到了9个化合物,分别鉴定为2α,3β,11α,19α-四羟基乌苏-12-烯-28-羧酸-β-D-吡喃葡萄糖基酯(1)、野鸦椿酸(2)、2α,3β,19α-三羟基乌苏-23-醛-12-烯-28-羧酸-β-D-吡喃葡萄糖基酯(3)、野蔷薇苷(4)、苦莓苷F1(5)、2α,3β,19α-三羟基齐墩果-12-烯-28-羧酸-β-D-吡喃葡萄糖基酯(6)、桦木酸(7)、β-谷甾醇(8)和儿茶素(9);其中化合物7对BGC823及HeLa细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为19.0和19.6 μmol/L,化合物8对BGC823及HeLa细胞的IC50分别为16.2和15.8 μmol/L.结论 化合物1为新化合物,命名为金樱子皂苷,化合物3为首次从该植物中分离到,化合物7和8对BGC823及HeLa细胞显示出中等强度的细胞毒活性.

月季黑斑病是由真菌蔷薇盘二孢(Marssonina rosae)引起的.本研究以高抗黑斑病菌的野生种木香花(Rosa banksiae)作为实验材料,采用TA克隆法和RACE技术,克隆获得抗黑斑病候选基因RbRdrl(GenBank登录号MK584935),并对其进行相关生物信息学分析.序列分析结果显示,RbRdrl含有1个3 396 bp的完整的开放阅读框,能编码1 131个氨基酸;其编码的蛋白是一个亲水性蛋白,亚细胞定位于线粒体及过氧化物酶体上,不具有信号肽及跨膜结构域.氨基酸同源序列多重比对发现,该基因与野蔷薇(R.multiflora)和玫瑰(R.rugosa)具有较高的同源性,其中与野蔷薇同源性为86％,玫瑰同源性为84％.实时荧光定量PCR结果表明,该基因在木香花不同组织中均有表达且存在组织特异性,在幼叶及成熟叶中的表达量相对较高,在根、茎及花瓣中的表达量相对较低.RbRdr1基因在受黑斑病菌侵染不同时期的成熟叶片中,其相对表达量均表现为诱导积极上调,且在侵染6h最高.综上,RbRdrl基因可能参与了木香花与黑斑病菌早期的互作过程.

研究野蔷薇根总黄酮(total flavonoids from Rosa multiflora,TF-RM)对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞株(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)损伤的影响.SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组、辛伐他汀组(1.8 mg·kg-1 ·d-1)、TF-RM组(2.5 g·kg-1 ·d-1),每组10只.灌胃给药7d,腹主动脉取血,分离制备含药血清.采用ox-LDL诱导建立HUVEC损伤模型,分别加入15％辛伐他汀、5％ TF-RM、10％ TF-RM、15％TF-RM含药血清及空白血清.采用流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS),硝酸还原酶法检测上清液一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,ELISA法检测上清液内皮素(endothelin,ET-1)、P-选择素、E-选择素、细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)含量,Western blot法检测凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1,Lox-1)蛋白表达.与空白组比较,模型组HUVEC内ROS浓度及上清液ET-1、P-选择素、E-选择素、ICAM-1、VCAM-1、IL-1β含量显著升高(P＜0.05),上清液NO含量显著降低(P＜0.01),Lox-1蛋白表达显著增加(P＜0.05),TNF-α和IL-6有增加趋势.与模型组比较,TF-RM显著降低HUVEC内ROS浓度及上清液ET-1、P-选择素、E-选择素、ICAM-1、TNF-α、IL-1β含量(P＜0.05),显著升高上清液NO含量(P＜0.01),明显抑制Lox-1蛋白表达(P＜0.05),对上清液VCAM-1和IL-6含量有降低趋势.野蔷薇根总黄酮含药血清作用于凝集素样氧化低密度脂蛋白受体,通过减少细胞氧化损伤、调节血管活性物质、降低黏附分子及炎症级联反应发挥对血管内皮细胞的保护作用.

目的:建立金樱根基原之一的粉团蔷薇根质量控制标准.方法:性状、显微、TLC法进行定性鉴别;根据2020年版《中华人民共和国药典》方法进行检查和浸出物测定;UPLC测定粉团蔷薇根中构莓苷F1、阿江榄仁亭、野蔷薇苷含量,并以UPLC建立指纹图谱.结果:所建立的显微鉴别、薄层色谱法、UPLC含量测定和指纹图谱方法稳定可行.药材水分、总灰分及浸出物含量:水分不得过13.87％,总灰分不得过8.72％,浸出物不得少于5.08％;11个批次粉团蔷薇根中所测构莓苷F1、阿江榄仁亭、野蔷薇苷含量范围分别是0.44～12.45、0.32～3.79、1.10～8.08 mg·g-1,暂定本品按干燥品计算,含构莓苷F1不得少于0.35 mg·g-1,含阿江榄仁亭不得少于0.26 mg·g-1,含野蔷薇苷不得少于0.88 mg·g-1;同时测定了11批粉团蔷薇根药材的指纹图谱并建立了共有模式,标定共有峰15个,指认了其中的构莓苷F1、阿江榄仁亭、野蔷薇苷、蔷薇酸、委陵菜酸5个成分.结论:该研究所建方法专属性强,可从整体上对粉团蔷薇根进行鉴别和质量控制,也为最终制定金樱根药材质量标准打下基础.

目的 探讨野蔷薇根总黄酮(TF-RM)对H2O2诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)线粒体功能及凋亡通路的影响.方法 将SD雄性大鼠随机分正常对照组、维生素C组(0.08 g·kg-1)、TF-RM组(2.5 g·kg-1),每组10只.灌胃给药,每天1次,连续7d,制备含药血清.采用H2O2(950 μmol·L-1)诱导HUVEC损伤,并分别与维生素C及TF-RM低、中、高剂量(5％、10％、15％)含药血清共培养24 h.采用DCFH-DA荧光定量法检测HUVEC中活性氧(ROS)的含量;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位的变化;Fluo-4染色法检测细胞内Ca2+浓度;Western Blot法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-9、Caspase-3蛋白的表达情况.结果 与正常对照组比较,模型组HUVEC内的ROS水平、线粒体膜电位下降率、Ca2+浓度以及Bax蛋白表达量显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.01).与模型组比较,TF-RM各剂量组细胞内的ROS水平、Ca2+浓度及Bax蛋白表达量均明显降低(P＜0.05,P＜0.01),Bcl-2蛋白表达量升高(P＜0.05);TF-RM高剂量组的线粒体膜电位下降率明显降低(P＜0.05);TF-RM中剂量组的Caspase 9蛋白表达量明显降低(P＜0.05).结论 TF-RM能够改善H2O2诱导的HUVEC线粒体功能损伤,发挥对细胞凋亡的保护作用.

目的 研究洋金花Datura metel L.叶化学成分及其抗炎活性.方法 采用大孔吸附树脂、硅胶、ODS、HPLC法对洋金花叶70％乙醇提取物进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构,采用RAW264.7模型评价其体外抗炎活性.结果 从中分离得到28个化合物,分别鉴定为7,27-dihydroxy-1-oxowitha-2,5,24-trienolide(1)、acnistoferin(2)、baimantuoluoline K(3)、daturafoliside G(4)、daturafoliside H(5)、daturafoliside I(6)、daturafoliside R(7)、daturafoliside S(8)、daturametelin A(9)、daturametelin I(10)、daturametelin J(11)、daturataturin A(12)、baimantuoluoside H(13)、(22R)-27-hydroxy-7α-methoxy-1-oxowitha-3,5,24-trienolide(14)、柯里拉京(15)、desmethylagrimonolide 6-O-β-D-glucopyranoside(16)、仙鹤草内酯-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(17)、丁香脂素(18)、丁香脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(19)、1,6-di-O-coumaroyl glucopyranoside(20)、滨蒿内酯(21)、东莨菪内酯(22)、野蔷薇亭(23)、(-)-loliolide(24)、(+)-isololiolide(25)、邻苯二甲酸二丁酯(26)、对羟基苯甲醛(27)、没食子酸乙酯(28).化合物9、20能抑制LPS诱导细胞释放NO,IC50分别为25.14、16.26μmol/L.结论 化合物15～17、20、23、28为首次从茄科植物中分离得到,化合物2、19、24、27首次从曼陀罗属植物中分离得到.化合物9、20具有较强的抗炎活性.