乌苏烷型五环三萜化合物是三萜化合物的一种重要类型,具有抗肿瘤、抗炎、抑菌、降糖、降脂等药理活性,可用于医药保健等领域.目前主要的生产方式是从植物中直接提取和化学合成,但限于资源短缺、产率低、成本高等问题.近年来,运用合成生物学技术,模块化处理目标化合物的代谢途径,为乌苏烷型三萜化合物的大规模生产提供了解决方案.本文综述了近年来乌苏烷型五环三萜生物合成的研究进展,包括乌苏烷型五环三萜骨架的天然生物合成、后修饰酶以及利用代谢工程调控乌苏烷型五环三萜异源高效生产的策略,以期为乌苏烷型五环三萜的高效合成提供借鉴.

目的 研究芫花Daphnegenkwa枝叶中三萜类成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性.方法 运用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备高效液相色谱及重结晶等多种分离方法进行分离纯化,根据理化性质以及波谱数据对分离的单体化合物进行结构鉴定,对获得的化合物测定α-葡萄糖苷酶抑制活性.结果 从芫花95％乙醇提取物中共分离得到20个三萜类化合物,分别鉴定为山楂酸(1)、常春藤皂苷元(2)、齐墩果酸(3)、3β,13β-dihydroxyolean-11-en-28-oic acid(4)、11-oxoerythrodiol(5)、3β-hydroxy-11-oxo-olean-12-en-28-oicacid(6)、坡模酸(7)、3β-hydroxyolean-12-en-28-aldehyde(8)、3β-hydroxyolean-12-en-11-one(9)、3-羰基齐墩果酸(10)、古柯二醇(11)、oleanolicacid2-oxopropylester(12)、熊果酸(13)、ilelatifol A(14)、3β-hydroxy-11-oxours-12-en-28-oicacid(15)、2α,3β-dihydroxyurs-12-en-28-oicacid(16)、3β-hydroxy-11-oxo-ursan-12-ene(17)、2-oxopropyl(3β)-3-hydroxyurs-12-en-28-oate(18)、熊果醛(19)和 11 α-methoxyurs-12-ene-3β,12-diol(20).其中化合物1、3、4、13、15和16对α-葡萄糖苷酶具有较明显的抑制活性.结论 化合物6为首次从芫花中分离得到.化合物1～5、7～20为瑞香属内首次分离得到.化合物1、3、4、13、15和16表现出高于阳性对照阿卡波糖的α-葡萄糖苷酶的抑制活性,这表明芫花的枝叶中含具有降糖作用的天然活性分子.

利用酵母提取物(yeast extract,YE)作为模拟生物胁迫的诱导子,诱导花楸悬浮细胞(Sorbus pohuashanensis suspension cell,SPSC)产生生物胁迫作用,对胁迫下产生的三萜类次生代谢产物进行分离鉴定.采用正相硅胶、葡聚糖凝胶、中压制备液相等色谱技术对SPSC甲醇提取物进行分离纯化,并运用波谱分析技术鉴定出 26 个三萜类化合物,包括 15 个乌苏烷三萜(1～15),2 个 18,19-裂环乌苏烷三萜(16～17),4 个羽扇豆烷三萜(18～21),2 个环阿屯烷三萜(22～23),以及 3 个鲨烯型三萜(24～26).所有三萜均为首次从YE诱导SPSC中分离得到,其中化合物 22-O-acetyltripterygic acid A(1)为新化合物.对分离得到的化合物进行抗真菌、抗肿瘤和抗炎活性评估,结果表明化合物 1 对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7 释放一氧化氮(NO)具有一定的抑制作用.

乌苏烷型降三萜是在乌苏烷三萜碳骨架上减少1个或几个甲基,按其缺少甲基的位置可分为23-降、24-降、28-降、29-降、30-降、2-降、3-降和3,24-降8种类型.其药理活性包括抗癌、抗炎、抗菌和抑制酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶(ACAT)等.结合国内外有关乌苏烷型降三萜类化合物的文献,对乌苏烷型降三萜类化合物的植物分布、化学结构特征及药理活性3方面进行综述,为此类化合物的进一步研究提供参考依据.

建立山绿茶中海南冬青皂苷D、冬青皂苷A1、3β,19α-dihydroxyolean-12-ene-24,28-dioic acid (命名为ilexhainanin E) 、冬青素A、齐墩果酸、熊果酸等3对齐墩果烷型、乌苏烷型三萜同分异构体HPLC-ELSD含量测定方法,用于指导山绿茶药材的质量控制.以6种三萜成分为对照品,采用Waters XBridge C18色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5 μm),甲醇(A)-0. 5％甲酸水溶液 (B) 为流动相,梯度洗脱(0 ～18 min,70％ ～85％ A;18 ～20 min,85％ ～95％ A;20 ～35 min,95％ A),流速1. 0 mL· min-1;柱温30℃;ELSD漂移管70℃,载气为N2,流速2. 8 L·min-1.进样量10 μL.6批山绿茶药材中海南冬青皂苷D、冬青皂苷A1、ilexhainanin E、冬青素A、齐墩果酸、熊果酸质量分数分别为3. 7 ～8. 5,10. 3 ～22. 1,2. 8 ～5. 9,7. 8 ～14. 1,2. 6 ～3. 8,8. 8～11. 9 mg·g-1.该研究可用于山绿茶药材中三萜成分的含量测定,为该药材质量标准的完善提供参考.

心脑血管疾病是我国成年人群首要致死病因,且发病率呈上升和年轻化趋势,运用中药治疗心脑血管疾病十分必要.天然产物是治疗心脑血管药物的重要来源.三萜类化合物是植物体内重要的次生代谢产物,具有广泛的生物活性,其中五环三萜类表现出明显的抗炎、抗肿瘤、抗病毒等药理作用.近年来,越来越多的研究集中在五环三萜类化合物抗心脑血管疾病领域,对其结构进行衍生化从而提升活性、改善药性的研究也越发深入.通过查阅国内外五环三萜类化合物及其衍生物近10年的文献专利报道,综述了齐墩果烷、乌苏烷、羽扇豆烷、木栓烷4种类型五环三萜类化合物及其衍生物抗心脑血管疾病的研究进展,为治疗心脑血管疾病药物的研发提供依据和参考.

积雪草酸是一种天然存在的乌苏烷型五环三萜酸.近年研究表明积雪草酸能够通过多种机制途径对肿瘤细胞进行抑制,包括抑制肿瘤细胞增殖与诱导凋亡、阻滞肿瘤细胞周期、抑制肿瘤血管细胞生成、抑制肿瘤细胞侵袭迁移、辅助化疗增强其疗效.积雪草酸可以多靶向地抑制肿瘤细胞,但其作用靶点仍未明确;对于积雪草酸的临床前研究以及毒性研究尚少,积雪草酸的抗肿瘤作用仍有很大的研究空间.

明确的构效关系(SAR)是新药设计和研发的基础;一种先导化合物的成功筛选和发现,是新药研制成功的先决条件.合理应用定量构效关系(QSAR)进行定量药物设计,可以大大缩短研发周期,提高研发效率.研究定量构效关系的途径有多种,其结果的可行度大小,取决于其所采用的结构参数化方法、数学模型及数据的质量.目前,3D-QSAR已经成为了包括中药研发领域在内的最重要前期药物设计手段,其核心是分析方法和定量构效关系模型的建立.五环三萜皂苷作为天然药物中含量最为丰富的三萜皂苷之一,具有广泛的生物活性和药效作用,以其作为先导化合物,具有巨大的研究价值和较高的成药潜力.文章主要从QSAR的概念、发展过程、分析方法出发,结合五环三萜皂苷的分子结构特性和近年的研究实例,总结和归纳了3D-QSAR技术在筛选五环三萜皂苷先导化合物中的应用策略和一般研究步骤,并对QSAR未来发展方向进行了展望.

乌苏烷型三萜大多是乌苏酸衍生物,该类化合物主要以游离或糖苷的形式存在于金樱根、四季青、积雪草等植物中,具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎、抑菌等药理活性,广泛应用于医药和化妆品领域.查阅近五年来国内外有关文献,对天然产物中乌苏烷型三萜类化学成分及药理活性方面的最新研究进行综述,以期为更好地开发利用该类化学成分提供参考依据.

目的 研究蔷薇科植物金樱子Rosa laevigata根的化学成分.方法 采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS柱色谱、重结晶及半制备液相分离和纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构,并运用MTT法对所分离化合物对人宫颈癌HeLa、人胃腺癌BGC823、人结肠癌HCT-116及人肝癌HepG-2细胞的细胞毒活性进行检测.结果 从金樱根乙醇提取物中分离得到了9个化合物,分别鉴定为2α,3β,11α,19α-四羟基乌苏-12-烯-28-羧酸-β-D-吡喃葡萄糖基酯(1)、野鸦椿酸(2)、2α,3β,19α-三羟基乌苏-23-醛-12-烯-28-羧酸-β-D-吡喃葡萄糖基酯(3)、野蔷薇苷(4)、苦莓苷F1(5)、2α,3β,19α-三羟基齐墩果-12-烯-28-羧酸-β-D-吡喃葡萄糖基酯(6)、桦木酸(7)、β-谷甾醇(8)和儿茶素(9);其中化合物7对BGC823及HeLa细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为19.0和19.6 μmol/L,化合物8对BGC823及HeLa细胞的IC50分别为16.2和15.8 μmol/L.结论 化合物1为新化合物,命名为金樱子皂苷,化合物3为首次从该植物中分离到,化合物7和8对BGC823及HeLa细胞显示出中等强度的细胞毒活性.