目的:探究汉黄芩素调节Hippo/Yes相关蛋白(YAP)信号通路对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌纤维化的影响.方法:采用腹腔注射阿霉素的方式构建大鼠CHF模型,成功造模36只大鼠,将其随机分为模型组、汉黄芩素组(汉黄芩素100 mg/kg)、汉黄芩素+维替泊芬组(100 mg/kg汉黄芩素+100 mg/kg维替泊芬),每组12只.剩余12只大鼠作为对照组.采用彩色多普勒超声系统检测各组大鼠心功能参数:左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD);称重并计算各组大鼠心脏质量指数(HMI)和左心室质量指数(LVMI);酶联免疫吸附法(ELISA)检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;Masson染色法检测大鼠心肌胶原容积分数(CVF)和血管周围纤维面积和血管管腔面积比值(PVCA/LA);苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织病理学变化;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测大鼠心肌组织Hippo/YAP信号通路相关蛋白、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、结缔组织生长因子(CTGF)表达.结果:与对照组相比,模型组大鼠LVEF、LVFS、心肌组织SOD水平及哺乳动物ste-20样激酶(MST)1/2、大型肿瘤抑制因子(LATS)1/2磷酸化水平明显降低(P＜0.05),LVEDD、LVESD、HMI、LVMI、心肌组织MDA水平、CVF、PVCA/LA、心肌组织YAP、MMP-2、MMP-9、CTGF蛋白表达明 显升高(P＜0.05),心肌组织出现大量胶原纤维沉积和损伤.与模型组相比,汉黄芩素组LVEF、LVFS、心肌组织SOD水平、MST1/2、LATS1/2磷酸化水平明显升高(P＜0.05),LVEDD、LVESD、HMI、LVMI、心肌组织 MDA 水平、CVF、PVCA/LA、心肌组织 YAP、MMP-2、MMP-9、CTGF 蛋白表达明显降低(P＜0.05),心肌组织胶原纤维沉积和损伤减少.维替泊芬增强了汉黄芩素对CHF大鼠心肌纤维化的改善作用.结论:汉黄芩素可能通过激活Hippo/YAP信号通路、抑制YAP表达来减轻CHF大鼠心肌纤维化.

目的:观察脉冲电磁场(PEMF)对椎间盘退行性病变(IDD)大鼠髓核组织及离体髓核细胞神经肽Y(NPY)的调控作用，并探讨其对髓核细胞凋亡及基质降解的影响。方法:采用随机数字表法将18只SD大鼠分为对照组、IDD模型组(简称模型组)和PEMF组。将模型组及PEMF组大鼠制成IDD动物模型，PEMF组于造模后给予PEMF干预，每天曝磁1次，连续干预14 d。同期体外培养大鼠原代髓核细胞并分为对照组、TNF-α模型组(简称模型组)和TNF-α＋PEMF组(简称PEMF组)，分别向模型组、PEMF组细胞培养板内注入25 μL TNF-α(终浓度为50 ng/ml)，PEMF组随后给予曝磁处理，每天曝磁1次，连续干预6 d，对照组则同期向细胞培养板内注入25 μL磷酸盐缓冲液(PBS)。于造模8周后采用番红固绿染色评估各组大鼠椎间盘组织病理形态学改变；同时检测各组大鼠椎间盘及离体髓核细胞NPY、神经肽Y2受体(NPY2R)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2因子(Bcl-2)、Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)、基质金属蛋白酶-3(MMP3)的表达水平。结果:模型组椎间盘纤维组织出现断裂、褶皱，且多糖、蛋白质等成分明显减少，骨纤维增多。PEMF组椎间盘纤维组织断裂较少，软骨组织增多，纤维环与髓核边界较清晰。模型组大鼠椎间盘纤维环及髓核组织中均有NPY表达，且NPY、NPY2R表达量均较对照组明显增加( P<0.05)，PEMF组NPY、NPY2R表达量较模型组进一步升高( P<0.05)。与对照组比较，模型组Bax含量显著增加( P<0.05)，Bcl-2表达明显减少( P<0.05)，而PEMF组Bax含量较模型组明显降低( P<0.05)。模型组Col-Ⅱ水平显著低于对照组( P<0.05)，MMP3蛋白表达则明显增强( P<0.05)；PEMF组Col-Ⅱ mRNA表达较模型组显著升高( P<0.05)，MMP3蛋白表达明显降低( P<0.05)。各组离体髓核细胞上述指标检测结果与在体实验观察结果基本一致。 结论:PEMF干预可能通过上调NPY表达，阻滞Bax/Bcl-2信号通路抑制髓核细胞凋亡，并通过增加Col-Ⅱ含量，减少MMP3表达以逆转ECM代谢失衡，有助于延缓IDD退变进程。

目的:利用生物信息学方法挖掘呼吸机相关性肺损伤（VILI）小鼠的差异表达基因（DEG），并通过构建VILI小鼠模型对关键基因进行验证。方法:①实验1（生物信息学分析）：从基因表达数据库（GEO）下载VILI与自主呼吸对照组小鼠的肺组织基因芯片数据GSE9368和GSE11662，通过统计分析获得DEG，运用韦恩图获得两个数据的共同DEG，然后使用DAVID在线数据库对共同DEG进行基因本体（GO）功能注释和京都基因与基因组百科（KEGG）通路富集分析，最后利用基因与蛋白质相互作用检索在线数据库（STRING）对共同DEG进行基因编码蛋白相互作用（PPI）分析，并运用CytoScape软件、分子复合物检测分析插件（MCODE），以及CytoHubba插件中最大团中心性（MCC）、最大邻居连通度（MNC）与度（degree）算法进行拓扑分析，筛选出关键基因。②实验2（相关基因编码蛋白验证）：构建C57BL/6小鼠大潮气量（20 mL/kg）VILI模型，并设自主呼吸对照组。取小鼠肺组织进行苏木素-伊红（HE）染色，观察肺组织病理学改变；并对实验1中筛选出的关键基因编码蛋白进行免疫组化验证。结果:①实验1结果：GSE9368数据中筛选出114个DEG，其中上调99个，下调15个；GSE11662数据中筛选出258个DEG，其中上调188个，下调70个；获得共同DEG 66个，其中上调61个，下调5个。GO功能注释结果表明，共同DEG参与炎症反应、免疫应答、白细胞及中性粒细胞趋化浸润等过程；KEGG通路富集分析提示共同DEG主要富集于细胞黏附、细胞因子-细胞因子受体相互作用及肿瘤坏死因子（TNF）信号通路等。通过STRING及CytoScape构建差异基因PPI网络图和重要子模块，并获得拓扑分析MCC、MNC及degree算法得出的交集基因，分别为细胞因子信号转导抑制因子3（SOCS3）、白细胞介素-1β（IL-1β）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、整合素Itgam、CXC型趋化因子配体2（CXCL2）、CXC型趋化因子受体2（CXCR2）、L-选择素Sell及CC型趋化因子受体1（CCR1）。②实验2结果：构建大潮气量VILI小鼠模型结果显示，与自主呼吸对照组相比，机械通气结束后0 h小鼠肺组织有所损伤；通气结束后6 h肺组织结构受损明显，肺泡腔可见不同程度出血和塌陷，肺泡壁明显增厚，肺泡腔及间质还可见炎症细胞浸润。对拓扑分析交集前3位基因IL-1β、SOCS3、MMP-9的编码蛋白进行免疫组化染色，结果显示，随通气时间延长，小鼠肺组织中IL-1β、SOCS3、MMP-9蛋白表达逐渐上调，6 h时与自主呼吸对照组比较差异均有统计学意义〔IL-1β（积分 A值）：8.40±2.67比5.10±0.94，SOCS3（积分 A值）：9.74±1.80比5.95±1.31，MMP-9（积分 A值）：11.45±6.20比5.36±1.28，均 P<0.05〕。 结论:基于GSE9368和GSE11662数据的生物信息学分析发现，VILI与炎症损伤、细胞因子及免疫细胞浸润相关；IL-1β、SOCS3、MMP-9蛋白可能为VILI生物标志物。

目的:探讨微小RNA（miR）-153-3p如何与α-突触核蛋白（snca）相互作用影响小鼠的骨质疏松进程。方法:采用切除双侧卵巢构建骨质疏松（OVX）小鼠模型（品系），通过苏木精-伊红（HE）染色明确病理学改变。通过实时荧光定量反转录聚合酶链反应、免疫蛋白印记实验和免疫组织化学染色对目标基因的信使RNA（mRNA）及蛋白表达进行定量。核因子-κB活化因子受体配体（RANKL）处理小鼠单核巨噬细胞白血病细胞（RAW264.7细胞）后，显微镜下观察细胞形态，噻唑蓝（MTT）法评价细胞活力，Transwell实验检测破骨细胞迁移能力；双荧光素酶实验验证miR-153-3p与snca的相互作用。结果:snca在OVX小鼠中低表达（ t＝11.436， P<0.05），miR-153-3p在OVX小鼠中高表达（ t＝15.833， P<0.05）。抑制miR-153-3p或过表达snca抑制骨质疏松，snca在RANKL诱导的RAW264.7细胞中低表达（ t＝11.796， P<0.05），miR-153-3p在RANKL诱导的RAW264.7细胞中高表达（ t＝10.448， P<0.05）。过表达snca抑制破骨细胞分化[抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）： t＝7.493， P<0.05；Cathepsin K： t＝9.536， P<0.05；基质金属蛋白酶（MMP）-9： t＝20.371， P<0.05；MMP-2： t＝31.924， P<0.05]。miR-153-3p通过抑制snca表达促进破骨细胞分化（ F＝123.390， P<0.05），过表达snca能恢复过表达miR-153-3p的效果（ F＝136.515， P<0.05）。双荧光素酶及蛋白检测实验结果表明miR-153-3p能负向调控snca的表达（ F＝92.528， P<0.05）。 结论:抑制miR-153-3p通过促进snca表达抑制破骨细胞功能，进而抑制小鼠体内骨质疏松进程。

目的:探究微小RNA 562（miR-562）调控成纤维细胞生长因子受体1（FGFR1）对结直肠癌细胞迁移及侵袭的影响。方法:选取2019年10月至2020年10月十堰市人民医院（湖北医药学院附属人民医院）25例行手术切除术的结直肠癌患者，获取其结直肠癌组织及肿瘤边缘>5 cm处正常癌旁组织样本。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测癌旁组织、结肠癌组织、人正常结直肠细胞（FHC细胞）和人结直肠癌细胞系（SW480、SW620、HT29及HCT116细胞）中miR-562的表达。将SW480细胞分为对照组、miR-NC组、miR-562 mimics组、miR-562 mimics+pcDNA3.1组、miR-562 mimics+pcDNA3.1-FGFR1组。CCK-8法检测SW480细胞增殖；Transwell法检测SW480细胞侵袭迁移；双荧光素酶报告基因检测miR-562和FGFR1靶向关系；Western blot检测SW480细胞中FGFR1、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、基质金属蛋白酶2（MMP2）的表达情况。结果:与癌旁组织相比，结肠癌组织中miR-562表达[（0.59±0.08）vs（1.01±0.10）]显著降低（ P<0.05）；与FHC细胞（1.00±0.08）相比，SW480、SW620、HT29及HCT116细胞中miR-562表达水平（0.48±0.06）、（0.76±0.14）、（0.70±0.11）、（0.56±0.10）显著降低（ P<0.05），且其表达水平在SW480细胞中最低；与对照组相比，miR-562 mimics组miR-562表达水平、增殖抑制率显著增加，FGFR1、CyclinD1表达水平、迁移及侵袭细胞数、MMP2表达水平显著降低（ P<0.05）；FGFR1是miR-562的潜在靶基因；FGFR1高表达可逆转miR-562过表达对SW480细胞迁移及侵袭的抑制作用。 结论:miR-562过表达可能通过靶向抑制FGFR1表达来抑制SW480细胞的迁移及侵袭。

目的:评价自体血小板分离(APP)回输对全弓置换术患者术后急性肾损伤的影响。方法:选择全麻下拟行全弓置换术患者60例，性别不限，年龄18～64岁，BMI 19～34 kg/m 2，ASA分级Ⅲ或Ⅳ级。采用随机数字表法分为3组( n＝20)：APP回输组(A组)、急性等容血液稀释组(N组)和单纯自体血回收回输组(C组)。A组于手术开始前完成APP，浓缩红细胞根据术中情况及时回输，贫血小板血浆和富血小板血浆待鱼精蛋白中和后回输；N组在手术开始前完成急性等容血液稀释(ANH)，放出的全血待鱼精蛋白中和后回输；C组在术中单纯行自体血回收及洗涤红细胞回输，A组和N组均行自体血回收。分别于麻醉诱导后10 min(T 1)、体外循环后5 min(T 2)、手术结束即刻(T 3)、术后24和48 h(T 4，5)时采集颈内静脉血及尿液，测定红细胞压积(Hct)、血浆游离血红蛋白(fHb)、尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、组织金属蛋白酶抑制物-2(TIMP-2)和胰岛素样生长因子结合蛋白-7(IGFBP-7)的浓度，计算[TIMP-2]×[IGFBP-7]。于术前、术后当天、术后1、2和3 d时测定肌酐(Scr)、肾小球滤过率(GFR)、尿素、尿酸和胱抑素C浓度。记录术中异体血制品输入量、术后机械通气时间、ICU停留时间及血液透析情况。 结果:与C组比较，A组和N组术后异体红细胞输注量和A组异体血小板输注量减少，N组T 2时Hct降低，N组和A组T 3和T 4时fHb降低，A组术后当天、术后1 d时Scr降低，术后当天、术后2和3 d时胱抑素C降低( P<0.05)；与N组比较，A组术后异体血小板输注量减少，T 3～5时NGAL和TIMP-2浓度、T 3，4时IGFBP-7浓度和[TIMP-2]×[IGFBP-7]、术后当天、术后1 d时Scr、术后当天、术后2和3 d时胱抑素C浓度降低( P<0.05)。 结论:APP回输减轻全弓置换术患者术后急性肾损伤的效果优于急性等容血液稀释。

目的:探讨中波紫外线(UVB)照射人皮肤成纤维细胞后，白藜芦醇对细胞氧化损伤的保护作用。方法:体外培养成纤维细胞，30 J/cm 2的UVB照射后加入不同浓度白藜芦醇(0.01、0.05 mmol/L)干预处理，同时设置空白及UVB对照组，在细胞继续培养24、48、72 h后，三个时间点上CCK8法检测细胞增殖活性，实时荧光定量PCR测定成纤维细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-1、-3、-9及金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1的mRNA水平。 结果:与UVB对照组比较，在干预72 h后，0.05 mmol/L白藜芦醇组有明显抑制UVB照射后细胞增殖率降低作用( P<0.05)。0.01、0.05 mmol/L白藜芦醇组均有抑制成纤维细胞中MMP-1、-3、-9 mRNA的高表达作用，与UVB对照组比较，0.05 mmol/L白藜芦醇组48 h时间点即可观察到明显抑制作用( P<0.05)，而0.01 mmol/L白藜芦醇组干预72 h后才显示明显抑制作用( P<0.05)。0.05 mmol/L白藜芦醇组干预48、72 h后，明显抑制细胞中TIMP-1 mRNA低表达作用( P<0.05)。 结论:0.05 mmol/L白藜芦醇可能通过调节UVB照射后MMP-1、-3、-9和TIMP-1 mRNA的表达从而对成纤维细胞氧化损伤起到一定的保护。

目的:探讨富血小板血浆（PRP）经TGF-β1/Smad2/3介导MMP/TIMP表达，治疗大鼠椎间盘退变（IVDD）的作用机制。方法:将40只IVDD大鼠随机分为4组，每组10只，PRP组：腰椎间盘（L4/5、L5/6）内注射10 μl PRP；PRP+TGF-β1抑制组：10 μl PRP+10 μl TGF-β1抑制剂混合物；TGF-β1抑制剂组：10 μl TGF-β1抑制剂；生理盐水对照组：10 μl理盐水。各组治疗后2、4周采用HE、Masson染色观察椎间盘退变情况；RT-qPCR检测TGF-β1，Smad2/3，MMP1、3，TIMP1 mRNA表达水平；免疫组化检测椎间盘内TGF-β1、Ⅰ型胶原蛋白表达丰度；通过分析比较不同组间、不同时间椎间盘内各种指标的变化，评估大鼠椎间盘退变情况。结果:治疗2、4周后HE、Masson染色观察发现PRP组优于另外3组；免疫组化检测PRP组TGF-β1表达优于另外3组，而Ⅰ型胶原蛋白表达少于另外3组；治疗2周后RT-qPCR检测PRP组大鼠椎间盘内TGF-β1（2.14±0.11），Smad2（3.47±0.18）、Smad3（1.77±0.09），TIMP1（2.80±0.18）的mRNA相对表达量明显高于其他3组（ P<0.05），MMP1（0.70±0.07）、MMP 3（0.67±0.06）的mRNA相对表达量明显低于生理盐水组和TGF抑制剂组（ P<0.05）；在治疗4周后PRP组TGF-β1（2.45±0.23），Smad2（3.82±0.06）、Smad 3（3.22±0.15），TIMP1（2.96±0.06）的mRNA相对表达量进一步升高，明显高于其他3组（ P<0.05），MMP1（0.39±0.05）、MMP3（0.51±0.07）的mRNA相对表达量逐渐减少，明显低于生理盐水组和TGF抑制剂组（ P<0.05）。 结论:PRP通过TGF-β1/Smad2/3介导MMP/TIMP表达，改善退变椎间盘理化指标，从而延缓椎间盘退变。

目的:探究光动力疗法(PDT)联合牙周基础治疗对糖尿病合并慢性牙周炎患者炎症因子水平的影响。方法:回顾性选取2020年1月至2021年1月海南医学院第一附属医院收治的87例糖尿病合并慢性牙周炎患者的临床资料，按其不同治疗方式分为PDT联合治疗组(A组，50例)和对照组(B组，37例)。A组患者在常规非手术方法治疗的基础上实施PDT辅助治疗，功率100~140 mW，照射功率密度100 mW/cm 2，光斑直径4 mm，时间1 min；B组患者单纯采取常规非手术方法进行治疗。观察两组治疗1个月后的临床疗效，比较两组患者治疗前和治疗1个月后龈沟液中白细胞介素-1β(IL-1β)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)水平改变，记录牙周状态指标包括牙周附着丧失(AL)距离、牙龈出血指数(BI)、牙周探诊深度(PD)、探诊出血指数(BOP)。 结果:治疗1个月后，A组患者临床总有效率(96.0%)显著高于B组(73.0%)，差异有统计学意义( P<0.05)。治疗1个月后，两组患者IL-1β、HMGB1、IL-8、TNF-α水平均低于治疗前(均 P<0.05)，且A组显著低于B组(均 P<0.05)；治疗1个月后，两组TIMP-1水平均高于治疗前(均 P<0.05)，且A组显著高于B组( P<0.05)。治疗1个月后，两组患者AL、BI、PD及BOP指标水平均较治疗前降低(均 P<0.05)，且A组低于B组(均 P<0.05)。 结论:对糖尿病合并慢性牙周炎患者采用PDT辅助治疗疗效显著，能够有效减轻牙周炎症反应，改善患者牙周情况。

目的:探讨连续性血液净化（CBP）治疗重症心力衰竭合并肾衰竭患者的疗效及对血清p66Shc蛋白、可溶性fms样络氨酸激酶受体1（sFlt-1）、组织金属蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）水平的影响。方法:选择2017年3月至2019年10月朝阳市中心医院收治的重症心力衰竭合并肾衰竭患者97例，按随机数字表法分为对照组（48例）和观察组（49例），对照组采用间歇性血液透析（IHD）治疗，观察组接受CBP治疗，比较两组的治疗效果和治疗前后肾功能、心功能指标、p66Shc蛋白、sFlt-1、TIMP-1水平及不良反应发生情况。结果:观察组治疗后总有效率高于对照组[79.59%（39/49）比60.42%（29/48）]，差异有统计学意义（χ 2 = 4.25， P<0.05）。治疗1周后，观察组血尿素氮、血肌酐、血磷、血尿酸、β2微球蛋白水平低于对照组[（12.63 ± 3.14）mmol/L比（16.23 ± 4.74）mmol/L、（175.52 ± 39.57）μmol/L比（240.15 ± 50.18）μmol/L、（1.20 ± 0.23）mmol/L比（1.37 ± 0.31）mmol/L、（265.15 ± 34.79）μmol/L比（297.52 ± 50.07）μmol/L、（28.75 ± 5.14）mg/L比（33.52 ± 7.39）mg/L]，差异有统计学意义（ P<0.05）；观察组左室射血分数、每搏量及心输出量高于对照组[（53.63 ± 7.96）%比（49.52 ± 5.14）%、（58.45 ± 15.23）ml比（49.58 ± 9.52）ml、（4.59 ± 0.52）L/min比（4.01 ± 0.23）L/min]（ P<0.05）；观察组p66Shc、sFlt-1、TIMP-1水平低于对照组[1.11 ± 0.36比1.45 ± 0.42、（15.76 ± 4.34）μg/L比（19.87 ± 5.66）μg/L、（59.14 ± 10.57）μg/L比（65.39 ± 9.45）μg/L]，差异有统计学意义（ P<0.05）。观察组治疗后总不良反应发生率低于对照组[14.29%（7/49）比31.25%（15/48）]，差异有统计学意义（χ 2 = 3.98， P<0.05）。 结论:CBP治疗重症心力衰竭合并肾衰竭患者疗效优于IHD，且可改善患者心肾功能，降低p66Shc蛋白、sFlt-1、TIMP-1水平，减少不良反应，安全可行。