目的:探讨金属调节转录因子-1(MTF-1)对破骨细胞分化和功能的影响并探讨其可能的分子机制。方法:采用定量聚合酶链反应(qPCR)检测破骨细胞分化过程中MTF-1的表达变化。应用MTF-1小分子抑制剂LOR-253(50、100 nmol/L)抑制MTF-1转录活性后，采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、TRAP酶活检测、qPCR实验及骨板吸收试验，检测MTF-1功能抑制对破骨细胞分化与功能的影响。采用单因素方差分析ANOVA和SNK检验分析组间差异。结果:核因子κB受体活化因子配体(RANKL)处理后1d，RAW264.7细胞的MTF-1表达水平升高达5.13倍。LOR-253下调MTF-1转录活性后，RANKL诱导形成的破骨细胞数目显著减少( F＝686.079， P<0.05)，对照组为(74.6±3.2)个，50 nmol/L组为(35.2±1.7)个，100 nmol/L组为(9.2±0.7)个；TRAP酶活性也显著降低( F＝2 119.937， P<0.05)；骨板吸收面积明显减少( F＝463.123， P<0.05)，对照组为(75.0±6.3)%，50 nmol/L组为(49.7±3.4)%，100 nmol/L组为(15.9±1.4)%；破骨细胞标志基因(抗酒石酸酸性磷酸酶、组织蛋白酶K、基质金属蛋白酶9)及分化调控基因活化T细胞核因子-1(NFATC1)的表达均明显下调，50 nmol/L组分别为0.70±0.02、0.65±0.02、0.34±0.01、0.80±0.01，100 nmol/L组分别为0.60±0.01、0.40±0.02、0.30±0.01、0.75±0.01( F＝780.000、1 735.929、6 954.000、787.500， P<0.05)。 结论:采用LOR-253抑制MTF-1转录活性明显抑制了破骨细胞的分化与功能，而NFATC1在其中发挥了重要作用。

目的:研究抑制高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对大鼠脊髓损伤（SCI）后星形胶质细胞（AS）基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的作用及分子机制。方法:改良Allen打击法制作Sprague-Dawley（SD）大鼠SCI模型，使用丙酮酸乙酯（EP）或甘草甜素（GL）抑制HMGB1作用，将大鼠分为假手术组、SCI组、SCI+EP（50 mg/kg）组、SCI+GL（100 mg/kg）组，观察大鼠脊髓AS的胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、MMP-9的蛋白表达。体外培养SD大鼠脊髓AS，建立氧糖剥夺/复氧（OGD/R）模型，观察OGD 6 h/R 6、12、24、48 h后脊髓AS的MMP-9蛋白表达，以表达最高的时间点用于后续实验为OGD/R组；通过HMGB1 shRNA或EP抑制HMGB1，观察HMGB1对OGD/R处理AS的MMP-9蛋白表达的作用；并使用Toll样受体4（TLR4）、 β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)及核转录因子- κB（NF- κB）的抑制剂，观察HMGB1/TLR4/TRIF/NF- κB通路在OGD/R处理AS的MMP-9蛋白表达中的作用机制。 结果:Western blot结果表明，SCI后1 d大鼠脊髓MMP-9蛋白表达增高，SCI+EP组和SCI+GL组大鼠脊髓MMP-9蛋白表达较SCI组显著减少，差异均有统计学意义（ P<0.001）。免疫荧光结果表明，GFAP与MMP-9蛋白在SCI后脊髓中共定位表达，SCI+EP组和SCI+GL组大鼠脊髓的GFAP、MMP-9蛋白表达较SCI组显著减少，差异均有统计学意义（ P<0.05）。由于在体外培养的脊髓AS中，OGD 6 h/R 12 h的MMP-9蛋白表达较正常组和OGD 6 h/R 6、24、48 h显著增加，以OGD 6 h/R 12 h为OGD/R组。OGD/R+HMGB1 shRNA组和OGD/R+EP组中AS中的MMP-9蛋白表达较OGD/R组显著减少，差异均有统计学意义（ P<0.001）。抑制TLR4、抑制TRIF或抑制NF- κB均可显著减少OGD/R的AS的MMP-9蛋白表达，差异均有统计学意义（ P<0.001）。 结论:抑制HMGB1作用减少大鼠SCI后脊髓AS的MMP-9蛋白表达，并减少OGD/R处理后AS的MMP-9蛋白表达。HMGB1通过TLR4/TRIF/NF- κB信号通路调节OGD/R处理的AS中的MMP-9蛋白表达。

目的:探究虎杖苷调节酪氨酸激酶3/信号转导因子和转录激活因子3(JAK3/STAT3)信号通路对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨退变的影响。方法:采用随机数字表法将50只大鼠分为假手术组、模型组、虎杖苷低剂量组、虎杖苷高剂量组、虎杖苷高剂量＋Colivelin(JAK3/STAT3激活剂)组，每组大鼠各10只。改良Mankin评分评价软骨退变程度；酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)检测血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Ⅰ型胶原交联羧基端肽(CTX-Ⅰ)、Ⅱ型胶原CTX(CTX-Ⅱ)水平；苏木精-伊红(HE)染色和番红O-固绿染色观察关节软骨组织形态学改变；原位末端转移酶标记法(TUNEL)观察大鼠软骨细胞凋亡情况；蛋白质印迹法(Western blot)检测大鼠关节软骨组织基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13、JAK3、STAT3蛋白。组间比较采用单因素方差分析。结果:与假手术组比较，KOA模型组大鼠软骨严重退变，软骨表面膜样结构被显著破坏，与模型组比较，虎杖苷高剂量组大鼠软骨退变程度和软骨表面膜样结构破坏程度显著减轻；虎杖苷高剂量组大鼠Mankin评分、血清IL-1β、IL-6、TNF-α、CTX-Ⅰ、CTX-Ⅱ水平、细胞凋亡率、软骨组织MMP-3、MMP-13、磷酸化JAK3(p-JAK3)/JAK3、p-STAT3/STAT3蛋白相对表达显著低于模型组[(5.30±1.13)分比(12.90±2.36)分、(11.49±1.57) pg/ml比(28.61±3.85) pg/ml、(3.18±0.52) pg/ml比(7.59±1.16) pg/ml、(6.23±1.14) pg/ml比(16.83±1.94) pg/ml、(15.78±1.71) pg/ml比(28.53±3.65) pg/ml、(10.86±1.39) pg/ml比(19.61±2.37) pg/ml、(6.76±0.78)%比(21.83±1.84)%、(0.41±0.03)比(0.74±0.06)、(0.81±0.07)比(1.24±0.11)、(0.46±0.04)比(0.87±0.08)、(0.57±0.05)比(1.05±0.09)， t＝9.185、13.021、10.970、14.897、10.003、10.071、23.846、15.556、14.749、14.496、14.743， P<0.05]；激活剂Colivelin可部分逆转虎杖苷对KOA大鼠软骨的保护作用。 结论:虎杖苷通过抑制JAK3/STAT3信号通路可降低炎性反应，进而改善膝骨关节炎大鼠软骨退变。

目的:检测Cullin1基因在胃癌组织和细胞株中的表达，并探讨其参与肿瘤上皮-间充质转化(EMT)的机制。方法:选取2020年1月至2020年3月于河北医科大学第四医院行胃癌根治术12例患者离体标本癌及癌旁组织，应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)技术分别检测12例胃癌与配对癌旁组织中Cullin1 mRNA和蛋白的表达；合成抑制内源性Cullin1表达的小干扰RNA(siRNA)转染胃癌细胞为实验组，非特异性siRNA转染(NS-siRNA)为对照组；用噻唑蓝(MTT)实验检测肿瘤细胞的增殖活性；应用划痕实验及Transwell小室侵袭实验检测细胞的侵袭迁移能力；通过RT-qPCR及Western blot检测转染前后细胞中EMT相关基因E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、锌指转录因子(Snail)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。组间比较采用 t检验或 χ2检验。 结果:胃癌组织中Cullin1 mRNA和蛋白的表达水平高于癌旁正常组织(4.19±0.50比1.19±0.28， t＝-0.583， P<0.05；0.99±0.07比0.40±0.11， t＝16.102， P<0.05)。MTT显示转染细胞48 h后，Cullin1-siRNA组细胞活性低于NS-siRNA组和空白组(0.55±0.06比1.16±0.10， t＝1.061， P<0.05；0.55±0.06比1.22±0.10， t＝13.963， P<0.05)。Cullin1-siRNA转染后细胞的侵袭能力低于NS-siRNA组和空白组(39.17±2.23比83.67±5.79， F＝720.65， P<0.05；39.17±2.23比88.00±4.29， F＝115.34， P<0.05)；Cullin1-siRNA组细胞迁移能力低于NS-siRNA组和空白组[(0.50±0.09) mm比(0.91±0.05) mm， t＝-10.064， P<0.05；(0.50±0.09) mm比(0.89±0.07) mm， t＝-8.369， P<0.05]。Cullin1-siRNA转染后SGC7901细胞后EMT相关基因N-cadherin、Snail、MMP-9表达均低于空白组表达(1.04±0.05比0.55±0.04， t＝10.845， P<0.05；1.05±0.07比0.44±0.04， t＝10.493， P<0.05；1.04±0.05比0.37±0.03， t＝15.882， P<0.05)。 结论:Cullin1基因可能通过调节部分EMT基因而促进了胃癌侵袭转移。

目的:探究人牙槽窝肉芽组织的细胞组成与异质性并构建单细胞图谱，解析肉芽组织在炎性微环境下通过自然转归的潜在结局。方法:纳入2022年9月至2023年8月就诊于第四军医大学口腔医院颌面外科，因中、重度牙周炎行牙拔除术并拟行延期位点保存术或自体牙移植术的患者12例，收集其牙槽窝肉芽组织，分别用HE染色和单细胞转录组测序技术（ScRNA-seq）观察不同类型肉芽组织细胞构成、组织形态学变化，获得特定微环境下的炎性牙槽窝肉芽组织细胞序列差异，构建出人牙槽窝不同类型肉芽组织的单细胞图谱，并探索炎性肉芽组织转归过程中细胞类型分布及关键基因变化的时空规律。结果:HE染色显示，牙槽窝炎性肉芽组织中含有大量炎性细胞浸润，保留炎性肉芽组织待自然转归3周后，其组织学形态与修复性肉芽组织愈合形态基本一致。ScRNA-seq共捕获肉芽组织细胞20 448个，基因表达定量检测分析炎性肉芽组织、自然转归性肉芽组织及修复性肉芽组织基因总数分别为33 835、36 058、34 719个。肉芽组织在单细胞水平被注释为血管内皮细胞、间充质干细胞、成纤维细胞等10个细胞亚群。炎性肉芽组织与自然转归性肉芽组织在细胞组成占比存在差异。拟时序分析展示了肉芽组织中免疫反应与血管新生参与组织转归愈合的两种主要结局。参与炎症调控和免疫反应的基因胰岛素样生长因子结合蛋白 5（Igbp5）、锌指蛋白（Zfp36）和热休克蛋白（Hspa1b），以及参与细胞外基质分泌及血管、纤维形成的相关基因组织金属蛋白酶抑制因子3（Timp3）、骨膜蛋白（Postn）和G蛋白信号调节因子5（Rgs5）在两种肉芽组织中的表达存在显著差异。结论:炎性肉芽组织在细胞组成占比、基因表达、生物学功能等方面与自然转归性肉芽组织存在异质性，不刮除牙槽窝炎性肉芽组织待其自然转归后在组织学及单细胞水平展现出与修复性肉芽组织相似的细胞结构组成，并通过免疫反应及组织重塑调节炎症反应及愈合过程。

目的:探讨薯蓣皂苷对耐奥沙利铂(L-OHP)的结肠癌细胞株HT-29/L-OHP影响及其机制。方法:常规培养结肠癌细胞株HT-29、耐药细胞株HT-29/L-OHP。噻唑蓝(MTT)法检测0～72 h细胞活性。以5 μmol/L的薯蓣皂苷处理细胞后流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡；划痕实验及Transwell小室实验检测细胞侵袭和迁移能力；实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测薯蓣皂苷干预48 h对HT-29/L-OHP细胞多药耐药基因1(MDR1)、肺耐药蛋白(LRP)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、CXC趋化因子受体7(CXCR7)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、Livin及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3活性的影响。应用SPSS 25.0软件对数据进行ANOVA分析和 t检验。 结果:MTT结果显示，薯蓣皂苷对HT-29、HT-29/L-OHP细胞有抑制作用，呈时间-剂量依赖特征( P<0.05)。5 μmol/L的薯蓣皂苷处理后HT-29/L-OHP细胞凋亡率处理组为(19.05±2.99)%，对照组为(9.07±2.84)%( t＝5.928， P<0.01)；处理组HT-29/L-OHP细胞迁移率为(50.45±10.77)%，对照组(78.25±10.16)%( t＝-4.599， P<0.01)；处理组HT-29/L-OHP细胞穿膜数[(93.50±16.12)个]，对照组[(150.67±20.85)个， t＝-5.313， P<0.01]。薯蓣皂苷处理后HT-29/L-OHP细胞中MDR1、bcl-2、CXCR7、MMP-2明显降低，bax增高(RT-qPCR结果： t＝6.052、4.699、6.082、2.882、-5.215， P<0.05；Western blot结果： t＝5.569、4.162、5.284、3.438、-4.299， P<0.05)；LRP、Livin无明显变化(RT-qPCR结果： t＝0.188、0.706， P>0.05；Western blot结果： t＝0.184、0.188， P>0.05)；HT-29/L-OHP细胞Caspase-3活性在处理组(1.63±0.33)，对照组(0.77±0.13)( t＝5.939， P<0.01)。薯蓣皂苷与L-OHP联合应用对HT-29/L-OHP的抑制率为(71.42±7.83)%，L-OHP组为(35.90±7.51)%，薯蓣皂苷组为(44.03±6.37)%( F＝39.361， P<0.01)。 结论:薯蓣皂苷可能通过调节多种基因表达而减轻结肠癌细胞对L-OHP的耐药性。

目的:探讨含WW结构域的转录因子1(WWTR1或TAZ)在创伤后骨性关节炎(PTOA)中对软骨细胞的调控作用。方法:由贵州医科大学动物实验中心提供20只c57bl/6J小鼠简单随机法分为假手术组(Sham)组、内侧半月板(DMM)不稳定组，每组6例，3个月后取材。苏木精-伊红(HE)染色和番红O固绿(Safranin O)染色验证模型是否构建成功和根据国际骨关节炎研究学会(OARSI)对骨关节软骨损伤进行分级，免疫组织化学法检测TAZ的表达。分离培养膝关节原代软骨细胞，将其分为对照组(Control)和TAZ抑制组(TAZ inhibitor-1)进行体外实验。通过免疫荧光检测TAZ inhibitor-1对TAZ表达的影响。蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测TAZ inhibitor-1对软骨细胞合成和分解代谢相关因子表达的影响。组间比较采用 t检验。 结果:HE结果显示，DMM组滑膜比对照组有增厚和有炎性细胞浸润。Safranin O染色显示，根据OARSI评分DMM组关节软骨浅层比对照组有降解和软骨下骨增厚[(4.333±1.731)分比(1.000±0.167)分， t＝21.240， P<0.01]。免疫组织化学结果显示，DMM组TAZ表达低于对照组(63.333±2.667比44.500±1.500， t＝19.210， P<0.01)。在体外实验中，免疫荧光结果显示，TAZ inhibitor-1组软骨细胞内TAZ的表达低于对照组(44.406±1.731比54.772±5.419， t＝15.860， P<0.01)。Western blot结果显示，TAZ inhibitor-1组二型胶原酶Ⅰ(Col2a1)、糖胺聚糖(ACAN)表达低于对照组(0.470±0.038比0.937±0.330，0.589±0.015比0.859±0.037， t＝20.830、17.160， P<0.01)，TAZ inhibitor-1组基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、含TSP样基序的去整合素金属蛋白酶(ADAMTS)-7表达高于对照组(0.897±0.004比0.540±0.018、0.956±0.007比0.605±0.013， t＝4.920、8.056， P<0.01)。qPCR结果显示，TAZ inhibitor-1组MMP-13、ADAMTS-7、SOX5等基因表达高于对照组(1.697±0.030比1.000±0.007、5.242±0.343比1.000±0.031、0.769±0.018比1.000±0.030， t＝22.820、23.820、12.270， P<0.01)，TAZ inhibitor-1组COl2a1、ACAN、刺猬因子重组蛋白(IHH)等基因表达低于对照组(0.524±0.047比1.001±0.069、0.664±0.310比1.001±0.624、0.367±0.024比1.002±0.085， t＝10.580、8.875、13.660， P<0.01)。 结论:TAZ在软骨细胞中通过调节软骨细胞的代谢促进PTOA的发生发展。

目的:采用网络药理学和实验验证的方法探索雷公藤治疗肾癌的作用机制。方法:利用中药系统药理学（TCMSP）数据库与分析平台筛选雷公藤的有效成分，并通过Swiss数据库预测雷公藤的靶点。自DisGeNET、GeneCards和OMIM数据库收集肾癌相关靶点，并通过Venny 2.1.0获得交集靶点。使用STRING数据库和Cytoscape软件绘制蛋白-蛋白相互作用（PPI）网络，并进行基因本体（GO）及京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。通过Cytoscape软件构建"成分-靶点-通路"网络。诱导肾癌皮下移植瘤模型，将裸鼠随机分为对照组和治疗组，每组5只，治疗组灌胃615 mg/ml雷公藤溶液（将1 845 mg雷公藤颗粒溶于3 ml水）2.46 g/kg，10 μl/次，1次/d，共给药21 d；对照组灌胃等量生理盐水。每5天测量1次肿瘤体积，并采用酶联免疫法检测丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1（AKT1）、信号转导子与转录激活子3（STAT3）、肿瘤坏死因子（TNF）、T肿瘤蛋白p53（TP53）、JUN、丝裂原激活蛋白激酶8（MAPK8）和MAPK14表达情况。结果:筛选出雷公藤有效药物成分28个，潜在靶点117个。识别出13 425个相关疾病靶点，最后获得113个药物和疾病交集靶点。在PPI网络中，AKT1、STAT3、TNF、TP53、JUN、MAPK8和MAPK14是核心靶点。GO分析显示BP主要包括核受体活性、配体激活的转录因子活性、RNA聚合酶特异性DNA结合转录因子结合、核类固醇受体活性、肾上腺素能受体活性等；CC主要包括对激素的反应、细胞对脂质的反应、积极调节细胞迁移、对TNF的反应、炎症反应、细胞对激素刺激的反应、对缺氧的反应、对金属离子的反应等；MF涉及膜筏、膜微区、质膜的外侧、膜侧、质膜筏、突触前膜、小窝、转录调控复合体、突触后膜、突触膜等。KEGG分析显示雷公藤治疗肾癌涉及脂质和动脉粥样硬化、晚期糖基化终末产物-晚期糖基化终末产物受体（AGE-RAGE）、TNF、Toll样受体、磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B（PI3K-Akt）和MAPK等信号通路。实验验证结果显示雷公藤治疗后肿瘤体积减小（ P<0.05），TP53蛋白表达增加（ P<0.001），AKT1、STAT3、TNF、JUN、MAPK8和MAPK14蛋白表达均降低（均 P<0.001）。 结论:预测了雷公藤治疗肾癌的靶点及信号通路，为进一步研究其保护机制及临床应用提供参考依据。

目的:基于网络药理学方法验证丹皮－赤芍药对治疗脓毒症的作用机制。方法:在TCMSP、OMIM、GeneCards等数据库中检索丹皮－赤芍、脓毒症对应靶点，用Cytoscape 3.8.2软件构建"中药材－活性成分－靶点－疾病"分析图，DAVID数据库进行基因本体(GO)与京都基因与基因组百科全书(KEGG)功能富集分析，微生信云平台绘制气泡图。结果:丹皮－赤芍药对共有36个有效成分，主要为槲皮素、山奈酚、黄芩苷、β－谷甾醇、豆甾醇、芍药苷等。与脓毒症潜在共有关键靶点96个，其中度值>4.9者为前列腺素G/H合酶2(PTGS2)、转录因子p65(RELA)、磷酸肌醇3激酶(PIK3CG)、细胞凋亡调节因子(BAX)、细胞凋亡调节因子(BCL2)、半胱天冬酶－3(CASP3)。蛋白相互作用(PPI)网络分析结果共有10个重要靶标蛋白，包括RAC－α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)、白介素－6(IL－6)、肿瘤坏死因子(TNF)、白介素－1β(IL－1β)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、细胞肿瘤抗原p53(TP53)、基质金属蛋白酶－9(MMP9)、CASP3、PTGS2、人超敏C－C趋化因子2(CCL2)。富集分析提示主要信号通路包括脂质与动脉粥样硬化通路、AGE－RAGE信号通路、癌症通路、肿瘤坏死因子信号通路、HIF－1信号通路、IL－17信号通路等。结论:丹皮－赤芍药对可能通过活性成分槲皮素、山奈酚、芍药苷等，作用于PTGS2、RELA、PIK3CG、BAX、BCL2、CASP3等靶蛋白，通过TNF相关信号通路、HIF－1信号通路、IL－17信号通路等产生对脓毒症的干预效应；但尚需进一步实验验证。

目的:探讨青藤碱(Sinomenine)对卵巢癌细胞增殖、迁移和血管生成拟态的影响及作用机制.方法:使用不同浓度(0、0.25、0.50、1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L)的青藤碱分别处理 A2780 细胞24、48 h,CCK-8法检测细胞存活率.将A2780细胞随机分为对照(Control)组、CXCR4激活剂基质细胞衍生因子-1(SDF-1)(SDF-1,100 ng/mL)组、CXCR4 抑制剂普乐沙福(Plerixafor,500 ng/mL)组、青藤碱(Sinomenine,1.0 mmol/L)组、Sinomenine+SDF-1(1.0 mmol/L Sinomenine+100 ng/mL SDF-1)组,分别检测 A2780 细胞增殖、迁移与侵袭,体外血管生成拟态形成实验检测青藤碱对血管生成拟态的影响,Western blot法检测血管内皮生长因子(VEGF)、上皮细胞激酶(EphA2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、MMP-2、CXC趋化因子受体4(CXCR4)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达.结果:青藤碱可有效抑制A2780细胞增殖,且呈浓度依赖性;青藤碱可显著抑制A2780细胞迁移、侵袭及血管生成拟态形成,并下调血管生成拟态标志蛋白VEGF、EphA2、MMP-9、MMP-2表达,抑制CXCR4、p-STAT3表达(P＜0.05),青藤碱的这一抑制作用可被CXCR4激活剂减弱.结论:青藤碱可能通过抑制CXCR4-STAT3轴,抑制卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭及血管生成拟态形成.