目的:探讨大电导钙依赖性钾通道（BKCa）参与脓毒症发病的机制。方法:收集脓毒症患者（28例）、普通感染者（25例）和健康体检者（25例）血清，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定BKCa水平；并分析脓毒症患者血清BKCa水平与急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ（APACHEⅡ）的相关性。培养RAW 264.7细胞，用脂多糖（LPS）刺激，部分实验以尼日尼亚菌素（Nigericin）作为第二刺激信号构建脓毒症细胞模型；采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）、蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）测定不同浓度LPS（0、50、100、1 000 μg/L）刺激后细胞BKCa的mRNA和蛋白表达。RAW 264.7细胞转染BKCa的小干扰RNA（siRNA-BKCa），用Western blotting测定细胞天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1前体（pro-caspase-1）、白细胞介素-1β前体（pro-IL-1β），细胞培养液中caspase-1 p20、IL-1β p17，以及NOD样受体蛋白3（NLRP3）、核转录因子-κB（NF-κB）水平。碘化丙啶（PI）染色后荧光显微镜下观察凋亡情况，测定乳酸脱氢酶（LDH）释放率，Western blotting测定细胞凋亡蛋白Gasdermin D（GSDMD）表达以评估沉默BKCa对细胞焦亡的影响。结果:脓毒症患者血清BKCa明显高于普通感染者和健康体检者（ng/L：165.2±25.9比102.5±25.9、98.8±20.0，均 P<0.05），且脓毒症患者血清BKCa水平与APACHEⅡ评分呈显著正相关（ r＝0.453， P＝0.013）。用LPS构建脓毒症细胞模型，显示LPS呈浓度依赖地促进BKCα的mRNA和蛋白表达，1 000 μg/L刺激后细胞BKCa的mRNA和蛋白表达水平均较空白组（0 μg/L）明显增加〔BKCa mRNA（2 -ΔΔCt）：3.00±0.36比1.00±0.16，BKCa/β-actin：1.30±0.16比0.37±0.09，均 P<0.05〕。与对照组比较，模型组细胞caspase-1 p20/pro-caspase-1比值、IL-1βp17/pro-IL-1β比值均明显升高（caspase-1 p20/pro-caspase-1比值：0.83±0.12比0.27±0.05，IL-1βp17/pro-IL-1β比值：0.77±0.12比0.23±0.12，均 P<0.05）；但转染siRNA-BKCa后二者均较模型组明显下降（caspase-1 p20/pro-caspase-1比值：0.23±0.12比0.83±0.12，IL-1βp17/pro-IL-1β比值：0.13±0.05比0.77±0.12，均 P<0.05）。与对照组比较，镜下观察模型组凋亡细胞明显增多，LDH释放率、GSDMD表达明显增加〔LDH释放率：（30.60±8.40）%比（15.20±7.10）%，GSDMD-N/GSDMD-FL：2.10±0.16比1.00±0.16，均 P<0.05〕；但转染siRNA-BKCa后上述指标均较模型组明显下降〔LDH释放率：（15.60±7.30）%比（30.60±8.40）%，GSDMD-N/GSDMD-FL：1.13±0.17比2.10±0.16，均 P<0.05〕。脓毒症细胞NLRP3的mRNA和蛋白表达水平均较对照组明显增加〔NLRP3 mRNA（2 -ΔΔCt）：2.06±0.17比1.00±0.24，NLRP3/GAPDH：0.46±0.05比0.15±0.04，均 P<0.05〕；但转染siRNA-BKCa后NLRP3表达较模型组明显下降〔NLRP3 mRNA（2 -ΔΔCt）：1.57±0.09比2.06±0.17，NLRP3/GAPDH：0.19±0.02比0.46±0.05，均 P<0.05〕。与对照组比较，脓毒症细胞NF-κB p65核转移明显增加（NF-κB p65/Histone：0.73±0.12比0.23±0.09， P<0.05）；而转染siRNA-BKCa后细胞核中NF-κB p65表达明显下降（NF-κB p65/Histone：0.20±0.03比0.73±0.12， P<0.05）。 结论:BKCa参与脓毒症发病，其可能机制是激活NF-κB/NLRP3/caspase-1信号通路诱导炎症因子生成和细胞焦亡。

目的:探讨大电导钙激活钾离子通道［large conductance calcium-activated potassium channel，BK（Ca）］是否参与衰老小鼠耳蜗血管纹毛细血管周细胞（pericytes，PC）的迁移。方法:将C57BL/6J小鼠分为3月龄（ n=10）组和12月龄组（ n=10），听性脑干反应（ABR）检测各组听力阈值；免疫荧光检测各组耳蜗血管纹毛细血管PC上β-BK（Ca）通道和骨桥蛋白（osteopontin，OPN）表达变化；透射电镜（transmission electron microscope，TEM）观察各组耳蜗血管纹PC的形态改变。细胞实验：原代培养耳蜗血管纹PC并鉴定；D-半乳糖（D-gal）制备细胞衰老模型，CCK8确定D-gal干预浓度；β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色评估细胞衰老水平；全细胞膜片钳技术记录PC上BK（Ca）通道激活电流变化；免疫荧光技术检测PC上β-BK（Ca）通道蛋白表达变化；划痕实验和Transwell实验检测2组细胞迁移侵袭能力；Western blot技术检测β-BK（Ca）通道和OPN蛋白表达水平。采用SPSS 22.0软件对数据进行统计学分析。 结果:动物实验：12月龄组小鼠较3月龄组ABR阈值升高（ t=12.66， P<0.01）；12月龄组小鼠耳蜗血管纹PC上β-BK（Ca）通道表达水平较3月龄组降低（ t=14.64， P<0.01），OPN表达升高（ t=20.73， P<0.01）；TEM中3月龄组PC与内皮细胞紧密相连，12月龄组PC与内皮细胞连接疏松或PC胞体从毛细血管壁分离。细胞实验：耳蜗血管纹原代培养的耳蜗血管纹PC阳性率在95%以上，15 mg/ml D-gal干预的PC较对照组的SA-β-gal染色细胞阳性率高，差异有统计学意义（ t=36.90， P<0.01）。与对照组PC相比，D-gal干预组全细胞膜片钳BK（Ca）通道电流减小（ t=12.18， P<0.05），β-BK（Ca）通道蛋白和荧光表达水平降低（ t=11.98， P<0.01； t=15.72， P<0.05），OPN蛋白表达升高（ t=18.53， P<0.01），PC迁移能力增加（ t=7.91， P<0.01； t=7.59， P<0.01）。D-gal干预后给予BK（Ca）通道特异性阻断剂Iberiotoxin（IBTX）可使OPN表达明显升高（ t=4.26， P<0.05），PC迁移能力增加（ t=5.88， P<0.01； t=21.97， P<0.01）。 结论:衰老小鼠耳蜗血管纹毛细血管PC迁移能力增加，β-BK（Ca）通道表达降低，给予BK（Ca）通道特异性阻断剂IBTX可使迁移能力增加，提示BK（Ca）通道可能参与衰老小鼠耳蜗血管纹毛细血管PC的迁移。

目的:探讨钙激活钾通道蛋白4（KCNN4）在甲状腺乳头状癌（PTC）中的表达情况、其与患者临床病例特征及预后的关系。方法:收集2021年1月至2021年6月在华中科技大学同济医学院附属同济医院甲状腺乳腺外科手术切除的PTC及癌旁甲状腺组织共116例，通过免疫组织化学实验检测KCNN4的表达水平，并分析不同KCNN4表达水平的患者之间的临床病例特征及预后的差异；通过细胞计数试剂盒（CCK-8）实验和划痕愈合实验检测KCNN4对PTC细胞增殖和迁移能力的影响。组间比较采用非配对 t检验；KCNN4与患者临床病理特征的关系采用 χ2检验或Fisher精确检验，生存分析采用Kalpan-Meier法。 结果:KCNN4在PTC中的表达显著高于癌旁组织（免疫组织化学评分：8.17±2.46比3.26±0.72， t＝8.44， P<0.05）；KCNN4的表达与肿瘤多灶性情况[低表达比高表达（下同），单灶为31比50，多灶为6比29， χ2＝2.24， P<0.05]、肿瘤TNM分期（Ⅰ～Ⅱ期为35比60，Ⅲ～Ⅳ期为2比19， χ2＝2.43， P<0.05）及甲状腺外侵犯显著相关（无腺外侵犯为34比59，有腺外侵犯为3比20， χ2＝2.17， P<0.05），而与患者年龄（≤55岁为12比28，>55岁为25比51， χ2＝0.32， P>0.05）、性别（男为5比16，女为32比63， χ2＝0.88， P>0.05）、是否合并有桥本甲状腺炎无关（无桥本甲状腺为23比56，有桥本甲状腺炎为14比23， χ2＝0.94， P>0.05）。KCNN4高表达患者的无复发生存率低于低表达组患者（复发率：8.86%比0%， HR＝2.42， P<0.05）；CCK-8实验表明，敲减KCNN4后的KTC-1和BCPAP细胞的增殖能力低于对照组细胞[KTC-1对照组比短发卡RNA（shRNA）转染组，72 h：1.28±0.11比0.47±0.06， t＝8.28， P<0.05；96 h：1.82±0.24比0.61±0.10， t＝10.45， P<0.05；BCPAP对照组比shRNA转染组，72 h：1.37±0.19比0.51±0.07， t＝6.14， P<0.05；96 h：2.03±0.47比0.84±0.20， t＝3.99， P<0.05]。划痕愈合实验显示，敲降KCNN4后的KTC-1和BCPAP细胞划痕愈合能力低于对照组细胞[KTC-1对照组比shRNA转染组24 h划痕愈合百分比：（66.47±7.60）%比（33.41±3.76）%， t＝6.28， P<0.05；BCPAP对照组比shRNA转染组24 h划痕愈合百分比：（71.25±9.06）%比（43.32±5.83）%， t＝12.10， P<0.05]。 结论:KCNN4与PTC发生、发展密切相关。

目的:观察内皮素受体A(ETA)抑制剂BQ-123对C57BL/6小鼠骨癌痛的镇痛效果，并探讨脊髓星形胶质细胞活化及大电导钙激活钾离子通道(BK Ca)通道的作用。 方法:选用C56BL/6雄性小鼠30只，体重18~20 g，随机数字表法分为3组( n＝10)，假手术组(S组)、癌痛组(BCP组)、BQ-123组(BQ组)。BCP组和BQ组于左下肢股骨骨髓腔内接种Lewis肺癌细胞(2×10 6个)制备骨癌痛模型。S组则注射等量D-Hanks’液。于接种后第7~21天，BQ组腹腔内注射BQ-123(10 nmol/d)，BCP组则注射等量双蒸水(10 μl/d)。于术前1 d(T0)、术后第7天(T1)、第10天(T2)、第13天(T3)、第15天(T4)、第18天(T5)、第21天(T6)测定机械痛阈值(MWT)和后足使用评分。术后第21天，取L4~L6脊髓，分别采用蛋白质印迹法(Western blot)法检测BK Ca通道蛋白、星形胶质细胞活化标志物胶质纤维状酸性蛋白(GFAP)蛋白表达，酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-1β的表达。正态分布资料组间比较采用单因素方差分析或重复测量资料方法分析，两两比较采用Tukey检验。 结果:BQ组于T2~T6时时间点MWT高于BCP组[(3.97±0.37) g比(3.31±0.56) g、(3.89±0.45) g比(3.22±0.88) g、(3.48±0.56) g比(2.78±0.51) g、(3.13±0.49) g比(2.20±0.33) g、(3.28±0.52) g比(1.95±0.54) g]，差异有统计学意义( q＝3.367、3.418、3.571、4.744、6.734， P<0.05)；于T3~T6时行走评分高于BCP组[(2.70±0.72) g比(2.20±0.49) g、(2.63±0.59) g比(1.77±0.40) g、(2.02±0.65) g比(1.30±0.51) g、(1.83±0.61) g比(1.27±0.52) g]，差异有统计学意义( q＝3.406、5.859、4.905、3.815， P<0.05)；脊髓BKCa通道表达明显高于BCP组(0.27±0.03比0.18±0.02)，GFAP表达低于BCP组(0.31±0.02比0.41±0.03)，差异有统计学意义( q＝3.406、7.276， P<0.05)；TNF-α和IL-1β表达低于BCP组[(286.45±15.94) pg/mg蛋白比(217.62±15.48) pg/mg蛋白、(178.28±18.26) pg/mg蛋白比(148.15±12.87) pg/mg蛋白]，差异有统计学意义( q＝8.152、4.795， P<0.05)。 结论:腹腔内注射ETA拮抗剂BQ-123可减轻小鼠骨癌痛，其机制可能与BK Ca通道表达上调、脊髓星形胶质细胞活化受抑制有关。

目的:探讨大电导钙激活钾通道(BKCa)基因敲除后大鼠胰腺转录组基因表达及信号转导通路变化，分析BKCa基因在胰腺中的作用。方法:3只BKCa基因敲除成年雌性SD大鼠(BKCa敲除组)由首都医科大学基础医学院生理学与病理生理学系王伟教授馈赠，设3只野生型成年雌性SD大鼠为野生组。取完整的胰腺组织，提取总RNA，采用转录组测序技术进行测序、差异分析软件DESeq2筛选BKCa敲除组和野生组胰腺组织间的差异表达基因，利用基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库对差异表达基因进行生物功能富集分析。采用RT-PCR法对富集分析出的关键基因进行验证。结果:BKCa敲除组和野生组大鼠胰腺样本共检测到18 258个基因，经DESeq2软件筛选出348个表达差异基因，其中200个基因在BKCa敲除组胰腺中高表达，148个基因低表达。GO数据库显示214个差异表达基因富集在56个GO条目，其中24个涉及生物学过程，18个涉及细胞组分，14个涉及分子功能；KEGG数据库显示348个差异表达基因中15个富集于PI3K/Akt信号通路，经RT-PCR验证，其关键基因Hsp90ab1、Hsp90aa1、Foxo3a、Col1a2在BKCa敲除组胰腺组织的表达显著高于野生组( P<0.0001)，而Thbs1、Pik3r1和Ppp基因表达差异无统计学意义。 结论:在转录组水平上筛选出BKCa敲除组与野生组大鼠差异表达基因，其显著富集于PI3K/Akt信号通路，为预测BKCa在胰腺中发挥的功能提供了线索。

目的:探讨百草枯（PQ）染毒肺泡上皮细胞内KCa3.1对NLRP3炎症小体的调控作用。方法:体外培养A549细胞，分为对照组、TRAM-34（KCa3.1的特异性抑制剂）组、PQ组及PQ+TRAM-34组。免疫荧光检测细胞中KCa3.1的变化。Western Blot检测NLRP3炎症小体相关蛋白及NIMA相关激酶7（NEK7）蛋白的表达。细胞钾离子浓度变化比色法定量检测试剂盒检测钾离子的变化。结果:免疫荧光结果提示A549细胞染毒后，KCa3.1表达明显增加。Western Blot结果提示PQ处理后，A549细胞内NLRP3炎症小体（相关蛋白NLRP3、ASC、Caspase-1）及NEK7蛋白表达明显升高；抑制KCa3.1后，NLRP3炎症小体及NEK7表达减少；且差异具有统计学意义[NLRP3蛋白（NLRP3/β-actin，对照组比抑制剂组比染毒组比染毒+抑制剂组）：[(0.02±0.00) vs (0.03±0.00) vs （0.74±0.00） vs （0.32±0.01）]；ASC蛋白（ASC/ β-actin，对照组比抑制剂组比染毒组比染毒+抑制剂组）: [（0.12±0.01） vs（0.11±0.03） vs（0.46±0.02） vs（0.17±0.03）]；Caspase-1蛋白（Caspase-1/ β-actin，对照组比抑制剂组比染毒组比染毒+抑制剂组）:[(0.05±0.00) vs 0.04±0.00) vs （0.34±0.03） vs（0.15±0.01）];NEK7蛋白（NEK7/ β-actin，对照组比染毒组比染毒+抑制剂组）：[(0.38±0.03) vs （0.83±0.02) vs (0.51±0.01)，均 P<0.01]。比色法检测结果提示PQ处理后细胞内钾离子明显下降，抑制KCa3.1后细胞内钾离子下降明显减少；且差异有统计学意义（对照组比染毒组比染毒+抑制剂组：[(1.00±0.00) vs （0.60±0.05） vs（0.86±0.02），均 P<0.01]。 结论:PQ中毒后，可能激活KCa3.1促使细胞内钾离子外流，上调NEK7表达，从而激活NLRP3炎症小体，促进肺纤维化的发生。

目的:探讨中电导钙激活钾离子通道(SK4)蛋白与甲状腺乳头状癌中央区淋巴结转移的相关性。方法:分析88例甲状腺乳头状癌患者的组织芯片，根据SK4免疫组织化学染色结果分为SK4阳性表达组(55例)和SK4阴性表达组(33例)，细胞实验小干扰RNA(siRNA)敲除SK4的甲状腺乳头状癌细胞为实验组，甲状腺乳头状癌细胞为对照组。采用 χ2检验分析SK4表达与临床病理特征之间的关系，采用Logistic回归模型分析甲状腺乳头状癌中央区淋巴结转移危险因素。通过Transwell细胞迁移和侵袭实验验证SK4对甲状腺乳头状癌细胞侵袭转移的作用。采用SPSS 22.0(IBM)和Graphpad prism 5.0软件分析。应用 χ2检验和Fisher精确概率法分析组间差异，建立Logistic二元回归模型进行单因素、多因素分析。 结果:88例甲状腺乳头状癌组织中SK4阳性者为55例，阳性率为62.5%。SK4在甲状腺乳头状癌中央区淋巴结转移中阳性表达率为73.3%(33/45)，SK4在各临床分期中阳性表达率为，Ⅰ期66.7%(24/33)，Ⅱ期23.1%(3/13)，Ⅲ期80.6%(25/33)，Ⅳ期50.0%(3/6)， χ2检验结果显示SK4的表达水平与甲状腺乳头状癌中央区淋巴结转移、临床分期之间差异有统计学意义( χ2＝4.611、11.762， P<0.05)。SK4的表达与患者年龄、性别、T分期、肿瘤部位之间无统计学意义( χ2＝0.724、1.343、2.799、0.637， P>0.05)。Logistic回归分析结果显示SK4阳性和临床分期，是甲状腺乳头状癌中央区淋巴结转移的独立危险因素( OR＝3.827、3.882， P<0.05)。SK4敲除后甲状腺乳头状癌细胞的侵袭及迁移能力的明显受到抑制，SK4敲除组侵袭及迁移能力低于对照组(224个细胞 比690个细胞；196个细胞比571个细胞； t＝185.900、138.600， P<0.01)。 结论:SK4的表达与甲状腺乳头状癌中央区淋巴结转移中密切相关。

生长抑素又称生长激素释放抑制因子(SRIF)，是一种神经递质、神经调质和神经营养因子，通过激活5种特异的G蛋白偶联受体发挥作用。SRIF受体在视网膜中广泛表达和分布，激活这些受体调控视网膜细胞的电压门控钾和钙通道，调控多种胞内信号通路，进而调节神经递质的释放和突触传递等，参与视网膜视觉信息的处理过程。同时，SRIF及其受体对视网膜损伤，如视网膜缺血、兴奋毒性损伤和糖尿病视网膜病变等具有神经保护作用。本文结合本研究团队近年在视网膜SRIF及其受体系统的研究结果，就SRIF及其受体在视网膜的分布、对视网膜的生理调控和神经保护作用的研究进展进行综述。

大电导钙激活钾离子通道是一种具有钙离子敏感性及电压依赖性且对血管张力调节具有重要作用的膜离子通道，糖尿病时血管平滑肌细胞大电导钙激活钾离子通道结构及功能发生改变，说明糖尿病血管病变可能与大电导钙激活钾离子通道异常有关。活性氧是体内一类氧的单电子还原产物，高血糖状态下活性氧生成增加。目前越来越多的证据表明高血糖状态下活性氧影响大电导钙激活钾离子通道功能，但具体机制尚不完全清楚。本文主要综述活性氧对糖尿病血管平滑肌细胞大电导钙激活钾离子通道的影响及其机制。

在非传染性疾病中,心血管疾病(CVD)是导致死亡的主要原因.根据2023年更新的美国心脏学会报告,2017～2020年全球心血管疾病的患病率高达48.6％[1].在中国,CVD的患病率和死亡率逐年上升,给社会带来巨大的经济负担.因此,心血管疾病的机制研究及诊治具有重要意义.