目的:探讨肌源性分化蛋白1(Myod1)对氧糖剥夺(OGD)诱导的SH-SY5Y细胞增殖抑制和凋亡的影响,并阐明其作用机制.方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测正常对照组研究对象和缺血性脑梗死组患者外周血及正常培养的SH-SY5Y细胞(对照组)和OGD细胞模型(OGD组)细胞中Myod1和长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因15(SNHG15)mRNA表达水平.分别采用 si-Myod1、pcDNA3.0-Myod1、si-SNHG15、pcDNA3.0-SNHG15、si-NC、空载质粒(Vector)、miR-NC和miR-24-3p模拟物(miR-mimics)质粒转染SH-SY5Y细胞后,进行OGD处理,将SH-SY5Y细胞分为对照组、OGD组、OGD+Vector组、OGD+Myod1组、OGD+si-NC组、OGD+si-Myod1 组、OGD+si-SNHG15 组、OGD+si-SNHG15+Vector 组、OGD+si-SNHG15+Myod1 组、OGD+miR-NC 组、OGD+miR-mimics 组、OGD+miR-mimics+Vector 组和 OGD+miR-mimics+SNHG15组.采用CCK-8法检测各组细胞活性,采用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)染色法检测各组EdU阳性细胞率,采用原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测各组TUNEL阳性细胞率,采用W estern blotting法检测各组细胞中裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)、裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(cleaved caspase-9)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平.染色质免疫共沉淀(CHIP)法评估Myod1和SNHG15之间的关联.双荧光素酶报告基因实验评估Myod1与SNHG15及SNHG15与miR-24-3p的靶向关系.结果:与正常对照组比较,缺血性脑梗死组患者外周血中Myod1和SNHG15 mRNA表达水平均升高(P＜0.05).与对照组比较,OGD组细胞中Myod1和SNHG15 mRNA表达水平均明显升高(P＜0.05).与OGD组比较,48和72 h时OGD+Myod1组细胞活性和EdU阳性细胞率均降低(P＜0.01),TUNEL阳性细胞率升高(P＜0.01);OGD+si-Myod1组细胞活性和EdU阳性细胞率均升高(P＜0.01),TUNEL阳性细胞率降低(P＜0.01).Myod1可与SNHG15的启动子序列结合.SNHG15 可吸附 miR-24-3p,Myod1 与 SNHG15 及 SNHG15 与 miR-24-3p 存在靶关系.敲低 SNHG15后,与OGD组比较,48和72h时OGD+si-SNHG15组细胞活性和EdU阳性细胞率均升高(P＜0.01),TUNEL 阳性细胞率降低(P＜0.01),细胞中 Bax、cleaved caspase-3 和 cleaved caspase-9 蛋白表达水平降低(P＜0.01),Bcl-2蛋白表达水平升高(P＜0.01);与OGD+si-SNHG15组比较,48和72 h时OGD+si-SNHG15+Myod1组细胞活性和EdU阳性细胞率降低(P＜0.05),TUNEL阳性细胞率升高(P＜0.05),细胞中 Bax、cleaved caspase-3 和 cleaved caspase-9 蛋白表达水平升高(P＜0.05),Bcl-2的蛋白表达水平降低(P＜0.05).过表达miR-24-3p和SNHG15后,与OGD组比较,48和72 h时OGD+miR-mimics组细胞活性和EdU阳性细胞率升高(P＜0.01),TUNEL阳性细胞率降低(P＜0.01),细胞中 Bax、cleaved caspase-3 和 cleaved caspase-9 蛋白表达水平降低(P＜0.01),Bcl-2 蛋白表达水平升高(P＜0.01);与 OGD+miR-mimics 组比较,48 和 72h 时OGD+miR-mimics+SNHG15组细胞活性和EdU阳性细胞率降低(P＜0.05),TUNEL阳性细胞率升高(P＜0.05),细胞中Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白表达水平升高(P＜0.05),Bcl-2蛋白表达水平降低(P＜0.05).结论:Myod1可通过与SNHG15启动子区结合进而吸附miRNA-24,促进OGD诱导的SH-SY5Y细胞的增殖抑制和细胞凋亡.

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因15(SNHG15)对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导的PC12细胞氧化应激和细胞凋亡的影响及分子机制.方法 将PC12细胞分为Con组、Aβ25-35 组、Aβ25-35+si-SNHG15组、Aβ25-35+si-NC组、Aβ25-35+微小RNA(miR)-942-5p组、Aβ25-35+miR-NC组、Aβ25-35+si-SNHG15+anti-miR-942-5p组、Aβ25-35+si-SNHG15+anti-miR-NC组;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测lncRNA SNHG15和 miR-942-5p表达水平;酶联免疫吸附试验检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)表达水平;蛋白质印迹法检测蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测lncRNA SNHG15和 miR-942-5p靶向关系.结果 Aβ25-35 诱导的 PC12细胞中lncRNA SNHG15、MDA、Bax表达水平及细胞凋亡率升高,SOD活性、miR-942-5p、Bcl-2表达水平降低(P<0.05).抑制lncRNA SNHG15表达或过表达miR-942-5p后,SOD活性、Bcl-2表达水平升高,细胞凋亡率、MDA、Bax表达水平降低(P<0.05).lncRNA SNHG15靶向调控miR-942-5p.下调miR-942-5p表达逆转了抑制lncRNA SNHG15表达对Aβ25-35 诱导的PC12细胞氧化应激和凋亡的作用.结论 抑制lncRNA SNHG15表达通过上调miR-942-5p表达减轻Aβ25-35 诱导的PC12细胞氧化应激和细胞凋亡.

小核仁RNA宿主基因15(SNHG15)是长非编码RNA(lncRNA)的一种,定位于7号染色体.近年来有研究指出lncRNA SNHG15在多种恶性肿瘤如胶质瘤、甲状腺癌、乳腺癌、肺癌、胃癌、结直肠癌、肝癌、胰腺癌、肾癌、骨肉瘤中过表达,其可通过不同信号通路促进肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移,并导致肿瘤患者预后不良.

长链非编码RNA在多种人类肿瘤中扮演重要角色.小核仁RNA宿主基因15(small nuclear RNA host gene 15,SNHG15)作为一个新发现的长链非编码RNA,在胃癌、肝癌、胰腺癌等多种人类肿瘤中高表达.异常表达的SNHG15与患者的临床特征密切相关,并通过不同机制调节肿瘤细胞的增殖、抗凋亡、侵袭和转移.SNHG15有可能成为肿瘤诊断和治疗的潜在靶点.本文就SNHG15在肿瘤发生、发展中的作用及潜在分子机制作一综述.

目的 检测lncRNA SNHG12在乳腺癌中的表达情况并探讨其临床意义.方法 收集2012年1月至2013年10月行手术切除的85例乳腺癌患者的癌组织及相应癌旁组织.采用qRT-PCR法测定乳腺癌组织及癌旁组织中lncRNA SNHG12的表达情况,分析lncRNA SNHG12与乳腺癌临床病理特征的关系,并对全部患者进行随访,分析lncRNA SNHG12表达对乳腺癌患者预后的影响.结果 乳腺癌组织中lncRNA SNHG12表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05);乳腺癌组织中lncRNA SNHG12表达情况与患者肿瘤直径、淋巴结转移及ER有关(P<0.05);术后随访5年共有15例患者死亡,其中lncRNA SNHG12高表达乳腺癌患者5年总存活率显著低于低表达患者(P<0.05);Cox模型多因素分析结果显示,肿瘤直径、淋巴结转移、lncRNA SNHG12是影响乳腺癌预后的独立危险因素.结论 乳腺癌组织中lncRNA SNHG12表达上调,其表达水平与患者肿瘤直径及淋巴结转移等临床病理特征有关,可能成为乳腺癌患者不良预后的生物标志物.

目的 探究结直肠癌肝转移患者射频消融术后小核仁RNA宿主基因15(SNHG15)变化及意义.方法 采用定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测58例结直肠癌肝转移患者射频消融术治疗前后血清SN-HG15 miRNA的相对表达量,分析其与结直肠癌肝转移患者预后的关系.结果 射频消融术治疗前,结直肠癌肝转移患者血清SNHG15 miRNA的相对表达量为(2.86±0.67),明显高于射频消融术治疗后结直肠癌肝转移患者的(1.77±0.45),差异有统计学意义(P﹤0.01).58例结直肠癌肝转移患者1、2和3年的生存率分别为91.38%(53/58)、68.97%(40/58)和62.07%(36/58).经射频消融术治疗3年后,结直肠癌肝转移患者生存36例,死亡22例,分别作为生存组和死亡组.生存组患者血清SNHG15 miRNA相对表达量为(1.52±0.34),明显低于死亡组患者的(2.17± 0.30),差异有统计学意义(P﹤0.01).血清SNHG15 miRNA相对表达量诊断结直肠癌肝转移患者预后的曲线下面积(AUC)为0.924.以SNHG15 miRNA相对表达量为1.78为临界值,SNHG15 miRNA相对表达量﹥1.78的结直肠癌肝转移患者平均总生存时间为18.61个月,低于SNHG15 miRNA相对表达量≤1.78的结直肠癌肝转移患者的平均总生存时间34.10个月,差异有统计学意义(P﹤0.05).Cox分析结果显示,血管侵犯情况和SNHG15 miR-NA相对表达量与结直肠癌肝转移患者总生存时间密切相关.结论 结直肠癌肝转移患者射频消融术后SN-HG15 miRNA的相对表达量降低,其相对表达量与射频消融术治疗结直肠癌肝转移患者的预后密切相关.

目的 探讨长链非编码(lncRNA)核仁小RNA宿主基因15(SNHG15)靶向调节微小RNA-141(miR-141)对甲状腺癌细胞侵袭、凋亡影响及机制.方法 本研究起止时间为2018年10月至2019年5月,参照Lipofectamine 2000说明将SNHG15小干扰RNA(siRNA)、siRNA阴性对照(siRNA control)、miR-141抑制剂(miR-141 inhibitor)或抑制剂阴性对照(inhibitor control)转染至甲状腺癌FRO细胞,细胞随机分组空白对照(si-control)组、转染阴性对照(si-NC)组、转染SNHG15 siRNA(si-SNHG15)组、转染SNHG15 siRNA和inhibitor control(si-SNHG15+anti-control)组和转染SNHG15 siRNA和miR-141 inhibitor(si-SNHG15+anti-miR-141)组,,转染48 h,qRT-PCR检测SNHG15和miR-141 mRNA表达;Transwell小室及流式细胞术分别检测细胞侵袭能力及凋亡率;双荧光素酶报告系统检测SNHG15和miR-141的靶向关系.Western blotting检测上皮钙黏素(E-cadherin)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达.结果 与si-control组比较,si-SNHG15组中SNHG15 mRNA表达[(1.000)比(0.263±0.032)]明显降低,细胞侵袭能力[(168.6±7.1)个比(78.2±3.3)个]明显降低,凋亡率[(4.31±0.42)％比(33.11±1.69)％]明显升高,E-cadherin[(0.105±0.011)比(0.602±0.058)]和Bax表达[(0.049±0.008)比(0.263±0.028)]明显升高,Bcl-2表达[(0.587±0.063)比(0.131±0.015)]明显降低(P<0.05).SNHG15与miR-141存在靶向关系.与si-SNHG15+anti-control组比较,si-SNHG15+anti-miR-141组细胞侵袭能力[(79.9±4.2)个比(130.3±5.2)个]明显升高,凋亡率[(34.08±1.63)％比(15.66±0.87)％]降低,E-cadherin[(0.641±0.062)比(0.309±0.032)]和Bax表达[(0.282±0.030)比(0.144±0.015)]明显降低,Bcl-2表达[(0.138±0.017)比(0.478±0.052)]明显升高(P<0.05).结论 lncRNA SNHG15可靶向调节miR-141影响甲状腺癌细胞侵袭和凋亡,机制与调节E-cadherin、Bcl-2和Bax表达有关.

目的 研究子痫前期(preeclampsia,PE)胎盘组织中差异表达的长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因5 (lnc-SNHGS)及微小RNA-155(miR-155)在PE晚孕期患者血清、血清外泌体中的表达情况及外泌体源性检测.方法 收集2020年11月至2021年3于乐山市人民医院产科同期住院分娩的正常妊娠(NC组)与PE患者(PE组)血清标本各15例,提取血清总RNA,实时定量PCR (qRT-PCR)检测血清中lnc-SNHG5、miR-155表达情况;提取血清中外泌体,透射电镜、蛋白免疫印迹、纳米颗粒跟踪分析技术鉴定外泌体,并检测其是否具有胎盘源性;提取外泌体中总RNA,qRT-PCR检测外泌体中lnc-SNHG5、miR-155表达情况.结果 与NC组相比,PE组血清中及外泌体中lnc-SNHG5表达均降低,而miR-155表达则均增高;NC组及PE组血清中外泌体具有较好的粒径及浓度、形态,并表达特征性蛋白CD63、CD9;NC组及PE组血清中外泌体均表达胎盘外泌体特异性胎盘碱性磷酸酶.结论 lnc-SNHG5、miR-155在PE患者血清、外泌体中的表达与其在PE胎盘组织中差异表达趋势一致;PE患者血清中外泌体具有胎盘源性;初步揭示了lnc-SNHG5、miR-155可能以外泌体装载的方式参与了PE发病.

目的:研究长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因15(LncRNA SNHG15)与miRNA-451a对乳腺癌细胞的生物学活性的影响.方法:qRT-PCR法检测SNHG15、miRNA-451a及趋化因子受体4(CXCR4)在乳腺癌耐药细胞SKBR3-PR中的表达情况;细胞划痕实验检测干扰SNHG15及miRNA-451a抑制剂对SKBR3-PR的细胞迁移能力的影响;流式细胞术检测对细胞凋亡情况的影响;Western blotting实验检测CXCR4、上皮间质转化(EMT)相关蛋白Vimentin、Snail水平表达.结果:相比于亲本细胞,乳腺癌耐药细胞株中SNHG15表达量上调,但差异无统计学意义(P>0.05),miRNA-451a表达量下降(P<0.05),CXCR4表达量上调(P<0.01);划痕实验结果显示SNHG15促进细胞的迁移(P<0.01),miRNA-451a可抑制细胞迁移(P<0.01);细胞凋亡实验结果表明SNHG15抑制细胞凋亡(P<0.01),miRNA-451a促进细胞凋亡(P<0.01);Western blotting表明干扰SNHG15后,EMT相关蛋白Snail和CXCR4表达水平下降,miRNA-451a抑制剂组Snail和CXCR4表达水平上升(P<0.01),Vimentin表达水平无统计学意义(P>0.05).结论:LncRNA SNHG15可能通过调控miRNA-451a促进乳腺癌细胞的迁移、凋亡,并且潜在调控CXCR4诱导乳腺癌细胞的EMT.

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因15(SNHG15)在胃癌中的临床意义.方法 选取行根治性手术治疗的胃癌患者97例.收集所有患者的临床资料,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测胃癌组织和正常胃黏膜组织SNHG15的相对表达量.对所有患者从术后第1天起随访5年.采用Kaplan-Meier生存曲线分析患者术后生存期,采用Cox比例风险模型对预后影响因素进行分析.结果 胃癌组织SNHG15相对表达量显著高于正常胃黏膜组织(P<0.001).不同分化程度、TNM分期、浸润深度和淋巴结转移患者之间胃癌组织SNHG15相对表达量差异均有统计学意义(P<0.05).Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,低表达组(SNHG15≤2.18)平均生存时间和5年生存率均高于高表达组(SNHG15>2.18)(P<0.001).Cox比例风险模型分析结果显示,低分化、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、淋巴结转移和SNHG15高表达是影响胃癌患者预后的危险因素[风险比(HR)分别为0.381、2.568、2.892和4.851].结论 胃癌组织中SNHG15表达显著升高,且与患者预后有关,或可作为胃癌机制研究及预后评估的潜在标志物.