为精简文字,使文章读起来简练易懂,现将本刊常用的所熟知的专业名词缩略语公布如下:RNA 核糖核酸OR 比值比A值 吸光度值CT 计算机体层摄影术AIDS 艾滋病HIV 人类免疫缺陷病毒HEV 戊型肝炎病毒AST 天冬氨酸氨基转移酶Ct值 每个反应管内荧光信号达到设阈值时所经历的的循环数PCR 聚合酶链式反应IHA 间接血凝试验SAT 试管凝集试验PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳ARIMA 自回归移动平均模型NCBI 美国国立生物技术信息中心抗-HBe 乙型肝炎e抗体HBeAg 乙型肝炎e抗原

目的 原核表达并纯化麻疹病毒(measles virus,MV)核蛋白(N),免疫家兔后制备兔抗MV N抗血清,并鉴定其特异性.方法 以MV-S191疫苗株基因组为模板,PCR扩增N基因3个片段,构建重组表达质粒pGEX-MV-N1、pGEX-MV-N2和pGEX-MV-N3,分别转化至E.coli BL21(DE3)中诱导表达N-末端带有GST标签的融合蛋白GST-MV-N1、GST-MV-N2和GST-MV-N3,纯化后,分别与等体积弗氏完全佐剂(初次免疫)、弗氏不完全佐剂(加强免疫)混合,乳化均匀后各免疫1只雌性家兔,共免疫6次,采集全血,分离血清获得兔抗MV N抗血清,Western blot法及间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)鉴定其特异性.结果 重组表达质粒 pGEX-MV-N1、pGEX-MV-N2 和pGEX-MV-N3经双酶切、PCR及测序鉴定证明构建正确;表达的GST-MV-N1和GST-MV-N3融合蛋白相对分子质量分别约42 000和39 000,主要以包涵体形式存在,纯度分别为96％和85％,而上清和沉淀中均未见GST-MV-N2融合蛋白的表达;兔抗MVN3抗血清能特异性识别MV-S191感染细胞后表达的N蛋白,且特异性高于兔抗MV-N1抗血清.结论 成功制备了兔抗MV N抗血清,为重组MV疫苗的研发以及MV结构蛋白抗体的制备提供了技术支持.

非大疱性类天疱疮与大疱性类天疱疮相关，临床表现多样，多数伴有瘙痒，缺乏大疱性类天疱疮的紧张性水疱或大疱的典型临床表现，误诊率高。组织病理缺乏特异性，需要依靠直接免疫荧光、间接免疫荧光或盐裂间接免疫荧光明确诊断。部分无疱性类天疱疮会发展为大疱性类天疱疮，预后较大疱性类天疱疮好，但由于易被延迟诊断，使得控制症状的药物用量大，药物不良反应多。

目的:初步探讨白细胞介素（IL）-23受体（IL-23R）过表达对实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）模型小鼠辅助性T细胞17 （Th17细胞）/调节性T细胞（Treg细胞）平衡的影响。方法:8周龄雌性C57BL/6J小鼠12只，随机分为LV-Ctrl组、LV-IL-23R组，每组各6只。两组小鼠经尾静脉分别注射LV-Ctrl、LV-IL-23R慢病毒；注射后7 d采用光感受器间维生素A类结合蛋白 1-20主动免疫构建EAU小鼠模型。免疫后13 d开始，每2天使用间接检眼镜观察小鼠眼底并进行临床评分。免疫后30 d，苏木精-伊红染色观察小鼠视网膜组织病理学改变。酶联免疫吸附测定检测两组小鼠血清中IL-17水平；流式细胞仪检测Th17细胞和Treg细胞比例；实时荧光定量聚合酶链反应检测IL-23R、IL-17、维甲酸相关孤儿受体γt （RORγt）、IL-10和叉头状转录因子p3 (Foxp3） mRNA相对表达量。组间比较采用重复测量方差分析、独立样本Mann-Whitney U检验和独立样本 t检验。 结果:与LV-Ctrl组比较，LV-IL-23R组小鼠视网膜炎症反应更重。免疫后13 d，LV-IL-23R组、LV-Ctrl组小鼠眼底炎症评分差异无统计学意义（ t=-2.001， P=0.058 ）；免疫后15~ 29 d，LV-IL-23R组小鼠眼底炎症评分均高于LV-Ctrl组，差异有统计学意义（ t=-4.429、-6.578、-7.768、-10.183、-6.325、-7.304、-4.841、-6.872， P<0.001）。组织病理学检查显示，与LV-Ctrl组比较，LV-IL-23R组眼底炎性细胞浸润增多，视网膜结构破坏更为严重，组织病理学评分显著升高，差异有统计学意义（ t=-4.339， P=0.001）。与LV-Ctrl组比较、LV-IL-23R组小鼠脾脏中IL-23R mRNA相对表达量显著升高，差异有统计学意义（ Z=2.087， P=0.037）；T细胞中IL-17、RORγt mRNA相对表达量增加，IL-10、Foxp3 mRNA相对表达量降低，差异均有统计学意义（ t=-6.313、-5.922、4.844、7.572， P=0.003、0.004、0.008、0.002 ）。与LV-Ctrl组比较、LV-IL-23R组小鼠血清中IL-17水平明显升高，差异有统计学意义（ t=-5.423 ， P=0.002）；脾脏和淋巴结中Th17细胞比例明显升高，Treg细胞比例显著降低，差异有统计学意义（ t=-4.290、3.700， P=0.002、0.006）。 结论:IL-23R过表达可促使EAU小鼠的Th17/Treg失衡，加重EAU临床及病理表现。

患者，男，44岁，因"双眼视力下降5~6 d"于2021年4月27日在天津医科大学眼科医院就诊。既往无眼部疾病史，否认糖尿病、高血压以及外伤史、吸烟史。浅表性胃炎病史3~4年；饮酒史3~4年。近2个月饮350~400 g白酒/d（根据患者提供饮用白酒的信息计算196~224 g乙醇/d，甲醇含量在国家卫生标准范围内），停酒后手抖。眼部检查：裸眼视力（UCVA）：右眼0.01，左眼0.02；最佳矫正视力（BCVA）：右眼0.02，左眼0.1；眼压：右眼16.2 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），左眼17.5 mmHg。双眼结膜、角膜、前房、晶状体未见异常；瞳孔直径：右眼3.5 mm，左眼3.5 mm，直接、间接对光反射正常。双眼眼底视盘界清色可，视网膜血管走行自然，黄斑未见异常。超广角眼底照相显示：双眼视网膜平伏，未见异常。眼底自发荧光示：双眼黄斑区小片低自发荧光（见图1）。光学相干断层扫描（OCT）示：双眼鼻侧视网膜神经纤维层（Retinal nerve fiber layer, RNFL）略薄，双眼颞下RNFL略增厚（见图2）。光学相干断层扫描血管成像（Optical coherence tomography angiography, OCTA）示：视网膜浅层及深层血流密度未见异常。视觉诱发电位（Visual evoked potential, VEP）示：双眼P100潜伏期延长，振幅正常（见图3）。血常规、生化、电解质检查示：红细胞3.60×10 12/L，血红蛋白浓度129 g/L，平均红细胞血红蛋白含量35.8 pg，平均红细胞血红蛋白浓度358 g/L；谷丙转氨酶235 U/L，谷草转氨酶295 U/L，r-谷氨酰转肽酶217 U/L，总胆红素33.00 μmol/L，直接胆红素14.80 μmol/L；血钾3.43 mmol/L。免疫常规示：梅毒、HIV、乙肝、丙肝抗体均为阴性。头颅MRI（外院）示：脑实质MRI平扫未见异常，右侧中下鼻甲肥大。诊断：双眼急性乙醇中毒性视神经病变。嘱患者戒酒，予以营养神经改善微循环治疗：口服甲钴胺片0.5 mg/次，每日3次，维生素B1片10 mg/次，每日3次，氯化钾缓释片0.1 mg/次，每日2次，银杏叶提取物片40 mg/次，每日3次；双眼点七叶洋地黄双苷滴眼液每日4次，溴酚酸钠滴眼液每日2次。患者遵医嘱用药20 d后复查视力，BCVA：右眼0.8，左眼0.9。眼底视盘界清色可，黄斑中心凹光反射可见。嘱继续戒酒，改善营养治疗，半年后复查。

目的:对我国轮状病毒A组G2P[4]流行株进行分离培养和鉴定。方法:采用轮状病毒抗原胶体金法筛查56份病毒性腹泻患儿粪便标本，对阳性样本VP7和VP4基因测序确定其G和P基因型别，并接种至MA-104细胞，持续传代。运用SDS-PAGE电泳、实时荧光定量PCR、间接免疫荧光、嗜斑实验和电镜等技术进行鉴定。结果:检出轮状病毒阳性样本46份，测序确定G2P [4]型2株，细胞培养盲传5代，嗜斑纯化后G2P[4]型毒株RNA PAGE电泳图呈DS-1株轮状病毒的（4:2:3:2）形态，电镜下呈车轮状形态，轮廓清晰，病毒滴度随时间变化逐步上升。结论:成功从粪便样本中分离和培养出G2P[4]型A组轮状病毒。

目的:掌握克里米亚-刚果出血热病毒（CCHFV）核蛋白（NP）和糖蛋白（GP）片段的精细抗原表位谱分布，明确优势抗原表位在克里米亚-刚果出血热（CCHF）实验室检测中的价值。方法:2014—2021年在新疆大学生命科学院实验室将CCHFV YL04057株采用改良生物肽合成方法分段表达出由8个氨基酸组成的最小合成短肽，以CCHFV多克隆抗体或单克隆抗体14B7（IgM）或CCHFV阳性羊血清为抗体，用免疫印迹方法鉴定出NP和GP片段上具有抗原活性的最小抗原表位（BCE），并采用邻接法将获得的具有序列多态性的BCE与不同地区的CCHFV进行空间聚类，确定BCE组合方式与地理区域分布的相关性，探讨其在建立血清学诊断中的应用价值。采用原核表达质粒（pET-32a、pGEX-KG）和带有不完整谷胱甘肽（GST188）标签的原核表达质粒（pXXGST-ST-1）构建和表达NP片段上6个不同肽段长度的优势抗原表位，建立间接酶联免疫吸附测定（ELISA）检测方法，以经免疫荧光法（IFA）鉴定的CCHF羊血清为对照，统计分析不同肽段长度的抗原表位重组蛋白与IFA检测结果的特异度、敏感度和总符合率。结果:CCHFV NP和GP片段共有30个具有抗原活性的BCE，其中NP片段抗原表位集中的核心中间片段NP 2（aa 170~305）有6个BCE，两端的NP 1（aa 1~200）和NP 3（aa 286~482）有9个BCE；GP片段的Gc（aa 1~558）和Gn（aa 533~708）片段有14个BCE和1个包含15个氨基酸的长抗原肽（AP），NP片段BCE氨基酸序列的同源性为97.1%，GP片段对应的同源性为89.1%。在GP片段9个具有序列多态性的BCE中，由GnEc1、GnE2、GnE4、GcE3、GcE6和GcAP-4（Ap）6个组合BCE可将15株来自全球不同地区的CCHFV聚类成亚洲Ⅰ、亚洲Ⅱ、非洲Ⅰ、非洲Ⅱ和欧洲 5个地理类群。构建表达的PET-32a-NP（全长）、PGEX-KG-NP 2（aa 170~305）、pGEX-KG-NP 2-1（aa 235~275）、PGEX-KG-NP 2-1-1（aa 237~256）、pXXGST-1-NP 2-1-2（aa 250~265）和PGEX-KG-NP 2-1-3（aa 260~276）6个重组蛋白CCHFV NP兔多克隆抗血清（pAb）免疫印迹反应阳性，以33份经IFA CCHF检测的羊血清为参照，以NP 2和NP 2-1 2个片段构建的重组蛋白为抗原建立的间接ELISA检测方法检测敏感度、特异度和总符合率最好，敏感度分别为73.4%（11/15）和66.7%（10/15），特异度分别为100%（18/18）和94.4%（17/18），总符合率分别为87.9%（29/33）和81.8%（27/33）。 结论:CCHFV NP和GP上分布着数量较多的具有抗原免疫活性的BCE，其中，优势抗原表位在CCHF实验室血清学诊断中具有较高的应用价值。

探讨2021—2022 年期间儿童急性呼吸道感染（ARI）患者的8种常见呼吸道病原体的情况。回顾性研究选取2021年9月至2022年8月在甘肃省妇幼保健院就诊的8 710例ARI患者作为研究对象，患者年龄为0~17岁，其中男性患儿5 048例，女性患儿3 662例。采用间接免疫荧光法对8种常见呼吸道病原体包括甲型流感病毒（FluA）、乙型流感病毒（FluB）、副流感病毒（PIV）、呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、肺炎支原体（MP）、肺炎衣原体（CP）、柯萨奇病毒B组（CoxB）IgM抗体进行检测，采用 χ2检验对结果进行分析。结果显示，8 710例ARI患儿中共检出阳性1 497例，阳性检出率为17.19%。在8种常见呼吸道病原体中MP检出率为11.34%，占比为66.0%，其次依次为FluB、CoxB、PIV、RSV、ADV、FluA和CP，占比分别为13.83%、9.55%、6.01%、2.61%、1.47%、0.40%和0.13%。其中呼吸道病毒（FluA、FluB、RSV、ADV、PIV、CoxB）占比为33.86%。不同性别患儿之间PIV、ADV 和MP检出率比较，差异有统计学意义（ χ2=6.814、5.154、17.784， P<0.05）。学龄期患儿（6~17岁）检出率最高，占比33.27%（184/553）。ARI患者8种常见呼吸道病原体检出率在春季、冬季较高，夏季和秋季较低。综上，2021—2022 年期间本院ARI患者以MP和FluB感染为主，8种常见呼吸道病原体感染的高峰期是春季、冬季，6~17岁年龄段ARI患者8种常见呼吸道病原体检出率最高。

患者男，13岁。因左眼视力下降10 d到安徽医科大学第二附属医院眼科就诊。既往身体健康，无外伤史及手术病史。眼科检查：右眼矫正视力1.0，左眼矫正视力0.12。双眼眼压正常。双眼眼前节未见明显异常。左眼相对性传入性瞳孔障碍（＋）。眼底检查，左眼视盘边界欠清，下方视盘隆起，黄斑区星芒状渗出（图1A ）。眼部彩色超声检查，左眼视盘前方球壁稍隆起。光相干断层扫描（OCT）检查，左眼颞侧视盘明显水肿隆起，黄斑区渗出部位可见强反射信号（图1B ）。荧光素眼底血管造影（FFA）检查，早期左眼视盘及其周边毛细血管扩张，视盘颞下方荧光素渗漏，随造影时间延长，荧光素渗漏明显增加，黄斑周围毛细血管未见渗漏（图1C ）。右眼上述各项检查均未见异常。疑诊：左眼视神经视网膜炎。为明确病因，进一步询问病史。患者表示平时喜欢和猫狗玩耍，2周前曾被猫抓伤过右手；1周前曾有低热、咳嗽等感冒症状，就诊时均已消失，因此并未引起重视。进一步查体可见患者耳前及腋下淋巴结肿大，触痛（＋）；四肢及躯干皮肤可见红斑性有痂丘疹，直径2~ 6 mm。血清学间接免疫荧光法（IFA）测得巴尔通体免疫球蛋白（Ig）G样本滴度为1∶256，提示患者近期有巴尔通体感染。结合患者病史、全身及眼部典型临床表现，诊断：猫抓病、左眼急性视神经视网膜炎。

目的:探讨C-Fos与丝裂原活化蛋白激酶14（MAPK14）相互作用参与调控类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞（RA-FLS）增殖、凋亡的机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链式反应PCR（RT-qPCR）、蛋白质印迹法检测RA-FLS和正常成纤维样滑膜细胞（FLS）细胞C-Fos mRNA和蛋白表达水平。将RA-FLS细胞分为C-Fos过表达组（转染pcDNA3.1-Myc-C-Fos质粒）、过表达对照组（转染pcDNA3.1-Myc空质粒）、C-Fos沉默组（转染siRNA-C-Fos）、沉默对照组（转染siRNA-NC）和空白对照组（未加任何处理）。细胞计数试剂（CCK-8）检测各组细胞增殖能力，流式细胞实验检测各组细胞凋亡的变化，蛋白质印迹法检测各组细胞C-Fos、MAPK14、p-MAPK14、ki-67、Bax蛋白表达水平。间接免疫荧光实验检测C-Fos和MAPK14在细胞中的定位关系。免疫共沉淀方法检测C-Fos-MAPK14的相互作用关系。采用GraphPad Prism 5统计学软件进行数据分析，正态分布的数据以 ± s表示，2组间比较采用独立样本 t检验；多组比较采用应采用方差分析，进一步两两比较采用LSD- t检验。 结果:RA-FLS细胞中C-Fos mRNA（5.37±0.91）相对表达量明显高于FLS细胞（1.46±0.32）（ t=9.94， P<0.001）。C-Fos在RA-FLS蛋白水平（1.12±0.15）均显著高于FLS（0.81±0.07）（ t=3.18， P=0.017）。与空白对照组和过表达对照组相比，过表达C-Fos可显著促进RA-FLS细胞增殖，抑制细胞凋亡率，上调细胞p-MAPK14、ki-67蛋白水平，下调细胞Bax蛋白水平（均 P<0.05）；与空白对照组和沉默对照组相比，沉默C-Fos可显著抑制RA-FLS细胞的增殖，增加细胞凋亡率，下调细胞p-MAPK14、ki-67蛋白水平，上调细胞Bax蛋白表达水平（均 P<0.05）。间接免疫荧光实验结果表明C-Fos与MAPK14均可在RA-FLS细胞核中表达，免疫共沉淀实验验证C-Fos与MAPK14蛋白具有相互作用。 结论:C-Fos与MAPK14相互作用促进磷酸化MAPK14蛋白表达，从而促进RA-FLS增殖，并抑制凋亡。