目的:探讨前扣带回(anterior cingulate cortex，ACC)调控神经生长因子(nerve growth factor，NGF)诱导的慢性非特异性腰痛大鼠痛行为与焦虑样行为的潜在机制。方法:成年雄性8周龄SPF级SD大鼠96只，按照随机数字表法分为4组(每组24只)：对照组、模型组、对照+D-AP5组(D-AP5为N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂)和模型+D-AP5组。采用第5腰椎左侧多裂肌注射NGF建立腰痛大鼠模型(注射2次，间隔5 d)。造模5 d后，对照+D-AP5组和模型+D-AP5组大鼠右侧前扣带回注射D-AP5(2 μg，0.3 μL，1次/d，连续3 d)，模型组和对照组则注射等体积0.9%氯化钠溶液。采用机械刺激和冷热板实验评估大鼠疼痛阈值，旷场实验评估大鼠焦虑样行为，免疫荧光法检测脊髓胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)阳性细胞和c-Fos(一种即早基因)阳性细胞密度，Western blot实验检测脊髓GFAP、c-Fos蛋白、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phosphorylated c-Jun N-terminal kinases，p-JNK)、单核细胞趋化蛋白-1 (monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)和趋化因子(C-X-C基序)配体1[chemokine (C-X-C motif) ligand 1，CXCL-1]的表达。采用SPSS 23.0软件进行统计分析，正态分布的数据组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用Tukey检验；非正态分布的数据组间比较采用Krusal-Wallis H检验，两两比较采用Mann-Whitney U检验并对 P值进行Bonferroni校正。 结果:4组大鼠腰部压力疼痛阈值(pressure pain threshold，PPT)、机械缩足阈值(paw withdrawal threshold，PWT)均差异有统计学意义( F＝53.498，41.939，均 P<0.001)。造模后7 d，模型+D-AP5组PPT[(418.5±46.9)g]、足底PWT[(55.6±7.1)g]均高于模型组[(290.0±32.0)g，(30.5±7.5)g](均 P<0.001)。各组旷场实验中央区活动距离百分比( H＝11.922， P<0.01)、中央区活动时间百分比( H＝21.614， P<0.001)均差异有统计学意义。模型+D-AP5组中央区活动时间百分比高于模型组[5.6(4.3，7.9)%，3.1(2.1，3.8)%]( P<0.01)。各组左侧脊髓背角浅层GFAP、c-Fos阳性细胞密度均差异有统计学意义( H＝49.085， F＝18.120，均 P<0.001)。模型+D-AP5组左侧背角浅层GFAP [34.3(21.1，47.5)个/mm 2]、c-Fos阳性细胞密度[(52.7±39.4)个/mm 2]低于模型组[76.5(68.6，94.9)个/mm 2，(112.4±63.7)个/mm 2](均 P<0.001)。各组腰2节段GFAP、c-Fos、p-JNK、MCP-1、CXCL-1蛋白表达均差异有统计学意义( F＝49.413，38.437，41.867，36.735，130.951，均 P<0.001)。模型+D-AP5组腰2节段GFAP(1.7±0.5)、c-Fos(1.1±0.1)、p-JNK(1.7±0.3)、MCP-1(1.0±0.4)、CXCL-1(0.8±0.1)蛋白表达均低于模型组[(4.3±0.7)，(2.6±0.5)，(2.8±0.4)，(2.9±0.4)，(3.5±0.4)](均 P<0.01)。 结论:ACC可调控慢性非特异性腰痛大鼠机械性痛觉过敏及焦虑样行为，这可能与脊髓星形胶质细胞、p-JNK通路、MCP-1和CXCL1的参与有关。

目的:评价天麻素对神经病理性痛大鼠脊髓腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/瞬时受体电位通道A1(TRPA1)信号通路的影响。方法:SPF级健康雄性SD大鼠36只，6～8周龄，体质量200～230 g，采用随机数字表法分为3组( n＝12)：假手术＋生理盐水组(SHAM组)、神经病理性痛＋生理盐水组(NP组)和神经病理性痛＋天麻素组(GAS组)。2%异氟烷麻醉下，采用坐骨神经慢性结扎损伤法制备大鼠神经病理性痛模型，SHAM组未结扎。造模后连续14 d，GAS组腹腔注射天麻素100 mg/kg，SHAM组和NP组注射等量生理盐水。分别于造模前1 d(T 0)、造模后第1、3、5、7、10和14天(T 1-6)时测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。在T 4和T 6时测完痛阈后，2%异氟烷麻醉处死大鼠取L 4-6脊髓组织，采用qRT-PCR法检测TRPA1 mRNA表达，Western blot法检测脊髓TRPA1、AMPK和p-AMPK表达，免疫荧光染色法检测脊髓TRPA1表达；免疫组织化学染色法观察TNF-α、IL-1β和c-fos的表达。 结果:与SHAM组相比，NP组T 1-6时MWT和TWL降低，脊髓TRPA1 mRNA、TRPA1、TNF-α、IL-1β和c-fos表达上调，p-AMPK表达下调( P<0.05)，AMPK表达差异无统计学意义( P>0.05)；与NP组相比，GAS组T 3-6时MWT和T 2-6时TWL升高，脊髓TRPA1 mRNA、TRPA1、TNF-α、IL-1β和c-fos表达下调，p-AMPK表达上调( P<0.05)，AMPK表达差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:天麻素减轻大鼠神经病理性痛的机制可能与调控AMPK/TRPA1信号通路有关。

目的:探讨C-Fos与丝裂原活化蛋白激酶14（MAPK14）相互作用参与调控类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞（RA-FLS）增殖、凋亡的机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链式反应PCR（RT-qPCR）、蛋白质印迹法检测RA-FLS和正常成纤维样滑膜细胞（FLS）细胞C-Fos mRNA和蛋白表达水平。将RA-FLS细胞分为C-Fos过表达组（转染pcDNA3.1-Myc-C-Fos质粒）、过表达对照组（转染pcDNA3.1-Myc空质粒）、C-Fos沉默组（转染siRNA-C-Fos）、沉默对照组（转染siRNA-NC）和空白对照组（未加任何处理）。细胞计数试剂（CCK-8）检测各组细胞增殖能力，流式细胞实验检测各组细胞凋亡的变化，蛋白质印迹法检测各组细胞C-Fos、MAPK14、p-MAPK14、ki-67、Bax蛋白表达水平。间接免疫荧光实验检测C-Fos和MAPK14在细胞中的定位关系。免疫共沉淀方法检测C-Fos-MAPK14的相互作用关系。采用GraphPad Prism 5统计学软件进行数据分析，正态分布的数据以 ± s表示，2组间比较采用独立样本 t检验；多组比较采用应采用方差分析，进一步两两比较采用LSD- t检验。 结果:RA-FLS细胞中C-Fos mRNA（5.37±0.91）相对表达量明显高于FLS细胞（1.46±0.32）（ t=9.94， P<0.001）。C-Fos在RA-FLS蛋白水平（1.12±0.15）均显著高于FLS（0.81±0.07）（ t=3.18， P=0.017）。与空白对照组和过表达对照组相比，过表达C-Fos可显著促进RA-FLS细胞增殖，抑制细胞凋亡率，上调细胞p-MAPK14、ki-67蛋白水平，下调细胞Bax蛋白水平（均 P<0.05）；与空白对照组和沉默对照组相比，沉默C-Fos可显著抑制RA-FLS细胞的增殖，增加细胞凋亡率，下调细胞p-MAPK14、ki-67蛋白水平，上调细胞Bax蛋白表达水平（均 P<0.05）。间接免疫荧光实验结果表明C-Fos与MAPK14均可在RA-FLS细胞核中表达，免疫共沉淀实验验证C-Fos与MAPK14蛋白具有相互作用。 结论:C-Fos与MAPK14相互作用促进磷酸化MAPK14蛋白表达，从而促进RA-FLS增殖，并抑制凋亡。

目的:探讨星状神经节阻滞(stellate ganglion block，SGB)对创伤后应激障碍(post-traumatic stress disorder，PTSD)模型小鼠条件性恐惧记忆的调控作用及其机制。方法:选取8～9周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠，根据随机数字表法分组，并完成以下实验：(1)32只小鼠分为PTSD组、PTSD＋七氟烷组(Sev组)、PTSD＋生理盐水组(NS组)、PTSD＋SGB组(SGB组)，每组8只。采用条件性恐惧实验建立PTSD模型，检测4组小鼠的恐惧记忆；(2)取3只小鼠，采用伪狂犬病病毒(pseudorabies virus，PRV)逆行示踪观察星状神经节(stellate ganglion，SG)到脑内的神经投射；(3)取24只小鼠，分为空白对照(negative control，NC组)、Sev组、NS组、SGB组，每组6只，采用免疫荧光染色观察蓝斑核(locus coeruleus，LC)去甲肾上腺素(norepinephrine，NE)能神经元(LC NE)中c-Fos的表达；(4)取3只小鼠，采用霍乱毒素B亚基(cholera toxin subunit B，CTB)逆行示踪LC到基底外侧杏仁核(basolateral amygdala，BLA)的神经投射；(5)使用化学遗传学和光遗传学方法，借助病毒载体增强神经元活性，观察LC NE-BLA神经环路的化学或光遗传学激活对小鼠恐惧记忆的影响。采用GraphPad Prism 8.0对数据进行单因素方差分析。 结果:(1)造模后，NS组小鼠在测试阶段僵立时间百分比[(59.83±6.31)%]与PTSD组[(62.21±7.90)%]和Sev组[(63.61±8.48)%]相比均差异无统计学意义(均 P>0.05)，SGB组小鼠僵立时间百分比[(47.78±7.02)%]低于NS组( P<0.05)。(2)SG注射PRV病毒示踪结合免疫荧光结果显示，LC NE神经元投射至SG。(3)免疫荧光染色检测小鼠LC NE神经元活动性，结果显示与NC组[(5.52±2.70)%]相比，NS组[(16.75±3.44)%]和Sev组[(14.90±2.73)%]小鼠LC NE神经元中c-Fos表达均明显较高(均 P<0.01)，SGB组小鼠c-Fos表达[(10.90±3.29)%]较NS组低( P<0.05)。(4)CTB逆行追踪结果显示，LC神经元投射到BLA。(5)SGB小鼠经化学遗传激活后，其僵立时间百分比高于激活前[(67.02±9.49)%，(45.97±7.15)%] ( P<0.01)；SGB组小鼠经光遗传学激活后，小鼠的僵立时间百分比也明显高于激活前[(77.37±11.66)%，(47.76±9.63)%] ( P<0.001)。 结论:SGB可以有效降低PTSD模型小鼠的恐惧记忆，并降低了小鼠LC NE神经元活动性，这可能是通过抑制LC NE-BLA神经环路机制实现的。

目的:探讨 K-ras基因对PM 2.5染毒人支气管上皮（HBE）细胞部分癌基因和抑癌基因表达的影响。 方法:于2019年9月，根据 K-ras基因mRNA序列，设计合成干扰序列，转染HBE细胞构建 K-ras基因沉默细胞。用10、50 μg/ml PM 2.5混悬液及10 μmol/L Cr 6+分别染毒HBE细胞和 K-ras基因沉默细胞，实时荧光定量PCR检测 c-myc、 c-fos、 N-ras、 cyclin-D1、 p16、 p53基因的mRNA表达水平，Western blot检测c-myc和p53蛋白表达水平。 结果:K-ras基因沉默细胞中 K-ras基因mRNA表达水平下降（80.5%±3.6%），K-ras蛋白表达水平下降（58.9%±4.7%）（ P<0.01）。各浓度PM 2.5染毒HBE细胞组、 K-ras沉默细胞组及10 μmol/L Cr 6+染毒HBE细胞组、 K-ras沉默细胞组 c-myc、 c-fos、 N-ras、 cyclin-D1基因mRNA表达水平均高于未染毒相应细胞对照组， p16和 p53基因mRNA表达水平低于未染毒相应细胞对照组（ P<0.01）；10 μg/ml PM 2.5染毒 K-ras沉默细胞组 c-myc、 c-fos、 p16基因mRNA表达水平低于10 μg/ml PM 2.5染毒HBE细胞组， p53基因mRNA表达水平高于10 μg/ml PM 2.5染毒HBE细胞组（ P<0.01）；50 μg/ml PM 2.5染毒 K-ras沉默细胞组 c-fos、 N-ras、 cyclin-D1、 p16和 p53基因mRNA表达水平均低于50 μg/ml PM 2.5染毒HBE细胞组（ P<0.01）。50 μg/ml PM 2.5染毒HBE细胞组c-myc蛋白表达水平高于未染毒HBE细胞组，p53蛋白表达水平低于未染毒HBE细胞组（ P<0.05）；50 μg/ml PM 2.5染毒 K-ras沉默细胞组c-myc蛋白表达水平高于未染毒 K-ras沉默细胞组（ P<0.05）。 结论:PM 2.5可引起HBE细胞癌基因表达升高， K-ras基因沉默能抑制PM 2.5诱导HBE细胞癌基因的表达。

骨纤维异常增殖症（FD）是一种罕见的良性骨疾病，可累及全身骨骼，其中颅面部骨质是常被累及的部位之一。颅面骨纤维异常增殖症（CFD）多以无痛渐进的非炎性肿块作为临床表现。目前，CFD的病因和发病机制存在基因突变、信号通路异常激活、白细胞介素（IL-6）升高、c-fos 原癌基因异常激活和成纤维细胞生长因子23（FGF23）过度表达等几种学说。CFD的临床表现多样，主要依靠患者的主诉、病史、临床表现、体格检查和影像学检查来诊断。手术是治疗CFD最主要和最有效的治疗方法，手术方案主要包括保守和根治手术方案两大类。具体的手术方案需根据病情和患者的意愿来制定。近年来，CFD的药物治疗也取得了巨大进展。治疗CFD的药物主要包括抑制骨吸收和促进骨形成两方面。因此，CFD的治疗需要在多学科协作团队的共同参与下，根据患者的具体病情制定最适合的个体化治疗方案。

目的:研究p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）基因沉默对大气细颗粒物（PM 2.5）染毒肝细胞（L02细胞）相关基因表达的影响。 方法:于2019年6至9月，根据GenBank提供的p38MAPK基因序列，设计合成3条干扰序列，退火后连接到PLVX-shRNA2-puro中，将重组慢病毒载体转染L02细胞。用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）和蛋白免疫印迹（Western blotting）法对p38MAPK基因沉默效果进行鉴定。用浓度为50 μg/ml的PM 2.5水溶物和10 μmol/L阳性对照Cr 6+分别染毒L02细胞、p38MAPK基因沉默细胞24 h，同时设立空白对照组。用荧光定量PCR检测癌基因（c-fos、c-myc、k-ras）、抑癌基因（p53）和凋亡基因（Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9）的相对表达水平。 结果:p38MAPK基因沉默细胞中p38MAPK基因和蛋白表达水平较正常L02细胞明显下降（ P<0.05），p38MAPK基因沉默细胞株构建成功。与空白对照组比较，PM 2.5染毒L02细胞组癌基因c-fos、c-myc、k-ras和凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达水平升高，抑癌基因p53表达水平下降，差异均有统计学意义（ P<0.05）；与PM 2.5染毒L02细胞组比较，PM 2.5染毒p38MAPK基因沉默细胞组癌基因c-fos、c-myc、k-ras和凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达水平下降，抑癌基因p53表达水平升高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:PM 2.5对L02细胞癌基因、抑癌基因和凋亡基因表达有明显影响，而p38MAPK基因沉默可抑制PM 2.5对L02细胞的影响。

目的:探讨促肾上腺皮质激素释放因子2型受体（CRFR2）对慢性偏头痛小鼠痛觉敏化及焦虑的调控作用及潜在机制。方法:将48只C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、NBI35965组、K41498组，每组12只。后3组小鼠于第1、3、5、7、9天腹腔注射10 mg/kg硝酸甘油建立慢性偏头痛模型，NBI35965组及K41498组小鼠于第2、4、6、8天双侧三叉神经脊束尾核分别注射100 nL NBI35965、K41498溶液，对照组小鼠注射同体积生理盐水。第1、3、5、7、9天腹腔注射2 h后及第10天上午11时采用Von frey纤维丝检测小鼠眶额部机械痛阈值。于第11天上午11时采用高架十字迷宫实验检测小鼠的焦虑样行为。采用Western blotting实验检测小鼠三叉神经脊束尾核中促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）、促肾上腺皮质激素释放因子1型受体（CRFR1）、CRFR2蛋白的表达。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测小鼠三叉神经脊束尾核中 CRFR1及 CRFR2 mRNA的表达。采用免疫荧光染色检测小鼠三叉神经脊束尾核中降钙素基因相关肽（CGRP）、即刻早期基因（c-fos）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）及离子钙结合适配器分子1（Iba-1）蛋白的表达。 结果:（1）与对照组比较，模型组、NBI35965组、K41498组小鼠第3、5、7、9、10天的眶额部机械痛阈值较低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与模型组比较，K41498组小鼠第7、9、10天的眶额部机械痛阈值较高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。（2）与对照组比较，模型组、NBI35965组、K41498组小鼠的开臂进入次数较少，开臂停留时间较短，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与模型组比较，K41498组小鼠的开臂进入次数较多，开臂停留时间较长，差异均有统计学意义（ P<0.05）。（3）与对照组比较，模型组、NBI35965组、K41498组小鼠三叉神经脊束尾核中CRF和CRFR2蛋白的表达较高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与模型组比较，K41498组小鼠三叉神经脊束尾核中CRF蛋白的表达较低，差异有统计学意义（ P<0.05）。（4）与对照组比较，模型组、NBI35965组、K41498组小鼠三叉神经脊束尾核中 CRFR2 mRNA的表达较高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。（5）与对照组比较，模型组、NBI35965组、K41498组小鼠三叉神经脊束尾核中CGRP、c-fos、Iba-1、GFAP蛋白的表达均较高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与模型组比较，K41498组小鼠三叉神经脊束尾核中CGRP及c-fos蛋白的表达较低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:CRFR2通过调控三叉神经脊束尾核的神经元活化及CGRP释放而影响慢性偏头痛小鼠眶额部痛觉敏化及焦虑样行为的发生发展。

目的:探讨水溶性膳食纤维低聚果糖(FOS)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠黏膜屏障的保护作用，为UC的治疗寻找新的药物选择。方法:采用4%葡聚糖硫酸钠诱导7 d建立UC小鼠模型，将6~8周雄性C57BL/6小鼠随机分为3组：对照组饮用蒸馏水；模型组给予4%葡聚糖硫酸钠；FOS组在4%葡聚糖硫酸钠诱导的同时给予20 mg/mL的FOS灌胃；每日监测小鼠体重、粪便性状及便血情况，计算疾病活动指数(DAI)评分。实验结束后，HE染色观察小鼠结肠组织病理改变，应用实时荧光定量PCR、Western Blot及免疫荧光染色检测各组小鼠肠道中紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-1、Occludin的表达水平。结果:与对照组相比，模型组小鼠体重降低、DAI评分升高；而FOS组小鼠体重高于模型组，DAI评分低于模型组( P<0.05)。与对照组相比，模型组小鼠结肠长度缩短[(7.52±0.41)cm比(5.48±0.19)cm]，组织病理学评分增高(0.53±0.38比3.51±0.18)；而FOS组小鼠结肠长度[(6.82±0.63)cm]长于模型组，病理学评分(2.33±0.63)低于模型组，差异均有统计学意义( P<0.05)。模型组小鼠ZO-1、Claudin-1、Occludin蛋白及其mRNA表达水平均较对照组降低( P<0.05)；而FOS组小鼠均较模型组增高( P<0.05)。 结论:FOS能够减轻UC小鼠体重下降症状，降低其DAI评分，改善结肠组织炎症，上调紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-1、Occludin的表达，保护肠黏膜屏障。

目的:探讨血浆外泌体源性miR-20a-5p通过靶向PIK3R1对雌激素受体阳性的乳腺癌（estrogen receptor-positive breast cancer，ER（+）BC）骨转移的影响。方法:借助生物信息学网站检索与ER（+）BC骨转移相关的数据集，选择miR-20a-5p纳入研究。收集90例ER（+）BC患者与相对应的健康人的血浆，检测血浆中PIK3R1的表达，从血浆中提取外泌体，检测外泌体中miR-20a-5p的表达。双荧光素酶报告实验验证miR-20a-5p与PIK3R1的靶向调控关系。分别将转染NC-inhibitor、miR-inhibitor的外泌体或转染si-NC、si-PIK3R1的ER（+）BC细胞注射到小鼠左心室，Micro-CT扫描骨组织并进行骨组织TRAP染色。将转染NC-inhibitor、miR-inhibitor的外泌体与转染si-NC、si-PIK3R1的ER（+）BC细胞共培养后，使用Western blot检测破骨细胞分子c-fos、NFATc1的表达。结果:qRT-PCR检测发现较正常血浆外泌体（1±0.26）或细胞（1±0.13），miR-20a-5p在ER（+）BC血浆外泌体（1.49±0.27）（ t=12.40， P<0.001）及BC细胞系MCF-7（1.64±0.13）（ t=6.03， P=0.004）、BT474（1.49±0.11）（ t=4.98， P=0.008）、T47D（1.98±0.15）（ t=8.55， P=0.001）中均表达升高。而与正常血浆外泌体（1±0.25）或细胞（1±0.10）比较，PIK3R1在ER（+）BC血浆外泌体（0.69±0.24）（ t=8.48， P<0.001）及ER（+）BC细胞系MCF-7（0.73±0.05）（ t=4.18， P=0.014）、BT474（0.61±0.05）（ t=6.04， P=0.004）、T47D（0.34±0.04）（ t=10.61， P<0.001）中则表达降低。PIK3R1在血浆（ t=8.48， P<0.001）及ER（+）BC细胞系MCF-7（ t=4.18， P=0.014）、BT474（ t=6.04， P=0.004）、T47D（ t=10.61， P<0.001）中则表达降低。PIK3R1被证实为miR-20a-5p的靶基因。与NC-inhibitor组小鼠相比，miR-inhibitor组小鼠的骨小梁组织体积（ t=3.32， P=0.029）、骨小梁区域体积（ t=6.24， P=0.003）、骨体积分数（ t=7.35， P=0.002）和骨矿物密度（ t=13.72， P<0.001）均增加，成熟破骨细胞数量减少。与NC-inhibitor组比较，miR-inhibitor组细胞中c-fos（ t=9.04， P=0.001）和NFATc1（ t=13.42， P<0.001）的表达减少。与miR-inhibitor+si-NC组相比，miR-inhibitor+si-PIK3R1组中小鼠的骨小梁组织体积（ t=3.03， P=0.039）、骨小梁区域体积（ t=6.37， P=0.003）、骨体积分数（ t=3.36， P=0.028）和骨矿物密度（ t=6.92， P=0.002）均减少，成熟破骨细胞数量增加，细胞中c-fos（ t=7.75， P=0.002）和NFATc1（ t=9.65， P=0.001）的表达增加。 结论:ER（+）BC患者血浆外泌体源性miR-20a-5p通过抑制PIK3R1表达来促进ER（+）BC骨转移。