背景:课题组前期研究发现二仙丸加减方可以缓解胶原诱导性关节炎大鼠炎症反应,但其作用机制尚需进一步验证.目的:分析二仙丸加减方入血成分,观察二仙丸加减方含药血清对J774A.1巨噬细胞焦亡的影响.方法:①二仙丸加减方入血成分分析:采用超高效液相色谱-高分辨质谱(UHPLC-HRMS)对二仙丸加减方及入血成分进行检测和鉴定.②二仙丸加减方含药血清对J774A.1巨噬细胞焦亡的影响:采用分子对接技术对二仙丸加减方入血成分倍半萜类化合物与NLRP3进行初步验证.将J774A.1巨噬细胞随机分为空白对照组、脂多糖+三磷酸腺苷组及脂多糖+三磷酸腺苷+二仙丸加减方含药血清低(2.5%)、中(5%)、高(10%)剂量组.根据试剂盒说明书检测各组细胞上清液中乳酸脱氢酶释放情况;ELISA检测各组细胞上清液中白细胞介素1β、白细胞介素18水平;Hoechst/PI染色法检测各组细胞膜受损情况;Western blot检测各组细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达水平.结果与结论:①共鉴定出二仙丸加减方药效成分32个,入血成分21个,其中入血成分主要包括多种倍半萜类化合物;②分子对接结果显示3-O-Acetyl-13-deoxyphomenone、Incensol oxide、Atractylenolide III、Rupestonic acid、3,7-Dihydroxy-9,11-eremophiladien-8-one与NLRP3之间结合活性较好;③与空白对照组相比,脂多糖+三磷酸腺苷组细胞上清中乳酸脱氢酶活性及白细胞介素1β、白细胞介素18水平均显著升高(P<0.001),Hoechst/PI染色可见PI阳性细胞数量显著增加.脂多糖+三磷酸腺苷+二仙丸加减方含药血清各组上述指标均显示不同程度降低;④与空白对照组相比,脂多糖+三磷酸腺苷组NLRP3、Caspase-1、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达显著升高(P<0.05);与脂多糖+三磷酸腺苷组相比,脂多糖+三磷酸腺苷+二仙丸加减方含药血清各组细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达均有不同程度降低(P<0.05),且具有一定的剂量依赖性.结果表明:二仙丸加减方含药血清可能通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路抑制J774A.1巨噬细胞焦亡.

采用硅胶、大孔树脂、葡聚糖凝胶、MCI树脂、薄层色谱以及高效液相色谱等色谱分离方法,从鱼腥草(Hout-tuynia cordata)地上部分95％乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到10个化合物.运用质谱、核磁共振等波谱技术和文献对比法鉴定了其结构,分别鉴定为去氢催吐萝芙木醇(1)、5,6-环氧-3-羟基-β-紫罗兰酮(2)、黑麦草内酯(3)、pubinernoid A(4)、槲皮苷(5)、槲皮素(6)、阿福豆苷(7)、4-甲氧基苯-1,2-二醇(8)、4-羟基苯甲醛(9)、苯甲酸(10).化合物1～4为首次从鱼腥草中分离得到的降碳倍半萜.对所有化合物进行了抗植物病原菌活性筛选,结果显示:在40 mg/mL浓度下,化合物5～7对禾谷镰刀菌、褐枝孢菌、番茄灰霉病菌、瓜类球腔菌和棉花枯萎病菌抑菌率介于38％～50％之间.

目的 研究过岗龙(榼藤子Entada phaseoloides干燥藤茎)的化学成分.方法 应用正相硅胶、ODS、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及半制备型HPLC等色谱技术进行系统分离纯化,并通过核磁共振波谱、质谱等技术鉴定单体化合物的结构.结果 从过岗龙75％乙醇提取物中共分离得到17个化合物,分别鉴定为3-氧-泰国树脂酸(1)、6β-羟基-3-氧代齐墩果-12-烯-28酸(2)、泰国树脂酸(3)、苏门答腊树脂酸(4)、3β,6β-二羟基齐墩果-11,13(18)-二烯-28-酸(5)、(Z)-4-[3'-(β-D-glucopyranosyloxy)butylidene]-3,5,5-trimethyl-2-cyclohexen-l-one(6)、异落新妇苷(7)、黄杞苷(8)、槲皮苷(9)、3-O-α-L-鼠李糖-儿茶素(10)、(-)-epicatechin-3-O-p-hydroxybenzoate(11)、lysidicichin(12)、异补骨脂查耳酮(13)、4-羟基-3-甲氧基苯酚-1-O-β-D-(6'-O-没食子酰基)葡萄糖苷(14)、1,6-二-O-没食子酰基-β-D-葡萄吡喃糖(15)、苯甲酸(16)和没食子酸甲酯(17).结论 所有化合物均为首次从过岗龙中分离得到,为中药过岗龙的开发利用提供了一定的物质基础.

采用硅胶、ODS、MCI、Sephadex LH-20 等柱色谱分离技术对牛蒡叶乙酸乙酯部位进行化学成分研究.通过NMR、MS、IR、UV、X衍射等现代波谱技术及结合文献数据对分离得到的化合物进行结构鉴定,共鉴定出 20 个化合物,分别为arcta-nol(1)、柑橘苷A(2)、melitensin 15-O-β-D-glucoside(3)、11β,13-氢化刺蓟苦素(4)、11β,13-dihydrosalonitenolide(5)、8α-羟基-β-桉叶醇(6)、紫丁香苷(7)、二氢丁香苷(8)、3,4,3',4'-tetrahydroxy-δ-truxinate(9)、松脂素(10)、连翘脂素(11)、丁香脂素(12)、山柰酚(13)、槲皮素(14)、木犀草素(15)、金丝桃苷(16)、4,5-二咖啡酰奎宁酸(17)、1H-indole-3-carboxaldehyde(18)、苄醇-β-D-葡萄糖苷(19)、N-(2'-苯基乙基)异丁酰胺(20).其中化合物 1 为新的降碳倍半萜,化合物 2~5、7~8、18~20 为首次从牛蒡属中分离得到.

目的 探讨蓍草总倍半萜内酯对类风湿性关节炎(R A)模型大鼠的抗炎作用,并初步探讨其作用机制.方法大鼠右后足跖皮下注射弗氏完全佐剂建立佐剂性关节炎大鼠模型,给予不同剂量蓍草总倍半萜内酯和雷公藤多苷药物干预21 d.通过检测大鼠关节肿胀度、关节炎指数和血清白介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(T N F)-α水平等指标,观察蓍草总倍半萜内酯片对佐剂性RA大鼠的影响.结果与模型组比较,蓍草总倍半萜内酯中、高剂量组在14、21、28 d大鼠足跖肿胀度显著低于模型组(P<0.05,P<0.01),明显抑制了RA大鼠足关节肿胀度.蓍草总倍半萜内酯中、高剂量组在14、21、28 d大鼠关节指数显著低于模型组(P<0.05,P<0.01).与模型组比较,蓍草总倍半萜内酯低、中、高剂量组均能够显著降低IL-6、IL-1β、TNF-α水平(P<0.05,P<0.01),各剂量组的抑制作用呈剂量依赖性.结论蓍草总倍半萜内酯具有较好的治疗大鼠RA作用,其作用机制可能与下调炎症因子IL-6、IL-1β、T N F-α水平有关.

目的 研究蜈蚣藻化学成分.方法 用色谱和光谱技术分离并鉴定其化学成分.结果 从蜈蚣藻中分离鉴定17个化合物,分别为:1,3-二羟基-2-甲氧基-5-羟甲基苯(1),N-甲基-L-酪氨酸(2),苯乙酰胺(3),黑麦草内酯(4),3-乙酰基苯甲酰胺(5),2-亚乙基-3-甲基琥珀酸(6),4-N甲酰胺基正丁酸(7),降倍半萜§(+)-去氢催吐萝芙叶醇(8),鸟嘌呤核苷(9),马来酸(10),对羟基苯乙酰胺(11),6-氨基己酸乙酯(12),4-N甲酰胺基正丁酸甲酯(13),N-(2-羟乙基)-正己酰胺(14),麦角甾醇(15),4-氨基丁酸甲酯(16)和2,5-二叔丁基苯酚(17).结论 该17个化合物均为首次从该种蜈蚣藻中分离到.

目的 对漆树科盐肤木属植物火炬树(Rhus typhina L)叶的化学成分进行研究.方法 采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、MCI柱色谱及半制备型高效液相色谱等多种方法分离单体化合物,通过波谱数据分析鉴定结构.结果 分离得到13个化合物,分别鉴定为没食子酸甲酯(methyl gallate,1)、(-)-地芰普内酯[(-)-loliolide,2]、没食子酸(gallic acid,3)、杨梅素(myricetin,4)、杨梅苷(myricetrin,5)、阿福豆苷(afzelin,6)、贝壳杉双芹素(agathisflavone,7)、铁力木双黄酮B(mesuaferrone B,8)、byzantionoside B (9)、blumenol C glucoside(10)、(6R,9S)-3-oxo-α-ionol-β-D-glucopyranoside(11)、methyl m-digallate (12)和methyl p-digallate (13).结论 化合物2、9 ～11为首次从盐肤木属植物中分离得到.

目的:探索大白杜鹃Rhododendron decorum枝叶结构新颖的化学成分.方法:反复利用正相硅胶、ODS、MCI、Sephadex LH-20等柱色谱以及半制备HPLC等分离手段对大白杜鹃95％的乙醇水提取物进行分离纯化,并根据其谱学数据、理化性质进行结构鉴定.结果:从大白杜鹃枝叶的95％乙醇水提取物中分离鉴定了8个化合物,包括2个木脂素和2个苯丙素类物质,3个倍半萜和1个降倍半萜,分别是(7S,8S)-3-甲氧基-3’,7-环氧-8,4’-氧代新木脂素4,9,9’-三醇(1)、(+)-8-羟基松脂醇(2)、异阿魏酸(3)、二氢紫丁香苷(4)、山楂叶苷元B(5)、反烷4(15)-烯-1β,11-二 醇(6)、1,10-裂环4羟基-衣兰醇-5-烯-1,10-二酮(7)、(-)-黑麦草内酯(8).结论:化合物1～8均为首次从大白杜鹃中分离得到.

为了对丹桂(Osmanthus fragrans var.aurantiacus)干花进行化学成分研究,利用硅胶、MCI、聚酰胺等柱色谱和半制备反相高效液相色谱从丹桂干花95％乙醇提取物中分离得到1个新化合物(1)和5个己知化合物(2～6),通过理化性质和一维核磁共振(1H-、13C-NMR、DEPT)、二维核磁共振(1H-1H COSY、非去偶HSQC、HSQC、HMBC)、紫外光谱、红外光谱以及高分辨质谱等波谱数据鉴定化合物结构,分别鉴定为(9S)-9-hydroxymengastigm-5-en-4-one-9-O-primeveroside (1)、齐墩果酸(2)、连翘脂素(3)、红景天苷酯(4)、红景天苷(5)和类叶升麻苷(6).化合物1为新化合物,其他化合物均为首次从该植物中分离得到.

目的 研究软枣猕猴桃Actinidia arguta果实的化学成分.方法 采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、制备薄层色谱和半制备型高效液相色谱等方法分离,根据波谱数据鉴定化合物结构.结果 从软枣猕猴桃75％工业乙醇冷浸提取物的正丁醇萃取物中共分得15个化合物,分别鉴定为(2R,6R,9R)-三羟基-大柱香波龙烷-4,7E-二烯-3-酮-9-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、(6S,9R)-玫瑰花苷(2)、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷(3)、紫云英苷(4)、香草酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、1-O-feruloyl-β-D-glucopyranoside(6)、阿魏酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、红景天苷(8)、3-hydroxy-1-(4-O-β-D-glucopyranosyl-3-methoxyphenyl) propan-1-one (9)、5-O-咖啡酰基奎宁酸甲酯(10)、5-O-咖啡酰基奎宁酸丁酯(11)、5-O-阿魏酰基奎宁酸甲酯(12)、5-O-香豆酰基奎宁酸甲酯(13)、咖啡酸(14)和原儿茶酸(15).结论 化合物1为1个未见文献报道的甲基环己烯型降倍半萜苷类化合物,命名为软枣猕猴桃苷A;化合物2、5和7～13为首次从猕猴桃属植物中分离得到;化合物6为首次从软枣猕猴桃中分离得到.