目的:探讨血清陷窝蛋白1(Cav-1)与甲壳质酶蛋白-40(YKL-40)在急性脑梗死中的表达及联合检测与预后评估的价值。方法:回顾性选取2016年1月至2019年6月河北北方学院附属第一医院收治的118例急性脑梗死患者作为研究对象，根据脑梗死体积将患者分为小梗死组(<5 cm 3)、中梗死组(5～10 cm 3)和大梗死组(>10 cm 3)，选择108例健康体检者作为健康对照组，比较各组血清Cav-1、YKL-40水平，并分析脑梗死体积与血清Cav-1、YKL-40水平相关性。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清Cav-1与YKL-40水平对急性脑梗死的诊断价值；对患者进行一年随访并采用改良Rankin量表(mRS)评分评估预后情况，分析血清Cav-1、YKL-40与预后之间相关性。 结果:不同梗死体积急性脑梗死患者血清Cav-1、YKL-40表达水平显著高于健康组( P<0.001)。血清Cav-1、YKL-40水平与急性脑梗死患者梗死体积呈正相关( r＝0.854， P＝0.004； r＝0.867， P＝0.002)。ROC曲线分析结果表明，Cav-1(以21.78 μg/L为诊断截断值)联合YKL-40(以158.69 ng/ml为诊断截断值)诊断急性脑梗死的灵敏度为85.59%，约登指数为0.532，ROC曲线下面积为0.896(95% CI：0.741～0.932)，显著高于各指标单项检测( P<0.05)，诊断效能最佳。随访8个月和12个月时，联合诊断结果阳性组患者发生死亡的比例以及mRS评分明显高于阴性组患者( P<0.05)。 结论:急性脑梗死患者血清Cav-1、YKL-40呈显著高表达，两者联合检测可提高诊断效能，对于患者早期诊断和预后预测具有潜在应用价值。

目的:探讨桃叶珊瑚苷对注意缺陷多动障碍(attention deficit/hyperactivity disorder，ADHD)模型小鼠行为及星形胶质细胞过度活化的作用。方法:清洁级C57BL/6雌性野生型孕鼠12只，采用孕期腹腔注射艾司氯胺酮(15 mg/kg)法建立子代小鼠ADHD模型。子代小鼠按照窝别匹配原则分为对照+生理盐水组、对照+桃叶珊瑚苷组、艾司氯胺酮+生理盐水组和艾司氯胺酮+桃叶珊瑚苷组(每组 n＝15)。子代小鼠出生后14 d，对照+桃叶珊瑚苷组和艾司氯胺酮+桃叶珊瑚苷组小鼠给予桃叶珊瑚苷(5 mg/kg，1次/d)灌胃，对照+生理盐水组和艾司氯胺酮+生理盐水组小鼠给予等体积0.9%氯化钠溶液，连续给灌胃5 d，子代小鼠与母鼠同笼饲养至出生后21 d。子代小鼠出生后21 d，通过旷场实验、高架十字迷宫实验评估子代小鼠行为学指标；免疫荧光法检测小鼠杏仁核区谷氨酸脱羧酶2(glutamic acid decarboxylase 2，GAD2)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid，GABA)及胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)的表达，Sholl analysis定量分析星形胶质细胞形态变化。采用GraphPad Prism 9.0.1软件进行统计分析，多组间比较采用单因素方差分析或Kruskal-Wallis检验。 结果:(1)行为学实验结果显示，4组小鼠旷场实验中总路程以及高架十字迷宫实验中开放臂停留时间均差异有统计学意义( F＝236.90， H＝39.92，均 P<0.001)。艾司氯胺酮+生理盐水组小鼠的运动总路程[(7 044±249)mm，(22 891±2 175)mm， P<0.05]和开放臂停留时间[12.69(9.86，17.24)s，2.72(0.57，3.87)s， P<0.05]均高于对照+生理盐水组。艾司氯胺酮+桃叶珊瑚苷组小鼠的运动总路程[(22 891±2 175)mm，(8 252±839)mm， P<0.05]和开放臂停留时间[12.69(9.86，17.24)s，5.45(1.13，10.99)s， P<0.05]均低于艾司氯胺酮+生理盐水组。(2)免疫荧光结果显示，4组小鼠杏仁核区GAD2、GABA、GFAP荧光强度均差异有统计学意义( F＝145.50，50.08，53.83，均 P<0.05)。与对照+生理盐水组比较，艾司氯胺酮+生理盐水组小鼠杏仁核区GAD2[(100.00±9.60)%, (24.86±4.14)%， P<0.05]、GABA[(100.00±16.84)%，(25.48±5.70)%， P<0.05)]荧光强度均下调，GFAP[(100.00±18.02)%，(223.80±25.85)%， P<0.05)]荧光强度上调；与艾司氯胺酮+生理盐水组比较，艾司氯胺酮+桃叶珊瑚苷组小鼠杏仁核区GAD2[(24.86±4.14)%，(56.08±6.55)%， P<0.05]、GABA[(25.48±5.70)%，(52.59±15.74)%， P<0.05)]荧光强度上调，GFAP[(223.80±25.85)%，(157.10±22.10)%， P<0.05]荧光强度下调。(3)Sholl analysis结果显示，4组小鼠星形胶质细胞突起与同心圆的交点数目差异有统计学意义( F＝ 12.47， P<0.05)。与对照+生理盐水组比较，艾司氯胺酮+生理盐水组星形胶质细胞突起及突起分支与同心圆交点数目增加[(2.07±0.48)个，(1.67±0.72)个， P<0.05)]；与艾司氯胺酮+生理盐水组小鼠比较，艾司氯胺酮+桃叶珊瑚苷组星形胶质细胞突起及突起分支与同心圆交点数目减少[(1.20±0.78)个，(2.07±0.48)个， P<0.05]。 结论:桃叶珊瑚苷能够改善ADHD模型小鼠多动行为，其机制可能与桃叶珊瑚苷能够抑制小鼠脑杏仁核区星形胶质细胞过度活化相关。

目的:探讨骨碎补总黄酮(TFRD)对幼兔激素性股骨头缺血坏死病程及凋亡相关蛋白表达的影响及其可能机制。方法:动物实验研究。选用2月龄健康新西兰白兔110只，按随机数字表法分为对照组(10只)、模型组(50只)、TFRD组(50只)。模型组及TFRD组行双侧臀肌交替注射醋酸泼尼松龙注射液(7.5 mg/kg)，每周2次，对照组同部位同频次注射等体积生理盐水(0.3 mL/kg)；TFRD组于第1次注射醋酸泼尼松龙开始每天灌服TFRD溶液(35 mg/kg)，对照组及模型组每日灌服等体积生理盐水6 mL，连续8周。根据是否发病将模型组分为模型发病组及模型未发病组；将TFRD组分为TFRD发病组及TFRD未发病组。造模结束后，取双侧股骨头行病理学检查；酶联免疫吸附实验(ELISA)测定各组股骨头组织中磷酸化蛋白酪氨酸激酶2(P-JAK2)、磷酸化信号转导与转录激活因子3(P-STAT3)、细胞因子信号传导抑制蛋白3(SOCS3)及凋亡相关因子表达情况；实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、SOCS3相对表达情况。结果:模型组坏死发生率22.86%(8/35)；TFRD组坏死发生率15.79%(6/38)。微型计算机断层扫描技术示：与模型发病组比较，TFRD发病组骨体积分数和骨小梁厚度较高，骨小梁分离度较低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。病理染色示：TFRD未发病组较其他实验组骨小梁形态更完整、骨小梁周围可见成骨细胞、空骨陷窝更少，病理变化得到明显改善。ELISA显示：与模型发病组比较，TFRD发病组P-JAK2、P-STAT3、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)相关X蛋白、半胱氨酸蛋白酶3表达均下降，Bcl-2表达增高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。qPCR示：与模型发病组比较，TFRD发病组JAK2、STAT3、SOCS3表达下调，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:TFRD可以经JAK2/STAT3/SOCS3通路抑制幼兔激素性股骨头缺血坏死骨组织中促凋亡因子表达，减缓幼兔激素性股骨头缺血坏死病程。

目的:探讨人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)在防治大鼠激素性骨质疏松(GIOP)方面的疗效及其潜在的分子生物学机制。方法:采用光学显微镜、流式细胞技术对HUC-MSCs进行表征和鉴定。成骨细胞MC3T3-E1分为对照组、地塞米松(DEX)组、DEX+不同比例HUC-MSCs组。对照组加入正常培养基，DEX组加入10 μmol/L DEX处理，DEX+不同比例HUC-MSCs组加入10 μmol/L DEX处理细胞，然后将HUC-MSCs按照1∶1、10∶1、100∶1的比例在共培养小室中与MC3T3-E1非接触式共培养48 h。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞活力。24只SD大鼠随机分成3组( n＝8)：对照组、模型组、治疗组(HUC-MSCs组)。模型组使用DEX构建GIOP模型，对照组给予等量磷酸盐缓冲液(PBS)，治疗组在构建GIOP模型的同时通过尾静脉注射约10 6个HUC-MSCs进行治疗。8周后取股骨组织样本，采用苏木精-伊红(HE)染色观察空骨陷窝率，脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色评价细胞凋亡。进行Micro CT扫描，测量骨密度(BMD)、单位组织体积的骨量(Bv/Tv)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁间距(Tb.Sp)、骨小梁数量(Tb.N)等骨质疏松相关指标。提取组织蛋白后，用蛋白印迹法(Western blot)检测通路蛋白表达。两组间比较采用独立样本 t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:流式细胞鉴定结果显示，HUC-MSCs高表达CD44(99.9%)、CD73(98.0%)、CD90(100.0%)、CD105(99.6%)、CD166(99.9%)，低表达CD14(0.43%)、CD19(1.11%)、CD34(0.89%)、CD45(1.06%)、HLA-DR(0.38%)，符合HUC-MSCs表面特异性抗原表达规律。CCK-8显示，模型组较对照组细胞活力明显下降，与HUC-MSCs共培养后可部分恢复MC3T3-E1活力。HE染色对照组、模型组、HUC-MSCs组空骨陷窝率分别为(2.546±1.049)%、(28.720±1.546)%、(13.600±1.012)%。TUNEL染色结果对照组、模型组、HUC-MSCs组TUNEL阳性细胞的比例分别为(2.334±0.789)%、(24.140±4.646)%、(11.610±2.974)%。Micro CT显示模型组BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N均降低，Tb.Sp增加，HUC-MSCs治疗可以一定程度上逆转上述改变。Western blot结果表明，与对照组比较，模型组β-连环蛋白(β-catenin)、Runt相关基因2(Runx2)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)蛋白表达均明显下降，硬化素(SOST)蛋白表达增加，HUC-MSCs治疗组β-catenin、Runx2、BMP-2表达较模型组增加，SOST表达相应减少。结论:HUC-MSCs能够通过Wnt/β-catenin信号通路改善地塞米松所致的骨丢失。

患者男，17岁，因面部、眼睑丘疹伴痒痛4年，泛发全身1年就诊。4年前无明显诱因面部出现米粒至黄豆大小圆形及类圆形淡黄色、肉色丘疹，以眼睑最为明显，未诊治。除眼睑部位丘疹遮挡影响视物外，无其他不适。既往史：5年前曾出现全身丘疹、结节伴瘙痒，当地医院诊断"疥疮"，予"硫软膏"局部外用后丘疹、结节消退，瘙痒消失。父母兄弟均体健，否认遗传病及家族中类似疾病。体检：一般情况良好，各系统检查未发现异常，全身浅表淋巴结未扪及肿大。皮肤科检查：面部及双侧上下眼睑见多发性直径0.1 ~ 0.8 cm肉色丘疹；眼睑处较大的丘疹顶端破溃结痂，未见渗出，双眼球右侧巩膜均可见肉色斑块附着（图1），颈部及背部、四肢近端见大量类圆形淡红色圆顶丘疹，腋窝较明显。实验室检查：梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验、快速血浆反应素环状卡片试验、人类免疫缺陷病毒、丙型肝炎病毒检查无异常；甘油三酯0.70 mmol/L（参考值< 1.7 mmol/L，下同），总胆固醇3.27 mmol/L（0 ~ 5.18 mmol/L）。皮损皮肤镜下见淡黄色均质状结构，边缘可见边界不清淡红斑及少量线状血管，未见溃疡、分枝状血管。左侧上眼睑丘疹病理检查：真皮及皮下组织成片组织样细胞增生（图2A、2B）；免疫组化示CD68阳性（图2C）、S100阳性（图2D）、CD1a个别阳性，郎格罕细胞特异蛋白少许阳性，Ki-67阳性（15%）。病理诊断：青少年黄色肉芽肿。

目的:探讨髓源性生长因子(myeloid-derived growth factor, MYDGF)对RAW264.7细胞炎症反应及破骨分化的影响。方法:培养破骨细胞前体细胞RAW264.7，采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度MYDGF重组蛋白(rMYDGF)对RAW264.7细胞活性的影响；利用脂多糖(LPS)对RAW264.7细胞进行炎症诱导，然后观察rMYDGF干预后炎症介质表达及细胞极化情况；利用核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)对RAW264.7细胞进行破骨分化诱导并添加rMYDGF干预，随后通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测破骨细胞分化的情况，显微镜下观察破骨吸收陷窝及肌动蛋白环(F-actin环)数目；逆转录PCR检测破骨细胞分化过程中活化T细胞核因子1(Nfatc1)、组织蛋白酶K(CTSK)和c-Fos基因的表达情况；蛋白免疫印迹法(Western印迹)检测核因子-κB(NF-κB)信号通路蛋白磷酸化水平。结果:MTT实验结果显示，rMYDGF浓度低于100 ng/mL时对RAW264.7细胞活性无明显抑制；rMYDGF抑制LPS诱导的炎症介质表达及M1型细胞极化；破骨诱导后，rMYDGF干预组与对照组相比，TRAP阳性细胞数目和面积均减少，骨吸收陷窝数目和面积均减少，并且F-actin环面积减少，形态不完整；此外，rMYDGF减少破骨细胞分化过程中特异性基因的表达，抑制NF-κB信号通路IκBα蛋白磷酸化。结论:MYDGF抑制RAW264.7细胞炎症反应及破骨分化。

女，1岁，系G 2P 2，足月顺产，2022年8月2日就诊于河南省儿童医院郑州儿童医院神经遗传代谢病科。出生体质量为3.35 kg，无窒息抢救史。患儿自3月龄至今患泌尿道感染4次、肺炎1次；4月余认生，现会发"ma ma"音；大运动发育稍落后，7个月会独坐，10个月会爬，现可扶站。出生4个月时血常规检查结果提示白细胞17.95 × 10 9/L(正常参考值为5.10 ~ 14.10 × 10 9/L)，红细胞3.98 × 10 12/L(正常参考值为4.00 ~ 5.50×10 12/L)，血红蛋白115 g/L(正常参考值为107 ~ 141 g/L)，中性粒细胞占比68.2%(正常参考值为13.0% ~ 55.0%)，淋巴细胞占比25.4%(正常参考值为33.0% ~ 77.0%)，中性粒细胞12.23 × 10 9/L(正常参考值为0.80 ~ 5.80 × 10 9/L)，淋巴细胞4.56 × 10 9/L(正常参考值为2.40 ~ 8.70 × 10 9/L)，C-反应蛋白31.52 mg/L(正常参考值为0 ~ 10.00 mg/L)。尿常规检查结果提示红细胞25/高倍视野[正常参考值为(0 ~ 3)/高倍视野]，白细胞146/高倍视野[正常参考值为(0 ~ 5)/高倍视野]，诊断为泌尿道感染。膀胱输尿管造影检查提示双侧膀胱输尿管反流(图1)，肾盂积水(分离10.8 mm，轻度)。心脏彩色多普勒超声检查提示心脏肌部室间隔缺损(图2A)、卵圆孔未闭(图2B)、左肺动脉中远端稍窄(图2C)。出生6个月头颅及腰骶部MRI检查提示白质髓鞘化落后，双侧侧脑室增宽(图3)，左肾略大，肾盂周围异常信号，尾椎上翘，余腰骶椎MRI平扫未见明显异常。患儿父母表型未见异常，否认近亲结婚及家族遗传病史。患儿有1个6岁的哥哥，现体健。患儿入院时体质量为8 kg、身高为72 cm，头围44.5 cm，生长发育落后于同龄儿。精神可，有额头突出、眼窝凹陷、宽眼距、眼裂下斜、耳后旋、薄上唇、腰骶部隐窝等外观特征。肺、腹检查未见异常，四肢肌张力低下，双侧膝反射可引出。抽取患儿及其父母的外周血样，进行全外显子组测序分析，结果提示患儿染色体17p13.3区存在1.49 Mb微缺失：seq[GRCH37]del(17)(p.13.3p.13.3)chr7：g.882 518-2 371 192 del(图4)，父母该区域均未发现相同的缺失。本研究通过了河南省儿童医院郑州儿童医院伦理委员会的审查(2022-K-070)，患儿父母均签署了知情同意书。

患者女，54岁，因“发现左侧乳房肿物3年”于2023年4月日至潍坊市中医院乳腺甲状腺外科治疗。患者3年前偶然发现左侧乳房触痛肿块，无皮肤红肿热痛表现。患者既往体健。查体：双侧乳房外观基本对称，双乳头无内陷，无溢液；左乳外上象限触及约2 cm×2 cm大小肿物，质硬，活动度大，轻度触痛，右乳未触及明显肿物；双乳腺体厚韧，颗粒样感明显；左侧腋下扪及大小约2 cm×2 cm肿大淋巴结，质韧，活动度可，无触痛；双锁骨上未触及肿大淋巴结。2023年4月22日乳腺彩色多普勒超声显示，双乳低回声结节乳腺影像报告和数据系统（breast imaging-reporting and data system，BI-RADS）3类，双侧腋窝淋巴结肿大。2023年4月22日乳腺钼靶摄片检查结果：左乳2、3点位置见致密影，BI-RADS 4A类；双侧乳腺增生，BI-RADS 2类。2023年4月22日行乳房肿物空芯针穿刺活检，病理检查结果显示肿瘤细胞排列呈筛状，主要由上皮、肌上皮构成，筛孔内见黏液成分及红染样物，考虑为腺样囊性癌。2023年4月24日行乳腺MRI检查：左侧乳腺后部腺体约3点位置异常信号，双侧乳腺纤维结节样增生，双侧腋窝增大淋巴结（BI-RADS 3类）。于2023年4月26日全身麻醉下行左乳癌保乳术+前哨淋巴结活检术，术中使用亚甲蓝为前哨淋巴结示踪剂，并切取蓝染前哨淋巴结3枚。探查发现癌灶约3 cm×2 cm×2 cm，与周围组织分界不清，将癌灶及周围约2 cm范围内的正常组织一并切除。术中快速冰冻病理检查示3枚前哨淋巴结均未查见转移癌。术后常规病理检查诊断为腺样囊性癌，组织学分级为Ⅱ级，病理学分期为PT2N0M0。免疫组织化学染色：雌激素受体（estrogen receptor，ER）、雄激素受体、CD117蛋白、CK5/6蛋白、细胞角蛋白7、E-钙黏附素、GATA结合蛋白3、P63蛋白、细胞增殖抗原标记物均阳性，孕激素受体（progesterone receptor，PR）、人表皮生长因子受体2、CD10蛋白均阴性。结合临床表现及病理检查结果，诊断为乳腺腺样囊性癌（adenoid cystic carcinoma of breast，ACCB）。术后随访6个月，未见局部复发及远处转移。见图1。

目的:探讨原纤维蛋白1(FBN1)在猪耳软骨细胞工程化软骨组织中的表达情况，以及过表达FBN1后对软骨细胞表型和细胞外基质表达的影响。方法:取3只长枫杂交猪单侧耳廓软骨，提取软骨细胞扩增至第2代，以6.0×10 7/ml的密度(200 μl)接种于直径为10 mm、厚2 mm的聚羟基乙酸-聚乳酸(PGA-PLA)支架材料上，体外培养5周，构建9块细胞材料混合物组织块；将6块细胞材料混合物植入3只裸鼠体内，每只2块，培养10周，构建工程化软骨组织6块。HE染色分别检测3块体外培养5周的细胞材料混合物及裸鼠体内培养10周后的组织工程化软骨形态；取3块2 cm×1 cm大小的另一侧猪耳软骨组织及3块1.0 cm×0.5 cm大小的工程化软骨组织提取RNA，通过qPCR检测二者FBN1 mRNA表达差异；取0.5 cm×0.5 cm大小的另一侧猪耳软骨组织及工程化软骨组织各3块，利用免疫组织化学染色检测二者FBN1在蛋白水平的表达及分布差异；在第2代猪耳软骨细胞中转染空载体质粒及FBN1过表达质粒，利用实时荧光定量PCR检测软骨细胞外基质相关基因的表达变化，实验重复3次。所得数据用Graph Pad Prism 6.0进行双尾非配对 t检验分析， P<0.05为差异具有统计学意义。 结果:HE染色结果显示：体外培养5周时，工程化软骨组织中可见大量软骨细胞及小的软骨陷窝，体内培养10周后，工程化软骨组织中形成明显软骨陷窝；工程化软骨组织FBN1 mRNA的相对表达量(0.001 41±0.000 28)较正常猪耳软骨组织(0.003 58±0.000 34)显著降低，差异有统计学意义( t＝4.913， P＝0.008)；正常组织中FBN1分布于软骨陷窝及软骨膜处，而工程化软骨组织中多分布于软骨膜处，越接近软骨组织中心越少；FBN1过表达组中FBN1 mRNA相对表达量为0.018 03±0.000 64，而空载体对照组为0.006 13±0.001 03，差异具有统计学意义( t＝9.708， P<0.001)；过表达FBN1后软骨细胞 SOX9、 COL2A1、 ACAN等软骨相关基因的相对表达量与对照组相比分别增加了1.273±0.071、1.315±0.104、1.928±0.280倍，差异有统计学意义( t＝3.874、3.311、3.044， P＝0.018、0.001、0.038)。 结论:猪耳软骨工程化软骨组织中FBN1 mRNA表达量及蛋白表达量显著低于正常耳软骨组织；体外实验显示FBN1促进软骨细胞 COL2A1、 ACAN等软骨相关基因的表达。

对2例淋巴结分枝杆菌性梭形细胞假瘤的临床资料、组织形态、免疫表型及特殊染色进行分析。例1女，1个月28 d，腋窝淋巴结肿大伴不规则发热半个月。切除多结节性肿物，最大径4?cm。例2男，29岁，人免疫缺陷病毒（HIV）感染，多发淋巴结肿大伴高热10 d并穿刺活检。镜下观察：淋巴结内温和梭形细胞束状增生伴有程度不等淋巴细胞、浆细胞、中性粒细胞浸润和增生的毛细血管，形成梭形细胞假瘤。抗酸染色显示病变内大量分枝杆菌，免疫组织化学标记梭形细胞CD68和S-100蛋白阳性。