目的:探讨骨碎补总黄酮(TFRD)对幼兔激素性股骨头缺血坏死病程及凋亡相关蛋白表达的影响及其可能机制。方法:动物实验研究。选用2月龄健康新西兰白兔110只，按随机数字表法分为对照组(10只)、模型组(50只)、TFRD组(50只)。模型组及TFRD组行双侧臀肌交替注射醋酸泼尼松龙注射液(7.5 mg/kg)，每周2次，对照组同部位同频次注射等体积生理盐水(0.3 mL/kg)；TFRD组于第1次注射醋酸泼尼松龙开始每天灌服TFRD溶液(35 mg/kg)，对照组及模型组每日灌服等体积生理盐水6 mL，连续8周。根据是否发病将模型组分为模型发病组及模型未发病组；将TFRD组分为TFRD发病组及TFRD未发病组。造模结束后，取双侧股骨头行病理学检查；酶联免疫吸附实验(ELISA)测定各组股骨头组织中磷酸化蛋白酪氨酸激酶2(P-JAK2)、磷酸化信号转导与转录激活因子3(P-STAT3)、细胞因子信号传导抑制蛋白3(SOCS3)及凋亡相关因子表达情况；实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、SOCS3相对表达情况。结果:模型组坏死发生率22.86%(8/35)；TFRD组坏死发生率15.79%(6/38)。微型计算机断层扫描技术示：与模型发病组比较，TFRD发病组骨体积分数和骨小梁厚度较高，骨小梁分离度较低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。病理染色示：TFRD未发病组较其他实验组骨小梁形态更完整、骨小梁周围可见成骨细胞、空骨陷窝更少，病理变化得到明显改善。ELISA显示：与模型发病组比较，TFRD发病组P-JAK2、P-STAT3、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)相关X蛋白、半胱氨酸蛋白酶3表达均下降，Bcl-2表达增高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。qPCR示：与模型发病组比较，TFRD发病组JAK2、STAT3、SOCS3表达下调，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:TFRD可以经JAK2/STAT3/SOCS3通路抑制幼兔激素性股骨头缺血坏死骨组织中促凋亡因子表达，减缓幼兔激素性股骨头缺血坏死病程。

目的:研究骨碎补总黄酮对亚硝酸钠诱导的学习记忆障碍模型小鼠学习记忆的影响。方法:将75只小鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、抗脑衰胶囊组、骨碎补总黄酮组和骨碎补总黄酮+抑制剂组，每组15只。抗脑衰胶囊组灌胃抗脑衰胶囊混悬液585 mg/kg；骨碎补总黄酮组灌胃骨碎补总黄酮溶液97.5 mg/kg；骨碎补总黄酮+抑制剂组腹腔注射0.072 mg/kg ICI182780溶液，并灌胃骨碎补总黄酮溶液97.5 mg/kg，连续给药21 d，1次/d。第22天进行造模，除空白组外，其余各组小鼠腹腔注射亚硝酸钠复制学习记忆障碍模型。采用水迷宫试验检测小鼠学习记忆能力，免疫组织化学染色检测小鼠海马雌激素受体β（ERβ）表达，Western blot法检测海马中ERβ、磷酸化p38（P-P38）、Bcl-2、Bcl-2关联死亡启动子（Bcl2 antagonist of cell death，Bad）、Caspase-3蛋白表达，比色法检测海马MDA、SOD、NO水平。结果:与模型组比较，骨碎补总黄酮组小鼠潜伏期缩短（ P<0.01），穿越平台次数及靶象限停留时间增加（ P<0.01）；小鼠海马区ERβ［（0.371±0.010）比（0.124±0.009）］、Bcl-2［（1.146±0.028）比（0.726±0.016）］蛋白表达及SOD［（153.657±6.385）U/mg比（67.719±5.845）U/mg］活性增加（ P<0.01）；P-P38/P38［（0.412±0.043）比（0.806±0.069）］、Bad［（0.421±0.010）比（0.633±0.010）］、Caspase-3［（0.923±0.042）比（1.437±0.033）］蛋白表达及MDA［（8.669±0.662）nmol/mg比（11.772±1.054）nmol/mg］、NO［（4.259±0.225）nmol/mg比（10.805±0.415）nmol/mg］水平降低（ P<0.01）。ER阻断剂可拮抗骨碎补总黄酮的恢复和改善作用。 结论:骨碎补总黄酮可通过雌激素受体-P38丝裂原激活的蛋白激酶（ER-P38/MAPK）信号通路调节亚硝酸钠模型小鼠的学习记忆功能，抑制神经细胞凋亡，减少氧化应激损伤，从而发挥神经保护作用。

目的 中药骨碎补是中医骨伤科的常用药,现代研究表明,骨碎补总黄酮及其成分柚皮苷均能促进牵张成骨过程.通过动物体内实验,观察比较骨碎补总黄酮和柚皮苷对牵张成骨骨愈合的影响.方法 取雄性新西兰兔15只,按前期研究造模步骤完成牵张成骨模型兔造模;将模型兔分为3组(n=5),在术后第2天开始分别予生理盐水、骨碎补总黄酮[200 mg/(kg·d)]和柚皮苷[100 mg/(kg·d)]灌胃给药.术后第56天处死动物,观察各组骨标本牵张区骨缺损修复情况,并行显微CT(Micro computed tomography,Micro-CT)检查、生物力学检测.结果 与柚皮苷组相比,骨碎补总黄酮组骨骼矿物质密度(Bone mineral density,BMD)、骨表面积组织体积比值(Bone volume to tissue volume,BV/TV)、骨小梁厚度(Trabecular thickness,Tb.Th)、骨小梁数量(Trabecular number,Tb.N)更高,差异有统计学意义(P＜0.05),而骨碎补总黄酮组骨小梁分离度(Trabecular separation,Tb.Sp)更小,差异有统计学意义(P＜0.05).与柚皮苷组相比,骨碎补总黄酮组骨标本能承受的最大应力(Maximum stress,N/mm2)和最大载荷(Maximum loading,N)均更大(P＜0.05).结论 本研究表明,骨碎补总黄酮和柚皮苷对牵张成骨骨愈合均有促进作用,而总黄酮比其成分柚皮苷更显著.

背景:多项研究发现,骨碎补总黄酮可促进诱导膜中血管新生、改善诱导膜生物性能、加速诱导膜技术骨重建,但相关分子机制仍需进一步探究.目的:观察骨碎补总黄酮通过调控H型血管对大鼠股骨Masquelet诱导膜模型骨重建的影响.方法:将36只雄性SD大鼠按体质量分层后随机分为空白组、模型组、中药组,每组12只,3组均建立4 mm右后肢股骨骨缺损模型,模型组与中药组骨缺损处充填聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥;造模后6周,空白组骨缺损处填充大鼠自体尾骨,模型组与中药组取出诱导膜内的骨水泥后植入大鼠自体尾骨.植骨第3天开始,中药组灌胃给予骨碎补总黄酮157.5 mg/(kg·d),其余两组灌胃给予生理盐水,连续给药至植骨后8周.植骨后8周取材进行相关检测.结果与结论:①X射线片显示,空白组缺损区骨折线清晰,仅有少量骨痂形成;模型组缺损区可见不连续皮质骨,骨缺损区仍存在;中药组缺损区充满新生骨组织,骨髓腔与部分皮质骨形成,骨折线消失.②Micro-CT扫描显示,空白组缺损区新生骨量较少,模型组缺损区骨小梁数量明显增多,中药组大量新生骨组织填充于骨缺损区.③苏木精-伊红染色显示,空白组缺损区仅见少量新骨形成,成骨质量较差;模型组缺损区有较多的新骨形成,但骨组织内夹杂有部分纤维结缔组织;中药组缺损区可见大量新骨形成,成骨质量最佳.④CD31/Emcn免疫荧光双标染色显示,空白组骨缺损区新生骨组织内H型血管数量稀少、分布稀疏;相比空白组,模型组骨缺损区骨组织内含更多H型血管,血管呈相对规则的条状分布;中药组骨缺损区H型血管数量最多,并且血管分布密集.⑤结果表明,骨碎补总黄酮可通过上调H型血管表达增强成血管-成骨作用,提高大鼠股骨Masquelet诱导膜模型成骨效能、促进骨重建.

目的 探讨骨碎补总黄酮(total flavonoids of rhizoma drynariae,TFRD)对去卵巢(ovariectomized,OVX)骨质疏松大鼠氧化应激的影响及其机制.方法 构建OVX骨质疏松大鼠模型,分别用TFRD和补佳乐(BJL)灌胃,给药 12 周后称重,取股骨组织和血清.HE染色观察股骨组织形态学变化,免疫组织化学染色检测股骨组织中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和骨形态发生蛋白 2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)的表达,生化试剂盒检测血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平,Western blot检测股骨组织中Notch1、发状分裂相关增强子 1(hairy and enhancer of split 1,Hes1)、过氧化还原酶1(peroxiredoxin 1,Prdx1)蛋白的表达.结果 TFRD和BJL均能显著抑制OVX所致的大鼠体重的增加(P＜0.01),并改善骨小梁的结构的完整性,缩短骨小梁间距,显著降低病理评分(P＜0.01).此外,TFRD和BJL均能升高血清SOD水平(P＜0.01),降低MDA和 ROS水平(P＜0.01),促进股骨组织中OPG、BMP-2的表达(P＜0.01),并抑制Notch1、Hes1 和Prdx1 蛋白的表达(P＜0.01).结论 TFRD可抑制OVX大鼠的氧化应激反应,调控骨稳态,其发挥抗骨质疏松的作用可能与抑制Notch1/Hes1/Prdx1 通路有关.

目的:探讨miR-93-5p在骨碎补总黄酮(TFRD)介导的兔骨髓间充质干细胞(rBMSCs)成骨分化中的作用.方法:采用成骨培养液对rBMSCs进行成骨诱导分化,通过茜素红S和油红O染色分别检测rBMSCs的成骨和成脂分化.运用荧光定量PCR(qPCR)检测miR-93-5p的表达,Western免疫印迹检测FZD6、ALP、Runx2 和WNT通路相关蛋白(Dishevelled和β-catenin)的蛋白表达水平.双荧光素酶报告基因分析法检验miR-93-5p和FZD6 的结合.采用SPSS 22.0 软件包对数据进行统计学分析.结果:与对照组相比,TFRD促进rBMSCs的成骨分化,抑制miR-93-5p的表达,促进FZD6 和成骨相关基因ALP和Runx2 的表达.双荧光素酶报告基因分析表明,FZD6 是miR-93-5p的下游靶基因.过表达miR-93-5p抑制rBMSCs的成骨分化和FZD6、ALP和Runx2 的蛋白表达,而过表达FZD6 逆转miR-93-5p的抑制作用.使用WNT通路抑制剂(KYA1797K)处理rBMSCs,可逆转TFRD对成骨分化的促进作用,导致成骨细胞分化减少,ALP、Runx2 和WNT通路相关蛋白(Dishevelled和β-catenin)表达下调.结论:TFRD通过下调miR-93-5p,促进FZD6 的表达,激活WNT信号通路,促进rBMSCs成骨分化,从而有助于口腔种植体骨结合.

目的:观察失重下骨碎补总黄酮对成骨细胞增殖作用及ERK通路变化,探讨骨碎补总黄酮促成骨细胞增殖的可能机制.方法:培养SD仔鼠成骨细胞,建立微重力模型,加高、中、低剂量骨碎补血清培,观察细胞形态学变化,PNPP检测成骨细胞ALP变化,MTT检测成骨细胞增殖.PCR测定ERK通路.结果:与空白对照组和低剂量组相比,中、高剂量组细胞增殖能力及ALP活性值均升高,ERK通路表达升高具有统计学意义(P＜0.05),与阳性对照组接近.结论:骨碎补在失重下可促成骨细胞增殖,其机制与ERK通路激活相关.

目的:研究骨碎补总黄酮对合并牙列缺损或缺失的骨质疏松症患者牙槽骨高度、厚度、骨密度及牙槽嵴顶宽度的影响.方法:将符合纳入标准的46例患者随机分为实验组和对照组,每组23例,实验组服用强骨胶囊,对照组服用阿仑膦酸钠片;于药物治疗前及治疗后1、3、6个月时分别行锥形束CT(CBCT)检查,应用Anatomage inviv0 5软件测量并观察牙槽骨高度、厚度、骨密度及牙槽嵴顶宽度的变化,采用SPSS17.0软件包进行统计学分析.结果:对照组牙槽骨颊(唇)侧皮质骨的骨密度在药物治疗后1个月时较实验组显著升高(P＜0.05),实验组牙槽骨的颊(唇)侧皮质骨骨密度在药物治疗后3个月和6个月时均较对照组显著升高(P＜0.05).对照组牙槽嵴顶宽度和牙槽骨的颊(唇)侧皮质骨厚度在药物治疗后3个月较实验组显著升高(P＜0.05),在药物治疗后6个月时,2组间差异无统计学意义(P＞0.05).不同时点实验组和对照组在基骨的颊(唇)侧皮质骨、松质骨、腭(舌)侧皮质骨的厚度变化均无显著差异(乃0.05).结论:骨碎补总黄酮能显著增加骨质疏松症患者牙槽骨骨密度,在增加牙槽骨的颊(唇)侧皮质骨的骨密度上较阿仑膦酸钠存在优势;骨碎补总黄酮能增加骨质疏松症患者牙槽骨的颊(唇)侧皮质骨厚度,对牙槽嵴顶宽度、牙槽骨高度影响不大.

目的:探讨骨碎补总黄酮(DMF)基于Notch信号通路改善骨质疏松的作用及机制研究.方法:(1)选取2016年1月-2017年1月间我院收治的120例骨质疏松患者作为研究对象,把入选病例随机分为试验组和对照组,每组60例,试验组用强骨胶囊(含骨碎补总黄酮180 mg/粒)联合钙尔奇D治疗,对照组单纯用钙尔奇D治疗.比较两组临床疗效、血钙、和血磷、TNF-α、MCP-1、IL-6水平.(2)分离和培养大鼠骨髓基质细胞,实验分组与给药:NC组:DMEM 高糖完全培养液(含10% FBS);RA组:RA(0.4 mmol/L);DMF+RA组:DMEM高糖完全培养液(含DMF的血清)+RA(0.4 mmol/L);Jaggedl+RA组:Jaggedl[1000 μg/L+RA(0.4 mmol/L)];Jaggedl+DMF+RA组:Jaggedl(1000 μg/L)+DMEM高糖完全培养液(含DMF的血清)+RA(0.4 mmol/L);DAPT+RA组:DAPT(16 μmol/L)+RA(0.4 mmol/L);DAPT+DMF+RA组:DAPT(16 μmol/L)+DMEM高糖完全培养液(含DMF的血清)+RA(0.4 mmol/L).检测各组Notch-1、Hes-1 mRNA和蛋白水平.结果:(1)临床研究中试验组总有效率高于对照组总有效率(91.67%>76.67%,P<0.05);治疗后试验组血钙和血磷水平高于对照组(P<0.05).治疗后,试验组TNF-α、MCP-1、IL-6水平低于对照组(P<0.05).(2)实验研究结果中RT-PCR和Western blot检测结果表明,与RA组相比Jaggedl+RA组中Notch-1、Hes-1 mRNA和蛋白水平均上调,DMF+RA组、DAPT+RA组中Notch-1、Hes-1 mRNA和蛋白均下调(P<0.05).与 Jaggedl+RA组相比 Jaggedl+DMF+RA组中 Notch-1、Hes-1 mRNA和蛋白水平均下调(P<0.05).与DAPT+RA组相比DAPT+DMF+RA组中Notch-1、Hes-1 mRNA和蛋白水平均下调(P<0.05).结论:骨碎补总黄酮可改善骨质疏松症,且其机制可能与抑制Notch信号通路相关.

目的:探讨骨碎补总黄酮的干预时间对大鼠胫骨牵张成骨效能的影响.方法:36只雄性SD大鼠根据体质量分层随机分为全程用药组、牵张期用药组、牵张加矿化期用药组,每组12只.造模成功后,将骨碎补总黄酮在不同时间段应用于的各组大鼠牵张成骨模型,8周后采用Lane-Sandhu法进行影像学评分,Micro-CT进行成骨区骨密度检测,通过组织切片评价标本的成骨质量.结果:全程用药对牵张成骨区域的Lane-Sandhu评分及骨密度的影响优于其他两组(P＜0.05,P＜0.01),其他两组间差异无统计学意义.组织切片HE染色示各组大鼠胫骨牵张成骨区域均有不同程度的成骨,而全程用药组效果最佳.结论:早期、全程应用骨碎补总黄酮可以有效的提高大鼠牵张成骨区域的成骨质量.