目的 探讨富氢水对乙醇诱导急性胃损伤的保护作用及其机制.方法 采用实验研究方法.40只昆明小鼠按随机数字表法分为正常对照组(0.01 mL/g生理盐水+0.03 mL/g生理盐水)、单独富氢水组(0.01 mL/g生理盐水+0.03 mL/g饮用富氢水)、乙醇造模组(0.01mL/g 56.酒精饮品+0.03 mL/g生理盐水)和富氢水治疗组(0.01 mL/g 56.酒精饮品+0.03 mL/g饮用富氢水),每组10只小鼠.每天灌胃2次,连续灌胃7d.检测指标:(1)胃溃疡指数测定.(2)胃组织病理学检查.(3)检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平.(4)检测胃组织中SOD和MDA的表达水平.(5)免疫组织化学染色检测小鼠胃组织中凋亡因子caspase-3、bax、caspase-9、fas和caspase-8的蛋白表达水平.(6)逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测小鼠胃组织中凋亡因子caspase-3、bax、caspase-9、fas和caspase-8的mRNA相对表达水平.正态分布的计量资料以(x)±s表示,多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用LSD-t检验.结果 (1)胃溃疡指数测定:正常对照组、单独富氢水组、乙醇造模组、富氢水治疗组小鼠胃黏膜损伤指数分别为0、0、10.40± 1.64、3.92±0.23,4组比较,差异有统计学意义(F=175.050,P＜0.05);乙醇造模组分别与正常对照组和富氢水治疗组比较,差异均有统计学意义(t=19.835,12.352,P＜0.05).(2)胃组织病理学检查:①胃组织大体标本:正常对照组及单独富氢水组小鼠胃黏膜完整光滑,未见糜烂、溃疡及炎症.乙醇造模组小鼠部分胃黏膜糜烂、溃疡损伤面积大,程度重;与乙醇造模组小鼠比较,富氢水治疗组小鼠胃黏膜损伤面积减少.②胃组织病理学检查结果显示:正常对照组及单独富氢水组小鼠胃黏膜表面完整.与正常对照组比较,乙醇造模组小鼠部分胃黏膜表面上皮变性受损.富氢水治疗组小鼠与乙醇造模组小鼠比较,胃黏膜坏死变性程度和炎性细胞浸润程度均减轻.(3)血清中SOD、MDA、IL-6、TNF-α的表达水平:正常对照组、单独富氢水组、乙醇造模组、富氢水治疗组小鼠血清SOD分别为(70±6) U/mL、(74±4)U/mL、(101±4)U/mL、(115±5)U/mL,MDA分别为(7.52±0.23)μmol/L、(7.61±0.91)μmol/L、(16.95±0.66) μmoL/L、(14.02±0.58) μmoL/L,SOD/MDA分别为9.40±1.07、9.91±1.55、5.99±0.17、8.23±0.32,IL-6分别为(6.3±1.8) ng/L、(5.1±1.6) ng/L、(19.2±4.9) ng/L、(7.1±1.8) ng/L,4组上述指标比较,差异均有统计学意义(F=97.405,269.950,16.486,25.663,P＜0.05);TNF-α分别为(53±14) ng/L、(67±17)ng/L、(52±13) ng/L、(58±21) ng/L,4组比较,差异无统计学意义(F=0.862,P＞0.05).(4)胃组织中SOD和MDA的表达水平:正常对照组、单独富氢水组、乙醇造模组、富氢水治疗组小鼠胃组织中SOD分别为(93±18) U/mL、(93±13) U/mL、(121±31) U/mL、(143±26)U/mL,MDA分别为(7.90±1.72) μmol/L、(6.96±1.49) μmol/L、(17.10±4.88) μmol/L、(7.31±1.58) μmol/L,SOD/MDA分别为12.48±4.54、13.83±3.40、7.88±3.70、20.00±4.68,4组上述指标比较,差异均有统计学意义(F=5.463,15.051,7.388,P＜0.05).(5)胃组织中凋亡相关蛋白的表达情况:免疫组织化学染色检测结果显示:正常对照组、单独富氢水组、乙醇造模组、富氢水治疗组小鼠胃组织中caspase-3蛋白表达水平分别为0.065 5±0.003 7、0.065 7±0.002 7、0.330 7±0.017 3、0.096 7±0.003 0,bax蛋白表达水平分别为0.065 7±0.003 0、0.064 9±0.003 0、0.335 4±0.033 3、0.084 8±0.001 7,fas蛋白表达水平分别为0.225 4±0.024 3、0.246 0±0.022 3、0.397 0±0.028 5、0.375 0±0.035 6,4组上述指标比较,差异均有统计学意义(F=1 004.222,309.171,48.555,P＜0.05);caspase-9蛋白表达水平分别为0.049 2±0.0004、0.047 9±0.002 0、0.047 0±0.003 7、0.048 7±0.0008,caspase-8蛋白表达水平分别为0.151 5±0.010 2、0.154 0±0.013 5、0.157 2±0.006 2、0.153 9±0.006 3,4组上述指标比较,差异均无统计学意义(F=0.998,0.297,P＞0.05).(6)胃组织凋亡相关因子mRNA的表达情况:RT-PCR检测结果显示:正常对照组、单独富氢水组、乙醇造模组、富氢水治疗组小鼠胃组织中caspase-3 mRNA相对表达水平分别为1.00±0.00、0.72±0.43、3.19±0.87、0.49±0.16,bax mRNA表达水平分别为1.00±0.00、0.66±0.26、1.58±0.76、0.69±0.25,caspase-9 mRNA相对表达水平分别为1.00±0.00、1.57±0.31、3.04±1.15、2.98±0.85,fas mRNA相对表达水平分别为1.00±0.00、0.50±0.19、2.84±0.98、0.53±0.24,4组上述指标比较,差异均有统计学意义(F=32.106,5.038,9.706,23.387,P＜0.05);caspase-8 mRNA相对表达水平分别为1.00±0.00、1.50±0.60、1.36±0.34、1.32±0.43,4组比较,差异无统计学意义(F=1.337,P＞0.05).结论 富氢水可以减轻乙醇诱导的急性胃损伤,其可能作用机制为抗氧化、抗炎和抗凋亡.富氢水安全可靠,未发现对机体存在毒副作用.

目的 构建并评价富氢环境在干预比格犬盆腹腔手术损伤中的作用.方法 选取的10只健康清洁幼年雌性比格犬,随机分为对照组与实验组,均在术中暴露并回纳回肠、空肠、回盲部、膀胱、子宫及附件,同时用电凝刀破坏回盲部、膀胱、子宫及附件;根据吸氢后血氢浓度变化、饮用水盆2000ml富氢水浓度衰减分析以及200ml腹腔富氢生理盐水灌洗液氢浓度衰减分析,构建出盆腹腔手术围术期富氢环境条件;对照组术后予以普通处理,实验组在富氢环境下饲养与护理.结果 吸入含2％氢的混合气体30min后,血氢浓度趋于稳定;新制饱和富氢水1h后,氢浓度下降为初始浓度的一半;腹腔灌注饱和富氢生理盐水后,氢浓度急剧下降,约至15min后,浓度下降一半.根据已构建的富氢环境,检测术前、术后第1天以及第3天的WBC、MDA、SOD、IL-6以及TNF-α的水平.其中,术前两组对比差异无统计学意义(P＞0.05);术后第1天和第3天实验组WBC、MDA、IL-6以及TNF-α水平均明显低于对照组(P＜0.05),而实验组SOD的水平明显高于对照组(P＜0.05).结论 本研究成功构建了一个完整的富氢环境模型,利用该模型后,盆腹腔手术术后血清炎性指标及氧化应激代谢指标明显下调,提示该富氢环境能够有效控制盆腹腔手术带来的损伤、炎性反应及氧化应激.

地壳中元素含量从大到小依次为氧、硅、铝、铁、钙、钠、钾、镁、氢,金属元素铝位居第三,含量丰富且存在广泛.它是一种重要的环境神经毒剂,可通过饮用水、食品添加剂、化妆品及饮食等来源〔1〕与人类频繁接触,进入人体后,在脑部海马区〔2〕、额皮质等敏感区域蓄积并发挥神经毒性作用.大量研究证明,铝作为以学习记忆能力减退为主要症状的神经退行性疾病的重要危害因素,与阿尔茨海默病( AD) 、肌萎缩性脊髓侧索硬化症及帕金森综合征( PD)等认知功能障碍疾病紧密相关〔3,4〕.流行病学调查研究表明,长期接触铝会导致人群出现神经系统症状,如学习记忆能力减退、轻度认知功能障碍等〔5〕.随着经济发展水平的进一步提高及人口老龄化趋势的飞速发展,各种痴呆的发病率逐年升高〔6,7〕,拥有较小离子半径的铝在生物系统中能够有效替代许多酶反应中的必需生物金属,从而产生毒性效应〔8〕,它是一种确切的神经毒物.铝暴露引起的神经系统损害已成为近几年来公共卫生领域重要的全球性问题〔9〕,但其引起退行性神经疾病,如认知能力障碍等的发生机制比较复杂,至今未有定论〔10〕.本文将从铝对脂质过氧化、神经细胞凋亡、Tau蛋白异常磷酸化致神经纤维缠结( NFTs) 、神经递质、胆碱能神经系统及钙稳态失衡六个方面对铝的神经毒性作用机制进行综述.

目的:探讨氢气对牙龈炎孕鼠牙龈局部损伤的保护作用及其可能的机制.方法:取SD雌鼠,采用结扎法诱导牙龈炎后,与雄鼠合笼交配.将孕鼠随机分为对照组、造模组和氢水组.对照组和造模组孕鼠饮用纯水,氢水组给予饱和氢水,1天2次.于妊娠第16天处死孕鼠,ELISA法检测各实验组孕鼠牙龈中Prog、SOD、TNF-α的水平,免疫组织化学和Western免疫印迹法检测牙龈中PR、NFκB和TNF-α的表达.采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:丝线结扎可诱导SD大鼠妊娠期牙龈炎,PR主要分布于各实验组牙龈上皮细胞的胞质中,孕激素(Piog)及其受体(PR)的水平在各实验组孕鼠牙龈局部无显著差异(P＞0.05).造模组大鼠牙龈内SOD含量显著降低,NFκB和TNF-α表达显著升高.与造模组相比,氢水组孕鼠牙龈炎症反应明显减轻,牙龈内NFκB和TNF-α的表达下调.结论:孕激素及其受体可能在实验大鼠妊娠牙龈炎的发生与发展过程中发挥间接作用,氢气可能通过抑制氧化应激相关炎症反应,减轻实验大鼠的妊娠牙龈炎.

目的 探讨分子氢对雄性小鼠生殖系统高水平小剂量电离辐射损伤的防护作用及机制.方法 将小鼠精原细胞系GC-1 spg细胞分为对照组、加氢组、4 Gy照射组、4 Gy照射加氢组,在各组细胞处理后24 h时采用流式细胞术检测细胞凋亡率.将72只雄性BALB/c小鼠分为对照组、加氢组、0.25 Gy照射组、0.25 Gy照射加氢组、0.5 Gy照射组、0.5 Gy照射加氢组,每组12只.小鼠加氢处理采用饮用富氢水联合呼吸高浓度氢气法.各组小鼠经相应处理后24 h分离睾丸组织进行H-E染色,并于内眦静脉取血,采用ELISA试剂盒检测促性腺激素释放激素(GnRH)、血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮含量.照射后4周分离小鼠双侧附睾制备精子悬液,以精子彗星电泳实验检测精子DNA损伤情况.结果 4 Gy照射加氢组GC-1 spg细胞的24 h凋亡率低于4 Gy照射组,差异有统计学意义(t=7.186,P<0.01).加氢处理缓解了0.5 Gy照射导致的小鼠睾丸组织损伤,纠正了0.25 Gy、0.5 Gy照射诱发的FSH水平升高(t0.25 Gy=3.1958,P0.25 Gy=0.019;t0.5 Gy=10.7234,P0.5 Gy<0.05),并减轻了0.25 Gy、0.5 Gy照射后4周小鼠精子DNA彗星拖尾程度和DNA损伤情况(尾部面积:t0.25 Gy=16.5923,t0.5 Gy=15.8915;尾部DNA含量:t0.25 Gy=11.2965,t0.5 Gy=13.7850;尾部DNA百分含量:t0.25 Gy=26.8340,t0.5 Gy=10.3257;尾长:t0.25 Gy=16.8654,t0.5 Gy=15.4412;尾矩:t0.25 Gy=26.9794,t0.5 Gy=13.1742;Olive尾矩:t0.25 Gy=24.7524,t0.5 Gy=6.8961;P均<0.05).结论 分子氢通过降低精原细胞凋亡、调节激素紊乱、减轻精子DNA损伤等方式对雄性小鼠生殖系统高水平小剂量辐射损伤发挥防护作用.

氢气是一种无色、无味、具有生物活性的还原性小分子气体,可与机体内的活性氧发生反应.目前认为氢气具有抗氧化、抗炎、抗凋亡等生物学作用,且氢气具有极高生物安全性.近年来氢气相关研究的范围不断扩大,氢气应用的模型从急性病到慢性病、从良性病到恶性病都有所涉及.此外,氢气应用的手段也在逐渐丰富,包括氢气吸入、氢水饮用、含氢溶液静脉注射或局部使用以及含氢透析液透析等.与此同时逐渐增多的临床研究也进一步证明,氢气在疾病治疗方面的重要作用和独特优势.然而,氢气生物学效应的分子机制目前仍未阐明,许多学者和普通大众对氢气生物学效应的研究进展缺乏了解,这限制了氢气医学的发展及相关产品的研发,氢气医学的研究和普及依然任重而道远.

目的:探讨氢对氧化应激诱导的视网膜衰老的保护机制.方法:将小鼠随机分为三组:对照组、模型组(NaIO3处理组)和治疗组(H2水灌胃组).模型组通过鼠尾静脉注射NaIO3溶液建立视网膜氧化应激损伤模型;对照组小鼠注射生理盐水;治疗组予富含H2的饮用水灌胃后造模.利用SA-β-gal染色检测视网膜衰老情况.收集小鼠视网膜,western-blot检测DNA损伤反应相关蛋白ATM、NF-κB蛋白、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和DNA修复相关蛋白HMGB1的表达.结果:SA-β-gal染色显示,治疗组蓝绿色沉淀较模型组相比减少.western-blot结果显示治疗组中DNA损伤反应相关蛋白ATM、NF-κB、Cyclin D1相对表达量(0.10±0.009、0.32±0.01、0.19±0.002)较模型组(0.77±0.08、0.70±0.02、0.36±0.01)均显著降低,差异均具有统计学意义(均P<0.01);而治疗组中DNA修复相关蛋白HMGB1相对表达量(0.927±0.06)较模型组(0.383±0.07)显著升高,差异有统计学意义(P<0.01).结论:氢可以通过抑制氧化应激诱导的DNA损伤减弱视网膜衰老.

目的:通过观察富氢水联合香砂六君子丸对功能性消化不良大鼠体质量、胃排空率、小肠推进率和胃动素、胃泌素、胃促生长素的影响,探讨富氢水联合香砂六君子丸对功能性消化不良大鼠的协同治疗作用.方法:将40只大鼠随机分为空白组、模型组、香砂六君子组、富氢水联合香砂六君子组、多潘立酮组,共5组,每组8只.采用夹尾激惹刺激及不规则喂养干预建立大鼠功能性消化不良模型并给予各组相应治疗:香砂六君子组大鼠给予香砂六君子丸2.25 g/kg灌胃,富氢水联合香砂六君子组大鼠给予香砂六君子丸2.25 g/kg灌胃并自由饮用富氢水,多潘立酮组大鼠给予多潘立酮5 mg/kg灌胃,空白组和模型组大鼠给予等体积生理盐水.治疗28 d后,测量大鼠体质量、胃排空率和小肠推进率并收集各组大鼠血清,采用ELISA法测定血清中胃动素、胃泌素和胃促生长素水平.结果:与模型组相比较,各治疗组大鼠体质量、胃排空率和小肠推进率均增加(P＜0.05),血清胃泌素水平降低(P＜0.05),血清胃动素和胃促生长素水平(P＜0.05).富氢水联合香砂六君子组增加大鼠体质量、小肠推进率、升高血清胃动素水平、血清胃促生长素水平的效果和降低血清胃泌素水平的效果优于香砂六君子组(P＜0.05),增加大鼠体质量、胃排空率、小肠推进率、升高血清胃促生长素水平的效果和降低血清胃泌素水平的效果优于多潘立酮组(P＜0.05).结论:富氢水对香砂六君子丸治疗功能性消化不良大鼠具有协同治疗效果,具有良好的开发和应用价值.

目的 观察富氢水、中成药(金复康口服液)或两者协同干预对胆管癌成瘤的影响.方法 实验分为四组:对照组(n=10),富氢水组(n=10),金复康口服液组(n=5)和富氢水+金复康口服液组(n=5).对照组予以成年SD雄性大鼠自由饮用含有硫代乙酰胺(300 mg/L)水,实验组在饮用含硫代乙酰胺水的同时,分别经胃灌注适量富氢水、金复康口服液、富氢水+金复康口服液,20周处死所有大鼠,肉眼和显微镜下观察肝成瘤情况.结果 9只可评价对照组大鼠在第20周时均形成肉眼以及镜下可见的肿瘤100％(9/9),而富氢水干预组7只大鼠可评价,肝肿瘤发生率为57.1％(4/7),金复康口服液干预组大鼠肝内肿瘤的成瘤率为40％(2/5),富氢水联合金复康口服液干预组大鼠肝内成瘤率为0(0/5).结论 富氢水+金复康口服液的协同作用能够成功阻断大鼠肝内胆管癌的发生.

目的:观察自由饮用富氢水8周,中等强度耐力训练大鼠氧化应激损伤指标、抗氧化指标的变化,分析富氢水对运动性氧化应激损伤的保护作用.方法:将40只1 10-140g SD雄性大鼠随机分为4组:安静对照组(N=8,C组);运动对照组(N=12,CS组);补充富氢水组(N=8,H组);补充富氢水运动组(N=12,HS组).C组、CS组大鼠自由进食,饮水.H组、HS组大鼠自由进食,饮用富氢水,实验共持续8周.自第5周开始,CS组、HS组大鼠进行中等强度耐力跑台训练,训练4周.训练结束后次日,全部大鼠在24h内心尖取血,分离血清.测定血清氧化应激指标(MDA、8-OHdG、3-NT);抗氧化指标(T-AOC、T-SOD、CAT、GSH-Px).结果:①大鼠血清8-OHdG、3-NT指标无组间差异;运动对照组大鼠血清MDA含量显著高于安静对照组(P＜0.05);补充富氢水运动组大鼠血清MDA含量显著低于运动对照组(P＜0.05).②大鼠血清T-SOD活性水平无组间差异;运动对照组大鼠血清CAT活性极显著高于安静对照组(P＜0.01);补充富氢水运动组大鼠血清CAT活性、GSH-Px活性、T-AOC水平均显著高于运动对照组(P＜0.05).结论:4周中等强度耐力训练引起大鼠脂质过氧化损伤,8周自由饮用富氢水显著降低运动性氧化应激引起的脂质过氧化损伤并显著提高大鼠的抗氧化能力.