外泌体(exos)作为一种直径在40～150 nm之间的细胞外囊泡，在介导细胞间通讯中扮演着重要角色。新的证据表明，肿瘤细胞分泌的exos(TEXs)可通过传递微小RNAs对肿瘤微环境中的免疫细胞进行驯化，使其处于免疫抑制状态，从而为肿瘤的生长、进展和转移提供有利支持。本综述旨在对TEXs微小RNAs在介导肿瘤免疫抑制中的研究进展进行总结，从而为深入理解肿瘤微环境中TEXs介导的肿瘤细胞和免疫细胞的"crosstalk"提供参考。

目的 探究去泛素化酶在单核细胞驯化免疫中的作用及机制.方法 Q-PCR检测单核细胞驯化免疫中去泛素化酶相关基因的表达情况;ELISA法检测去泛素化酶对驯化的单核细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响;双荧光素酶报告基因检测系统测定去泛素化酶对NF-κB信号通路的影响.双荧光素酶报告基因检测系统测定:UCHL1对NF-κB 信号通路的影响、UCHL1与NF-κB信号通路关键信号分子之间的作用及UCHL1影响NF-κB信号通路所依赖的酶活性;ELISA法检测UCHL1对单核细胞驯化作用中TNF-α分泌水平的影响.结果 去泛素化酶USP2、UCHL1、OTUB2和OTUD4在单核细胞驯化免疫中的表达量明显升高;去泛素化酶抑制剂可明显抑制驯化单核细胞中TNF-α的分泌水平;USP2、UCHL1、OTUB2、PSMD14 等可明显激活 NF-κB 信号通路,通过上述实验筛选出对NF-κB影响最为明显的UCHL1进行后续研究.UCHL1的表达明显影响NF-κB信号通路的激活;UCHL1的表达促进了由IκB-α、IKK-α或IKK-β介导的NF-κB的激活;UCHL1主要通过其泛素水解酶活性调控NF-κB信号通路;UCHL1抑制剂可明显减弱单核细胞的驯化作用.结论 自身免疫病中免疫复合物可以驯化单核细胞增强其敏感性,这种作用可通过UCHL1调节NF-κB信号通路的激活实现.

在动物细胞培养过程中,血清的存在能满足细胞的生长繁殖需求,但实际生产中血清提取工艺复杂,成本高昂,给大规模生产带来困难,不利于商业化开发.常见细胞源疫苗血清残留对疫苗免疫效果有很大的影响,而无血清培养基避免了血清所带来的血源性污染等问题,其成分和含量明确,制备流程简易,提高了实验的稳定性和准确性,有利于获得高质量的生物产品,与天然培养基等传统的培养基相比有着许多优势.随着生物科学的发展,细胞无血清培养技术的创新和应用已成为生物工程重点研究课题.我们简要综述了无血清驯化细胞的发展历程、应用,及无血清培养基的组成成分、优缺点等内容,以期对未来细胞培养技术的发展进程提供助力.

发酵菌株的改良在发酵工业生产上通常是一项非常重要的内容,而传统的驯化模式周期长、效率低、稳定性差且成本高,很难满足工业化快速生产的要求.规律成簇间隔短回文重复Cas(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/Cas,CRISPR/Cas)是细菌及古生菌中的一种适应性免疫系统,在此系统上改进的基因编辑技术能实行RNA导向的DNA精准编辑.因而利用CRISPR/Cas基因编辑技术对菌株的快速构建和优化,是一条快速获得高产菌株的新途径.本文综述了CRISPR/Cas系统组成、工作原理、分类以及该技术在发酵菌株上的应用研究进展,并探索了该技术存在的问题以及目前的解决办法,最后对CRISPR/Cas技术在发酵工程上的潜力进行了展望.

目的 利用生物反应器低血清培养基灌流培养猪瘟病毒,制备猪瘟病毒活疫苗,检测其免疫效价.方法 对猪睾丸ST细胞进行低血清培养驯化,待ST细胞适应低血清培养后,接种至生物反应器,当细胞达到接种密度后,感染猪瘟兔化弱毒株(Classical Swine)毒种,培养96 h后,连续收液48 d,收获的病毒液经滤膜过滤后,制备猪瘟病毒活疫苗.将疫苗免疫健康新西兰家兔和28日龄健康仔猪,检测病毒滴度及免疫效价.结果 用2％血清培养ST细胞,细胞接毒密度为5×106个/mL,病毒按3％～5％比例接种.利用上述条件培养的猪瘟病毒连续收获20次,病毒滴度均在7 500 RID/mL以上.免疫仔猪后第14天抗体效价达1∶128,未免疫仔猪抗体效价低于1∶16;攻毒后观察16d,免疫仔猪无任何猪瘟临床表现,保护率100％,而未免疫仔猪在攻毒后第6天开始陆续死亡,死亡率100％.结论 用低血清培养ST细胞制备的猪瘟病毒活疫苗具有较高的免疫效价,为猪瘟病毒疫苗生产工艺的改进奠定了基础.

目的 研究不同时间针刺足三里穴对炎性大鼠脊髓及背根神经节中香草酸瞬时电位受体4(TRPV4)蛋白表达的影响.方法 将54只清洁级的雄性SD大鼠驯化7 d后,进行基础痛阈筛选,然后按痛阈结果随机分组为造模组36只、空白组18只,造模组在右足足垫部皮内注射完全弗氏佐剂0.1 mL,空白对照组注射0.1 mL生理盐水.造模成功的大鼠又按照基础痛阈随机分为模型组18只和针刺组18只,每组按照不同的处理时间又分为ZT8(15:00)、ZT16(23:00)2个时间亚组,每组9只.在2个时间点进行处理,针刺组在相应时间点手针针刺患侧足三里30 min,其间每5 min捻转1 min,频率为120次/min,模型组、空白组捆绑固定30 min,不做其他处理,1次/d,共治疗7d.在第7天治理结束后检测相应时间点大鼠的痛阈,痛阈检测后取材,提取大鼠腰椎4～6的脊髓及背根神经节,采用免疫组化的方法检测大鼠背根神经节以及脊髓中TRPV4的表达.结果 ①在ZT8时间点:模型组大鼠与空白组相比,背根神经节中TRPV4表达量显著增加(P<0.01);脊髓组织TRPV4蛋白表达量明显上调(P<0.05).针刺组大鼠与模型组相比,针刺组背根神经节TRPV4表达量显著下降(P<0.01),脊髓组织TRPV4蛋白表达量无明显差异(P>0.05).②在ZT16时间点:与空白组相比,模型组大鼠背根神经节TRPV4表达量明显增加(P<0.05),脊髓组织TRPV4蛋白表达量明显上调(P<0.01).与模型组相比,针刺组大鼠背根神经节TRPV4表达量无明显差异(P>0.05),脊髓组织TRPV4蛋白表达量降低(P<0.05).结论 炎性痛能够诱发大鼠脊髓和背根局部神经节TRPV4蛋白表达的上调;针刺足三里穴能够调节炎性痛大鼠脊髓与背根神经节TRPV4的蛋白含量.

外泌体(exosome)是一种起源于内吞体系统的细胞外囊泡,是微环境中细胞间通讯的重要载体.肿瘤细胞在肿瘤进展过程中可以通过外泌体与微环境的免疫细胞、间质细胞和内皮细胞之间发生相互作用进而促进肿瘤进展.肿瘤外泌体中可以携带蛋白质、脂质和核酸等形式的生物信息分子,这些分子既可以对受体细胞进行驯化作用,同时有可能成为肿瘤特异性标志物,在肿瘤临床检验中发挥重要作用,因此,外泌体的研究已成肿瘤基础和临床检验研究中重要的新领域.该文就肿瘤外泌体在微环境中的多种细胞相互作用机制及其作为特异性肿瘤标志物的研究现状和前景作一概述.

环境温度的变化影响野生啮齿动物的消化道形态与功能.小肠是吸收营养成分的主要部位,其结构和功能具有可塑性.为了解小肠黏膜的结构和功能对环境温度变化的响应机制,以布氏田鼠 (Lasiopodomys brandtii) 为研究对象,比较了低温组和常温组动物小肠黏膜的组织结构和小肠黏膜免疫相关细胞的数目.结果显示: (1) 低温组布氏田鼠的十二指肠、空肠和回肠的绒毛长度及绒毛长度与隐窝深度的比值均高于对照组; (2) 低温驯化使布氏田鼠小肠上皮内淋巴细胞的数量增加; (3) 低温驯化使布氏田鼠十二指肠、空肠和回肠的杯状细胞数量均显著增加.结果表明,在低温环境下布氏田鼠的小肠黏膜结构和免疫细胞的数量发生了可塑性变化,这可能与低温环境下的高能量需求和免疫功能的变化有关.

免疫抑制引起脓毒症后期死亡风险增加.中性粒细胞、单核/巨噬细胞、自然杀伤细胞(NK细胞)和树突细胞等固有免疫细胞功能失调与脓毒症免疫抑制有关.近年来,免疫细胞代谢重编程是研究脓毒症免疫调节的热点问题.本文以固有免疫细胞为切入点,分析总结中性粒细胞脂肪酸合成代谢、单核/巨噬细胞葡萄糖和精氨酸代谢、NK细胞"驯化"与糖酵解、糖脂代谢、线粒体合成以及树突细胞分化、成熟、活化进行综述,以期深入理解脓毒症免疫代谢调节机制.

固有免疫和适应性免疫是高等脊椎动物中相对独立又互相协同的两类免疫应答.经典的免疫学理论认为免疫记忆是适应性免疫区别于固有免疫的重要特征之一.然而,近年来发现的“驯化免疫”(trained immunity)现象显示,固有免疫细胞在接受病原体、细胞因子或其他代谢产物刺激后,可以通过表观遗传和代谢重编程等方式改变细胞表型,使其在再次活化时产生更强的非特异性免疫应答.驯化免疫现象的存在一方面使机体受到再次感染时,固有免疫系统可以同样发挥重要的保护作用;另一方面,过度激活的驯化免疫应答则可能导致炎症性疾病的发生发展.该文主要介绍了以卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)和β-葡聚糖为代表的驯化免疫应答特征及调控机制,并综述了驯化免疫这一新概念在疾病治疗和预防中的最新研究.