目的:建立益气活血颗粒的质量控制方法.方法:以对照药材为对照,选用薄层色谱法(TLC)定性鉴别制剂中黄芪/炙黄芪、五味子、牡丹皮、莪术、丹参;分别采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)和高效液相-紫外检测器(HPLC-UV)法对益气活血颗粒中黄芪甲苷和毛蕊异黄酮苷进行定量测定.结果:处方中5味药材均能通过薄层色谱法检出,且斑点清晰,分离良好.黄芪甲苷和毛蕊异黄酮苷分别在进样量为2.32～37.04 μg、19.62～314 ng呈良好线性关系,平均回收率分别为91.25％、93.59％,RSD分别为2.27％(n=6)、1.90％(n=6).结论:研究建立的方法可有效用于益气活血颗粒的定性、定量控制.

采用高效液相色谱紫外及蒸发光散射检测器建立裂果薯总皂苷(SFSP60％)的特征图谱,乙腈-水为流动相梯度洗脱,检测波长203 nm,柱温30 ℃,流速1 mL/min,进样量10μL.以ELSD色谱图中SFSP60％色谱峰为参照,采用面积归一法计算出裂果薯皂苷Ⅰ (SPHS Ⅰ)相对百分比为84.28％,裂果薯皂苷Ⅱ(SPHS Ⅱ)为3.02％,化合物1为2.21％,化合物2为6.31％,化合物3为2.73％,化合物1～3可能是母核类似的皂苷类化合物.取对数生长期的人肝癌SMMC-7721细胞,给药组分别加入0、0.25、0.5、2、4μg/mL的SFSP60％、SPHS Ⅰ、SPHSⅡ和SPHS Ⅰ+Ⅱ(SPHS Ⅰ和SPHSⅡ各占比96.54％、3.46％)培养24 h、48 h、72 h,采用MrF法观察并计算细胞增殖抑制率和IC5o.结果显示给药组对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用呈现时间与剂量依赖性(P均＜0.05),且活性大小:SFSP60％＜SPHS Ⅰ、SPHSⅡ＜SPHS Ⅰ+Ⅱ.证明在总皂苷中是SPHS Ⅰ和SPHSⅡ发挥主要抗肿瘤作用,且抗肿瘤作用是各组分共同作用的结果.为裂果薯中有效组分的抗肿瘤活性研究提供了参考以及有效组分的合理配比提供了新思路.

目的 对固牙护齿丸的质量控制方法进行研究.方法 用薄层色谱法(TLC)鉴别了该处方中五味子、巴戟天和黄芪药材;用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)法和高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)法分别测定了处方中黄芪和丹皮药材中的有效成分黄芪甲苷和丹皮酚含量.结果 五味子、巴戟天和黄芪的TLC图特征斑点清晰,分离度好,阴性对照无干扰.黄芪甲苷在0.37 μg ～9.25 μg(r=0.9996)的绝对进样量对数值与各自峰面积的对数值呈良好线性关系;平均加样回收率为99.64％,RSD为0.81％(n=6),在12 h内稳定性良好;丹皮酚在0.115 μg～4.612 μg(r=0.9998)进样量与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率为98.89％,RSD为0.82％(n=6),在12 h内稳定.结论 所建立的方法简便易行、结果准确、重现性好,能够准确有效的控制固牙护齿丸的质量.

目的 建立仙灵骨葆胶囊(XLGB)多波长高效液相色谱-紫外真空波-蒸发光散射检测器(HPLC-UVD-ELSD)指纹图谱结合主要代表成分同时定量的方法,对市售制剂进行整体质量控制.方法 采用Poroshell 120 EC-C18色谱柱(4.6 mm×100mm,2.7μm);检测波长分别为240、270、334 nm;ELSD漂移管温度105℃;载气流速2.0 L·min-1;建立XLGB多波长HPLC-UVD-ELSD指纹图谱,对主要特征峰进行明确化学指认并确定组方中药来源,运用相似度软件对15批市售制剂进行相似度评价,同时在市售制剂批间差异小的前提下测定主要代表成分的含量.结果 建立了XLGB多波长HPLC-UVD-ELSD指纹图谱结合6个代表成分同时定量的方法;覆盖该复方6味组方中药的31个主要特征峰得到明确化学指认,并初步确定了26个特征峰的组方中药来源;15批市售制剂的指纹图谱与对照指纹图谱的相似度值在0.943 ～0.997之间;6个定量成分线性关系良好(r =0.999 0～0.999 6),且平均回收率为98.5％ ～ 104.9％.结论 该方法专属、快速、高效,能全面反映XLGB的整体质量;且贴近实际生产,有望进一步规范、提升成为企业内控标准.

目的 比较灰毡毛忍冬不同发育期花蕾中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量.方法 色谱柱:CAPCELL PAK C18 MG(250 mm×4.60 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.4％醋酸溶液(B),梯度洗脱;流速:1.0 mL·min-1;紫外检测波长:330 nm;蒸发光散射检测器条件:漂移管温度110℃,气体流速3.0 L·min-1,撞击器关;柱温:30℃.收集不同发育期(幼蕾期、三青期、大白期、银花期、金花期、凋花期)花蕾样品,采用HPLC-UV-ELSD串联技术,以外标两点法计算绿原酸的含量,以外标两点法对数方程计算灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量.结果 灰毡毛忍冬中绿原酸和川续断皂苷乙含量以三青期最高,分别为6.934％,1.800％;灰毡毛忍冬皂苷乙以幼蕾期最高,为9.351％,较三青期高0.227％.结论 通过对灰毡毛忍冬花蕾不同发育期的含量比较可见,最佳采收期为三青期,此时绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙含量高.

目的:对桔梗中苦味物质的分布和动态积累进行研究,为桔梗的质量控制和评价提供依据.方法:分别采用紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)测定桔梗植株1年生长过程中不同器官、根系不同部位、主根不同组织结构中总皂苷、总黄酮、总氨基酸以及去芹糖桔梗皂苷D、桔梗皂苷D、远志皂苷D的含量.结果:苦味物质含量分布的顺序如下:皂苷为叶＞花＞根＞茎,黄酮为叶＞花＞茎＞根,氨基酸为花＞叶＞茎＞根.桔梗根系中,皂苷、黄酮类成分在芦头、主根、侧根、须根中分布比较均匀,氨基酸在主根中分布最多.在主根的不同组织结构中,皂苷的分布为周皮＞韧皮部＞木质部,黄酮的分布为周皮＞韧皮部≈木质部,氨基酸的分布为木质部＞韧皮部＞周皮.不同生长时期,苦味物质含量发生动态变化,其中1月份含量最高.结论:本研究明确了桔梗最佳采收期为11月份至第2年1月份.桔梗的地上部分和须根中含有丰富的皂苷、黄酮和氨基酸,可作为提取相应成分的原料.新鲜桔梗直接切成饮片后干燥,不宜去皮,以提高桔梗饮片中苦味物质的含量.

目的:建立非达霉素原料药中有关物质的检查方法.方法:分别考察正相-紫外检测器色谱系统、反相-蒸发光散射检测器色谱系统、反相-紫外检测器色谱系统对非达霉素原料药中有关物质的检出能力,优选出最佳色谱系统.建立有关物质检查的高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Eclipse XDB C18,流动相A为0.2％三乙胺缓冲液(pH 3.8)-乙腈(55:45,V/V)、流动相B为0.2％三乙胺缓冲液(pH 3.8)-乙腈(20:80,V/V)(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为230 nm,柱温为35℃,进样量为10μL;以不加校正因子的主成分自身对照法计算有关物质含量.结果:非达霉素在正相-紫外检测器色谱系统下不能有效分离杂质C、F,在反相-蒸发光散射检测器色谱系统下仅能检出杂质C、D、E、F 4个杂质;在反相-紫外检测器色谱系统下可检出11个杂质,故以此系统进行有关物质检查.在方法学考察中,非达霉素检测质量浓度线性范围为0.5～20.0μg/mL(R2=0.9999);检测限为0.05 ng,定量限为0.15 ng;重复性、中间精密度试验的RSD均小于2.0％(n=6);平均回收率为98.4％(RSD为3.6％,n=9).3批非达霉素原料药中杂质含量分别为0.53％、0.51％、0.51％.结论:非达霉素在反相-紫外检测器色谱系统下进行杂质检查效果最好;建立的有关物质检查方法专属性强、灵敏度高,可用于非达霉素原料药中有关物质的检查.

目的:通过高效液相色谱-蒸发光散射检测器(high performance liquid chromatography-evaporative light scattering detector,HPLC-ELSD)分离发现舒血宁注射液中的不合紫外吸收的化学成分并测定含量.方法:直接通过HPLC-ELSD导向分离,富集相应色谱峰的组分,通过1D和2D NMR,MS,并参照对照品确定了舒血宁注射液中的化学成分.采用HPLC-ELSD方法同时测定分离得到的成分含量,条件为:色谱柱:COSMOSIL5NH2-MS氨基柱(5μm,4.6 mm×250.0 mm),流速:1.0 mL·min-1,柱温:30℃,漂移管温度60℃,增益4,流动相为:乙腈水(89∶11).结果:分离鉴定了舒血宁注射液中的4个化学成分,分别为松醇、果糖、红杉醇、葡萄糖,其中松醇和红杉醇为首次发现.含量测定方面,以峰面积的自然对数对质量的自然对数进行线性回归,松醇质量在4.423 2～22.116 0μg范围内与峰面积对数呈良好线性关系,r =0.999 9(n =6),平均回收率为101.34％ (n =9);果糖质量在6.1223～30.611 3μg范围内与峰面积对数呈良好线性关系,r=1.000 0(n =6),平均回收率为102.19％(n=9);红杉醇质量在1.787 5～8.937 6μg范围内与峰面积对数呈良好线性关系,r =0.998 9(n=6),平均回收率为101.12％(n=9);葡萄糖质量在7.758 3 ～38.791 7μg范围内与峰面积对数呈良好线性关系,r =0.994 8(n=6),平均回收率为101.02％ (n =9).结论:完善了舒血宁注射液化学质量控制方法,该含量测定方法简便、快速,结果准确、可靠、重复性良好,可用于舒血宁注射液中松醇、果糖、红杉醇和葡萄糖的含量测定.

目的 建立颈舒颗粒中有效成分含量测定的高效液相色谱(HPLC)法.方法 采用高效液相色谱-紫外可见分光光度(HPLC-UV)法测定颈舒颗粒中三七药材中5种成分三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd的含量,以乙腈-水溶液为流动相(梯度洗脱),流速为0.8 mL/min,检测波长为203 nm;采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法测定制剂中人工牛黄药材中胆酸、猪去氧胆酸的含量,以乙腈-0.2％甲酸溶液为流动相(梯度洗脱),流速为0.8 mL/min,气体压力为40 psi,漂移管温度为60℃.结果 该制剂中三七药材5种成分的回收率为97.82％ ～103.85％,RSD均小于1.50％(n=6);人工牛黄药材中胆酸、猪去氧胆酸的回收率为100.94％和100.32％,RSD均小于1.60％(n=6);7种成分的线性关系均良好(r≥0.9990).结论 该方法简便高效,准确可靠,重复性好,结果稳定,可用于颈舒颗粒的质量控制.

目的 建立定性分析祛瘀生新胶囊化学成分的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法,以及测定士的宁和黄芪甲苷的液相色谱法.方法 采用UPLC-MS/MS法定性分析祛瘀生新胶囊的特征化学成分,采用液相色谱法测定士的宁和黄芪甲苷的含量.色谱柱为Accucore AQ C18柱(150 mm×2.1 mm,2.6μm),流动相为0.1％甲酸水溶液-甲醇溶液,采用正离子全扫描模式;液相色谱柱为Welchrom C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),士的宁流动相为乙腈-0.2％磷酸水溶液(15:85,V/V),黄芪甲苷流动相为乙腈-水(32:68,V/V),蒸发光散射检测器检测,紫外检测器检测波长为260 nm.结果 祛瘀生新胶囊中有23个特征峰,包括士的宁、马钱苷酸、芦丁、黄芪甲苷等.士的宁、黄芪甲苷进样量分别在0.11～1.10μg(r=0.9999)和0.49～4.90μg(r=0.9992)范围内与峰面积线性关系良好;平均加样回收率分别为99.62％和99.44％,RSD分别为1.34％和0.90％(n=6).结论 该方法灵敏度高,重复性好,结果准确,专属性强,可为该制剂的质量标准及药效物质基础研究提供参考.