目的:探讨高浓度常压氧干预治疗对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响及其可能机制。方法:成年雄性SD大鼠21只，均切除右侧肾脏建立孤肾模型，2周后随机分为3组，每组7只：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）、高浓度常压氧+缺血再灌注组（NBHO+I/R组），S组仅分离左侧肾蒂，不给予缺血处理；I/R组和NBHO+I/R组分离左侧肾蒂并用无创动脉夹致左肾缺血45 min，再灌注24 h后，将3组大鼠置于密闭氧舱中，S组和I/R组吸入常规浓度氧气（21%），NBHO+I/R组吸入高浓度氧气（60%），每天1次，每次2 h，持续7 d。术后第7天，通过大鼠眶静脉取血测量血清尿素氮和肌酐水平；取大鼠左侧肾脏，测量肾脏组织中丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）含量；通过实时定量PCR（qPCR）和Western印迹法检测肾脏组织中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1（Keap1）和核因子E2相关因子2（Nrf2）mRNA和蛋白含量；苏木精-伊红（HE）染色观察肾脏组织病理改变；免疫组化染色观察肾脏组织中Keap1和Nrf2蛋白表达水平。结果:与S组相比，I/R组和NBHO+I/R组大鼠血清尿素氮［（10.7±1.7）mmol/L、（8.4±1.0）mmol/L比（6.1±1.3）mmol/L，均 P<0.05］和肌酐［（81.0±3.7）μmol/L、（62.9±3.4）μmol/L比（48.3±2.9）μmol/L，均 P<0.05］水平均增加，但NBHO+I/R组较I/R组降低（均 P<0.05）；I/R组和NBHO+I/R组肾脏组织MDA含量［（10.5±1.0）μmol/L、（8.6±0.8）μmol/L比（6.5±0.5）μmol/L，均 P<0.05］均增加，但NBHO+I/R组较I/R组降低（ P<0.05）；I/R组和NBHO+I/R组肾脏组织SOD含量均下降，但NBHO+I/R组较I/R组增加（ P<0.05）。与S组相比，I/R组和NBHO+I/R组肾脏组织中Keap1 mRNA和蛋白含量均降低，其中NBHO+I/R组下降最多（均 P<0.05）；I/R组和NBHO+I/R组肾脏组织中Nrf2 mRNA和蛋白表达水平均增加，其中NBHO+I/R组增加最多（均 P<0.05）。术后病理结果提示，与S组相比，I/R组和NBHO+I/R组肾脏组织病理损伤均加重，但NBHO+I/R组损伤程度较I/R组减轻。 结论:高浓度常压氧干预治疗可能通过激活Keap1-Nrf2信号通路，对大鼠肾脏缺血再灌注损伤产生保护性作用。

目的:研究高氧暴露和小分子干扰RNA(siRNA)对A549细胞中细胞核转录相关因子2(Nrf2)、NAD(P)H：醌氧化还原酶1(NQO1)表达的影响，探讨其在高氧肺损伤中的作用及其与细胞凋亡的关系。方法:将体外培养A549细胞随机分为4组：Ⅰ组为无干扰空气组；Ⅱ组为无干扰高氧组；Ⅲ组为Nrf2 siRNA转染空气组；Ⅳ组为Nrf2 siRNA转染高氧组；将Ⅱ组、Ⅳ组持续暴露于常压高浓度氧(950 mL/L O 2，50 mL/L CO 2)中；Ⅰ组、Ⅲ组仍置于50 mL/L CO 2培养箱中。通过预实验从目的基因靶点siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3(分别加入对应脂质体复合物)中筛选出抑制Nrf2效率最高的Nrf2 siRNA，应用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、Western blot分别检测4组Nrf2、NQO1的mRNA及蛋白表达水平，应用免疫荧光和激光共聚焦显微镜分析干扰Nrf2后A549细胞中Nrf2、kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、抗氧化物反应元件蛋白的分布，观察各组细胞凋亡情况。 结果:1．Nrf2 siRNA可抑制Nrf2表达，siRNA-1组、siRNA-2组、siRNA-3组Nrf2 mRNA表达均被抑制，其中siRNA-1组的抑制效率最高(80.57%)。2.Ⅱ组Nrf2、NQO1 mRNA的相对表达量分别为4.553±0.498和5.866±0.582，与Ⅰ组相比，mRNA及蛋白表达量显著增高，细胞凋亡率[(21.67±0.75)%]增加，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。3.Ⅳ组Nrf2、NQO1 mRNA的相对表达量分别为0.937±0.057和0.789±0.058，与Ⅱ组相比，mRNA及蛋白表达显著减弱，细胞凋亡率[(35.83±0.42)%]进一步增高，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。 结论:高氧暴露和siRNA导致A549细胞中Nrf2和NQO1表达异常，提示Nrf2和NQO1参与高氧肺损伤的发病过程；Nrf2、NQO1可能在高氧所致肺损伤及细胞凋亡中发挥保护作用。

目的:探讨常压高浓度吸氧对大鼠肾脏缺血再灌注后肾小管上皮细胞凋亡的影响及其机制。方法:成年雄性SD大鼠18只，均切除左侧肾脏建立孤肾模型，1周后采用数字随机分配到3个组，每组6只，分别为假手术组(S组)、对照组(C组)和实验组(E组)。S组仅钝性分离右侧肾蒂，但不予缺血处理；C组和E组均以动脉夹夹闭肾蒂致右肾缺血40 min。24 h后3组均置于密闭氧舱中，S组和C组吸入常规浓度氧气(21%)，E组吸入高浓度氧气(50%~55%)，每天1次，每次2 h，持续7 d。术后第8天取大鼠右侧肾脏，检测肾小管上皮细胞凋亡水平、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量、核因子E2相关因子2(Nrf2)的mRNA和蛋白表达水平、Nrf2在肾小管上皮细胞的表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果:C组和E组大鼠肾脏皮质中肾小管上皮细胞凋亡指数高于S组(12.18±1.82、3.96±0.99比0.74±0.20， F＝145.003， P<0.05)。C组和E组大鼠肾脏组织MDA含量高于S组[(15.20±0.84)、(8.33±0.33) μmol/L比(5.53±0.38) μmol/L， F＝465.303， P<0.05]。C组和E组大鼠肾脏组织SOD含量低于S组[(5.72±0.39)、(10.71±0.65) nmol/L比(14.20±0.52) nmol/L， F＝381.495， P<0.05]。C组与E组中Nrf2 mRNA表达水平高于S组(3.01±0.28、6.23±0.60比1.00， F＝469.948， P<0.05)。C组与E组中Nrf2蛋白表达水平高于S组(0.79±0.03、1.03±0.02比0.56±0.02， F＝1 095.493， P<0.05)。C组与E组肾脏皮质中肾小管上皮细胞Nrf2吸光度( A)值高于S组(14.58±1.73、23.95±2.38比7.45±1.05， F＝292.009， P<0.05)。 结论:常压高浓度吸氧能够减轻肾脏缺血再灌注损伤后肾小管上皮细胞凋亡

目的:探讨常压高浓度吸氧对大鼠缺血再灌注肾损伤的作用及其机制。方法:2019年6月至2019年8月，选取成年雄性SD大鼠(购自辽宁长生生物技术股份有限公司)18只，均予切除左侧肾脏建立孤肾模型，1周后数字随机分配到3个组中，每组6只，分别为假手术组(S组)、对照组(C组)和实验组(E组)。S组仅钝性分离右肾肾蒂，但不予缺血处理；C组和E组均以动脉夹夹闭肾蒂致右肾缺血40 min。24 h后3组均置于密闭氧舱中，S组和C组吸入常规浓度氧气(21%)，E组吸入高浓度氧气(50%～55%)，每天1次，每次2 h，持续7 d。缺血前及缺血后第2、4、6、8天，取大鼠尾静脉血测量血尿素氮(BUN)及血肌酐(Cr)水平；术后第8天测量大鼠体重，并取右侧肾脏行病理检查。苏木精-伊红(HE)染色，以肾小管损伤评分评估肾损伤；免疫组织化学染色，以吸光度( A)值评估血红素氧化酶-1(HO-1)表达水平。BUN和Cr统计学分析采用重复测量方差分析，缺血前3组大鼠BUN及Cr比较采用单因素方差分析；体重、肾小管损伤评分、吸光度组间比较采用单因素方差分析。 结果:缺血前3组大鼠BUN及Cr水平未见明显差异，其中BUN分别为(8.99±0.35)、(8.87±0.28)、(9.07±0.78) mmol/L( F＝0.259， P>0.05)；Cr分别为(63.02±1.67)、(64.28±2.01)、(65.56±3.07) μmol/L( F＝0.195， P>0.05)。术后第2、4、6、8天，S组大鼠BUN[(9.65±0.60)、(9.02±0.67)、(8.18±0.43)、(8.12±0.66) mmol/L]及Cr[(64.25±2.63)、(62.50±2.84)、(60.60±1.83)、(56.40±3.21) μmol/L]无明显变化；C组大鼠BUN[(24.47±2.06)、(52.91±1.38)、(32.69±1.76)、(13.99±1.38) mmol/L]及Cr[(215.16±3.63)、(265.16±5.25)、(208.69±6.18)、(157.02±6.83) μmol/L]与E组大鼠BUN[(15.65±1.19)、(35.64±2.13)、(16.36±0.55)、(10.72±1.37) mmol/L]及Cr[(164.98±2.88)、(214.40±3.55)、(123.45±3.85)、(100.80±3.92) μmol/L]逐渐升高，于第4天达高峰，后逐渐下降；其中，C组与E组大鼠BUN及Cr在上述时间点均显著高于S组，而E组大鼠BUN及Cr在上述时间点均显著低于C组( F＝315.569、2 298.200， P<0.05)。术后第8日，S组大鼠体重为(224.33±5.43) g，C组[(209.50±4.09) g]与E组[(221.00±2.53) g]大鼠体重均较其轻，但E组大鼠体重比C组重( F＝22.447， P<0.05)。镜下观察，S组大鼠肾小管损伤评分为(7.50±2.25)分，C组[(74.33±5.16)分]和E组[(40.83±5.04)分]大鼠肾小管损伤评分均较其高，但E组大鼠比C组大鼠低( F＝385.282， P<0.05)。S组肾脏皮质中HO-1吸光度值为12.17±3.24，C组(20.21±2.45)和E组(31.37±2.87)均较其高，而E组明显高于C组( F＝40.951， P<0.05)。 结论:常压高浓度吸氧能够减轻缺血再灌注肾损伤，其机制可能是通过增加肾脏组织中HO-1的表达。

目的 探究常压高浓度氧(NBO)对新生大鼠脑微血管内皮细胞损伤及核因子E2相关因子2/血红素氧合酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路的影响.方法 取新生SD大鼠45只,采用随机数字表法分为常氧组、NBO组和NBO+Nrf2激活剂组,每组各15只.常氧组大鼠置于普通空气(21％氧气)中饲养,NBO组和NBO+Nrf2激活剂组大鼠置于90％常压氧气饲养,NBO+Nrf2激活剂组每日灌胃5 mg/kg Nrf2激动剂莱菔硫烷.测定脑组织伊文思蓝(EB)含量,采用酶联免疫法检测血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)含量,干湿重法检测脑组织含水量,HE染色和TUNEL染色观察脑组织病理变化,蛋白质印迹法检测海马组织Nrf2/HO-1信号通路蛋白表达,水迷宫检测大鼠认知功能.结果 与常氧组比较,NBO组脑组织EB、VEGF、MMP-9含量及脑组织含水量升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与NBO组比较,NBO+Nrf2激活剂组脑组织EB、VEGF、MMP-9含量及脑组织含水量降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).病理染色结果显示,常氧组大鼠神经细胞形态及结构完整,未见明显病理变化和细胞凋亡;NBO组神经细胞形态及结构不规则,出现明显的水肿和空泡,并伴有大量的凋亡细胞;NBO+Nrf2激活剂组脑组织病理损伤较NBO组明显减轻.与常氧组比较,NBO组脑组织Nrf2、HO-1蛋白相对表达量降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);与NBO组比较,NBO+Nrf2激活剂组Nrf2、HO-1蛋白相对表达量升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与常氧组比较,NBO组第2～4天逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,差异均有统计学意义(P＜0.05);与NBO组比较,NBO+Nrf2激活剂组第2～4天逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增多,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 NBO可诱导新生大鼠脑微血管内皮细胞损伤,导致远期认知功能障碍,可能与下调Nrf2/HO-1信号通路表达有关.

高压氧治疗是把患者送到一个特殊的高压环境下,进行吸高浓度氧的一种治疗方法,可以显著提高患者的意识恢复率,还可促进骨折及创面的愈合,是一种有效的临床治疗方法[1].由于在高压的特殊环境下治疗,使常规护理发生改变.在高压下特殊治疗时,各种引流管、注射管、导管都应同常压下的护理一样,保持常开状态,达到引流通畅.根据玻义耳马略特定律,在温度不变的条件下,加压时,气体体积缩小,减压时,气体体积增大.在压力波动的条件下,如何保持引流通畅,而不发生引流液逆行,是高压氧舱内特殊护理的难题.现将笔者护理体会报道如下.

目的 探究常压高浓度氧治疗(normobaric hyperoxia,NBO)对脑缺血-再灌注大鼠脑内白细胞介素-1β( interleukin 1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α( tumor necrosis factor-α, TNF-α)、核转录因子(nuclear factor-κB,NF-κB)及其抑制蛋白(inhibitor of κB,IκB)表达的影响,探讨NBO治疗对脑缺血后NF-KB介导的炎性反应损伤的作用.方法 将15只健康雄性SD大鼠(280 ～320g)依据数字表法随机分为3组:假手术组(Sham,n=3)、正常氧浓度组(Normoxia,n=6)和NBO(n=6)组,应用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型,缺血90 min再灌注24 h.Sham组和Normoxia组大鼠术后呼吸普通空气,NBO组大鼠术后至再灌注前呼吸100％常压氧气.采用免疫荧光染色和Western blotting的检测方法,研究NBO治疗对脑缺血核心区炎性因子IL-1β、TNF-α和转录调节因子NF-KB及其抑制蛋白IκB表达的影响.结果 免疫荧光结果显示:①与Sham组相比,Normoxia组缺血核心区IL-1β、TNF-α及核移位NF-κB p65阳性细胞数目明显增多(P＜0.05),荧光强度增强;②与Normoxia组相比,NBO组缺血核心区IL-1β、TNF-α及核移位NF-κB p65阳性细胞数目明显减少(P＜0.05),荧光强度减弱.Western blotting结果显示:①与Sham组相比,Normoxia组缺血核心区NF-κB p65显著升高,IκB明显降低(P＜0.05),②与Normoxia组相比,NBO组缺血核心区NF-KB p65水平显著降低,IκB明显升高(P＜0.05).结论 NBO治疗可能通过调节缺血核心区转录调控因子NF-κB的适度活化来抑制脑缺血再灌注炎性损伤,从而实现脑神经保护作用.

目的 利用磁共振扩散加权成像(DWI)评价常压高浓度氧气(NBO)对急性脑缺血卒中大鼠的保护作用及治疗时间窗.方法 成年雄性SD大鼠40只,线栓法制作右侧大脑中动脉闭塞(MCAO)缺血模型,30 min后行头颅MRI检查,然后随机分为四组,每组10只.实验组分别于MCAO模型后45 min、2h和6h吸入NBO 2 h,MCAO模型后12h各组大鼠再行头颅MRI扫描,后断头取脑行HE染色,并与DWI结果进行比较.在磁共振表观扩散系数(ADC)图上测量各组大鼠的相对脑梗死面积及脑梗死病灶的相对ADC (rADC)值.结果 NBO治疗三组大鼠相对脑梗死面积增长率均低于对照组,MCAO后45 min、2h治疗组与对照组间差异有统计学意义(P＜0.01).NBO治疗三组大鼠脑梗死病灶rADC值降低率均小于对照组,MCAO后45 min、2h治疗组与对照组间差异有统计学意义(P＜0.01).四组大鼠组织学HE染色切片均可见梗死灶,MCAO模型后12 h,HE染色切片与在ADC图上所测得相对脑梗死面积均呈正相关(P＜0.01).结论 MRI DWI表明大鼠急性脑缺血后2h内给予NBO治疗具有保护作用.

目的 利用 MR扩散加权成像(DWI)评价常压高浓度氧(NBO)及高压氧(HBO)对急性脑缺血卒中大鼠的保护作用.方法 成年雄性SD大鼠30只,线栓法制作右侧大脑中动脉闭塞(MCAO)缺血模型,30 min后行头颅 MRI 扫描,然后随机分为NBO组、HBO 组和对照组,每组 10 只,MCAO 模型后 45 min NBO 组大鼠吸入常压氧气 2 h,HBO 组大鼠吸入高压氧气 2 h, MCAO 后 12 h各组大鼠再次行头颅 MRI扫描,后取脑行 HE染色,并与DWI梗死病灶进行比较.在 MR表观扩散系数(ADC)图上测量各组大鼠的相对脑梗死面积及脑梗死病灶的相对表观扩散系数(rADC)值.结果 3 组大鼠DWI上右侧大脑中动脉供血区均可见高信号,NBO 组、HBO 组大鼠脑梗死面积增长率均低于对照组(P<0.01),2组间差异无统计学意义(P>0.05);NBO 组、HBO 组脑梗死病灶 rADC值降低率均小于对照组(P<0.01),2组间差异无统计学意义(P>0.05).3 组大鼠组织学 HE染色切片均可见梗死灶,MCAO 模型后 12 h,HE染色切片与 ADC图所测得相对脑梗死面积呈正相关(P<0.01).结论 MRI 显示 NBO、HBO 能降低大鼠脑梗死面积的增长率和 rADC值的降低率,对急性脑缺血卒中大鼠具有神经保护作用.

目的 探讨高浓度氧暴露对新生早产大鼠肺组织中血红素加氧酶-1(HO-1)和谷氨酰-L-半胱氨酸连接酶催化亚单位(GCLC)动态表达的影响.方法 受孕21d大鼠行剖宫产取出早产鼠80只,喂养1d后随机分为空气组和高氧组.空气组早产鼠放置在室内常压空气中饲养,高氧组早产鼠放置在同一室内常压氧箱中(氧浓度85％～95％)饲养,分别于第1、4、7、10、14天,每组取8只大鼠,采集两组早产鼠肺组织标本.采用苏木精-伊红染色法检测两组早产鼠不同时间点肺组织结构的病理变化;采用Western blot技术和RT-qPCR检测两组早产鼠不同时间点肺组织HO-1和GCLC蛋白及mRNA的表达变化.结果 与空气组相比,高氧组早产鼠体重下降显著(P＜0.05).与空气组相比,高氧组早产鼠肺组织病理切片显示肺组织结构紊乱、肺泡间隔增宽、肺泡数目减少和肺泡简单化.高氧组早产鼠肺组织中HO-1 mRNA相对表达量在第7天时低于空气组,在第10、14天时高于空气组(P＜0.05).高氧组早产鼠肺组织中GCLC mRNA表达量在第1、4、7天时低于空气组,在第10天时高于空气组(P＜0.05).与空气组比较,高氧组早产鼠肺组织中HO-1蛋白表达水平在各时间点均升高;除第1天外,GCLC蛋白表达水平在其他各时间点均升高(P＜0.05).结论 高氧暴露导致早产鼠生长发育迟缓、肺发育阻滞.早产鼠肺组织HO-1和GCLC蛋白及mRNA的表达变化可能与高氧暴露导致早产鼠肺损伤发病过程相关.