目的 优化高良姜、大高良姜、红豆蔻3味山姜属中药的挥发油提取工艺,并研究其体外抗氧化能力.方法 基于单因素实验结果,以3味山姜属中药挥发油得率为指标,料液比、浸泡时间、提取时间为考察因素,水蒸气蒸馏法为提取方法,采用Box-Behnken响应面法确定3味山姜属中药挥发油的最优提取条件;采用FRAP法与ABTS自由基清除法对3味山姜属中药挥发油进行体外总抗氧化能力测定.结果 高良姜挥发油最优提取工艺为料液比1∶10.4,浸泡时间31 min,提取时间6.2 h;大高良姜挥发油最优提取工艺为料液比1∶12.4,浸泡时间84 min,提取时间7.3 h;红豆蔻挥发油最优提取工艺为料液比1∶12.3,浸泡时间90 min,提取时间6.5 h.相同浓度下,3味山姜属中药挥发油Fe3+还原能力排序为红豆蔻＞大高良姜≈高良姜,Trolox当量总抗氧化能力排序为红豆蔻≈大高良姜＞高良姜.结论 Box-Behnken响应面法操作简便,优化结果直观,预测准确;所得3味山姜属中药挥发油提取最优工艺方案稳定性高,重复性好;3味山姜属中药挥发油具有较好的体外抗氧化活性.

目的 筛选高良姜乙酸乙酯部位抗幽门螺杆菌胃炎活性成分.方法 联合"敲除策略"与高效液相色谱(HPLC)检测对高良姜乙酸乙酯部位的组分(成分)进行分离,同时得到不含该组分(成分)的阴性样品;构建幽门螺杆菌感染人胃黏膜上皮细胞(GES-1)胃炎模型,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清液中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-8和IL-1β水平.结果 总黄酮组分、不含二苯基庚烷的阴性组分、不含5-羟基-7-(4-羟基-3-甲氧基)苯基-1-苯基-3-庚酮(DHPA)的阴性组分以及高良姜素(给药浓度8 μg·mL-1作用24 h),均能够显著降低幽门螺杆菌胃炎细胞上清液中IL-6水平;总黄酮组分浓度为16 μg·mL-1 时可显著抑制幽门螺杆菌感染GES-1 胃炎细胞IL-6、TNF-α、IL-8和IL-1β的释放.结论 总黄酮组分是高良姜乙酸乙酯部位抗幽门螺杆菌胃炎的主要活性组分,该研究结果为进一步阐释高良姜抗幽门螺杆菌胃炎药效物质基础奠定了基础.

目的:探讨高良姜素(Gal)是否通过调节cGAS/STING信号通路影响骨肉瘤MG63细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡.方法:体外培养人骨肉瘤MG63细胞,分别使用0、5、15、25、50、100、200 μmol/L的Gal培养48 h后,CCK-8法检测Gal对细胞活力的影响.将MG63细胞分为对照组(未处理细胞)、Gal低浓度组(Gal-L组,50 μmol/L Gal处理)、Gal高浓度组(Gal-H组,100 μmol/L Gal处理)和Gal-H+STING抑制剂组(Gal-H+H-151组,100 μmol/L Gal+8 μmol/L H-151处理).采用EdU染色法、划痕愈合实验、Transwell小室法、流式细胞术检测各组细胞增殖活力、迁移、侵袭和凋亡能力,WB法检测各组细胞中cGAS、STING蛋白的表达水平.结果:与对照组比较,Gal-L组、Gal-H组细胞增殖活力、迁移、侵袭能力均显著降低(均P<0.05),细胞凋亡率和cGAS、STING蛋白表达水平均显著升高(均P<0.05);与Gal-H组比较,Gal-H+H-151组细胞增殖活力、迁移和侵袭能力均显著升高(均P<0.05),细胞凋亡率和cGAS、STING蛋白表达水平均显著降低(均P<0.05).结论:Gal可能通过激活cGAS/STING信号通路抑制骨肉瘤MG63细胞增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡.

目的:探讨高良姜素调节趋化因子配体2(CCL2)/趋化因子受体2(CCR2)通路对自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠炎症反应的影响.方法:84只大鼠随机分为对照组、模型组、高良姜素低剂量组、高良姜素中剂量组、高良姜素高剂量组、硒酵母片组、高良姜素高剂量+大鼠CCL2重组蛋白(rCCL2)组,每组12只.除对照组外,其他组大鼠均构建AIT模型,造模成功后给药,1次/d,持续8周.ELISA检测大鼠血清中甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)水平及甲状腺组织TNF-α、IL-6、IL-1β水平;HE染色检测大鼠甲状腺组织病理变化并对甲状腺组织进行炎症评分;qRT-PCR检测大鼠甲状腺组织CCL2、CCR2 mRNA表达;Western blot检测大鼠甲状腺组织CCL2、CCR2蛋白表达.结果:与对照组比较,模型组大鼠甲状腺组织病理损伤严重,炎症评分、TGAb、TPOAb、FT4、FT3、TNF-α、IL-6、IL-1β水平、CCL2、CCR2 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,高良姜素低剂量组、高良姜素中剂量组、高良姜素高剂量组、硒酵母片组大鼠甲状腺组织病理损伤减轻,炎症评分、TGAb、TPOAb、FT4、FT3、TNF-α、IL-6、IL-1β水平、CCL2、CCR2 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05);与高良姜素高剂量组比较,高良姜素高剂量+rCCL2组大鼠甲状腺组织病理损伤加剧,炎症评分、TGAb、TPOAb、FT4、FT3、TNF-α、IL-6、IL-1β水平、CCL2、CCR2 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05).结论:高良姜素可能通过抑制CCL2/CCR2信号通路抑制AIT大鼠炎症反应.

目的:建立高良姜-广藿香配伍溶液的质量标准.方法:针对高良姜-广藿香配伍溶液,高良姜素、广藿香酮2种指标性成分的薄层鉴别方法分别为:薄层板为硅胶G薄层板和高效硅胶G薄层板,展开剂为石油醚-乙酸乙酯(5∶3)、(5∶1);高良姜素、广藿香酮2种指标性成分高效液相色谱含量检测方法为:色谱柱为C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)、流动相为甲醇(A)-0.2%磷酸(B)、检测波长:310 nm、梯度洗脱.结果:对于高良姜-广藿香配伍溶液中高良姜素、广藿香酮2种指标性成分,薄层鉴别主斑点清晰、阴性对照无干扰;2种指标性成分的浓度在10.00～1 000.00 μg/mL、10.00～640.00 μg/mL范围内与峰面积线性关系系数分别为R2=0.999 0、R2=0.999 9;精密度RSD分别为 0.63%、0.56%,稳定性RSD分别为 1.82%、0.24%,重复性RSD分别为 1.30%、0.89%;平均回收率分别为 103.19%、100.87%(RSD为别为 0.93%、0.4%,n=9);该2种指标性成分的含量应分别不低于233.71 μg/mL、61.48 μg/mL.结论:建立的方法可用于高良姜-广藿香配伍溶液的质量控制,该方法精密度、准确度、稳定性及重复性均符合要求.

目的 研究高良姜素通过调节单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/趋化因子受体-2(CCR2)信号通路对肺癌细胞的恶性生物学行为产生的影响.方法 将人肺癌细胞系A549 分为ctrl组、低浓度高良姜素组(5 μmol/L)、高浓度高良姜素组(100 μmol/L)、吉非替尼组(10 μmol/L)、高浓度高良姜素+MCP-1组(100 μmol/L高良姜素+ 75 ng/mL MCP-1).CCK-8试剂盒检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;细胞划痕实验检测细胞迁移;transwell检测细胞侵袭能力;western blot检测MCP-1、CCR2、凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)、细胞增殖核抗原(Ki67)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白表达.结果 与ctrl组比较,低浓度高良姜素组、高浓度高良姜素组、吉非替尼组肺癌细胞A549 的细胞存活率、细胞迁移愈合率、细胞侵袭数、MCP-1、CCR2、Ki67、MMP-2 蛋白表达降低,而细胞凋亡率、Caspase-3 含量升高(P<0.05);与高浓度高良姜素组比较,高浓度高良姜素+MCP-1组A549 细胞存活率、细胞迁移愈合率、细胞侵袭数、MCP-1、CCR2、Ki67、MMP-2蛋白表达升高,而细胞凋亡率、Caspase-3含量降低(P<0.05).结论 高良姜素可能通过抑制MCP-1/CCR2 信号通路进而抑制肺癌A549 细胞恶性生物学行为,促进其凋亡.

[目的]总结分析黄酮类化合物防治糖尿病及其并发症的研究进展.[方法]检索2013年1月至2022年12月Web of Science、PubMed、中国知网、维普、万方等数据库中黄酮类化合物及糖尿病、糖尿病并发症的相关研究报道,归纳总结出黄酮类化合物在糖尿病及糖尿病并发症中的作用.[结果]研究证实,黄酮类化合物(中药黄酮提取物、柚皮素、高良姜素、山柰酚等)能有效防治糖尿病及由糖尿病引起的视网膜病变、肾病、心肌病、骨质疏松及糖尿病足.整体调节与综合治疗是黄酮类成分的特色,其具有抑制炎症、减少氧化应激、修复线粒体功能、降血糖、改善胰岛素抵抗的作用,并能够通过多条信号通路影响相关因子的表达,从而治疗糖尿病及其并发症.[结论]多途径、多层次阐述中药黄酮类化合物防治糖尿病及其并发症的药效物质基础、作用机制及构效关系,是开发黄酮类药物亟待解决的关键问题及未来研究的重要方向.

目的:探讨高良姜素(Galangin)对异丙肾上腺素(ISO)诱导心脏纤维化的作用机制.方法:将 30只 C57BL/6小鼠随机分为正常组、ISO组、高良姜素低剂量组[25 mg/(kg·d)]、高良姜素中剂量组[50 mg/(kg·d)]、高良姜素高剂量组[100 mg/(kg·d)].处理结束后行心脏超声评估心功能[左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)];测量小鼠体质量(BW)、心脏重量(HW)、胫骨长度(TL),计算心脏重量与体质量比值(HW/BW)、心脏重量与胫骨长度比值(HW/TL),评估心肌肥厚情况.天狼星红染色评价心脏纤维化程度;实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测炎症标志物白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和纤维化标志物胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)、胶原蛋白Ⅲ(CollagenⅢ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA水平;试剂盒检测心脏组织氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量.结果:与正常组比较,ISO 组小鼠 HW/BW、HW/TL、LVEDD 及 LVESD 升高,LVEF 和 LVFS 降低,IL-6、IL-1β、TNF-α、CollagenⅠ、CollagenⅢ和TGF-β1 mRNA表达水平升高,心脏SOD和CAT活性降低,MDA含量升高,心肌细胞横截面积增大,心脏纤维化面积增加(P<0.05).与 ISO组比较,高良姜素高剂量组心脏纤维化面积减小,Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、IL-6 mRNA表达水平降低,SOD活性升高,MDA含量降低,差异有统计学意义(P<0.05).高良姜素中剂量组 TGF-β1 低于 ISO组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:高良姜素可减轻 ISO诱导的心脏纤维化,其机制可能与抑制炎症、氧化应激有关.

目的:探讨高良姜素对利血平诱导小鼠抑郁模型的作用及机制.方法:采用利血平诱导的急性抑郁小鼠模型,取60只小鼠随机分为正常组、模型组、氟西汀组、高良姜素不同剂量组和3-甲基腺嘌呤组,10只/组.强迫游泳、悬尾、糖水偏好及旷场实验评价其抗抑郁作用;Elisa试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),5-羟色胺(5-HT)水平;免疫荧光和Western blot法检测自噬标志物Beclin-1、P62和LC3B的表达.结果:与正常组相比较,模型组小鼠悬停、浮停时间显著延长,水平活动和站立次数显著减少,糖水偏好度降低;脑组织中SOD、GSH-Px和5-HT和P62水平明显下降,而MDA、Beclin-1和LC3B水平明显升高(P＜0.05或P＜0.01).与模型组相比较,高良姜素各剂量组均能明显减少小鼠悬停、浮停时间,提高小鼠自主活动能力,逆转5-HT的减少,增加SOD和GSH-Px水平、减少MDA水平及调控自噬因子Beclin-1、P62和LC3B的表达(P＜0.05或P＜0.01).结论:高良姜素可能通过调控Beclin-1、P62和LC3B的表达改善抑郁症模型小鼠氧化应激,提高小鼠自主活动能力,增加5-HT水平,从而显著改善小鼠的抑郁症状.

目的 采用网络药理学、分子对接和实验验证研究高良姜-香附药对(简称"良附")治疗原发性痛经(primary dysmenorrhea,PD)的作用机制.方法 通过TCSMP及文献检索,获得高良姜和香附的活性成分,由TCSMP与Swiss Target Prediction平台获得相应成分及靶点;以"primary dysmenorrhea""dysmenorrhea"为检索词,经GeneCard、DrugBank、DisGenet、TTD和OMIM数据库获取疾病靶点.利用STRING数据库进行PPI网络分析,由Metascape平台进行KEGG和GO富集分析,取高良姜-香附药对交集靶点、活性成分和相关通路构建"成分-靶点-通路"网络图.选取"成分-靶点-通路"网络和PPI网络的核心成分与靶点通过AutoDock进行对接.采用苯甲酸雌二醇和缩宫素联合制备小鼠原发性痛经模型,观察扭体反应;HE染色观察小鼠子宫病理变化;ELISA法检测PD小鼠血清中前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)和β-内啡肽(β-EP)的水平,Western blot法和RT-qPCR法验证蛋白和mRNA的表达.结果 良附共获得29种主要活性成分,核心靶点为STAT3、PIK3CA、AKT1、ESR1、TP53、PTGS2等;分子对接结果显示,关键成分与核心靶点都有较强的结合能力.动物实验结果表明,良附组可缓解PD小鼠子宫组织水肿、充血和炎症,降低小鼠血清中PGF2α的水平,升高PGE2和β-EP的水平,抑制COX-2、p38、PI3K、和p-AKT的蛋白表达,mRNA的表达与蛋白表达趋势一致.结论 良附能够缓解PD引起的疼痛,其机制可能是通过PI3K/AKT、MAPK和PTGS2等多途径发挥药效.