含鹅膏肽类毒素致命鹅膏中毒可导致患者肝功能障碍，严重者出现死亡，经酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测鹅膏肽类毒素有助于早期临床确诊。本文三例患者经ELISA鉴定为含α-鹅膏毒肽的致命鹅膏中毒，中毒患者以消化系统损害为首发症状，后期出现肝功能损害，1例患者放弃治疗后死亡，予以吸附毒素、导泻、补液促进毒物代谢、保肝等支持治疗后，2例患者好转出院。

目的 探讨毒物检测技术在毒蕈中毒临床诊治中的应用价值,分析江苏省确诊毒蕈中毒患者的临床特征.方法 本研究是多中心回顾性队列研究.共收集2020年6月至2023年7月入组参与队列研究的江苏省内10家医院行毒物检测鉴定的32例毒蕈中毒患者的毒检结果、暴露信息及临床特征,分析毒检阳性即检出毒素患者的临床特征,对毒检采样情况与检测结果进行统计分析.结果 本研究共纳入32例进行毒检鉴定的临床诊断毒蕈中毒或可疑中毒患者.收集32例血液样本、31例尿液样本、22例蘑菇样本及1例呕吐物样本.其中蘑菇样本的毒素检测阳性结果18例,占比59.38％,检出α-鹅膏毒肽等8类毒素;1例呕吐物样本检出烟碱;所有患者血液、尿液样本中均未检出常见毒素.结论 通过毒物检测鉴定常见毒蕈毒素种类,能够辅助毒蕈中毒诊断,有助于更迅速、精准的明确蘑菇分型及其所含毒素类别,便于指导临床救治.

致命鹅膏最早发现于我国广东,是我国蘑菇中毒事件中最常见的剧毒蘑菇之一,因含有鹅膏肽类毒素,可以造成急性肝损害型中毒,引起相关食物中毒事件已有73起.本研究系统分析了致命鹅膏的生物学特征、毒素检测、毒素基因组学、中毒事件流行病学及毒理学等方面的研究历程和最新进展,以期为该种剧毒蘑菇中毒的有效防控和精准救治提供科学依据.

目的 建立超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-mass spectrometer detector quadrupole time of flight,UPLC-Q-TOF)定性定量检测毒蘑菇中鹅膏肽类毒素的分析方法.方法 样品加入甲醇后均质,超声离心提取,待测液采用ACQUITY UPLC? HSS T3 1.8 μm色谱柱(2.1×50 mm)进行分离,以0.1％氨水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱 0 min,2％B;0～0.5 min,2％B;0.5～6.0 min,95％B;6.0～7.0 min,95％B;7.0～8.0 min,2％B,流速0.3 mL/min,柱温40℃,进样量2.0 μL.采用超高效液相色谱四级杆飞行时间质谱仪对毒蘑菇进行分离、鉴定鹅膏菌中的毒素成分.结果 毒蘑菇样品中1、2、3、5、6、7、8号样品均未检出鹅膏肽类毒素;4号样品共检出6种组分,经鉴定为已知的鹅膏肽类毒素,分别是α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽和二羟鹅膏毒肽酰胺.进一步建立鹅膏肽类毒素快速定量方法,5种鹅膏肽类毒素在25～1 000μg/L范围内呈现良好的线性关系,相关系数为0.991 2～0.998 9,平均加标回收率为89.5％～110.5％,相对标准偏差为3.80％～7.80％.其中α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽的含量分别是(19.701±0.175)、(0.098±0.014)、(1.548±0.001)、(0.331±0.002)及(0.108± 0.060)mg/kg,二羟鹅膏毒肽酰胺与羧基二羟鬼笔毒肽相对含量为0.754 mg/kg.结论 该方法用于测定毒蘑菇中多种鹅膏肽类毒素,方法简单、快速、可靠,为进食毒蘑菇突发中毒患者的快速临床诊断和及时治疗提供了有效的科学依据.

目的 建立血清和尿液中α-鹅膏毒肽β-鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽毒素的超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱测定方法.方法 血清样品先用乙腈沉淀蛋白,再用含0.1％ TFA的二氯甲烷提取,残渣用含2mmol/L乙酸铵的甲醇-水(30∶70)溶解;尿液样品直接过0.22μm微孔滤膜;样品溶液经HSS T3色谱柱分离后用Q-TOF MS进行测定.结果 毒素准分子离子准确质量数及其同位素特征、色谱峰保留时间可作为毒素定性鉴定的依据,血清和尿液样品的检出限分别为10 ng/ml和5ng/ml,定量限为20 ng/ml和10 ng/ml,加标回收率分别为77.4％～ 95.6％和73.8％～103.8％,相对标准偏差在3.0％～18.0％和1.2％ ～ 25.4％之间.应用该方法测定了大鼠染毒尿液中鹅膏肽类毒素.结论 本方法简便、准确、可靠,适用于中毒事件生物样品中4种鹅膏肽类毒素的检测和确证分析.

目的 建立血清和尿液中4种鹅膏肽类毒素的超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱测定方法,考察和分析4种鹅膏肽类毒素在大鼠体内的代谢特征,为中毒样品的采集提供科学依据.方法 血清样品用乙腈+0.1％TFA二氯甲烷提取,残渣用流动相溶解;尿液样品则直接过0.22μm微孔滤膜;样品溶液经HSS T3色谱柱分离后用ESI-QTOF MS进行测定;选取SD健康大白鼠分别用4种鹅膏肽类毒素染毒,按需收集不同时间段的尿液和血液进行分析.结果 血清和尿液样品的检出限分别为10 ng/ml和5 ng/ml,加标回收率分别为77.4％～95.6％和73.8％～103.8％,相对标准偏差在3.0％～18.0％和1.2％～25.4％.大鼠染毒尿液中均检出4种毒素,鹅膏毒肽的含量明显比鬼笔毒肽的含量高,大鼠染毒血清中仅14％检测到毒素的存在.结论 检测方法适用于中毒事件生物样品中4种鹅膏肽类毒素的检测和确证分析,采集中毒8 h内的尿液对检出鹅膏毒肽的几率最大.

裂皮鹅膏(Amanita rimosa)是中国特有的剧毒蘑菇资源,其子实体含有多种鹅膏肽类毒素,常引起严重的中毒死亡事件.剧毒鹅膏菌的毒肽基因家族可编码多种毒环肽及丰富的未知功能肽类,目前裂皮鹅膏的毒肽基因家族尚未开展系统的研究.本研究以裂皮鹅膏新鲜子实体为材料提取RNA,构建cDNA文库.利用Illumina HiSeq 2000测序平台进行转录组测序,采用Trinity软件组装拼接,首次获得了裂皮鹅膏的转录组数据,转录组测序共获得19 598条Unigenes,通过Nr、KEGG、SwissPort及KOG数据库比对获得Unigene的功能注释.基于转录组序列和PCR验证获取了裂皮鹅膏的毒肽及相关肽类不同编码基因24条,分别编码α-amanitin、β-amanitin和Phallacidin等3种毒肽,以及编码21种未知功能肽类,其中16种为首次预测的新肽类.并对裂皮鹅膏毒肽基因家族编码的前体肽进行了系统聚类分析,明确了其系统发育位置.研究结果表明裂皮鹅膏具有丰富的毒肽及相关肽类的编码基因,为鹅膏肽类毒素的基因表达和新肽类资源的开发利用提供了数据.

目的 研究裂皮鹅膏中的毒素含量分布并观察小鼠毒作用靶器官的病理改变.方法 采集引起食物中毒的蘑菇,经鉴定为裂皮鹅膏;超高效液相色谱-串联质谱法测定其鹅膏毒肽和鬼笔毒肽的毒素含量;给KM小鼠一次性腹腔注射裂皮鹅膏2g/kg(干粉),注射体积10 mL/kg,观察3h后处死小鼠,取心、肝、脾、肺、肾、肠进行病理检查.结果 裂皮鹅膏干粉中的肽类毒素总量为2243 μg/g,其中总鹅膏毒肽为1224 μg/g,o-、p-和γ-鹅膏毒肽含量分别为944、268和12 pg/g,总鬼笔毒肽为1019μg/g,二羟基鬼笔毒肽、羧基三羟基鬼笔毒肽和羧基二羟基鬼笔毒肽含量分别为989、30 μg/g和未检出.染毒小鼠发生肝、肾细胞坏死并伴有弥漫性出血.结论 裂皮鹅膏毒素为剧毒类.裂皮鹅膏对小鼠肝、肾造成严重损害,与人群流行病学报告相符.

鹅膏菌在全世界分布广泛,大部分为剧毒菌种,且蘑菇中毒事件多由鹅膏菌剧毒菌种引起.鹅膏菌中毒主要由鹅膏肽类毒素导致,所含的α-鹅膏毒肽是其中最重要的一种,为双环八肽结构,化学性质稳定,可致严重肝损伤.由于缺乏特效解毒药物,临床上在诊治鹅膏菌中毒方面面临很多困难,因此鹅膏菌中毒患者预后较差.α-鹅膏毒肽导致严重肝损伤的机制主要是特异性抑制RNA聚合酶Ⅱ,并导致线粒体功能障碍、细胞凋亡、氧化应激等.根据中毒特点,近年来在治疗鹅膏菌中毒方面有了一定的突破.本文就鹅膏菌中毒导致急性肝损伤的机制及治疗进展进行综述.