目的:探讨烟曲霉暴露对卵清白蛋白(OVA)致敏大鼠滤泡性辅助(Tfh)细胞分化的作用。方法:本研究为实验研究。健康雄性Wistar大鼠48只，采用随机数字表法分为2组，OVA致敏加磷酸盐缓冲液(PBS)吸入组(OVA/PBS)、OVA致敏加烟曲霉孢子(AF)吸入组(OVA/AF)，每组24只。获取24、40、56 d处死大鼠血清、肺组织、肺气管旁淋巴结组织、肺泡灌洗液、大鼠脾脏等，分析脾和肺气管旁淋巴结中Tfh细胞含量、肺泡灌洗液中细胞因子浓度测定和IgE的检测、观察肺组织HE染色和PAS染色，以及用Western blot检测Blimp-1和Bcl-6蛋白表达情况。结果:随时间延长，OVA/AF组血嗜酸粒细胞计数及血清IgE水平均呈逐渐升高趋势，各时间点比较差异均有统计学意义( F值分别为4.91、5.53， P值均<0.05)；OVA/PBS组则均呈逐渐下降趋势，但各时间点比较差异均无统计学意义( F值分别为1.98、2.16， P值均>0.05)。2组大鼠肺组织HE染色和PAS染色观察发现，基底膜不规则增厚，可见黏膜下水肿、管腔内渗出物、以及炎症细胞的浸润。随时间延长，OVA/AF组PAS染色阳性杯状细胞比例呈升高趋势，各时间点比较差异有统计学意义( F＝8.062， P<0.05)；OVA/PBS组各时间点比较差异无统计学意义( F＝3.132， P>0.05)。随时间延长，OVA/AF组脾脏、肺及气管旁淋巴结均浆中Tfh细胞占T淋巴细胞总数比例均呈升高趋势，各时间点比较差异均有统计学意义( F值分别为6.71、4.98， P值均<0.05)；OVA/PBS组则均呈下降趋势，但各时间点比较差异均无统计学意义( F值分别为2.02、2.97， P值均>0.05)。OVA/AF组肺和气管旁淋巴结均浆中Tfh细胞占T淋巴细胞总数比例与血清IgE有相关性( r＝0.960 1)。OVA/AF组各时间点Blimp-1和Bcl-6蛋白表达比较差异均有统计学意义( P值均<0.05)；OVA/PBS组各时间点Blimp-1和Bcl-6蛋白表达比较差异均无统计学意义( P值均>0.05)。 结论:烟曲霉暴露可能对OVA致敏大鼠Tfh细胞有分化促进作用。

B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(B lymphocyte-induced maturation protein 1，Blimp-1)是一种调节B淋巴细胞和T淋巴细胞功能的重要转录分子。在抗原刺激B淋巴细胞分化为浆细胞分泌抗体的过程中，可下调维持B细胞表型和功能的重要基因的表达，同时上调维持浆细胞表型及特征的关键基因的表达，在浆细胞分化过程中起关键作用。CD4 +T细胞中非滤泡性T细胞(Follicular T cells，Tfh)高表达Blimp-1；生理水平的Blimp-1会严重损害CD4 +T细胞向Tfh细胞分化的能力，还可通过调控淋巴细胞而调节免疫相关疾病，有望成为治疗免疫相关疾病的新靶点。

目的:探讨B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(B lymphocyte induced maturation protein 1，Blimp-1)在原发性干燥综合征(pSS)外周血CD4 ＋T和CD19 ＋B细胞及唇腺组织的表达及其与临床指标的相关性。 方法:采用RT-PCR技术检测外周血CD4 ＋T和CD19 ＋B细胞及唇腺中PRDM1 mRNA表达水平。免疫组化观察Blimp-1蛋白在唇腺组织中的表达。评估PRDM1 mRNA与临床指标之间的相关性。 结果:pSS组CD4 ＋T和CD19 ＋B细胞中PRDM1 mRNA表达水平高于健康对照(healthy control，HC)组( P<0.01)。根据欧洲抗风湿联盟干燥综合征疾病活动指数(European League Against Rheumatism Sj?gren′s Syndrome Disease Activity Index，ESSDAI)将pSS患者分为活动组(ESSDAI≥5)和非活动组(ESSDAI<5)，活动组CD4 ＋T和CD19 ＋B细胞中PRDM1 mRNA表达水平高于非活动组( P<0.05)。pSS患者唇腺腺泡、导管周围及生发中心可见Blimp-1阳性聚集，唇腺PRDM1 mRNA表达水平与淋巴细胞浸润度呈正相关( r＝0.781， P<0.001)。 结论:Blimp-1高表达于pSS患者，可能影响pSS疾病活动，在pSS治疗中也具有一定的临床意义。

目的:分析人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)感染、结核分枝杆菌( Mycobacterium tuberculosis，MTB)感染，以及共感染患者的CD8 +T细胞耗竭状态。 方法:纳入2019年8月至2020年1月无锡市第五人民医院和太仓市第一人民医院所收治的HIV感染和(或)MTB感染患者87例，其中HIV感染18例，活动性结核(active tuberculosis, ATB)34例，潜伏性结核(latent tuberculosis, LTB)19例，HIV感染合并ATB 7例，HIV感染合并LTB 9例，同时纳入11名健康对照者。收集所有受试者的外周血，进行全血细胞表面染色和细胞内染色，使用流式细胞术检测CD8 +T细胞上的活化分子CD62配体、CD44、CD127，转录因子脱中胚蛋白(eomesodermin, EOMES)、T细胞因子1(T cell factor 1, TCF-1)、T盒转录因子(T-box expressed in T cells, T-bet)、B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(B lymphocyte-induced maturation protein 1, Blimp-1)，抑制性受体程序性死亡蛋白-1(programmed death-1, PD-1)、T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(T-cell immunoglobulin and mucin domain 3, Tim-3)的表达情况。统计学分析采用曼-惠特尼 U检验。 结果:HIV感染组活化分子CD62配体、CD44的平均荧光强度(mean fluorescence intensity，MFI)低于健康对照组，而抑制性受体Tim-3则高于健康对照组，差异均有统计学意义( U＝31.00、1.00、0.00，均 P<0.010)；HIV感染合并LTB组CD62配体、CD44的MFI低于LTB组，而PD-1、Tim-3则高于LTB组，差异均有统计学意义( U＝4.00、26.00、6.00、3.00，均 P<0.010)；HIV感染合并ATB组CD62配体、CD44、CD127的MFI低于ATB组，而PD-1、Tim-3则高于ATB组，差异均有统计学意义( U＝9.00、40.00、45.50、28.00、7.00，均 P<0.010)。HIV感染组的终末效应CD8 +T细胞表达水平高于健康对照组，而中枢记忆CD8 +T细胞则低于健康对照组，差异均有统计学意义( U＝15.00、33.00，均 P<0.010)；HIV感染合并LTB组的终末效应CD8 +T细胞表达水平高于LTB组，而中枢记忆CD8 +T细胞低于LTB组，差异均有统计学意义( U＝7.00、20.00，均 P<0.010)；HIV感染合并ATB组的终末效应CD8 +T细胞高于ATB组，而中枢记忆CD8 +T细胞低于ATB组，差异均有统计学意义(均 U＝7.00， P<0.001)。HIV感染组PD-1 +Tim-3 +T细胞的表达水平高于健康对照组，HIV感染合并LTB组PD-1 +Tim-3 +T细胞的表达水平高于LTB组，HIV感染合并ATB组PD-1 +Tim-3 +T细胞的表达水平高于ATB组，差异均有统计学意义( U＝21.00、6.00、5.50，均 P<0.001)。HIV感染合并LTB组的转录因子EOMES和TCF-1的MFI低于HIV感染组，而T-bet的MFI则高于HIV感染组，差异均有统计学意义( U＝3.00、4.00、9.00，均 P<0.001)；HIV感染合并ATB组的转录因子EOMES和TCF-1的MFI低于HIV感染组，而T-bet和Blimp-1的MFI则高于HIV感染组，差异均有统计学意义( U＝11.00、14.00、7.00、22.00，均 P<0.050)。 结论:合并HIV感染的MTB感染患者其免疫功能更为低下，CD8 +T细胞耗竭程度更高。此外，合并LTB和ATB感染的HIV感染者较单纯HIV感染者的CD8 +T细胞耗竭程度更高。

调节性T细胞(Treg)是机体维持免疫耐受不可或缺的T细胞亚群。Treg数量和功能的异常可以导致机体发生自身免疫反应，从而对自身稳态产生破坏。活化T细胞核因子(NFAT)、B淋巴细胞诱导成熟蛋白(BLIMP)-1、干扰素调节因子(IRF)4等转录因子在T细胞的生长、发育中，发挥重要调控作用。NFAT、BLIMP-1、IRF4对Treg的发育和功能亦具有重要作用。笔者拟就NFAT、BLIMP-1、IRF4对Treg的调控及其可能的作用机制的最新研究进展进行阐述。

创伤、感染、肿瘤或全身性疾病等因素引起的节段性骨缺损和骨折不愈合具有成骨范围局限、骨骼愈合周期长等特点.骨组织再生代谢调节因子可加速骨组织修复和高效重建骨缺损区.沉默信息调节因子6(SIRT6)作为一种去乙酰化酶和核苷酸转移酶,广泛参与成骨细胞和破骨细胞等骨细胞的分化、凋亡、代谢和炎症反应的调节,是骨代谢调节的重要因子.SIRT6通过与B淋巴细胞诱导成熟蛋白1形成复合体,并下调核因子κB通路表达,促进雌激素受体α-Fas配体轴信号表达,以抑制破骨细胞生成和成熟分化,从而阻碍骨吸收,导致骨组织骨量增加.另外,SIRT6能通过激活Akt-mTOR途径调节骨髓间充质干细胞自噬水平和成骨能力,并抑制成骨细胞内糖酵解和活性氧生成,通过CREB/CCN1/COX2途径和骨形态发生蛋白信号通路促进成骨细胞分化增加骨的形成,加速骨组织骨再生修复.本文综述了SIRT6参与骨再生病理生理机制的研究进展,揭示其可能作为骨组织修复潜在治疗靶点的意义.

目的 研究再生障碍性贫血患者外周血B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1(Blimp-1)表达与调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)失衡及预后的关系.方法 选择2020年3月至2023年3月陕西中医药大学附属医院收治的140例再生障碍性贫血患者作为观察组,以同期体检的110名健康志愿者作为对照组.检测两组外周血Blimp-1表达水平、Treg及Th17细胞数目,血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)水平;评价观察组患者病情并分为重型患者和轻型患者,比较两组间外周血Blimp-1、Treg、Th17 及血清IL-6、IL-10、IL-17 的差异,采用Pearson检验分析外周血Blimp-1与Treg、Th17、IL-6、IL-10、IL-17的相关性;随访预后并计算预后不良发生率,采用K-M曲线比较两组间预后不良发生率的差异.结果 观察组外周血Blimp-1表达水平、Treg数目、Treg/Th17比值以及血清IL-10 水平低于对照组,Th17 数目、血清IL-6 及IL-17 水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组外周血Blimp-1表达水平与Treg数目、Treg/Th17比值、IL-10水平呈正相关(r=0.351、0.376、0.328,P<0.05),与Th17数目及IL-6、IL-17水平呈负相关(r=-0.338、-0.409,P<0.05);观察组中重型患者的外周血Blimp-1表达水平、Treg数目、Treg/Th17比值以及血清IL-10水平低于轻型患者,Th17数目、血清IL-6及IL-17水平高于轻型患者,差异有统计学意义(P<0.05);观察组中Blimp-1高表达患者的预后不良发生率低于Blimp-1低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05).结论 外周血Blimp-1表达降低可能导致再生障碍性贫血患者Treg/Th17失衡、病情加重及预后不良.

目的 探讨宿主感染疟原虫后肺脏CD4+T细胞中程序性细胞死亡1蛋白(PD-1)的表达情况及功能.方法 将5～6周雌性C57BU6小鼠随机分为正常组和感染组,每组6只.采用流式细胞术检测疟原虫感染前后小鼠肺脏CD4+T细胞中PD-1的表达情况,并用流式检测肺脏PD-1+CD4+T细胞表型和细胞因子的分泌能力,之后采用qRT-PCR技术检测可能参与PD-1表达的相关转录因子B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(Blimp-1)、活化T细胞核因子(NFATc1)、信号转导及转录激活因子(STAT)3、STAT4、干扰素刺激基因因子3(ISGF3)、激活蛋白1(AP-1)、缺口基因Notch、叉头转录因子1(FoxO1)、核因子-κB(NF-κB)的表达情况.结果 疟原虫感染后,小鼠肺脏表达PD-1的CD4+T细胞的比例显著升高,由原来的11.66％升高到58.60％,差异有统计学意义(t=7.892,P＜0.01).感染组小鼠肺脏中PD-1+CD4+T细胞表达CD69分子高于PD-1CD4+T细胞,差异有统计学意义(t=9.856,P＜0.01).在感染组,与PD-1-CD4+T细胞相比,更多的PD-1+CD4+T细胞分泌IFN-γ、白细胞介素(IL)-2和IL-10,差异均有统计学意义(t=7.301、4.876、7.607,P均＜0.05).qRT-PCR检测结果发现与正常组相比,感染组脾脏中多种转录因子的表达量均改变,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 疟原虫感染后,小鼠肺脏中表达PD-1的CD4+T细胞参与了免疫应答,并通过分泌细胞因子,发挥免疫调节作用.

目的 探讨滤泡辅助性T细胞(Tfh)和滤泡调节性T细胞(Tfr)在急性髓系白血病(AML)患者外周血中的表达及意义.方法 选取60例初诊AML患者及40例健康体检者,流式细胞仪检测Tfh和Tfr细胞比例,ELISA检测血清细胞因子白介素-10(IL-10)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及白介素-21(IL-21)表达水平;WB检测Tfh和Tfr细胞转录因子B细胞淋巴瘤6(BCL-6)和B淋巴细胞诱导的成熟蛋白1(Blimp-1)的表达水平;比较两组细胞比例、转录因子及相关细胞因子的表达差异;分析AML患者Tfr、Tfh/Tfr比值和细胞因子IL-10、TGF-β1水平与AML患者不良预后之间的关联.结果 与对照组相比,AML组Tfr细胞比例、血清IL-10和TGF-β1水平增高,Tfh/Tfr比值和Blimp-1水平降低(P均＜0.05),而Tfh细胞比例、BCL-6和血清IL-21水平略增高,无明显统计学差异(P＞0.05).与预后中等组和预后良好组相比,预后不良组Tfr细胞比例、IL-10和TGF-β1明显增高,Tfh/Tfr比值明显降低(P均＜0.05);与预后良好组相比,预后中等组Tfr细胞比例、IL-10和TGF-β1水平升高(P均＜0.05),Tfh/Tfr比值明显降低(P＜0.05).Pearson相关性分析结果显示,Tfr细胞比例与血清IL-10、TGF-β1水平呈正相关(r=0.706、0.619,P均＜0.000 1),Tfh/Tfr比值与IL-10、TGF-β1水平呈负相关(r=-0.454,-0.446,P均＜0.001).结论 Tfr细胞及其相关细胞因子在AML患者中异常高表达,存在Tfh/Tfr比值失衡,且该现象在预后不良组AML中更明显.

研究广叶绣球菌多糖(polysaccharides,SLPs)对小鼠CD8+T细胞活化、增殖分化以及效应阶段的影响,探索广叶绣球菌多糖对CD8+T细胞的免疫应答调控机制.通过腹腔注射环磷酰胺溶液(80 mg/kg)构建免疫低下小鼠模型,灌胃广叶绣球菌多糖(低、中和高剂量分别为 100、200 和400 mg/kg),连续饲养20 d后处死,取脾脏和胸腺.血细胞分析仪测定血常规;MTT检测脾T淋巴细胞的扩增能力;流式细胞术分析脾脏CD8+T细胞表面CD28、CTLA-4 和PD1 以及树突状细胞表面MHCⅠ、CD80 和PD-L1 的表达量;ELISA测定外周血中TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-10、穿孔素及颗粒酶 B 的含量;RT-PCR 测定脾脏 Psmb9、Psmd9、TAP1、TAP2、IFN-γ、IL-2、JAK1、JAK2、STAT1、STAT3、SOCS-3 和 Blimp-1 的 mRNA 表达量;Western blot 测定 pJAK2/JAK2、pSTAT3/STAT3 和 Blimp-1 的蛋白表达量.试验表明广叶绣球菌多糖高剂量组脾脏指数显著升高,外周血中红细胞、白细胞、淋巴细胞、单核细胞和血小板的含量显著升高(P＜0.05 或P＜0.01);多糖中、高剂量组脾 T 淋巴细胞的扩增能力显著增强(P＜0.05);中、高剂量组 CD8+T 细胞含量显著降低,CD8+T细胞表面PD-1分子含量显著降低,树突状细胞表面PD-L1分子含量显著降低、MHCⅠ细胞含量显著升高(P＜0.05或P＜0.01);多糖高剂量组TNF-α、IFN-γ、IL-2、穿孔素和颗粒酶B的含量显著升高(P＜0.05 或 P＜0.01),IL-10 的含量显著降低(P＜0.05);中、高剂量组 Psmb9、Pmsd9、TAP1、TAP2和Blimp-1的mRNA含量显著升高(P＜0.05或P＜0.01),JAK1、JAK2、STAT1和STAT3的mRNA和蛋白表达量显著降低(P＜0.05或P＜0.01).多糖中高剂量组Blimp-1蛋白表达量显著升高(P＜0.05),多糖组与阳性对照组趋势一致.因此,认为广叶绣球菌多糖能够调节MHCⅠ类抗原加工呈递分子,并通过JAK2/STAT3信号通路促进CD8+T细胞的活化、增殖分化和效应杀伤过程,从而调控CD8+T细胞的免疫应答,起到改善小鼠免疫低下的作用.