目的:探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9（CARD9）在C57BL/6小鼠激素抵抗型哮喘气道损伤和炎症中的作用。方法:采用随机数字表法，将6~8周龄无特定病原体（SPF）级C57BL/6雌性小鼠分为A组（对照组）、B组（模型组）和C组（地塞米松治疗组），每组6只，B组及C组利用卵清白蛋白（OVA）/完全弗氏佐剂（CFA）腹部皮下注射，OVA雾化激发构建小鼠模型，C组每次致敏前30 min给予地塞米松，末次激发24 h后检测其病理变化及支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数，进行肺组织炎症浸润情况评分，Western blot检测造模前后CARD9蛋白的变化；然后将雌性6~8周龄C57BL/6野生型小鼠12只和CARD9基因敲除型小鼠12只分为4组，每组6只，其中D组为野生型对照组，E组为野生型模型组，F组为CARD9基因敲除对照组，G组为CARD9基因敲除模型组，造模如上述对照组和模型组。苏木精-伊红染色观察肺组织病理变化，ELISA法检测BALF中白细胞介素（IL）-4、IL-5和IL-17，RT-PCR法检测CXC趋化因子配体10（CXCL-10）和IL-17 mRNA水平。结果:B组炎症浸润评分［（3.33±0.82）比（0.67±0.52）分］和BALF总细胞计数［（10.13±4.83）×10 5个/ml比（3.76±0.84）×10 5个/ml］均高于A组（均 P<0.05）；C组炎症浸润评分［（2.83±0.75）分］和BALF总细胞计数［（9.80±3.19）×10 5个/ml］与B组差异无统计学意义（ P>0.05）；B组CARD9蛋白表达高于A组（0.245±0.090比0.047±0.014， P=0.004）；肺组织病理结果显示，与E组及F组相比，G组的肺组织炎症细胞浸润及组织结构破坏程度加重。与E组及F组相比，G组炎症细胞总数、中性粒细胞数量和嗜酸粒细胞数量均升高（均 P<0.05）；IL-4、IL-5及IL-17表达水平均升高（均 P<0.05）；支气管肺组织中IL-17及CXCL-10 mRNA表达水平亦均升高（均 P<0.05）。 结论:CARD9基因的缺失可能通过升高IL-17及CXCL-10等中性粒细胞趋化因子，增加中性粒细胞的浸润，从而加重C57BL/6小鼠激素抵抗型哮喘。

目的:探讨烟曲霉暴露对卵清白蛋白(OVA)致敏大鼠滤泡性辅助(Tfh)细胞分化的作用。方法:本研究为实验研究。健康雄性Wistar大鼠48只，采用随机数字表法分为2组，OVA致敏加磷酸盐缓冲液(PBS)吸入组(OVA/PBS)、OVA致敏加烟曲霉孢子(AF)吸入组(OVA/AF)，每组24只。获取24、40、56 d处死大鼠血清、肺组织、肺气管旁淋巴结组织、肺泡灌洗液、大鼠脾脏等，分析脾和肺气管旁淋巴结中Tfh细胞含量、肺泡灌洗液中细胞因子浓度测定和IgE的检测、观察肺组织HE染色和PAS染色，以及用Western blot检测Blimp-1和Bcl-6蛋白表达情况。结果:随时间延长，OVA/AF组血嗜酸粒细胞计数及血清IgE水平均呈逐渐升高趋势，各时间点比较差异均有统计学意义( F值分别为4.91、5.53， P值均<0.05)；OVA/PBS组则均呈逐渐下降趋势，但各时间点比较差异均无统计学意义( F值分别为1.98、2.16， P值均>0.05)。2组大鼠肺组织HE染色和PAS染色观察发现，基底膜不规则增厚，可见黏膜下水肿、管腔内渗出物、以及炎症细胞的浸润。随时间延长，OVA/AF组PAS染色阳性杯状细胞比例呈升高趋势，各时间点比较差异有统计学意义( F＝8.062， P<0.05)；OVA/PBS组各时间点比较差异无统计学意义( F＝3.132， P>0.05)。随时间延长，OVA/AF组脾脏、肺及气管旁淋巴结均浆中Tfh细胞占T淋巴细胞总数比例均呈升高趋势，各时间点比较差异均有统计学意义( F值分别为6.71、4.98， P值均<0.05)；OVA/PBS组则均呈下降趋势，但各时间点比较差异均无统计学意义( F值分别为2.02、2.97， P值均>0.05)。OVA/AF组肺和气管旁淋巴结均浆中Tfh细胞占T淋巴细胞总数比例与血清IgE有相关性( r＝0.960 1)。OVA/AF组各时间点Blimp-1和Bcl-6蛋白表达比较差异均有统计学意义( P值均<0.05)；OVA/PBS组各时间点Blimp-1和Bcl-6蛋白表达比较差异均无统计学意义( P值均>0.05)。 结论:烟曲霉暴露可能对OVA致敏大鼠Tfh细胞有分化促进作用。

目的:基于代谢组学的方法，从内源性代谢物的变化分析定喘汤对中性粒细胞型哮喘的干预效果及其可能机制。方法:40只C57BL/6小鼠随机分为5组，分别为正常组(A组)、中性粒细胞型哮喘模型组(B组)、定喘汤低剂量治疗组(C组)、定喘汤中剂量治疗组(D组)、定喘汤高剂量治疗组(E组)，每组8只。B、C、D、E组采用卵清白蛋白(OVA)和完全弗氏佐剂(CFA)联合诱导致敏小鼠建立中性粒细胞型哮喘模型，C、D、E组采用不同生药浓度的定喘汤进行干预治疗。采用Buxco小动物肺功能检测仪评估小鼠的气道反应性；提取肺泡灌洗液(BALF)采用计数板计数其白细胞总数，细胞涂片染色进行分类计数；HE染色观察肺组织的病理改变。采用高效液相色谱联用四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)检测各组小鼠的血清代谢物，采用常用的主成分分析(PCA)，偏最小二乘判别分析(PLS-DA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)模型对血清中代谢物图谱进行统计分析，从内源性代谢物的变化来反映定喘汤的干预效果及其可能机制。结果:(1)一般行为观察：除A组小鼠外，其他各组小鼠在激发期间均出现不同程度的哮喘症状。定喘汤各治疗组(C、D、E组)小鼠症状较B组程度减轻。(2)气道反应性：B组小鼠对乙酰甲胆碱(MCh)的气道反应性随着吸入浓度的升高而增加，各浓度MCh水平下的气道阻力均明显高于A组(均 P<0.01)；C、D、E组气道反应性低于B组(均 P<0.01)；D、E组小鼠气道反应性低于C组(均 P<0.05)；D、E组气道反应性比较差异无统计学意义( P>0.05)。(3)气道炎症细胞浸润：B组小鼠BALF中白细胞总数、中性粒细胞百分率明显高于A组(均 P<0.01)；C、D、E组白细胞总数、中性粒细胞百分率低于B组(均 P<0.01)；D、E组小鼠白细胞总数、中性粒细胞百分率低于C组(均 P<0.01)；D、E组之间比较差异无统计学意义(均 P>0.05)。(4)肺组织病理改变：A组小鼠肺组织未见病理改变。B组可见支气管管腔变狭窄，管腔内黏膜皱褶增生、上皮细胞脱落、肿胀及可见黏液栓、肺泡及肺组织结构破坏，支气管及血管周围大量炎症细胞浸润等典型病理学改变，其中以中性粒细胞及淋巴细胞浸润最明显；定喘汤各治疗组肺组织结构破坏、支气管黏膜水肿及炎症细胞浸润较B组均明显改善，其中D组小鼠肺组织病理改变相对较轻。(5)代谢组学分析：各组小鼠血清代谢物经PCA、PLS-DA以及OPLS-DA分析显示，A组和B组小鼠血清代谢物存在明显差异。通过代谢通路分析发现，不同生药浓度的定喘汤干预治疗可以在不同程度上改善哮喘疾病所致的代谢紊乱。 结论:定喘汤能有效减轻中性粒细胞型哮喘小鼠的气道炎症、气道高反应，有效调节中性粒细胞型哮喘所致的代谢异常。

目的:观察运脾泻肺化痰汤对哮喘模型大鼠气道黏液高分泌的影响，以及对表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR) /黏蛋白5AC (mucin5ac, MUC5AC）信号通路的调控作用。方法:将70只SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、西药组、联合组，每组10只。除正常组外，其余各组予卵清白蛋白、氢氧化铝混合液1 ml致敏建立哮喘大鼠模型。实验第16天开始灌胃，运脾泻肺化痰汤高、中、低剂量组分别灌胃40、20、10 g/kg运脾泻肺化痰汤，西药组灌胃羧甲斯坦片150 mg/kg，联合组灌胃运脾泻肺化痰汤20 g/kg、羧甲斯坦片150 mg/kg, 1次/d，连续灌胃4周。采用ELISA法检测大鼠血清TNF-α、IL-13含量；行瑞氏-姬姆萨染色观察大鼠肺泡灌洗液中白细胞总数及细胞分类情况；行过碘酸雪夫染色（PAS)观察肺组织病理学改变；Western blotting检测肺组织EGFR、MUC5AC蛋白表达；RT-PCR法检测EGFR、MUC5AC mRNA水平。结果:与模型组比较，中药高、中、低剂量组及西药组、联合组大鼠IL-13、TNF-α水平降低( P < 0.05) ，大鼠肺泡灌洗液中白细胞总数及嗜酸性粒细胞、中性粒细胞比例降低( P <0.05) ，肺组织EGFR [(0.466±0.023)、(0.354±0.047)、(0.667±0.066)、(0.553±0.065)、(0.290±0.033）比（0.782± 0.047) ]、MUC5AC [(0.424±0.022)、(0.313±0.033)、(0.603±0.051)、(0.495±0.041)、(0.243±0.024)比（0.806±0.090)]蛋白表达降低( P<0.05) ，EGFR[(2.302±0.321)、(2.549±0.623)、(3.084±0.453)、(2.585± 0.314)、(1.810±0.379）比（4.101±0.567) ]、MUC5AC [(3.243±0.742)、(3.283±1.064)、(4.419±0.572)、(3.817±0.637)、(2.469±0.424)比（5.840±0.661) ]mRNA水平降低( P<0.05)。 结论:运脾泻肺化痰汤可抑制哮喘大鼠气道黏液高分泌状态，其机制可能与EGFR/MUC5AC信号通路相关。

目的 基于网络药理学及体内实验探讨射麻止喘液治疗中性粒细胞型哮喘(NA)的分子机制.方法 (1)利用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)、文献检索及Swiss ADME、Swiss Target Prediction数据库检索、筛选射麻止喘液的活性成分及其作用靶点.利用OMIM、GeneCards、DisGeNET及DrugBank数据库检索、筛选NA疾病相关靶点.通过微生信平台对射麻止喘液活性成分作用靶点与NA疾病相关靶点取交集,得到射麻止喘液治疗NA的潜在作用靶点(共有靶点).采用Cytoscape 3.8 软件构建"中药-活性成分-潜在作用靶点"网络.通过STRING数据库建立潜在作用靶点蛋白互作(PPI)网络,使用内置Mcode插件分析获得核心靶点.使用Metascape平台对潜在作用靶点进行基因本体(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.(2)将BALB/C小鼠适应性喂养 1 周后,随机分为空白组、NA模型组、射麻止喘液低剂量组(2.5 g·kg-1)、射麻止喘液高剂量组(10 g·kg-1)、地塞米松对照组(1 mg·kg-1);通过腹腔注射致敏剂[鸡卵清白蛋白(OVA)+弗氏完全佐剂(CFA)]并通过雾化吸入激发的方法复制NA小鼠模型,第 0、7、14 天分别腹腔注射OVA+CFA(20 μg OVA+75 μg CFA,0.3 mL)致敏,第 21～30 天采用 5%OVA混悬液雾化激发(每次 8 mL,每次雾化时间40 min,每天 1 次);雾化激发前 1h各组灌胃给药,地塞米松对照组腹腔注射给药,每天 1 次.采用HE染色法观察小鼠肺组织病理变化;ELISA法检测肺泡灌洗液中IL-8 含量;RT-qPCR法检测肺组织中NLRP3、CXCR2 mRNA表达水平;免疫组化法检测肺组织中p-mTOR蛋白表达水平.结果 (1)共筛选得到射麻止喘液活性成分作用靶点 826 个,NA疾病相关靶点 154 个,取交集后得到射麻止喘液治疗NA的 51 个潜在作用靶点(共有靶点).通过"中药-活性成分-潜在作用靶点"网络分析得到槲皮素、木犀草素、山柰酚、豆甾醇、柚皮素等关键活性成分.通过对潜在作用靶点的PPI网络分析得到 29 个核心靶点,包括AKT1、IL6、TNF、EGFR、NLRP3、RELA、MIF、CXCR2、VEGFA等.GO功能富集分析得到 882 个生物学过程条目、33 个细胞组分条目、61 个分子功能条目;KEGG通路富集分析得到 142 条信号通路,主要涉及TNF信号通路、甲型流感信号通路、Toll样受体通路、MAPK信号通路、mTOR信号通路等.(2)动物实验结果:与空白组比较,NA模型组小鼠的气道黏膜损伤明显,结构紊乱,有大量炎性细胞浸润,黏膜充血、水肿,肺泡壁明显增厚,肺泡腔缩小;肺泡灌洗液中的炎症因子IL-8 水平明显升高(P＜0.05);小鼠肺组织NLRP3、CXCR2 mRNA表达显著上调(P＜0.01),p-mTOR蛋白表达水平明显升高.与NA模型组比较,射麻止喘液低、高剂量组小鼠肺组织支气管上皮细胞结构排列可见少许紊乱,气管及血管周围有少量的炎性细胞浸润,支气管黏膜充血水肿明显减轻;小鼠肺组织CXCR2 mRNA表达显著下调(P＜0.01),p-mTOR蛋白表达水平明显降低.射麻止喘液高剂量组小鼠肺泡灌洗液中的 IL-8 水平明显降低(P＜0.05);射麻止喘液低剂量组小鼠肺组织 NLRP3 mRNA表达明显下调(P＜0.05).结论 射麻止喘液对NA的治疗作用可能是通过槲皮素、木犀草素、山柰酚等关键活性成分,作用于NLRP3、CXCR2 等核心靶点,调控TNF信号通路、MAPK信号通路、Toll样信号通路、mTOR等关键信号通路来实现的.

目的:探究白芍总苷(TGP)对支气管哮喘模型小鼠气道重塑的影响及潜在机制.方法:将50只小鼠随机分为对照组(Control组)、模型组(OVA组)、TGP低剂量组(TGP-L,460 mg/kg)、TGP高剂量组(TGP-H,920 mg/kg)、TGP+ML385组(TGP 920 mg/kg+ML385 30 mg/kg),每组10只.采用卵清白蛋白(OVA)致敏和激发两个阶段建立哮喘小鼠模型.在每次激发前1 h,TGP各剂量组灌胃相应剂量的TGP混悬液,TGP+ML385组给予30 mg/kg的ML385和920 mg/kg的TGP灌胃,连续给药8周,实验过程中观察各组小鼠的行为学变化,最后一次激发24 h后收集支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA检测BALF中TGF-β1、半胱氨酰白三烯1(CysLT1)、半胱氨酰白三烯受体1(CysLTR1)水平;检测肺匀浆中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性;HE和AB-PAS染色观察肺组织病理学变化;RT-qPCR检测肺组织TGF-β1、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)的mRNA表达;Western blot检测肺组织TGF-β1/Nrf-2/HO-1通路相关蛋白表达.结果:与Control组相比,OVA组小鼠出现典型的哮喘症状,如打喷嚏、烦躁不安、喘息,BALF中TGF-β1、CysLT1、CysLTR1水平、肺组织炎症和黏液分泌评分、TGF-β1 mRNA和蛋白、MMP-9 mRNA表达显著升高(P<0.05),肺组织中T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT活性、TIMP-1 mRNA表达显著降低(P<0.05),肺组织Nrf-2和HO-1蛋白表达有所增加,但差异无统计学意义(P>0.05);与OVA组相比,TGP-L组和TGP-H组小鼠的哮喘症状明显减轻,BALF中TGF-β1、CysLT1、CysLTR1水平、肺组织炎症和黏液分泌评分、TGF-β1 mRNA和蛋白、MMP-9 mRNA表达显著降低(P<0.05),肺组织中T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT活性、TIMP-1 mRNA表达、Nrf-2和HO-1蛋白表达显著升高(P<0.05);且使用Nrf2抑制剂ML385阻断Nrf-2/HO-1通路激活可明显减弱TGP对哮喘小鼠肺组织氧化应激和气道重塑的抑制作用.结论:TGP可调节氧化应激和炎症诱发的支气管哮喘小鼠的气道重塑,其作用机制可能与降低TGF-β1表达、激活Nrf-2/HO-1通路有关.

目的:对比观察肺俞和天枢联用与肺俞单用对哮喘模型大鼠肺功能和组织炎症的影响.方法:将 48 只Sprague-Dawley大鼠根据随机数字表法分为正常组、模型组、从肺论治组和肺肠同治组,每组12只.除正常组外,其余三组大鼠采用卵清白蛋白致敏和雾化激发的方法制备哮喘模型.模型制备成功后,从肺论治组大鼠针刺双侧肺俞30 min;肺肠同治组大鼠先后针刺双侧肺俞和天枢各15 min,共计30 min.每天1次,连续14 d.其余两组大鼠不干预.干预结束后,肺功能测定仪测定各组大鼠的肺功能;光镜下观察苏木素-伊红染色的肺组织病理学改变、Masson染色的肺组织胶原沉积程度以及瑞-吉染色的肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞的含量;酶联免疫吸附法检测各组大鼠肺组织中白介素(IL)-4、IL-5、IL-13、IL-17、IL-25、IL-33、半胱氨酸白三烯(LT)、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)和前列腺素D2(PGD2)的含量.结果:与正常组相比,模型组大鼠最大呼气流量(PEF)、动态肺顺应性(Cdyn)、呼出25%肺活量时最大呼气流量(FEF25%)、一秒用力呼气容积占用力肺活量比(FEV1/FVC)、最大呼气中期流量(MMEF)均显著下降(P<0.01或P<0.05),肺阻力(RL)、胶原沉积程度、IL-4、IL-5、IL-13、IL-17、IL-33、LT、TSLP、PGD2及BALF中的中性粒细胞占比显著增加(P<0.01或P<0.05).与模型组相比,从肺论治组大鼠肺功能中FEF25%和FEV1/FVC显著升高(P<0.01,P<0.05),胶原纤维沉积程度、IL-4、IL-5、IL-13、IL-17、LT、TSLP及PGD2的含量均显著降低(P<0.01或P<0.05);肺肠同治组大鼠肺功能中PEF、FEF25%及FEV1/FVC均显著升高(P<0.01或P<0.05),RL、胶原纤维沉积程度、IL-4、IL-5、IL-13、IL-17、IL-33、LT、TSLP、PGD2及BALF中的中性粒细胞占比显著降低(P<0.01或P<0.05).与从肺论治组相比,肺肠同治组大鼠肺组织中IL-5的含量降低(P<0.05).结论:从肺论治及肺肠同治针刺对哮喘模型大鼠肺功能、肺组织炎症及BALF中的炎症细胞均具有良好的改善效果;肺肠同治在改善IL-5含量方面优于从肺论治;肺俞和天枢联用治疗哮喘有优于单用肺俞的趋势.

目的 探讨小儿健脾益肺方通过高迁移率组蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体 4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)炎症信号通路改善哮喘小鼠气道高反应的作用机制.方法 60 只 SPF 级Balb/c小鼠随机数字表法分为空白组、模型组、布地奈德组、小儿健脾益肺方组、布地奈德+小儿健脾益肺方组,用卵清白蛋白(OVA)致敏、激发建立小鼠急性哮喘模型,分别予布地奈德(0.2g/L)、小儿健脾益肺方(1.875 g/kg)干预.肺功能检测气道阻力,支气管肺泡灌洗液吉姆萨染色检测小鼠各种细胞占比情况,肺组织切片HE及PAS染色观察,ELISA检测血清及支气管肺泡灌洗液中OVA-IgE、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,蛋白质印迹法及免疫荧光检测HMGB1、髓样分化因子 88(MyD88)、TLR4、p-NF-κB/NF-κB等通路蛋白表达情况.结果 与空白组比较,模型组气道阻力明显升高(P<0.01),支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞比例明显升高(P<0.01),组织病理学染色较空白组出现明显炎性细胞浸润、杯状细胞增生、气道上皮水肿、管腔狭窄,血清及支气管肺泡灌洗液中OVA-IgE、IL-6、IL-1β、IFN-γ、TNF-α 表达升高(P<0.01),HMGB1、MyD88、TLR4、NF-κB等通路蛋白表达升高(P<0.05),NF-κB磷酸化程度升高(P<0.05).与模型组比较,布地奈德组、小儿健脾益肺方组、布地奈德+小儿健脾益肺方组气道阻力降低,支气管肺泡灌洗液中巨噬细胞占比升高、嗜酸性粒细胞降低(P<0.05),组织病理学染色结果显示炎症细胞浸润改善、平滑肌层增厚缓解、上皮完整性增加,杯状细胞化生减少,HE评分、PAS评分与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05).血清和支气管肺泡灌洗液中,小儿健脾益肺方组、布地奈德组、布地奈德+小儿健脾益肺方组与模型组比较均能明显降低各项指标的含量(P<0.01);与布地奈德组比较,小儿健脾益肺方组血清OVA-IgE含量明显升高(P<0.05),小儿健脾益肺方组和布地奈德+小儿健脾益肺方组HMGB1 含量明显降低(P<0.05).蛋白质印迹法检测结果显示,与模型组比较,小儿健脾益肺方组、布地奈德组、布地奈德+小儿健脾益肺方组均能有效降低HMGB1、MyD88 和TLR4 蛋白的表达和NF-κB的磷酸化程度,差异具有统计学意义(P<0.01);与布地奈德组相比,小儿健脾益肺方组HMGB1 的表达明显下降,而TLR4、MyD88 的表达升高,布地奈德+小儿健脾益肺方组HMGB1、TLR4、MyD88 的表达均明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.05).免疫荧光检测结果显示,小儿健脾益肺方组、布地奈德组、布地奈德+小儿健脾益肺方组HMGB1 与模型组比较明显降低(P<0.01),布地奈德+小儿健脾益肺方组的HMGB1 和TLR4 较布地奈德组均明显降低(P<0.05).结论 小儿健脾益肺方和布地奈德均能有效缓解哮喘相关病理改变,降低炎症因子表达,抑制HMGB1/TLR4/NF-κB炎症信号通路,改善气道高反应.小儿健脾益肺方和布地奈德联合应用优于布地奈德单独应用.HMGB1/TLR4/NF-κB炎症信号通路是健脾益肺方改善儿童哮喘气道高反应性的潜在作用机制.

目的:从对肠道短链脂肪酸(SCFAs)的调控角度探讨艾灸改善哮喘炎性反应的可能作用机制.方法:48只SD大鼠随机分为正常组、模型组、从肺论治组和肺肠同治组,每组 12只.采用卵清白蛋白(OVA)致敏和雾化激发法制备哮喘大鼠模型.从肺论治组艾灸大鼠双侧"肺俞"30 min;肺肠同治组艾灸大鼠双侧"肺俞""天枢"共30 min.模型组、从肺论治组、肺肠同治组大鼠上述干预结束1 h后,分别予以1%OVA溶液雾化20 min,均每天1次,连续14 d.同血细胞分析仪检测外周血中炎性细胞百分比,HE染色法观察肺组织病理形态学改变,瑞氏-吉姆萨染色法计数肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞,实时荧光定量PCR法检测肺组织中白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13、IL-17、IL-33、前列腺素D2(PGD2)、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)和白三烯(LT)mRNA的表达,气相色谱-质谱联用法检测粪便中SCFAs的含量.结果:与正常组相比,模型组大鼠肺组织结构重度异常,肺泡壁增厚,支气管周围可见大量炎性细胞浸润;外周血中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞百分比,BALF中嗜酸性粒细胞、中性粒细胞百分比,肺组织中IL-4、IL-5、IL-13、IL-17、IL-33、PGD2、TSLP、LT的mRNA表达均显著升高(P<0.01,P<0.05);粪便中乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、戊酸的含量均显著降低(P<0.05,P<0.01).与模型组相比,从肺论治组和肺肠同治组大鼠肺组织病理形态学损伤均显著改善;外周血中性粒细胞和淋巴细胞百分比,BALF中嗜酸性粒细胞百分比,肺组织中IL-4、IL-17、IL-33、PGD2、TSLP、LT的mRNA表达均显著降低(P<0.01,P<0.05);粪便中乙酸、丙酸、戊酸的含量均显著升高(P<0.05,P<0.01).除此之外,与模型组相比,肺肠同治组大鼠BALF中中性粒细胞百分比,肺组织中IL-5、IL-13的mRNA表达也均显著降低(P<0.05,P<0.01),粪便中异丁酸、丁酸含量也均显著升高(P<0.05,P<0.01).与从肺论治组相比,肺肠同治组大鼠肺组织中IL-5、LT的mRNA表达均显著降低(P<0.01,P<0.05),粪便中丙酸含量显著升高(P<0.05).结论:艾灸"肺肠同治"可以更好地调节肠道SCFAs的含量,缓解哮喘模型大鼠炎性反应;肠道SCFAs可能参与了艾灸改善哮喘大鼠炎性反应的作用过程.

目的 探索槐杞黄颗粒对哮喘大鼠肺组织微小RNA(miRNA)表达差异及细胞因子水平的研究.方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、实验组、阳性对照组.通过卵清白蛋白(OVA)致敏并激发构建大鼠哮喘模型,实验组在模型激发前灌胃给予槐杞黄颗粒4 g·kg-1,阳性对照组在模型激发前雾化给予吸入用布地奈德混悬液2 mg,模型组在模型激发前对照组灌胃给予等量的0.9%NaCl,另取SD大鼠只灌胃给予等量的0.9%NaCl不构建模型作为对照组.各组大鼠末次激发后24h内处死,检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和嗜酸性粒细胞数(EOS)及肺组织病理变化;用酶联免疫吸附试验法检测各组BALF中细胞炎症因子的浓度;用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组肺组织中miRNA-221、miRNA-155 和miRNA-21 的表达水平.结果 对照组、模型组、实验组及阳性对照组的 BALF 中细胞数分别为(27.85±4.27)×107、(152.38±9.87)×107、(100.75±3.83)×107和(84.25±4.83)×107 cell·mL-1,EOS 分 别 为(0.07±0.02)%、(6.38±0.22)%、(3.53±0.15)%和(1.13±0.05)%,白 细 胞 介 素-4 浓 度 分 别 为(183.24±8.15)、(238.24±18.15)、(235.15±11.55)和(208.24±12.35)ng·L-1,白细胞介素-6 浓度分别为(35.15±7.55)、(718.00±45.88)、(488.00±25.18)和(531.00±35.48)ng·L-1,白细胞介素-13 浓度分别为(18.35±1.18)、(45.27±6.75)、(28.78±2.75)和(21.93±3.82)pg·mL-1,免疫球蛋白E浓度分别为(61.00±7.00)、(151.00±17.00)、(108.00±11.00)和(99.00±13.00)ng·mL-1,γ干扰素浓度分别为(1 169.48±45.11)、(979.39±76.20)、(1 238.52±106.43)和(1 211.00±76.23)pg·mL-1,肺组织中miRNA-221 表达水平分别为 1.02±0.03、1.60±0.03、1.25±0.02 和1.03±0.04,肺组织中mi RNA-21 表达水平分别为1.08±0.02、2.03±0.04、1.76±0.03 和 1.80±0.04;模型组的上述指标与对照组比较,实验组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01 或P＜0.001).结论 在哮喘大鼠模型中,槐杞黄颗粒可能通过调控细胞内miRNA表达,调节炎症因子的水平,从而改善气道炎症.