目的:分析CHRNB1基因突变所致先天性肌无力综合征的临床表现、电生理及基因特点，提高对此病的诊断及鉴别诊断能力。方法:观察2019年2月就诊于空军军医大学唐都医院的CHRNB1基因突变所致先天性肌无力综合征一家系先证者的临床特点、实验室检查，对其进行电生理检查及高通量全外显子测序，并对治疗反应及预后进行评估。结果:先证者为16岁女性，4岁时出现双眼睑下垂，12岁时出现四肢无力。父亲有类似病史，母亲及一弟正常。心肌酶谱、甲状腺功能正常；重症肌无力抗体检测均为阴性；新斯的明试验阴性。双侧腋神经重复电刺激可见低频递减，针极肌电图未见肌源性损害。头颅磁共振成像、胸部CT检查结果大致正常。高通量全外显子测序：先证者CHRNB1基因8号外显子区域存在1个父源单杂合突变：c.865G>A（NM_000747）。予以氟西汀60 mg/d治疗，随访1年时四肢无力明显改善，眼睑下垂轻度改善。结论:CHRNB1基因突变所致慢通道先天性肌无力综合征患者临床及电生理表现与获得性自身免疫性重症肌无力相似，极易误诊，高通量全外显子测序可明确诊断。

离子通道在调节中枢神经系统兴奋性方面起着非常重要的作用.近年来研究发现,离子通道基因突变与很多原发性癫痫的发病高度相关.至今研究发现977个基因与癫痫相关,其中60个是离子通道基因.主要包括电压门控离子通道基因:钠离子通道(SCA1A、SCN1B、SCN2A等)、钾离子通道(KCNA2、KCNC1、KCNT1、KCNQ2、KCNQ3等)、氯离子通道(CLCN2等)及钙离子通道(CACNA1H、CACNA1A等)等;神经元递质受体门控通道基因:GABA受体(GABRA1、GABRB3、GABRD以及GABRG2等)、乙酰胆碱受体(CHRNA4、CHRNB2等)及其他门控通道及基因突变(HCN1、LGI1及PRRT2等).文中将重点综述近年来研究发现的离子通道基因突变与癫痫遗传学的相关性,以更好地辅助临床诊断及治疗.

癫痫是一种由脑部异常同步或过度的神经元电活动导致的慢性脑部疾病,影响着全球约6500 万人[1].其发病机制较为复杂,在目前已发现的癫痫致病基因中,电压门控离子通道相关基因和配体门控离子通道相关基因分别占17％、10％ [2].国内外研究表明,癫痫发生发展与烟碱型乙酰胆碱受体( nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)基因突变相关,目前已证实, CHRNA2、CHRNA3、CHRNA4、CHRNA5、CHR-NA7、CHRNB2及CHRNB4的基因突变在癫痫的疾病进程中扮演着重要作用.我们查阅了近年来国内外发表的相关文献,对烟碱型乙酰胆碱受体基因与癫痫的研究进展综述如下.

目的 探究尼古丁对心肌细胞凋亡的影响及与吸烟密切相关细胞色素酶P4501A1(Cyp1a1)和神经元乙酰胆碱受体β4亚基(Chrnb4)基因在尼古丁诱导心肌细胞凋亡中的作用机制.方法 根据不同方法将细胞分为对照组、尼古丁组、高糖/高脂模型组、尼古丁+高糖高脂模型组、shRNA-NC组、shRNA-Cyp1a1组、AMPK抑制剂组、shRNA-Cyp1a1+AMPK抑制剂组、shRNA-Chrnb4组、shRNA-Chrnb4+AMPK抑制剂组.制备H9C2细胞高糖/高脂模型,转染Cyp1a1或Chrnb4干扰质粒,采用尼古丁或AMPK抑制剂处理.流式细胞术检测细胞凋亡、活性氧、线粒体膜电位,ELISA法检测细胞内超氧化物歧化酶活性和微量丙二醛含量,Western blotting检测细胞中Cyp1a1、Chrnb4、Caspase-2、Caspase-3、Caspase-9、p-AMPK的表达.结果 尼古丁组、高糖/高脂模型组、尼古丁+高糖/高脂模型组SOD较对照组降低(P<0.05),尼古丁+高糖/高脂模型组较高糖/高脂模型组降低(P<0.05).尼古丁+高糖/高脂模型组MDA较对照组和高糖/高脂模型组升高(P<0.05).高糖/高脂模型组、尼古丁+高糖/高脂模型组ROS含量较对照组升高(P<0.05),尼古丁+高糖/高脂模型组较高糖/高脂模型组升高(P<0.05).尼古丁组、高糖/高脂模型组、尼古丁+高糖/高脂模型组线粒体膜电位较对照组降低(P<0.05),尼古丁+高糖/高脂模型组较高糖/高脂模型组降低(P<0.05).尼古丁组、高糖/高脂模型组、尼古丁+高糖/高脂模型组Cyp1a1和Chrnb4 mRNA相对表达量较对照组升高(P<0.05),尼古丁+高糖/高脂模型组较高糖/高脂模型组升高(P<0.05).尼古丁组和尼古丁+高糖/高脂模型组Caspase-2、Caspase-3、Caspase-9、Cyp1a1、Chrnb4蛋白相对表达量较对照组升高(P<0.05),p-AMPK蛋白相对表达量较对照组降低(P<0.05),高糖/高脂模型组p-AMPK蛋白相对表达量较对照组降低(P<0.05),Caspase-9、Cyp1a1、Chrnb4蛋白相对表达量较对照组升高(P<0.05),尼古丁+高糖/高脂模型组Caspase-2、Caspase-3、Caspase-9、Cyp1a1、Chrnb4蛋白相对表达量较高糖/高脂模型组升高(P<0.05),p-AMPK蛋白相对表达量较高糖/高脂模型组降低(P<0.05).shRNA-Cyp1a1组心肌细胞凋亡率较shRNA-NC组降低(P<0.05),AMPK抑制剂组和shRNA-Cyp1a1+AMPK抑制剂组较shRNA-NC组增加(P<0.05),shRNA-Cyp1a1+AMPK抑制剂组较AMPK抑制剂组降低(P<0.05).shRNA-Cyp1a1组Caspase-2、Caspase-3、Caspase-9、Cyp1a1蛋白相对表达量较shRNA-NC组降低(P<0.05),p-AMPK蛋白相对表达量较shRNA-NC组升高(P<0.05),AMPK抑制剂组Caspase-2、Caspase-3、Caspase-9、Cyp1a1蛋白相对表达量较shRNA-Cyp1a1+AMPK抑制剂组升高(P<0.05),p-AMPK蛋白相对表达量较shRNA-Cyp1a1+AMPK抑制剂组降低(P<0.05),shRNA-Cyp1a1+AMPK抑制剂组Cyp1a1蛋白相对表达量与shRNA-Cyp1a1组无差异(P>0.05).shRNA-Chrnb4组心肌细胞凋亡率较shRNA-NC组降低(P<0.05),AMPK抑制剂组和shRNA-Chrnb4+AMPK抑制剂组较shRNA-NC组增加(P<0.05),shRNA-Chrnb4+AMPK抑制剂组较AMPK抑制剂组降低(P<0.05).shRNA-Chrnb4组Caspase-2、Caspase-3、Cas-pase-9、Chrnb4蛋白相对表达量较shRNA-NC组降低(P<0.05),p-AMPK蛋白相对表达量较shRNA-NC组升高(P<0.05),AMPK抑制剂组和shRNA-Chrnb4+AMPK抑制剂组Caspase-2、Caspase-3、Caspase-9蛋白相对表达量较shRNA-NC组升高,p-AMPK蛋白相对表达量较shRNA-NC组降低(P<0.05),shRNA-Chrnb4+AMPK抑制剂组Chrnb4蛋白较shRNA-NC组降低,shRNA-Chrnb4+AMPK抑制剂组Caspase-2、Caspase-3、Caspase-9、Chrnb4蛋白相对表达量较AMPK抑制剂组降低(P<0.05),p-AMPK蛋白相对表达量较AMPK抑制剂组升高(P<0.05).shRNA-Chrnb4+AMPK抑制剂组Chrnb4蛋白相对表达量与shRNA-Chrnb4组无差异(P>0.05).结论 Cyp1a1、Chrnb4参与尼古丁诱导心肌细胞凋亡,其机制可能是通过抑制AMPK磷酸化,导致线粒体功能障碍,氧化应激增加,最终激活Caspase-2凋亡途径.