目的:探讨茵栀黄口服液对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠的作用和相关机制。方法:将18只C57BL/6J雌性小鼠分成正常饮食组、高脂饮食组和茵栀黄口服液组，每组6只。肝脏组织切片行H-E染色、油红O染色和Masson染色后进行病理学评分。检测血三酰甘油、总胆固醇、TBil、ALT和AST水平，采用高效液相色谱-串联质谱法测定小鼠回肠内容物胆汁酸组成，包括牛磺酸结合β鼠胆酸(TβMCA)、熊去氧胆酸(UDCA)和胆酸等。采用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法和免疫组织化学法检测法尼醇Ⅹ受体( FXR)、成纤维生长因子15( FGF15)和和成纤维生长因子受体4( FGFR4)基因的mRNA和蛋白质表达水平，以及胆汁酸合成相关酶细胞色素P450家族27亚族a成员1(CYP27a1)、细胞色素P450家族7亚族b成员1(CYP7b1)、细胞色素P450家族7亚族a成员1(CYP7a1)和细胞色素P450家族8亚族b成员1(CYP8b1)水平。统计学分析采用 t检验。 结果:茵栀黄口服液组血三酰甘油、总胆固醇、TBil、ALT和AST水平均低于高脂饮食组[分别为(1.47±0.07) mmol/L比(1.90±0.13) mmol/L、(2.57±0.17) mmol/L比(6.84±0.23) mmol/L、(0.88±0.22) mg/dL比(2.06±0.25) mg/dL、(28.43±3.16) U/L比(87.15±23.27) U/L、(147.40±8.47) U/L比(289.00±12.66) U/L]，差异均有统计学意义( t＝3.90、15.19、4.31、2.50、9.58， P均<0.05)。茵栀黄口服液组肝细胞脂肪变和气球样变评分均低于高脂饮食组[分别为(1.00±0.26)分比(2.33±0.33)分、(0.33±0.21)分比(1.17±0.31)分]，差异均有统计学意义( t＝3.90、4.90， P均<0.05)。茵栀黄口服液组回肠内容物FXR拮抗型胆汁酸TβMCA和UDCA水平均高于高脂饮食组[分别为(4.95±0.68) nmol/g比(2.64±0.15) nmol/g、(7.86±1.84) nmol/g比(2.22±0.38) nmol/g]，差异均有统计学意义( t＝3.92、2.99， P均<0.05)；茵栀黄口服液组回肠内容物FXR激动型胆汁酸胆酸水平低于高脂饮食组[(4.69±0.46) nmol/g比(21.66±3.25) nmol/g]，差异有统计学意义( t＝5.14， P<0.05)。茵栀黄口服液组回肠组织 FXR、 FGF15 mRNA和蛋白质，以及肝组织 FGFR4 mRNA和蛋白质表达水平均低于高脂饮食组(分别为1.86±0.40比4.25±0.70、9.99±2.82比75.17±23.41、4.76±0.63比12.66±1.39、2.20±0.14比5.30±0.25、1.15±0.05比3.05±0.16、1.73±0.09比2.37±0.21)，差异均有统计学意义( t＝2.56、2.76、4.87、10.90、10.96、2.94， P均<0.05)。茵栀黄口服液组胆汁酸合成替代途径中的CYP27a1和CYP7b1水平均高于高脂饮食组(分别为2.13±0.33比0.50±0.09和2.95±0.60比0.37±0.19)，差异均有统计学意义( t＝5.22、3.20， P均<0.05)；但CYP8b1表达水平低于高脂饮食组(2.38±0.41比8.63±2.20)，差异有统计学意义( t＝2.80， P<0.05)。 结论:茵栀黄口服液通过改变小鼠肠道胆汁酸组分抑制肠道FXR-FGF15信号通路，进而促进肝脏胆固醇合成胆汁酸，达到减轻NAFLD的作用。

目的:对利用生物信息学方法筛选的肾上腺皮质癌（ACC）肿瘤微环境（TME）相关基因构建的预后模型进行验证，为ACC的诊疗提供临床指导和相关生物标志物。方法:从癌症基因组图谱（TCGA）数据库中收集79例ACC患者的转录组数据和临床病理数据。采用ESTIMATE算法计算免疫评分、基质评分（二者即反映TME）和ESTIMATE评分，应用VennDiagram包对免疫评分及基质评分高、低评分组（以中位值进行分组）间差异表达基因进行选择，采用基因本体（GO）数据库和京都基因与基因组百科全书（KEGG）数据库对选择的基因进行功能富集分析，探索基因潜在功能与通路。采用单因素Cox回归、lasso回归和多因素Cox回归分析筛选与ACC TME相关的基因，并建立ACC患者预后的风险评分（RS）模型，用受试者工作特征（ROC）曲线评价构建的模型预测ACC患者预后的价值。以基因表达综合（GEO）数据库的数据集GSE33371和GSE19750作为外部验证集，对建立的预后模型进行验证。从TCGA数据库中提取79例ACC患者资料，将临床病理因素与所构建预后模型的RS纳入Cox回归分析，获得ACC患者预后影响因素。结果:根据免疫评分和基质评分，用VennDiagram包筛选得到1 205个二者交集的差异表达基因，其中上调833个，下调372个。对差异表达基因进行各回归分析筛选后，最终构建成功包含9个TME相关基因（GREB1、POU4F1、HIC1、HOXC9、CACNB2、RAB27B、ZIC2、C3、CYP2D6）的ACC预后模型，即RS=GREB1×0.223 6+POU4F1×0.671 7+HIC1×0.167 5+HOXC9×0.211 3+CACNB2×0.156 0+RAB27B×0.956 5+ZIC2×0.582 7+C3×（-0.003 1）+CYP2D6×0.819 3。该模型在TCGA数据库中预测79例ACC患者1、3、5年总生存的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.876、0.919、0.917，在GEO验证集中预测45例ACC患者1、3、5年总生存的AUC分别为0.689、0.704、0.708，表明模型对ACC患者生存具有较高的预测准确性。对TCGA数据库中79例ACC患者资料进行Cox回归分析显示，TME相关基因预后模型RS是ACC患者预后的独立影响因素（ HR=1.011，95% CI 1.005~1.016， P<0.01）。 结论:构建的ACC TME相关基因预后模型可用于预测ACC患者的预后。模型中包含的9个基因有可能作为研究ACC发病机制和免疫治疗的新靶点，值得进一步研究。

目的:分析21羟化酶缺陷症（21-OHD）患者睾丸肾上腺残余瘤（TART）的发生情况及临床特点，探讨可能与TART发生相关的因素。方法:纳入2018年1至12月于北京协和医院内分泌科就诊的27例男性21-OHD患者，并收集其临床和血生化资料。利用Sanger测序方法和多重连接探针扩增技术（MLPA）明确CYP21A2基因突变，并根据21羟化酶残余活性将患者分为Null组（酶活性完全丧失，3例）、A组（酶活性存留0~<1%，9例）、B组（酶活性存留1%~5%，7例）、C组（酶活性存留20%~50%，2例）和D组（携带尚未报道对应酶活性的罕见突变，6例）。双侧阴囊超声检查患者是否出现TART及其形态特征。结果:21-OHD男性患者27例，年龄（17.4±9.3）岁。其中15例（15/27，55.6%）出现TART病变，以青少年患者最为多见，最小的仅4岁。超声下多为双侧低回声病变。合并TART的患者17α-羟孕酮（17-OHP）及孕酮水平均高于未合并TART的患者[17-OHP：199.6（62.1，232.7）nmol/L比7.4（3.2，105.0）nmol/L， P=0.003；孕酮：97.1（42.0，126.8）nmol/L比5.4（0.7，20.0）nmol/L， P=0.004]。TART的发生与基因型分组存在相关性，严重影响酶活性的Null组和A组患者，其出现TART的可能性高于轻微影响酶活性的B和C组（8/12比4/9， P=0.021）。 结论:TART在21-OHD患者中较为常见，其与17-OHP等激素水平及CYP21A2基因型存在一定相关性，多发生于病情控制不佳的21-OHD患者。21-OHD患者TART病变的早期筛查可能对预后有重要意义。

目的:研究白藜芦醇对苯并芘诱导的SZ95人皮脂腺细胞炎症因子及相关基因表达的影响。方法:SZ95人皮脂腺细胞分为对照组、1 × 10 -5 mol/L白藜芦醇组、1 × 10 -5 mol/L苯并芘组及白藜芦醇+苯并芘组。实时荧光定量PCR检测各组SZ95人皮脂腺细胞中白细胞介素1α（IL-1α）、IL-6、芳香烃受体（AhR）、细胞色素酶P450（CYP）1A1、CYP1B1 mRNA表达；Western印迹检测各组p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）磷酸化水平（磷酸化p38水平/p38水平）和AhR蛋白相对水平；酶联免疫吸附法检测各组细胞上清液中IL-1α、IL-6蛋白表达。多组间均数比较用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 结果:对照组、白藜芦醇组、苯并芘组及白藜芦醇+苯并芘组SZ95人皮脂腺细胞IL-1α的mRNA（2.045±0.272、2.058±0.154、3.124±0.094、2.185±0.337）和蛋白（9.132±1.181、9.429±0.771、20.361±0.907、9.917±0.897）表达水平差异均有统计学意义（ F值分别为14.662、101.705， P值分别< 0.01、< 0.001），其中白藜芦醇+苯并芘组IL-1α mRNA和蛋白相对水平低于苯并芘组（均 P < 0.01）。此外，苯并芘组p38磷酸化水平显著高于对照组、白藜芦醇组及白藜芦醇+苯并芘组（ F=303.129，均 P < 0.000 1）。白藜芦醇+苯并芘组AhR、CYP1A1和CYP1B1的mRNA表达较苯并芘组显著下调（ t值分别为10.640、33.599、18.327，均 P < 0.001）。苯并芘组细胞AhR蛋白表达低于白藜芦醇+苯并芘组（ P < 0.001）。 结论:白藜芦醇可抑制环境污染物苯并芘诱导的SZ95人皮脂腺细胞炎症因子IL-1α表达，该作用可能通过AhR和p38MAPK通路所介导。

目的:采用网络药理学和分子对接探讨泽兰能否替代泽泻治疗心力衰竭。方法:利用TCMSP筛选泽兰及泽泻有效成分，通过SwissTargetPrediction数据库预测有效成分潜在靶点。通过GeneCards、OMIM、DisGeNET数据库收集心力衰竭相关靶点，利用Venny 2.1.0构建泽兰/泽泻与心力衰竭的交集靶点韦恩图，用STRING数据库构建交集靶点PPI网络，Cytoscape 3.9.1软件筛选得到泽兰/泽泻治疗心力衰竭的关键靶点，并构建“成分-交集靶点”网络。使用Metascape对交集靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析。采用分子对接技术评价活性成分与关键靶点的亲和力。结果:泽兰主要作用于HMGCR、CYP27B1等关键靶点，而泽泻作用靶点更为广泛，如PPARA、JAK2等。两者共有关键靶点包括HMGCR、ESR1等，主要参与胆固醇合成、类固醇激素合成等生物学机制。富集通路分析显示，两者在类固醇代谢等方面具有共性，而泽泻更倾向通过调节蛋白磷酸化、调控PI3K-Akt信号通路等治疗心力衰竭，泽兰治疗心力衰竭特有靶点CHRM4，显示出泽兰治疗心力衰竭的特有机制可能为调节血压、心肌保护等。结论:泽兰和泽泻在心力衰竭治疗中具有一定共性，但泽泻作用于更多靶点和信号通路，因此可能具有更广泛的药效。鉴于泽泻的肾毒性，建议治疗心力衰竭合并肾功能不全、早期心力衰竭方面可考虑以泽兰替代泽泻。

目的:分析21-羟化酶缺陷症（21-OHD）患者血脂异常发生情况及其相关因素。方法:纳入2016年1月至2018年1月于北京协和医院就诊的205例21-OHD患者。由病历资料获得患者基本情况、糖皮质激素替代治疗情况和实验室检查结果等，采用Sanger测序和多重连接探针扩增技术进行CYP21A2基因分型。描述21-OHD患者血脂异常情况、不同血脂状态21-OHD患者基本情况和相关激素水平，采用logistic回归模型分析21-OHD患者血脂异常相关因素。结果:205例21-OHD患者年龄［岁， M（ Q1， Q3）］为17.0（8.3，25.0），其中男51例（24.9%）。根据CYP21A2基因分型，Null组16例，A组26例，B组105例，C组27例，D组31例。血脂异常发生率为29.3%（60/205），男女血脂异常发生率分别为37.3%（19/51）和26.6%（41/154）。血脂异常的男性21-OHD患者血总皮质醇水平［nmol/L， M（ Q1， Q3）］为0.17（0.06，0.35），体质指数［kg/m 2， M（ Q1， Q3）］为25.76（17.01，30.45），均高于血脂正常者［分别为0.04（0.02，0.21）和18.83（16.53，23.88）］， P值均<0.05。血脂异常的女性21-OHD患者孕酮水平（nmol/L）、体质指数（kg/m 2）和年龄（岁）［ M（ Q1， Q3）］分别为74.40（50.97，98.52）、23.09（21.78，27.78）和23.00（16.50，28.00），均高于血脂正常组［分别为52.81（33.41， 68.85）、21.55（18.63，25.71）和18.00（9.50，25.00）］， P值均<0.05。孕酮每升高1 nmol/L，血脂异常的风险增加5.0%［ OR（95% CI）：1.05（1.01，1.09）］。 结论:21-OHD患者血脂异常发生率较高，孕酮水平与血脂异常有关。

目的:探讨女性血清维生素D水平与早期自然流产的关系，并探索维生素D的作用机制。方法:本研究采用病例对照研究，选择2018年3月至2019年12月期间在桐庐县第一人民医院就诊的52例自然流产女性为研究组，因非意愿妊娠要求终止早期妊娠的患者50例作为对照组，育龄期非妊娠状态的女性体检者40例作为正常组，比较三组患者血清中维生素D 3、钙离子及甲状旁腺激素（PTH）的浓度，收集研究组和对照组人工流产后的绒毛组织及蜕膜组织，采用RT-PCR检测维生素D受体（VDR）及1a-羟酶（ CYP27B1基因编码）的mRNA表达量，以免疫组织化学法定位并检测两者的蛋白相对表达量。 结果:研究组血清中维生素D 3浓度［12.4（10.1，17.2） μg/L］均低于对照组［16.7（13.5，21.9） μg/L ， P<0.000 1］和正常组［18.9（15.6，26.4） μg/L， P=0.005 6］，而血清中钙离子和PTH浓度组间差异均无统计学意义（ P>0.05）。在蜕膜组织中，研究组的 VDR mRNA［0.871 3（0.668 6，1.085 7）］及蛋白表达量［3.0（2.5，4.0）］较对照组的 mRNA［1.102 7（0.897 7，1.357 1）］及蛋白表达量［4.5（3.5，5.5）］降低，且差异有统计学意义（ P=0.000 3； P<0.000 1），而 CYP27B1 mRNA及蛋白表达量与对照组相比有下降趋势，但差异无统计学意义（ P>0.05）。在绒毛组织中，研究组和对照组相比，无论是 VDR还是 CYP27B1的mRNA及蛋白表达量差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:女性早期自然流产可能与低血清维生素D水平有关，低浓度维生素D主要通过下调蜕膜组织中的VDR表达导致早期自然流产的发生。

目的 探讨老年慢性心力衰竭(CHF)患者肺部感染与25ohd-2c3-1α羟化酶(CYP27B1)基因多态性的关联及血清胆碱酯酶(CHE)、心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)、钙结合蛋白(S100A12)水平表达意义.方法 选取浙江省安吉县人民医院2020年7月—2023年7月收治的老年CHF患者114例,根据肺部感染情况分为感染组/未感染组(26例/88例);分析两组临床资料和病原菌分布情况;分别采用丁酰硫代胆碱法和酶联免疫吸附法检测CHE、H-FABP、S100A12水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析三者对老年CHF患者肺部感染的诊断价值;采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)检测两组患者CYP27B1基因多态性.结果 老年CHF患者肺部感染患者分离出37株病原菌,多为革兰阴性菌;感染组血清CHE水平比未感染组低(P＜0.05),血清H-FABP、S100A12水平比未感染组高(P＜0.05);绘制ROC曲线获得CHE、H-FABP、S100A12联合检测诊断老年CHF患者肺部感染的曲线下面积(AUC)比各项单独检测高(P＜0.05),敏感度88.50％,特异度78.40％;感染组CYP27B1-1260位点AA基因型频率和A等位基因频率与未感染组比更低(P＜0.05),CC基因型频率和C等位基因频率与未感染组比更高(P＜0.05).结论 老年CHF患者肺部感染发生率较高,多为革兰阴性菌感染,且感染发生后血清CHE呈低表达,H-FABP、S100A12呈高表达,联合检测CHE、H-FABP、S100A12有助于诊断老年CHF患者肺部感染,CYP27B1基因多态性可能参与老年CHF患者肺部感染.

目的 探讨25-OH维生素D(25-OH vitamin D,25-OH-VD)对新生儿感染性肺炎(neonatal infectious pneumonia,NIP)的抗炎作用及其作用机制.方法 选取2022年1月～2023年1月成都市妇女儿童中心医院收治的65例NIP患儿,根据病情严重程度,分为轻症组(n=34)和重症组(n=31),另选取同期60例健康新生儿为对照组.通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清25-OH-VD,白细胞介素-2(inteleukin-2,IL-2)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和IL-1β水平;蛋白免疫印迹法检测外周血单个核细胞中维生素 D 受体(vitamin D receptor,VDR)、细胞核转化生长因子 β(transforming growth factor β,TGF-β)/Yes相关蛋白(nucleus-Yes-associated protein,n-YAP)和细胞核转录共激活因子 PDZ 结合基序(nucleus-transcriptional co-activator with PDZ-binding motif,n-TAZ)通路相关蛋白表达.脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激人肺上皮细胞构建NIP体外模型,分为Control组、LPS组和LPS+VD组;CCK-8检测细胞活力;qRT-PCR检测各组细胞中细胞色素P450家族成员28B1(recombinant cytochrome P450 27B1,CYP27B1)和VDR的mRNA表达;免疫细胞化学法检测各组细胞YAP阳性细胞核数;免疫荧光检测各组细胞YAP/TAZ复合物核转位;蛋白免疫印迹法检测各组细胞炎性因子相关蛋白表达.结果 与对照组相比,轻症组和重症组患儿血清中IL-2(1.91±0.18 μg/L,2.63±0.27 μg/Lvs 1.05±0.12 μg/L),IFN-γ(1.73±0.13 μg/L,2.18±0.19 μg/Lvs 1.03±0.07 μg/L),TNF-α(1.79±0.08 μg/L,2.38±0.13 μg/L vs 0.97±0.04μg/L)和 IL-1β(2.18±0.07 μg/L,2.59±0.11 μg/L vs 0.96±0.02 μg/L)含量以及 TGF-β(1.67±0.21,2.43±0.42 vs 1.02±0.04),n-YAP(2.08±0.11,4.23±0.37 vs 0.99±0.02)和 n-TAZ(2.47±0.42,4.21±0.58 vs 1.03±0.05)蛋白表达逐渐升高,25-OH-VD(12.57±2.21 μg/L,7.85±2.03μg/L vs 16.76±1.02 μg/L)含量和 VDR(0.73±0.09,0.51±0.06 vs 1.03±0.08)蛋白表达逐渐降低,差异具有统计学意义(F=18.983～56.782,均P＜0.001).细胞实验结果显示,与 Control 组相比,LPS 组细胞存活率在 12h(76.23％±0.73％vs 116.72％±2.14％),24 h(57.23％±0.94％vs 125.76％±1.67％)和 48 h(41.23％±0.56％vs 138.56％±1.35％)时显著降低(t=10.342,26.562,37.821);YAP 阳性细胞数(47.35±3.47 个 vs 12.46±1.34 个)和 YAP/TAZ 复合物核转位率(2.56％±0.32％vs 1.01％±0.06％)升高(t=46.362,26.921);IL-2(2.03±0.09 vs 1.03±0.08),IFN-γ(2.07±0.21 vs 1.02±0.04),TNF-α(2.18±0.11 vs 0.99±0.02)和 IL-1β(3.17±0.42 vs 1.03±0.05)的蛋白表达水平升高(t=28.341,26.713,31.235,47.823),差异具有统计学意义(均P＜0.001),而两组间CYP27B1和VDRmRNA表达差异无统计学意义(t=0.872,0.786,均P＞0.05).与 LPS 组比较,LPS+VD 组在 12 h(85.23％±0.36％),24 h(79.82％±0.63％),48 h(76.28％±0.72％)的细胞存活率和CYP27B1(4.42±0.14),VDRmRNA(5.13±0.56)表达升高,YAP阳性细胞核数(24.41±3.23个)和 YAP/TAZ 复合物核转位率(1.47％±0.26％)降 低,IL-2(1.21±0.06),IFN-γ(1.13±0.42),TNF-α(1.03±0.37)和 IL-1β(1.61±0.58)蛋白表达降低,差异具有统计学意义(t=7.263,19.892,23.145,27.872,26.982,14.762,13.623,18.273,25.314,27.873,22.134,均 P＜0.01).结论 血清 25-OH-VD 水平与 NIP 严重程度相关,外源性给予VD补充可通过调控TGF-β介导的YAP/TAZ核转位机制发挥抗炎作用,减轻NIP损伤.