目的:对水蛭活性肽进行纯化,并对水蛭活性肽进行树脂纯化条件考察.方法:采用DA201-C大孔吸附树脂进行极性分离,后经D201阴离子交换树脂进行电荷分离,最终得到纯化的水蛭活性肽组分.结果:DA201-C大孔树脂,上样肽浓度20 mg·mL-1,流速1.0 BV·h-1,依次用25％乙醇、50％乙醇和75％乙醇溶液洗脱,各洗脱部位得率及活力较高,但总体活性成分被分散,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH4.0,上样肽浓度30 mg·mL-1,流速3.0BV·h-1,分别用2.5％氯化钠的25％乙醇、2.5％氯化钠的50％乙醇、2.5％氯化钠的75％乙醇溶液洗脱,2.5％氯化钠的25％乙醇和2.5％氯化钠的50％乙醇洗脱部位有明显的抗凝活性,经过分析性RP-HPLC验证后,基线平稳,各组分分离度良好.结论:经DA201-C大孔树脂和D201离子交换树脂纯化后的水蛭活性肽,2.5％氯化钠的25％乙醇和2.5％氯化钠的50％乙醇洗脱部位活力较高,分离度好.

研究马甲子中五环三萜类化合物白桦脂酸、马甲子素的大孔吸附树脂纯化工艺.以白桦脂酸、马甲子素为指标,通过对10种大孔树脂(DA201、AB-8、D1400、D4020、NKA-9、HPD100、HPD700、H130和X-5)的静态、动态饱和吸附量和解析率实验筛选适宜的大孔树脂,并优化纯化工艺.工艺条件:马甲子素、白桦脂酸浓度分别为16.07、1023 μg/mL,上样体积为1000 mL(上样量为0.4 g/g,醇提物/干树脂),洗脱剂为85％乙醇,用量为900 mL,洗脱速度为3 mL/min.经树脂纯化后马甲子素的含量提高了8倍,白桦脂酸的含量提高了5倍,色素等杂质含量大大降低.大孔吸附树脂纯化后的马甲子提取物,其Hep-G2、AGS细胞的IC50分别为30.79±8.49、8.75±2.83 mg/L.本纯化工艺条件合理,适用于马甲子五环三萜类有效成分的纯化富集.

目的 研究决明子总蒽醌的大孔吸附树脂纯化工艺.方法 比较4种大孔吸附树脂(D-101、AB-8,DM-301,DA-201)对总蒽醌的吸附、解吸性能,筛选上样液质量浓度、体积流量,以及洗脱剂种类、用量.结果 AB-8型大孔吸附树脂的吸附、解吸性能最强.最佳条件为上样液质量浓度(以总葸醌计)0.65 mg/mL,最大上样量2.23 mg/g(总蒽醌/树脂),吸附体积流量1.0 mL/min,先用去离子水和20％乙醇除杂,再用10倍量80％乙醇洗脱,体积流量1.0 mL/min,浓缩干燥后得到含总蒽醌20％左右的干浸膏.结论 AB-8型大孔吸附树脂对决明子总蒽醌具有较好的纯化作用.

目的:采用3种大孔树脂对地龙酶解液进行纯化,筛选出最佳纯化树脂,并建立最佳纯化方法.方法:采用双酶酶解方法对地龙进行酶解得到地龙酶解液,同时对DA201-C、AB-8、D101 3种大孔树脂进行考察,得到最佳吸附树脂,同时对树脂进行系统考察得到最佳吸附条件.结果:通过考察得出3种树脂的吸附率顺序为DA201-C＞AB-8＞D101,说明DA201-C树脂对地龙酶解液活性肽吸附效果最佳,同时对DA201-C树脂进行静态和动态吸附考察,得出最佳吸附条件为:酶解液浓度为20 mg/mL,调节pH至6.0,以2 BV/h的流速往DA201-C树脂上上样,以A220nm＞0.10为上样终点,静态吸附3h,最终有效成分吸附率为89.65％.结论:采用DA201-C树脂对地龙酶解液进行处理方法科学合理,利于后期实验进行.

厌氧己酸发酵作为一种新型的有机废弃物资源化生物处理技术极具发展前景,但发酵体系中存在的己酸毒性限制了其生产强度.本研究利用离子交换树脂选择性吸附厌氧发酵液中的己酸,缓解对产己酸微生物的毒性,提高了己酸产率.首先采用静态吸附法对比5种树脂的吸附性能,选取了D201阴离子交换树脂,优化并确立了该树脂对己酸的解吸条件为30℃、1.0 mol/L NaOH洗脱液.然后将该树脂应用于实际己酸发酵过程,考察其对己酸合成的作用效能.结果 发现,D201阴离子交换树脂可以有效分离发酵体系中的己酸,显著提高了己酸的持续合成能力.发酵液中最高己酸浓度达到17.31 g/L,显著优于对照组的12.43 g/L;最高己酸累积产量是对照组的2.3倍,达到29.09 g/L.

目的:比较不同阴离子交换树脂对人参总皂苷的吸附和洗脱性能,阐明其吸附/洗脱机制,建立适合人参总皂苷纯化的阴离子交换树脂方法.方法:以比吸附量、比洗脱量、洗脱率和回收率为指标,考察5种大孔树脂(D301,D315,D312,D330,D201)的吸附/洗脱特性.利用拟一级、拟二级动力学模型,以及Langmuir和Freundlich等温吸附模型对优选树脂和D101型大孔树脂的吸附动力学和热力学过程进行研究,阐明阴离子交换树脂与常规大孔树脂之间的吸附机制差异.通过动态吸附/洗脱试验优选阴离子交换树脂柱色谱纯化工艺参数并进行验证试验,通过液质联用法(LC-MS)对纯化前后9种单体人参皂苷类成分进行定性和定量分析.结果:D301型阴离子交换树脂明显优于其他4种阴离子交换树脂,最佳工艺条件为上样液pH 8,上样体积2 BV,上样流速4 BV·h-1,用水和20％乙醇各3 BV洗脱杂质,加80％乙醇8 BV洗脱,洗脱流速4 BV·h-1.经D301型树脂纯化后,9种单体人参皂苷类成分的富集系数均得到了不同程度的提高,整体富集系数达5.3,整体回收率80.9％,人参总皂苷纯度也从粗提物的17.07％提高至91.19％.结论:D301型阴离子交换树脂纯化人参总皂苷的方法简便可行,实现了从人参药材中一维柱色谱富集高纯度人参总皂苷的目的.

离子交换树脂因具有吸附率高、选择性高等优点常被用于有机酸的原位分离.本文首先筛选了对富马酸具有较高吸附能力的D201树脂作为吸附树脂,然后进一步探究了pH和温度的影响.结果 发现:D201树脂对富马酸离子形式的吸附能力从大到小顺序为HFA-、FA2-、H2FA;且HFA-吸附到树脂上仅占据一个吸附位点,FA2-可能占据两个吸附位点,吸附位点利用率降低;分子形式的H2FA通过疏水相互作用被吸附到树脂骨架上;吸附过程属于吸热反应(△H＞0),升温有助于吸附.对解吸条件进行了优化,最佳的解吸条件是NaCl为解吸剂,解吸浓度1 mol/L,解吸体积10 mL,解吸时间20 min,此条件下解吸率达到89.6％.通过重复实验证明了D201树脂具有较高的重复利用率.最终证明了D201树脂可以被用于富马酸的分离,为进一步的原位回收奠定了基础.