目的 探讨DJ-1(Park7)在脑缺血再灌注损伤中的抗氧化作用及相关机制.方法 构建SD大鼠大脑缺血再灌注损伤模型,将SD大鼠随机分为假手术组、MCAO组、Scramble组和DJ-1 siRNA组、NC组和Overexpression组.通过DJ-1 siRNA干扰片段干扰DJ-1的表达,以及DJ-1过表达腺相关病毒载体过表达DJ-1的表达.通过测定MCAO/R后各组神经功能学评分和脑含水量,同时应用HE和Nissl染色法评估脑组织的形态学变化和皮层梗死区神经元的损伤情况,评价DJ-1对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用.用超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)分析脑组织氧化应激状态.免疫印迹法检测脑组织中DJ-1, Nrf2,HO-1以及NQO1的表达水平,以及免疫荧光染色法观察Nrf2的表达及核转位情况,探讨DJ-1减轻大鼠脑缺血再灌注氧化应激损伤的可能机制.结果 与MCAO组相比,DJ-1 siRNA组的神经功能学评分(P＜0.001)、脑含水量(P＜0.001)均明显增加;HE和Nissl染色显示脑缺血区神经元损伤进一步加重;SOD含量进一步降低,MDA含量进一步增加(P＜0.001);干扰DJ-1后,其蛋白水平明显降低(P=0.003),同时Nrf2及其下游的HO-1和NQO1也明显降低(P＜0.001).而过表达DJ-1以后,其DJ-1 (P=0.006)、Nrf2(P=0.006)及其下游的HO-1(P=0.004)和NQO1明显增加(P=0.014).结论 DJ-1作为体内重要的神经保护因子,可以减少大鼠脑缺血再灌注氧化应激损伤,并可能是通过激活Nrf2信号通路来实现的.

目的 探讨北柴胡Bupleurumchinense地上部分多糖组分(polysaccharides from aerial parts of B.chinense,ABP)对戊四唑致痫小鼠的预防作用及作用机制.方法 C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、丙戊酸钠(125mg/kg)组、癫痫宁片(1200mg/kg)组和ABP高、低剂量(100、25mg/kg)组,每组10只.各给药组ig相应药物,对照组和模型组ig等体积0.5％羧甲基纤维素钠溶液,1次/d,连续7d.末次给药后60min,除对照组外,其余各组ip戊四唑(60mg/kg).通过行为学评价ABP预防癫痫的作用;采用苏木素-伊红(HE)染色、免疫组化法检测海马神经元病理形态学变化;采用ELISA法测定海马组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,Caspase-3)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、谷氨酸脱羧酶 65(glutamic acid decarboxylase 65,GAD65)、GAD67、G 蛋白偶联的内向整流钾通道 1(G protein gated inwardly rectifying K channels 1,GIRK1)、N-甲基-D-天冬氨酸受体 1(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDAR1)、γ-氨基丁酸 A 型受体(γ-aminobutyric acid type A,GABA AR)水平;采用 Western blotting 检测海马组织中 DJ-1、特异性蛋白 1(specificity protein 1,SP1)、p-SP1、核因子 E2 相关因子 2(nuclear factor erythroid 2-relatedfactor 2,Nrf2)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白表达.采用过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导的PC12细胞氧化应激模型进行验证.结果 与模型组比较,ABP明显改善小鼠癫痫症状,表现为躯体僵直率和死亡率降低等(P＜0.01);海马锥体细胞排列规则,结构清晰,GFAP阳性表达面积明显降低;显著降低海马组织中Caspase-3、GFAP、GAD65、GAD67、GIRK1及NMDAR1水平(P＜0.01),升高GABAAR水平(P＜0.01);显著下调癫痫小鼠海马组织和H2O2诱导的PC12细胞中DJ-1、p-SP1、Nrf2及HO-1蛋白表达(P＜0.01).结论 ABP可以减轻癫痫发作期间DJ-1/Nrf2/HO-1介导的癫痫氧化应激,从而发挥预防癫痫的作用.

目的 探究红景天注射液对帕金森病患者治疗效果及血清DJ-1/核因子相关因子2(Nrf2)通路相关氧化应激指标的影响.方法 前瞻性选取2021年6月至2022年6月来河北北方学院附属第一医院治疗的120例帕金森病患者作为研究对象,按照随机数字表法将患者分为研究组与对照组,每组各60例.对照组患者接受常规抗帕金森病治疗,研究组患者在此基础上联用红景天注射液治疗,连续治疗4周.比较两组患者的临床疗效,治疗前、治疗后4周的氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)、DJ-1蛋白、Nrf2],治疗前、治疗后4个月的帕金森病综合症状、生活质量情况,并观察两组患者不良反应发生情况.结果 治疗后,观察组患者的治疗有效率为96.61％,明显高于对照组(83.05％),差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后4周,观察组患者血清SOD、GSH-Px、Nrf2 水平分别为(44.27±2.19)U/mL、(44.12±6.72)U/L、(669.68±87.23)U/L,均明显高于对照组[(31.29±2.97)U/mL、(40.82±4.12)U/L、(602.09±52.31)U/L],而血清丙二醛、DJ-1 蛋白水平分别为(2.27±0.86)nmol/mL、(7.08± 2.19)μg/L,均明显低于对照组(3.69±1.15)nmol/mL、(10.92±1.29)μg/L,差异均有统计学意义(P＜0.05).治疗后4个月,观察组患者的UPDRS评分为(46.23±2.34)分,明显低于对照组[(63.28±1.93)分],差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后4个月,观察组患者的生理功能、躯体功能、社会功能、心理状态、情感功能5个方面的评分分别为(73.12±5.22)、(78.23±2.34)、(81.23±2.13)、(88.29±3.91)、(86.39±3.23)分,均明显高于对照组[(53.13± 6.48)、(59.28±4.92)、(69.24±5.91)、(71.23±2.03)、(71.13±3.25)分],差异均有统计学意义(P＜0.05).治疗后,观察组患者不良反应发生率为8.47％,明显低于对照组(23.73％),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在常规抗帕金森病治疗基础上,采用红景天注射液治疗帕金森病可明显提高患者的临床疗效,抑制DJ-1/Nrf2通路相关氧化应激反应,改善帕金森病症状,提高患者生活质量,降低不良反应发生率.

目的:探讨红景天注射液与丁苯酞注射液对帕金森患者血清DJ-1/Nrf2通路相关氧化应激指标的差异.方法:本研究为前瞻性研究,以河北北方学院附属第一医院2020年8月-2022年9月住院治疗的帕金森患者120例作为研究对象,按照随机分组原则,将以上患者随机分为研究组以及对照组,所有患者均采取丁苯酞注射液治疗.研究组患者在此基础上联合采取红景天注射液治疗,连续治疗2周.比较两组患者的治疗效果、氧化应激反应指标、炎性指标、DJ-1/Nrf2通路指标之间的差异.结果:相比对照组(91.67％)而言,研究组(78.33％)患者的治疗的总有效率显著升高(x2=4.181,P=0.000);经过治疗后,两组患者的SOD、MDA显著改善,且研究组患者的SOD显著高于对照组,MDA显著低于对照组;研究组患者的IL-1β(t=16.132,P=0.000)、TNF-α(t=3.750,P=0.000)以及IL-6(t=2.515,P=0.013)显著低于对照组;两组患者的DJ-1以及Nrf2水平均显著上升,且研究组患者的DJ-1以及Nrf2水平显著高于对照组.结论:帕金森患者采取红景天注射液与丁苯酞注射液进行治疗,患者的血清DJ-1/Nrf2通路相关氧化应激指标得到显著的改善,治疗效果显著.

目的:考察蛋白DJ-1(DJ-1)/稳定核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)在精索静脉曲张相关性弱精症患者生精细胞氧化应激中的表达及意义.方法:收集本院2021年12月—2023年12月收治的120例确诊为精索静脉曲张相关性弱精症的男性患者临床资料,60例为新诊断患者纳入新诊断病例组,60例为接受维生素C联合维生素E治疗3个月的患者纳入病例治疗组;同期婚前健康检查健康男性40例为对照组.检测3组精液生精细胞形态、精液生精细胞的DJ-1、Nrf2蛋白及mRNA,外周血氧化应激[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)]、DJ-1、Nrf2.结果:3组年龄、体质指数、精液体积及精子尾部畸形率均无差异(P＞0.05);对照组、病例治疗组、新诊断病例组精子正常形态依次降低,精子头畸形率、体畸形率、头体环合畸形率依次增高,生精细胞DJ-1(0.35±0.11、0.71±0.16、0.89±0.12)、Nrf2 蛋白(0.31±0.09、0.62±0.14、0.78±0.13)及 mRNA 均依次增高,血清 MDA、DJ-1、Nrf2依次增高,SOD、GSH-Px依次降低(均P＜0.05).结论:激活DJ-1/Nrf2通路有助于增强精索静脉曲张相关性弱精症生精细胞的抗氧化能力,保护细胞免受由氧化应激引起的损伤,DJ-1/Nrf2通路或是精索静脉曲张相关性弱精症的治疗的潜在分子靶点.

[背景]pORF5质粒蛋白是沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)的重要毒力因子,具有抑制细胞氧化应激和凋亡的作用.[目的]探讨pORF5是否通过上调DJ-1蛋白激活核因子红细胞2相关因子 2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/醌氧化还原酶 1[NAD(P)H:quinone oxidoreductasel,NQO1]信号通路调控脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的细胞氧化应激与凋亡.[方法]用不同浓度的pORF5质粒蛋白以不同时间刺激HeLa细胞,Western blotting检测DJ-1蛋白表达情况;采用活性氧(reactive oxygen species,ROS)试剂盒、流式细胞术检测pORF5对LPS诱导的细胞氧化应激和凋亡的影响;利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰HeLa细胞DJ-1蛋白表达,用荧光显微镜观察细胞内ROS荧光强度,用试剂盒检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量变化;用Nrf2特异性抑制剂(ML385)预处理细胞1 h,pORF5单独或与LPS共刺激细胞后,分析凋亡相关蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、B 细胞淋巴瘤因子 2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白表达水平;利用 Western blotting分析干扰DJ-1蛋白表达对Nrf2/NQO1信号通路的影响.[结果]pORF5可上调DJ-1蛋白表达,并且最佳刺激浓度和时间分别为10 μg/mL和18 h;pORF5质粒蛋白可显著减弱LPS诱导的ROS荧光强度及细胞凋亡率(P＜0.001);si-DJ-1组中ROS荧光强度增强,MDA含量增多(P＜0.001),SOD活性下降(P＜0.001);ML385能抑制pORF5诱导的Nrf2、NQO1蛋白表达(P＜0.001),上调促凋亡蛋白Bax表达(P＜0.05),下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达(P＜0.01);si-DJ-1组中Nrf2及NQO1的表达明显降低(P＜0.001,P＜0.01).[结论]pORF5质粒蛋白可通过上调DJ-1蛋白激活Nrf2/NQO1信号通路抑制LPS诱导的细胞氧化应激与凋亡.