目的:通过降低斑马鱼接触蛋白相关蛋白基因2（contact protein-related protein gene 2, cntnap2）表达，建立注意缺陷多动障碍（attention-deficit/hyperactivity disorder，ADHD）遗传模型。方法:以注射剪接抑制型吗啉代寡聚核糖核酸降低cntnap2表达的斑马鱼作为实验组（ n=48），注射随机寡核苷酸片段的斑马鱼作为对照组（ n=48)，通过原位杂交观察斑马鱼神经递质系统相关基因th、dbh、gad1b、glyt2、vglut2表达的变化，使用实时荧光定量PCR检测神经递质系统及神经元发育相关基因表达量变化。使用斑马鱼行为轨迹跟踪系统记录（Noldus行为仪）检测cntnap2表达降低后多动/冲动行为及托莫西汀对多动/冲动行为的改善作用。 结果:原位杂交实验结果显示实验组较对照组神经递质系统相关基因dbh表达减少，gad1b表达增加；th、glyt2、vglut2表达未见明显差异。实时荧光定量PCR显示实验组较对照组神经递质系统相关基因dbh表达降低（ t=5.772， P=0.005），snap25、dat、gad1b表达增高（ t=14.310、22.210、22.090,均 P<0.01）；神经元发育相关基因shha、epha4b、netrin1b、noi及神经递质系统相关基因drd4、th、vglut2、glyt2表达差异均无统计学意义。6 dpf时药物未处理实验组较药物未处理对照组幼鱼游动总距离长 ［143.12(98.56, 212.22) cm 与99.03(80.54, 133.96) cm， Z=-3.547， P<0.01］，平均游动速度快［0.050(0.041, 0.067) cm/s与0.033(0.025, 0.042) cm/s, Z=-5.495， P<0.01］；经托莫西汀处理后，实验组药物处理较药物未处理幼鱼游动总距离减少［106.59(95.28, 120.10) cm与143.12(98.56, 212.22) cm, Z=-3.591， P<0.01］，平均游动速度减慢［0.031(0.028, 0.037) cm/s与0.050(0.041, 0.067) cm/s， Z=-7.035， P<0.01］。 结论:cntnap2表达降低斑马鱼可通过改变dbh、snap25、dat、gad1b表达量而产生多动/冲动表型，托莫西汀可有效缓解多动/冲动表型，cntnap2表达降低斑马鱼可作为ADHD遗传模型。

肺癌已成为国内发病率和致死率均排首位的恶性肿瘤 [1]。靶向免疫治疗是近年的研究热点 [2]。酪氨酸受体激酶家族被认为在肿瘤细胞的粘附、迁移、增殖及肿瘤新生血管形成过程中起着关键作用 [3]，尤其肝配蛋白A型受体2(ephrin type-A receptor 2, EphA2)及其配体，是目前该领域的焦点 [4]。前期研究发现， 99Tc m借助螯合剂联肼尼克酰胺(hydrazinonicotinamide, HYNIC)标记的SWLAYPGAVSYRK(SWL)—— 99Tc m-HYNIC-SWL，可作为非小细胞肺癌潜在的显像剂 [5]，且有研究表明SWL-Ahx-k-SWL(SLW2)与EphA2的结合能力是SWL的13倍 [6]，故本研究采用 125I对SWL2进行标记，探讨其药代动力学及活体生物分布，并验证活体显像的可行性。

目的:探讨血清甲胎蛋白（AFP）升高伴肠母细胞分化胃腺癌（GAED）患者的免疫表型和分子生物学特征。方法:收集2018—2020年山西省肿瘤医院收治的13例血清AFP升高且伴有GAED患者的临床病理资料，应用免疫组织化学（IHC）及二代测序方法对13例血清AFP升高伴GAED患者的病理组织进行免疫标志物和分子生物学特征分析，生存分析采用Kaplan-Meier法和Log rank检验。结果:13例GAED患者中，男12例，女1例，年龄41～70岁，中位年龄64岁，病灶位置以胃窦部（5例）、胃体部（4例）为主。IHC显示可表达瘤胚胎蛋白（AFP、SALL4、GPC3）、肠上皮分化蛋白（CDX-2、CD10）和一些原始肠上皮表型标志物（OCT3/4、Claudin6），联合应用多种标志物诊断可降低漏诊率。13例患者中，12例存在至少1个基因突变（1个基因突变：1例，2～5个基因突变：3例，6～15个基因突变：8例），1例未检测到突变。突变频率最高的基因是TP53（10例），其他突变基因包括EPHB1（3例）、ATRX（2例）、EPHA5（2例）、GATA3（2例）、LRP1B（2例）和MAP2K4（2例）。13例患者中3例存在基因结构变异，分别为C14orf177-GNAS、AIM1-FGFR3、EPHA6-ROS1基因重排。13例患者均存在拷贝数变异，11例患者存在2个以上基因的拷贝数变异。常见的扩增基因为IRS2（5例）、PTEN（5例）、GNAS（4例）、CCNE1（3例）、CEBPA（3例）、PCK1（3例）、ERBB2（2例），常见的缺失基因为SOX2（5例）、MYC（5例）。13例患者中，死亡4例，死亡患者中有2例出现肝转移；无病生存患者4例，5例患者病情进展，其中3例出现腹腔转移，2例出现肝转移。血清AFP升高伴GAED患者3年生存率为65.9%，3年无进展生存率为30.7%。基因LRP1B点突变与预后不良有关（ P＜0.001）。行免疫治疗较单纯化疗的患者预后无明显改善（ P=0.595），但进行术后化疗或术后化疗加免疫治疗较只进行手术患者预后好（均 P＜0.05）。 结论:血清AFP升高伴GAED是一种具有高度侵袭性的肿瘤，有独特的分子特征，往往同时伴有多个分子事件，TP53突变是其最常见的基因突变类型，此外，部分患者伴有人表皮生长因子受体2扩增和基因重排。

目的:基于生物信息学分析方法探讨炎症基因THY1在胃癌中表达、预后价值及其与肿瘤免疫、上皮-间充质转化(EMT)的关系。方法:在癌症基因组图谱数据库(TCGA)中生成胃癌和正常组织数据集，筛选在胃癌中存在差异表达炎症相关基因，采用wilcoxon.test方法识别差异表达基因(DEGs)，校正后 P<0.05且表达变化超过1.5倍的基因被鉴定为DEGs，确定THY1进行研究。使用R软件的生存分析功能(survival)确定THY1表达的预后评估价值；应用Metascape数据库对THY1功能进行富集分析；在TIMER 2.0数据库研究THY1基因表达与免疫细胞丰度相关性；使用STRING数据库分析与THY1存在互相作用的蛋白质，分析蛋白互作(PPI)结果。取20例新鲜胃癌组织及癌旁组织，使用荧光实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各基因的mRNA水平。网络数据使用R软件进行生物信息学分析；组织的RT-qPCR检测结果采用配对样本的 t检验。 结果:162个炎症相关基因中，30个在胃癌组织中表达高于癌旁组织，32个低于癌旁组织( P<0.05)，选择THY1为研究基因。THY1在胃癌中表达水平(18.60±1.16)与正常组织(16.98±1.31)比较，差异有统计学意义( W＝10 017， P<0.01)；根据THY1中位数将患者分为高表达组与低表达组，Kaplan-Meier生存结果显示高表达组中位生存期明显短于低表达组( χ2＝5.62， P<0.05)。对THY1基因功能富集分析结果显示其功能与Ephrin受体信号通路、细胞黏附调节、白细胞介导的细胞毒反应等有关。THY1表达与T细胞CD4 ＋CD8 ＋丰度正相关。应用THY1表达的中位数将样本分组，应用wilcoxon.test识别DEGs并进行GSEA富集分析，结果显示DEGs富集到EMT和炎性反应过程。PPI结果显示，THY1蛋白与纤维连接蛋白1(FN1)、促红细胞生成素产生肝细胞受体A4(EPHA4)等蛋白质存在互作。对临床组织检测结果显示，THY1、FN1、EPHA4的mRNA表达在胃癌组织(4.668±3.449、8.382±2.093、1.647±0.294)均高于癌旁组织(1.005±0.398、1.026±0.131、0.759±0.125)，差异有统计学意义( t＝4.718、3.508、2.786， P<0.01)。 结论:THY1基因可能参与免疫反应及EMT过程促进胃癌进展，是新的胃癌治疗潜在靶基因。

目的:探索微小RNA(miRNA，miR)-7856-5p对EPH受体A3(EPHA3)基因表达的调控作用及对结直肠癌细胞SW480迁移和增殖的影响。方法:实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测结直肠癌组织和细胞系中miR-7856-5p的表达。脂质体转染法分别将miR-7856-5p模拟物和miR-NC转入结直肠癌细胞SW480，分别定义为miR-7856-5p组和miR-NC组。Real-time PCR检测转染效果。Transwell实验和CCK-8实验检测转染后细胞迁移和增殖能力。生物信息学软件预测和双荧光素酶报告基因系统验证miR-7856-5p的靶基因。Real-time PCR和Western blot检测转染后细胞中 EPHA3的表达。符合正态分布的计量资料以均数±标准差( Mean± SD)表示，组间比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:miR-7856-5p在结直肠癌组织的表达明显低于癌旁组织( P<0.01)。miR-7856-5p在结直肠癌细胞系的表达明显低于正常肠黏膜上皮细胞( P<0.05)，在SW480细胞中表达最低( P<0.01)。miR-7856-5p组miR-7856-5p的表达明显高于miR-NC组，差异有统计学意义[(9.49 ± 1.09)比(1.06 ± 0.18)， P<0.01]。miR-NC组和miR-7856-5p组迁移细胞数量分别为(125.70±14.05)个和(42.01±8.98)个，miR-7856-5p组细胞迁移能力明显下降( P<0.01)。与miR-NC组比较，miR-7856-5p组细胞增殖能力明显降低( P<0.05)。生物信息学软件显示miR-7856-5p的靶基因是 EPHA3。双荧光素酶报告基因系统证实miR-7856-5p可靶向结合 EPHA3基因( P<0.05)。与miR-NC组比较，miR-7856-5p组SW480细胞中 EPHA3的表达明显降低( P<0.05)。 结论:miR-7856-5p可通过靶向调控 EPHA3的表达，抑制结直肠癌细胞SW480的迁移和增殖能力。

目的:探讨环状RNA HECTD1(circ-HECTD1)是否通过调控miR-98-5p/酪氨酸蛋白激酶A4(EPHA4)的表达参与氧糖剥夺(OGD)诱导的神经元损伤。方法:体外分离培养小鼠原代皮层神经元，采用双荧光素酶报告基因实验、RNA结合蛋白免疫沉淀实验检测神经元中circ-HECTD1、miR-98-5p和EPHA4之间的靶向关系，并将神经元随机分为对照组（正常条件下培养24 h）与OGD 6 h、12 h、24 h组（予OGD处理6 h、12 h、24 h）以及OGD+Vector组与OGD+circ-HECTD1组、OGD+小干扰RNA(siRNA）阴性对照（si-NC）组与OGD+siRNA circ-HECTD1(si-circ-HECTD1)组、OGD+微小RNA(miRNA）模拟物阴性对照（miR-NC）组与OGD+miR-98-5p模拟物（miR-98-5p mimic）组、OGD+miRNA抑制物阴性对照（anti-miR-NC）组与OGD+miR-98-5p抑制物（anti-miR-98-5p）组、OGD+miR-98-5p mimic+pcDNA组与OGD+miR-98-5p mimic+EPHA4组、OGD+si-circ-HECTD1+anti-miR-NC组与OGD+si-circ-HECTD1+anti-miR-98-5p组，分别转染pCD5-ciR空载体、pCD5-ciR-circ-HECTD1过表达载体、si-NC、si-circ-HECTD1、miR-NC、miR-98-5p mimic、anti-miR-NC、anti-miR-98-5p至神经元，以及共转染miR-98-5p mimic和pcDNA3.1空载体、miR-98-5p mimic和pcDNA3.1-EPHA4过表达载体、si-circ-HECTD1和anti-miR-NC、si-circ-HECTD1和anti-miR-98-5p至神经元，OGD处理24 h后，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR）法检测circ-HECTD1、miR-98-5p和 EPHA4 mRNA表达，采用Western blotting实验检测EPHA4蛋白表达，采用MTT法检测细胞增殖活性，采用流式细胞仪检测细胞凋亡率，采用ELISA法检测细胞培养液中白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量，采用试剂盒法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛（MDA)活性。 结果:(1)circ-HECTD1能够与miR-98-5p靶向结合，miR-98-5p能够与EPHA4 3'翻译区靶向结合。(2)与对照组比较，OGD 6 h、12 h、24 h组神经元中circ-HECTD1表达均明显升高，miR-98-5p表达均明显降低，EPHA4蛋白表达均明显升高，差异均有统计学意义( P<0.05)。(3)与OGD+Vector组比较，OGD+circ-HECTD1组神经元中circ-HECTD1的表达明显升高，miR-98-5p的表达明显降低；与OGD+si-NC组比较，OGD+si-circ-HECTD1组神经元中miR-98-5p的表达明显升高，EPHA4 mRNA和蛋白的表达均明显降低；与OGD+miR-NC组比较，OGD+miR-98-5p mimic组神经元中miR-98-5p的表达明显升高，EPHA4蛋白的表达明显降低；与OGD+anti-miR-NC组比较，OGD+anti-miR-98-5p组神经元中miR-98-5p的表达明显降低，EPHA4蛋白的表达明显升高；与OGD+si-circ-HECTD1+anti-miR-NC组比较，OGD+si-circ-HECTD1+anti-miR-98-5p组神经元中EPHA4 mRNA和蛋白的表达均明显升高，差异均有统计学意义( P<0.05)。(4)与对照组比较，OGD组神经元的细胞活力明显降低，细胞凋亡率明显升高，IL-1β、TNF-α含量明显升高，SOD活性明显降低，MDA活性明显升高；与OGD+si-NC组比较，OGD+si-circ-HECTD1组神经元的细胞活力明显升高，细胞凋亡率明显降低，IL-1β、TNF-α含量明显降低，SOD活性明显升高，MDA活性明显降低；与OGD+si-circ-HECTD1+anti-miR-NC组比较，OGD+si-circ-HECTD1+anti-miR-98-5p组神经元的细胞活力明显降低，细胞凋亡率明显升高，IL-1β、TNF-α含量明显升高，SOD活性明显降低，MDA活性明显升高；与OGD+miR-NC组比较，OGD+miR-98-5p mimic组神经元的细胞活力明显升高，细胞凋亡率明显降低，IL-1β、TNF-α含量明显降低，SOD活性明显升高，MDA活性明显降低；与OGD+miR-98-5p mimic+pcDNA组比较，OGD+miR-98-5p mimic+EPHA4组神经元的细胞活力明显降低，细胞凋亡率明显升高，IL-1β、TNF-α含量明显升高，SOD活性明显降低，MDA活性明显升高，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:敲低circ-HECTD1后可通过靶向调控miR-98-5p/EPHA4的表达，从而改善OGD诱导的神经元损伤。

目的:分析肺腺癌合并肺栓塞患者的差异表达基因，探讨肺腺癌合并肺栓塞可能的发病机制。方法:前瞻性研究。采用RNA测序技术检测新疆医科大学附属肿瘤医院2019年1～12月肺腺癌合并肺栓塞患者、肺腺癌患者及肺栓塞患者(每组均4例)外周血中RNA表达，使用生物信息学分析肺腺癌合并肺栓塞组对比肺腺癌组及肺栓塞组的差异表达基因。经Excel软件取交集，筛选两对比组共同差异基因，利用Metascape在线工具对共同差异基因进行基因本体(GO)富集分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。结果:从两对比组差异基因中筛选出147个共同差异基因，其中80个上调差异基因，67个下调差异基因，其中 P值最小的前5个共同差异基因分别为：CD177、S100P、HP、EPHA4、PRTN3。GO分析显示共同差异基因主要富集于中性粒细胞活化、轴突发育、白细胞分化、防御反应的负调控等过程，KEGG富集分析显示共同差异基因主要参与代谢途径、肺结核、癌症途径、血小板活化等通路。 结论:CD177、S100P、HP、EPHA4、PRTN3等基因可能参与肺腺癌合并肺栓塞的发生，中性粒细胞活化、血小板活化等生物学过程及通路也可能与肺腺癌合并肺栓塞相关。

目的 探讨健脾化瘀方(人参、茯苓、白术、丹参等)通过TGF-β1/Smad7 通路对肝细胞癌上皮间质转化(EMT)及血管生成的调控作用.方法 (1)采用BALB/C-nu裸鼠建立Hep3B荷瘤小鼠模型,随机分为对照组及健脾化瘀方低、中、高剂量组(3.844、7.689、15.378 g·kg-1·d-1),每组 5 只.灌胃给药,每日 1 次,连续给药 21 d.(2)将Hep3B细胞分为空白组、造模组(10 ng·mL-1 TGF-β1)、低浓度组(10 ng·mL-1 TGF-β1+4 mg·mL-1健脾化瘀方)、高浓度组(10 ng·mL-1 TGF-β1+6 mg·mL-1 健脾化瘀方),TGF-β1 诱导 48 h后更换为相应浓度的健脾化瘀方完全培养液(0、4、6 mg·mL-1)继续培养 24 h.(3)将HUVEC细胞分为正常组、模型组、中药组、模型加中药组.正常组细胞用不含TGF-β1 的条件培养基培养;模型组细胞用含TGF-β1 的条件培养基培养;中药组细胞用含有 4 mg·mL-1 健脾化瘀方但不含TGF-β1 的条件培养基培养;模型加中药组细胞用含 4 mg·mL-1健脾化瘀方且含TGF-β1 的条件培养基培养.继续培养 24 h后收集细胞进行后续实验.(4)计算Hep3B荷瘤裸鼠皮下移植瘤的瘤质量指数和抑瘤率;采用免疫荧光法检测荷瘤裸鼠皮下移植瘤中CD31 的表达;免疫组化法检测荷瘤裸鼠皮下移植瘤的微血管密度;细胞划痕实验检测Hep3B细胞的迁移能力;Transwell实验检测Hep3B/HUVEC细胞的侵袭能力;检测HUVEC细胞小管形成能力;Western Blot法检测荷瘤裸鼠皮下移植瘤、Hep3B及HUVEC细胞中相关蛋白的表达水平.结果 (1)与对照组比较,健脾化瘀方中、高剂量组荷瘤裸鼠皮下移植瘤质量及瘤质量指数显著降低(P＜0.01);低、中、高剂量组荷瘤裸鼠皮下移植瘤中CD31 的表达量及微血管密度显著降低(P＜0.05,P＜0.01),VE-cadherin、EphA2、N-cadherin蛋白表达显著下调(P＜0.05,P＜0.01),E-cadherin、Smad7 蛋白表达显著上调(P＜0.01).(2)与空白组比较,造模组的Hep3B细胞的相对迁移率明显升高(P＜0.05),侵袭细胞数显著增加(P＜0.01);Vimentin、N-cadherin 蛋白表达显著上调(P＜0.01),E-cadherin、Smad7 蛋白表达显著下调(P＜0.01).与造模组比较,健脾化瘀方低、高浓度组Hep3B细胞的相对迁移率显著降低(P＜0.01),侵袭细胞数显著减少(P＜0.01);Vimentin、N-cadherin蛋白表达显著下调(P＜0.01),E-cadherin、Smad7 蛋白表达显著上调(P＜0.01).(3)与正常组比较,模型组HUVEC细胞形成的小管分支点数显著增多(P＜0.01),小管分支长度及侵袭细胞数显著增加(P＜0.01);VE-cadherin、EphA2蛋白表达显著上调(P＜0.01),Smad7 蛋白表达显著下调(P＜0.01).与模型组比较,模型加中药组HUVEC细胞形成的小管分支点数显著减少(P＜0.01),小管分支长度显著缩短(P＜0.01),侵袭细胞数显著减少(P＜0.01);VE-cadherin、EphA2 蛋白表达显著下调(P＜0.01),Smad7 蛋白表达显著上调(P＜0.01).结论 健脾化瘀方可明显抑制肝细胞癌的生长、侵袭与迁移,可能与通过调控TGF-β1/Smad7 通路介导的EMT及血管生成有关.

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织有丝分裂相关激酶2(NEK2)、促红细胞生成素产生肝细胞受体A5(EPHA5)表达情况,分析其与临床病理特征、表皮生长因子受体(EGFR)突变和预后的关系.方法:选取自2019年10月至2020年10月期间我院诊治的151例NSCLC患者作为研究对象,术中取其癌组织及癌旁正常组织(距离癌组织5cm以上).采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测EGFR基因表达.免疫组织化学法检测癌组织和癌旁组织中NEK2、EPHA5表达.比较癌组织和癌旁组织NEK2、EPHA5表达情况.分析不同临床病理特征NSCLC患者NEK2、EPHA5表达情况.分析EGFR突变型与野生型不同NEK2、EPHA5表达情况.Kaplan-Meier生存曲线分析不同NEK2、EPHA5表达对NSCLC患者的预后情况.结果:与癌旁组织比较,癌组织NEK2、EPHA5阳性表达率明显更高(均P＜0.05);与TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移和肿瘤直径＜5 cm患者相比,TNM分期ⅢA期、淋巴结转移和肿瘤直径≥5 cm患者的NEK2、EPHA5阳性表达率均明显更高(均P＜0.05);EGFR突变型组NEK2、EPHA5阳性表达率显著高于EGFR野生型组(均P＜0.05);NEK2阳性表达组和阴性表达组3年总生存率(OS)分别为40.40％(40/99),57.69％(30/52),EPHA5 阳性表达组和阴性表达组患者 3 年 OS 分别为 41.90％(44/105),56.52％(26/46),各阴性表达组患者累积生存显著高于阳性表达组(P＜0.05).结论:NSCLC癌组织中NEK2、EPHA5阳性表达率升高,与TNM分期ⅢA期、淋巴细胞转移、肿瘤直径有关,还可能导致EGFR突变和不良预后.

目的:探讨多瘤病毒增强活化子3（PEA3）及红细胞生成素产生肝细胞受体2（EPHA2）在脑胶质母细胞瘤中的表达及在Wnt/β-catenin信号通路的作用。方法:构建脑胶质瘤U87细胞基因转染模型，将细胞系分为5组：空白组、PEA3干扰组、PEA3干扰空载组、EPHA2干扰组、EPHA2干扰空载组，Western blotting实验检测细胞中EPHA2、PEA3的蛋白表达水平，细胞活力检测（CCK-8）实验检测PEA3、EPHA2对细胞增殖能力的影响，定量反转录聚合酶连锁反应（qRT-PCR）实验检测Wnt/β-catenin通路下游基因转录因子4（TCF-4）、淋巴细胞增强结合因子1（LEF1）表达水平。结果:Western blotting实验结果显示：与空白组相比，EPHA2在EPHA2干扰组中表达量降低，PEA3在PEA3干扰组和EPHA2干扰组中表达量降低，差异均具有统计学意义（P<0.05）；5组细胞Wnt1、β-catenin蛋白表达量比较，差异无统计学意义(P>0.05)。CCK-8实验结果显示，与空白组相比，PEA3干扰组和EPHA2干扰组的细胞增殖率明显下降，差异均有统计学意义（P<0.05）。qRT-PCR结果显示，TCF-4、LEF1基因在PEA3干扰组、EPHA2干扰组中表达量下降，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论:通过干扰PEA3和EPHA2基因可降低胶质母细胞瘤的增殖能力，但PEA3和EPHA2是否通过Wnt/β-catenin通路促进胶质母细胞瘤的增殖能力值得进一步研究证实。