目的:基于永离有丝分裂基因A相关激酶9(NEK9)/转移相关肿瘤基因家族2(MTA2)信号通路泛素化修饰探讨胃癌(GC)的转移机制.方法:使用癌症基因组图谱(TCGA)和Kaplan-Meier Plotter数据库分析NEK9表达与GC分期、预后之间的关联.体外实验中,将GC细胞分为:对照组、shNC 组、shNEK9 组、shNC+NC-OE 组、shNEK9+NC-OE 组和 shNEK9+MTA2-OE 组.分别采用 MTT 和Transwell法测定细胞的增殖、迁移和侵袭,并通过 Western blot检测 NEK9、MTA2、上皮间充质转化(EMT)标记和PI3K/AKT信号通路蛋白表达.结果:TCGA数据库分析显示,NEK9 mRNA在肿瘤组织中的表达明显上调,并且与TNM分期较晚和NEK9高表达者的预后较差密切相关.此外,NEK9在7个GC细胞系中的表达明显高于正常胃上皮GES-1细胞(P＜0.05).与对照组相比,shNEK9组细胞活力、相对集落形成、EdU阳性细胞数、侵袭和迁移细胞数均显著降低(P＜0.05).此外,在shNEK9组细胞中,E-钙粘蛋白水平上调(P＜0.05),波形蛋白水平下调(P＜0.05).通过免疫共沉淀试验证明NEK9与MTA2有相互作用.NEK9敲低加速了 HGC-27细胞中MTA2的降解,并且 MTA2泛素化在NEK9沉默的细胞中增加.与shNEK9+NC-OE组组相比,shNEK9+MTA2-OE组相对集落形成、EdU阳性细胞数和迁移和侵袭数均显著增加(P＜0.05).结论:NEK9在GC中明显上调,其敲低在体外抑制GC细胞的生长和转移.NEK9可能通过去泛素化途径稳定 MTA2进而激活PI3K-AKT信号通路来对GC细胞产生促癌影响.

目的:探讨中心体相关蛋白激酶2(NEK2)和高迁移率蛋白A2(HMGA2)在乳腺癌组织中的表达水平及其临床意义。方法:收集东阳市妇幼保健院2011年1月至2019年6月收治的79例乳腺癌组织和癌旁组织标本应用免疫组织化学法检测NEK2和HMGA2的表达水平，组间比较采用 χ2检验。 结果:乳腺癌组织中的NEK2表达率为70.89%(56/79)，明显高于癌旁组织NEK2表达率24.05%(19/79)，差异有统计学意义( t＝34.747， P<0.01)；NEK2表达水平与乳腺癌组织学分级、肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移明显相关( t＝8.985、7.429、8.871、7.221， P<0.05)。乳腺癌组织中的HMGA2表达率为63.29%(50/79)，明显高于癌旁组织HMGA2表达率27.85%(22/79)，差异有统计学意义( t＝ 20.005， P<0.01)；HMGA2表达水平与乳腺癌组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关( t＝ 7.570、8.662、11.293， P<0.05)。 结论:乳腺癌组织中NEK2和HMGA2呈高表达，可用于评估乳腺癌组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移情况。

目的:探讨成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBL2)和中心体相关蛋白激酶2(NEK2)表达与结直肠癌临床特征和预后的关系。方法:收集大庆龙南医院(齐齐哈尔医学院第五附属医院)和广东医科大学附属医院2019年1月至2022年12月经病理学检查确诊的108例结直肠癌组织标本和对应癌旁组织标本，采用免疫组织化学法检测组织中MYBL2和NEK2表达，采用 χ2检验分析MYBL2和NEK2的表达与结直肠癌临床病理特征的关系。 结果:结直肠癌组织和对应癌旁组织中MYBL2表达率分别为74.07%(80/108)、12.96%(14/108)，两者差异有统计学意义( χ2＝82.045， P<0.01)。MYBL2表达水平与结直肠癌患者淋巴结转移、浸润深度、组织学分化程度、TNM分期明显相关( χ2＝5.839、7.036、4.304、6.895， P<0.05)，MYBL2表达水平与结直肠癌患者性别、年龄、肿瘤部位无相关( χ2＝0.039、0.045、0.005， P>0.05)。结直肠癌组织和对应癌旁组织中NEK2表达率分别为65.74%(71/108)、32.41%(35/108)，两者差异有统计学意义( χ2＝24.008， P<0.01)。NEK2表达水平与结直肠癌患者淋巴结转移、组织学分化程度、TNM分期明显相关( χ2＝4.384、5.555、6.213， P<0.05)，NEK2表达水平与结直肠癌患者性别、年龄、肿瘤部位、浸润深度无相关( χ2＝0.033、0.006、0.000、0.334， P>0.05)。 结论:结直肠癌组织中MYBL2和NEK2表达水平升高，两者均为结直肠癌预后不良的影响因素。

目的:探讨中心体相关蛋白激酶2(NEK2)和细丝蛋白A(FLNa)的表达与胃癌患者临床特征及预后之间的关系。方法:以2017年10月至2022年12月烟台市烟台山医院收治的108例胃癌患者组织标本作为研究对象，采用免疫组织化学方法检测上述胃癌组织和癌旁组织中NEK2和FLNa表达水平，结合临床资料，应用 χ2检验进行分析。 结果:胃癌组织中NEK2表达率为62.96%(68/108)，明显高于癌旁组织中NEK2表达率[11.11%(12/108)]，差异有统计学意义( χ2＝62.259， P<0.01)。胃癌组织中FLNa表达率为30.56%(33/108)，明显低于癌旁组织中FLNa表达率[80.56%(87/108)]，差异有统计学意义( χ2＝54.675， P<0.01)。NEK2表达水平与胃癌患者组织学分化程度、TNM分期(TNM stage，tumor node metastasis stage)、淋巴结转移、肿瘤大小明显相关( χ2＝4.723、6.632、4.246、7.021， P<0.05)，NEK2表达水平与胃癌患者年龄、性别无相关( χ2＝0.001、0.027， P>0.05)。FLNa表达水平与胃癌患者TNM分期、淋巴结转移、肿瘤大小明显相关( χ2＝5.102、6.279、5.645， P<0.05)，FLNa表达水平与胃癌患者组织学分化程度、年龄、性别无相关( χ2＝0.004、0.023、0.329， P>0.05)。 结论:NEK2在胃癌组织中高表达、FLNa在胃癌组织中低表达，NEK2和FLNa的表达水平与胃癌的形成发展密切相关。

目的:探讨AT丰富结合域1A(ARID1A)和中心体相关蛋白激酶2(NEK2)在原发性肝癌(PLC)组织中表达及其临床意义。方法:收集收集山西医科大学第二医院2015年1月至2020年12月经病理确诊的79例PLC组织标本、38例肝硬化组织标本和22例正常肝组织标本，采用免疫组织化学方法检测上述组织中ARID1A和NEK2表达，采用 χ2检验分析ARID1A和NEK2与PLC临床病理特征之间的关系。 结果:ARIDIA在正常肝组织、肝硬化组织与PLC组织中阳性表达率分别为86.36%(19/22)、55.26%(21/38)、27.85%(22/79)，两两之间比较差异有统计学意义( χ2＝6.065、24.433、8.296， P<0.05)；NEK2在正常肝组织、肝硬化组织与PLC组织中阳性表达率分别为9.09%(2/22)、34.21%(13/38)、73.42%(58/79)，两两之间比较差异有统计学意义( χ2＝4.689、29.527、16.532， P<0.05)。ARIDIA表达水平与PLC肿瘤大小、TNM分期(tumor node metastasis stage，TNM stage)和血管浸润明显相关( χ2＝5.039、6.769、5.277， P<0.05)，NEK2表达水平与PLC血管浸润、TNM分期明显相关( χ2＝5.4349、6.5142， P<0.05)。 结论:ARID1A在PLC组织中表达下调，NEK2在PLC组织中表达上调，ARID1A和NEK2表达可能与PLC的发生发展、侵袭转移有关；检测ARID1A和NEK2有助于评估PLC患者病情。

目的:在分子水平探讨Nek2B与β-catenin在三阴性乳腺癌（triple negative breast cancer，TNBC）中的表达及意义。方法:利用生物信息学分析的方法[GEO2R在线工具、基因本体（GO）功能分析、KEGG生物途径富集分析]筛选TNBC基因芯片集数据中的差异表达基因；运用Western blot及即时定量逆转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）检测Nek2B、β-catenin在TNBC细胞系中的表达水平；收集山西医科大学第二医院2007年1月1日至2012年12月31日的80例TNBC患者资料，采用免疫组织化学法检测Nek2B在TNBC肿瘤组织芯片的表达，分析其与TNBC临床病理学特征之间的关系。结果:通过生信分析2个TNBC肿瘤的cDNA芯片集（GSE38959和GSE27447），初筛共得到998个差异表达基因（DEG），其中13个共同DEG，生物途径分析结果显示共同DEG与Wnt/β-catenin通路有密切联系，其中Nek2的表达差异最大，且与患者不良预后相关；Western blot和qRT-PCR结果提示在同一种TNBC细胞系中，Nek2B与β-catenin的表达强度一致；免疫组织化学结果显示，在TNBC肿瘤组织中，Nek2B的高表达与高组织学分级（G3；84.3%比37.9%， P<0.001），淋巴结转移（76.7%比54.1%， P=0.032）和高Ki-67阳性指数（78.6%比52.6%， P=0.007）以及β-catenin阳性表达（72.5%比27.3%， P=0.018）相关。 结论:Nek2B高表达与TNBC患者的不良预后有关，在TNBC组织与细胞中，Nek2B的表达与β-catenin呈正相关性，提示Nek2B可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路影响TNBC的发生与发展。

目的:观察小鼠隐睾模型隐睾组织中NEK2基因mRNA的变化特点，NEK2蛋白表达定位及表达水平变化情况，初步探讨其在睾丸组织细胞凋亡中的作用。方法:首先构建小鼠隐睾模型，采用HE染色观察曲精小管内精细胞的损伤情况，Tunel检测细胞凋亡情况，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组织化学检测NEK2 mRNA和蛋白的表达情况。结果:建模成功后HE染色结果发现随着时间的推移曲精小管内精原细胞、初级精母细胞和精细胞损伤越严重。Tunel检测结果显示凋亡细胞数随着时间推移先上升后下降。Tunel检测结果显示建模后凋亡细胞数1、3、6、9和15 d分别为3.67±2.08( t=2, P=0.0412)，7.67±1.53( t=6.325, P=0.003)，17.67±3.51( t=7.906, P=0.001)，30.67±3.51( t=14.072, P<0.001)和14.33±3.21( t=6.860, P=0.002)，差异均具有统计学意义，均 P<0.05。免疫组化结果显示NEK2蛋白在细胞核和细胞质中表达，免疫组化和RT-PCR的结果显示建模术后NEK2 mRNA和蛋白的表达量逐渐上升，达峰值后随时间推移表达逐渐下降，并显著低于正常对照组。 结论:隐睾组织中NEK2的表达趋势与隐睾组织细胞凋亡的趋势相一致，提示NEK2的异常表达可能通过细胞凋亡作用影响曲精小管内精细胞的损伤，导致隐睾症患者的不育。

目的:探讨中心体相关蛋白激酶2(NEK2)和环氧合酶2(COX2)在前列腺癌组织的表达及两者与前列腺癌临床病理参数的关系。方法:选取广东医科大学附属医院2013年2月至2019年9月收治的77例前列腺癌组织标本和27例前列腺增生组织标本作为研究对象，应用免疫组织化学法检测两者组织中NEK2和COX2的表达水平，结合临床资料进行相关统计学分析。各组间比较采用 t检验。 结果:前列腺癌组织中的NEK2表达率明显高于前列腺增生组织NEK2表达率(61.43%比20.00%， t＝ 10.702， P<0.01)，NEK2表达水平与前列腺癌组织学分级、临床分期明显相关( t＝8.901、9.848， P<0.05)；前列腺癌组织中的COX2表达率明显高于前列腺增生组织COX2表达率(64.29%比15.00%， t＝ 15.182， P<0.01)，COX2表达水平与前列腺癌组织学分级、精囊腺侵犯、临床分期明显相关(分别为 t＝9.043、4.400、10.536， P<0.05)。 结论:NEK2和COX2在前列腺癌组织中高表达，检测NEK2和COX2有助于判断前列腺癌患者恶性程度。

目的 基于基因表达综合(GEO)数据库和癌症基因组图谱(TCGA)数据库筛选肺腺癌(LUAD)预后相关基因.方法 从GEO数据库中筛选出GSE118370、GSE10072、GSE115002 3个数据集,使用R软件筛选LUAD组织和相邻正常肺组织中的差异基因,对差异基因进行基因本体(GO)及京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.应用STRING数据库构建与差异基因相关的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络.应用Cytoscape软件鉴定差异基因中的关键基因,采用基因表达谱交互式分析(GEPIA)数据库分析关键基因在LUAD组织和正常肺组织中的表达,比较关键基因高表达与低表达LUAD患者的总生存期和无病生存期,比较不同临床分期LUAD患者关键基因的表达情况.应用UALCAN数据库对LUAD组织和正常肺组织中关键基因的表达情况进行分析.结果 共获得101个上调差异基因和213个下调差异基因.GO富集分析结果显示,上调差异基因主要富集在细胞外基质组织、有丝分裂细胞周期、上皮细胞分化等生物过程中,以及细胞黏附分子结合、蛋白激酶结合等分子功能方面;KEGG通路富集分析结果显示,上调差异基因主要富集在p53信号通路、松弛素信号通路等通路.GO富集分析结果显示,下调差异基因主要富集在血管发育、细胞对细胞因子刺激的反应等生物过程中,以及细胞外基质和膜筏等细胞组成中;KEGG通路富集分析结果显示,下调差异基因主要富集在细胞因子-细胞因子受体相互作用、神经活性配体-受体相互作用等通路中.最终筛选出8个关键基因,分别是BUB1有丝分裂检查点丝氨酸/苏氨酸激酶B(BUB1B)、ZW10相互作用着丝点蛋白(ZWINT)、细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、DNA拓扑异构酶Ⅱα(TOP2A)、泛素结合酶E2C(UBE2C)、细胞周期蛋白B2(CCNB2)、NIMA相关激酶2(NEK2)、纺锤体微管的装配因子(ASPM).这8个基因在LUAD组织中的表达水平均高于正常肺组织,且与LUAD患者的总生存期、无病生存期及临床分期有关.结论 BUB1B、ZWINT、CDK1、TOP2A、UBE2C、CCNB2、NEK2、ASPM基因在LUAD组织和正常肺组织中的表达具有差异,并且与LUAD患者的总生存期、无病生存期及临床分期有关.

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织有丝分裂相关激酶2(NEK2)、促红细胞生成素产生肝细胞受体A5(EPHA5)表达情况,分析其与临床病理特征、表皮生长因子受体(EGFR)突变和预后的关系.方法:选取自2019年10月至2020年10月期间我院诊治的151例NSCLC患者作为研究对象,术中取其癌组织及癌旁正常组织(距离癌组织5cm以上).采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测EGFR基因表达.免疫组织化学法检测癌组织和癌旁组织中NEK2、EPHA5表达.比较癌组织和癌旁组织NEK2、EPHA5表达情况.分析不同临床病理特征NSCLC患者NEK2、EPHA5表达情况.分析EGFR突变型与野生型不同NEK2、EPHA5表达情况.Kaplan-Meier生存曲线分析不同NEK2、EPHA5表达对NSCLC患者的预后情况.结果:与癌旁组织比较,癌组织NEK2、EPHA5阳性表达率明显更高(均P＜0.05);与TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移和肿瘤直径＜5 cm患者相比,TNM分期ⅢA期、淋巴结转移和肿瘤直径≥5 cm患者的NEK2、EPHA5阳性表达率均明显更高(均P＜0.05);EGFR突变型组NEK2、EPHA5阳性表达率显著高于EGFR野生型组(均P＜0.05);NEK2阳性表达组和阴性表达组3年总生存率(OS)分别为40.40％(40/99),57.69％(30/52),EPHA5 阳性表达组和阴性表达组患者 3 年 OS 分别为 41.90％(44/105),56.52％(26/46),各阴性表达组患者累积生存显著高于阳性表达组(P＜0.05).结论:NSCLC癌组织中NEK2、EPHA5阳性表达率升高,与TNM分期ⅢA期、淋巴细胞转移、肿瘤直径有关,还可能导致EGFR突变和不良预后.