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达格列净对糖尿病肾病患者肾功能及miR-21-5p和miR-423-5p水平的影响
编辑人员丨6天前
目的 分析达格列净对2型糖尿病肾病患者血糖水平、肾功能及miR-21-5p、miR-423-5p水平的影响.方法 选择2022年2月至2023年10月安徽医科大学附属合肥医院收治的98例糖尿病肾病患者,根据随机数表法分为对照组(n=49)与观察组(n=49).对照组接受二甲双胍治疗,观察组采取二甲双胍+达格列净治疗.对比两组治疗前后血糖水平、肾功能、血清促炎因子水平及miR-21-5p、miR-423-5p表达水平,同时记录两组不良反应发生情况.结果 两组治疗3个月后空腹血糖、糖化血红蛋白、肌酐、尿素氮、胱抑素C水平均低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05);两组治疗3个月后miR-21-5p、miR-423-5p水平及C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白介素6均低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05).观察组和对照组不良反应发生率差异无统计学意义(12.24%vs 6.12%,P>0.05).结论 达格列净有助于改善糖尿病肾病患者的血糖水平及肾功能,降低miR-21-5p、miR-423-5p表达和血清促炎因子水平,安全性好.
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编辑人员丨6天前
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慢性心功能不全患者单个核细胞微小RNAs差异表达与患者脑血管疾病的关系
编辑人员丨6天前
目的 探讨慢性心功能不全患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)微小RNA(microRNAs,miRNAs)差异表达与患者脑血管疾病的关系.方法 这是一项对2019年1月至2022年4月期间从西安交通大学第一附属医院出院的274例失代偿性心力衰竭患者的观察性研究.对患者进行随访,直到2023年1月,观察患者缺血性脑血管事件情况.miRNA微阵列用于分析基线循环miRNAs水平.通过实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)验证差异表达的miRNAs.采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析候选miRNAs对缺血性脑血管事件的预测价值.结果 在随访期间[422(184~939)d],有24例患者发生缺血性脑血管事件.与未发生缺血性脑血管事件的患者相比,发生缺血性脑血管事件的患者服用抗凝剂、维生素K拮抗剂的患者比例显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).在两组基线PBMCs样本中分析了2 549个miRNA的表达,并鉴定了20个差异表达的miRNAs(定义为FC>1.3和P<0.05).qRT-PCR验证结果显示,与非缺血性脑血管事件患者相比,发生缺血性脑血管事件患者的PBMCs样本中hsa-miR-1273g-3p、hsa-miR-2861表达水平显著上调,hsa-miR-483-5p表达水平显著下调,差异有统计学意义(P<0.05).ROC分析表明,hsa-miR-1273g-3p[曲线下面积(area under the curve,AUC)=0.745]预测心力衰竭患者缺血性脑血管事件的灵敏度和特异度分别为81%、56%,hsa-miR-2861(AUC=0.614)的灵敏度和特异度分别为76%、62%,hsa-miR-483-5p(AUC=0.821)的灵敏度和特异度分别为76%、80%.3种候选miR-NAs联合的预测价值优于单独一种miRNA,其AUC、灵敏度和特异度分别为0.941、90%、98%.结论 PBMCs中hsa-miR-1273g-3p、hsa-miR-2861表达水平上调和hsa-miR-483-5p表达水平下调可能与心力衰竭患者缺血性脑卒中风险增加有关.
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编辑人员丨6天前
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长链非编码RNA CDKN2BAS靶向微小RNA-98-5p调控骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的分子机制
编辑人员丨6天前
目的:探讨长链非编码RNA CDKN2BAS(lncRNA CDKN2BAS)是否通过靶向微小RNA(miRNA,miR)-98-5p影响骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测成骨细胞hFOB1.19(购自上海通派生物科技有限公司)与骨肉瘤细胞U2-OS、SOSP-9607、Saos-2、SJSA-1(购自美国典型菌种保藏中心)中CDKN2BAS、miR-98-5p的表达水平;按照随机数字表法随机分组为si-con组、si-CDKN2BAS组、miR-con组、miR-98-5p组、si-CDKN2BAS+anti-miR-con组、si-CDKN2BAS +anti-miR-98-5p组,噻唑蓝(MTT)法检测CDKN2BAS与miR-98-5p表达对骨肉瘤细胞增殖活力的影响;流式细胞术检测CDKN2BAS与miR-98-5p表达对骨肉瘤细胞凋亡能力的影响;Transwell小室实验检测CDKN2BAS与miR-98-5p表达对骨肉瘤细胞迁移及侵袭能力的影响;双荧光素酶报告实验检测CDKN2BAS是否靶向miR-98-5p;蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞核增殖抗原(Ki-67)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、p21、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase)-3、Cleaved Caspase-9、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38 MAPK)的表达量。两组间比较采用独立样本 t检验,多组间比较采用单因素方差分析。 结果:hFOB1.19细胞与骨肉瘤细胞U2-OS、SOSP-9607、Saos-2、SJSA-1中CDKN2BAS的表达水平分别为1.05±0.28、4.26±0.42、3.65±0.56、4.02±0.46、3.75±0.41,miR-98-5p的表达水平分别为0.98±0.06、0.41±0.05、0.64±0.07、0.57±0.06、0.47±0.05,与hFOB1.19细胞比,骨肉瘤细胞株中CDKN2BAS表达明显上调( F=80.889, P<0.05),miR-98-5p表达明显下调( F=130.868, P<0.05),差异均有统计学意义;沉默CDKN2BAS与过表达miR-98-5p后骨肉瘤细胞存活率分别为(68.57±8.63)%、(64.68±7.24)%,迁移细胞数分别为(98.43±11.51)、(93.46±12.54)个,侵袭细胞数分别为(47.93±6.84)、(38.64±6.69)个,沉默CDKN2BAS与过表达miR-98-5p后骨肉瘤细胞增殖活力明显降低( F=37.873、60.131, P<0.05),细胞迁移及侵袭能力明显减弱( F=159.281、189.097,167.638、302.502, P<0.05),Ki-67、MMP-2、MMP-9、p-p38 MAPK蛋白表达水平明显降低( F=101.455、161.465、196.590、149.229、157.759、55.555, P<0.05),而细胞凋亡率明显升高( F=260.694、270.939, P<0.05),p21、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达水平明显升高( F=88.672、448.342、202.034、118.338、121.661、290.273, P<0.05),差异均有统计学意义;双荧光素酶报告实验证实CDKN2BAS靶向抑制miR-98-5p的表达;与si-CDKN2BAS+anti-miR-con组比较,si-CDKN2BAS+anti-miR-98-5p组细胞增殖、迁移、侵袭能力明显增强( t=4.546、10.682、5.648, P<0.05),细胞凋亡能力明显减弱( t=6.996, P<0.05),差异均有统计学意义。 结论:lncRNA CDKN2BAS通过靶向负调控miR-98-5p的表达影响骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力。
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编辑人员丨6天前
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动态对比增强磁共振成像联合血清微小RNA-486-5p在胰腺癌诊断及手术可切除性评估的应用
编辑人员丨6天前
目的:探究动态对比增强磁共振成像(DCE-MRI)联合血清微小RNA(miR)-486-5p对胰腺癌诊断及手术可切除性评估价值。方法:选取2019年6月至2023年6月烟台市烟台山医院收治136例胰腺占位患者为研究对象,患者均接受DCE-MRI扫描及血清miR-486-5p检测,以手术病理为诊断金标准,以实际手术切除为手术可切除性标准,通过诊断试验四格表评价DCE-MRI、血清miR-486-5p及两者联合对胰腺癌诊断、手术可切除性评估价值,组间比较采用Mann-Whitney U检验和 χ2检验。 结果:136例患者经病理诊断确诊胰腺癌(胰腺癌组)98例,非胰腺癌(良性病变组)38例。胰腺癌组血清miR-486-5p表达为3.48(1.41~7.64),显著高于良性病变组的1.02(0.36~1.58)( Z=3.162, P<0.05)。DCE-MRI联合血清miR-486-5p诊断胰腺癌的敏感度、特异度、准确度、与病理诊断的一致性Kappa值分别为97.95%(96/98)、81.58%(31/38)、93.38%(127/136)、0.829。98例胰腺癌患者中,最终实际行手术切除35例(可切除组),不可切除63例(不可切除组)。可手术组血清miR-486-5p表达为2.05(1.01~3.72),显著低于不可切除组的4.88(2.95~10.01)( Z=3.882, P<0.05)。DCE-MRI联合血清miR-486-5p预测胰腺癌可切除的敏感度、特异度、准确度、与实际手术切除的一致性Kappa值分别为77.14%(27/35)、100.00%(63/63)、91.84%(90/98)、0.813。 结论:DCE-MRI联合血清miR-486-5p能提高胰腺癌诊断敏感度及准确度,且预测手术可切除性与实际手术切除一致性更高。
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编辑人员丨6天前
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子宫内膜异位症患者异位内膜组织中差异表达microRNA的筛选
编辑人员丨6天前
目的:探讨微小 RNA(microRNA,miRNA)在子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)患者异位内膜组织中的表达特征。方法:收集2018年4月至2019年10月期间于厦门大学附属第一医院妇产科就诊EMS 患者异位内膜组织和对照组在位内膜组织开展实验。利用Illumina平台的miRNA测序检测内膜组织中 miRNA的表达情况。通过生物信息学分析差异表达的miRNAs及其潜在靶基因在EMS发生、发展中的作用。结合文献挑选6个具有显著差异的miRNAs(miR-98-5p、let-7c-5p、miR-495-3p、miR-200b-3p、miR-200c-3p、miR-148b-3p),应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)进行验证,并在构建miRNA-基因调控网络后初步验证其潜在靶基因。结果:测序结果显示,相比对照组,EMS患者异位内膜组织中有69个miRNAs出现差异表达(差异倍数>1.5, P<0.05),其中表达上调22个,表达下调47个。基因本体分析显示,差异表达的miRNAs所调控的靶基因在生物学过程中集中在与蛋白质修饰、发育调控、细胞代谢和形态结构等相关。KEGG pathway分析显示,靶基因富集于蛋白质功能、自噬、AGE-RAGE及MAPK信号通路中。qRT-PCR结果显示miR-98-5p、let-7c-5p、miR-200b-3p、miR-200c-3p的表达情况与测序结果一致。miRNA-基因共表达网络显示 miRNAs与所预测的靶基因间的相互关系。miRNAs潜在靶基因的qRT-PCR验证结果显示,miR-200b-3p、miR-200c-3p与 ZEB2呈负相关,miR-98-5p与 PGRMC1呈负相关,miR-98-5p、let-7c-5p与 ADIPOR2呈正相关。 结论:miR-98-5p、let-7c-5p、miR-200b-3p和miR-200c-3p在EMS患者异位内膜组织中存在显著差异表达,可能参与EMS的发生、发展。
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编辑人员丨6天前
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老年急性缺血性脑卒中患者血清miR-134和miR-146b表达及其预测预后的价值
编辑人员丨6天前
目的:探讨血清miR-134及miR-146b表达水平预测老年急性缺血性脑卒中(AIS)患者预后的价值。方法:选取2017年1月至2019年10月海口市第三人民医院收治的162例老年AIS,根据改良Rankin量表(mRS)分为预后良好组(98例)和预后不良组(64例),采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分分为轻度组(46例)、中度组(75例)、重度组(41例)。采用实时荧光定量PCR检测各组血清miR-134及miR-146b表达水平。应用多因素Logistic回归分析老年AIS患者预后不良的危险因素。应用ROC曲线分析血清miR-134及miR-146b表达水平预测老年AIS患者预后不良的价值,Pearson相关分析老年AIS患者血清miR-134及miR-146b表达水平与NIHSS及mRS评分的相关性。结果:AIS组血清miR-134(3.26±1.13比0.85±0.38)及miR-146b(2.27±0.93比0.56±0.21)表达水平明显高于对照组( t=14.360、12.527, P<0.01)。预后不良组血清miR-134(4.35±1.46比2.28±0.85)及miR-146b(3.07±1.04比1.51±0.66)表达水平明显高于预后良好组( t=13.520、11.242, P<0.01)。重度组血清miR-134及miR-146b表达水平均明显高于中度组和轻度组( t=10.815、9.462, P<0.01),且中度组血清miR-134及miR-146b表达水平均明显高于轻度组( t=13.627、11.611, P<0.01)。多因素Logistic回归分析显示,血清miR-134[ OR(95% CI):2.470(1.603~4.927)]及miR-146b[ OR(95% CI):1.914(1.350~3.406)]水平升高是老年AIS患者预后不良的危险因素( P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清miR-134及miR-146b表达水平预测老年AIS患者预后不良的最佳截值分别为3.84、2.68,两项联合预测老年AIS患者预后不良的曲线下面积(0.926,95% CI:0.865~0.987)明显高于单项,其敏感度和特异度为92.4%和86.2%。相关分析显示,老年AIS患者血清miR-134及miR-146b表达水平与NIHSS评分及mRS评分均呈正相关( r=0.806、0.871、0.785、0.842,均 P<0.01)。 结论:血清miR-134及miR-146b表达水平升高与老年AIS患者神经功能缺损的严重程度及预后相关,两项联合预测老年AIS患者预后不良的价值较高。
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编辑人员丨6天前
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咪达唑仑上调微RNA-98-5p影响乳腺癌细胞的增殖和凋亡研究
编辑人员丨6天前
目的:探讨咪达唑仑对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及凋亡的影响及作用机制。方法:将MDA-MB-231细胞按照随机数字表法分为对照组(A组),咪达唑仑10、30、50 mg/L浓度组(分别为B组、C组、D组),干扰微RNA-98-5p (microRNA-98-5p, miR-98-5p)表达+50 mg/L咪达唑仑处理组(E组),干扰miR-98-5p表达阴性对照+50 mg/L咪达唑仑处理组(F组),miR-98-5p过表达阴性对照组(G组)及miR-98-5p过表达组(H组),每组设置6个复孔。四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)法检测MDA-MB-231细胞存活率,流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡率,实时荧光定量PCR (real-time fluorescent quantitative PCR, RT-qPCR)法检测各组MDA-MB-231细胞中miR-98-5p表达情况,Western blot法检测MDA-MB-231细胞周期蛋白(Cyclin Dl)、B淋巴细胞瘤-2 (B cell lymphoma-2, Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶-3 (cysteine protease-3, caspase-3)蛋白水平。结果:与A组比较,B组、C组、D组MDA-MB-231细胞存活率、S期及G 2/M期细胞比例、Cyclin Dl蛋白水平、Bcl-2蛋白水平明显降低( P<0.05),B组、C组、D组MDA-MB-231细胞miR-98-5p相对表达量、G 0/G 1期细胞比例、细胞凋亡率、caspase-3蛋白水平明显升高( P<0.05)。与B组比较,C组、D组细胞存活率、S期及G 2/M期细胞比例、Cyclin Dl蛋白水平、Bcl-2蛋白水平明显降低( P<0.05),miR-98-5p相对表达量、G 0/G 1期细胞比例、细胞凋亡率、caspase-3蛋白水平明显升高( P<0.05)。与C组比较,D组细胞存活率、S期及G 2/M期细胞比例、Cyclin Dl蛋白水平、Bcl-2蛋白水平明显降低( P<0.05),miR-98-5p相对表达量、G 0/G 1期细胞比例、细胞凋亡率、caspase-3蛋白水平明显升高( P<0.05)。与D组比较,E组细胞存活率、S期及G 2/M期细胞比例、Cyclin Dl蛋白水平、Bcl-2蛋白水平明显升高( P<0.05),miR-98-5p相对表达量、G 0/G 1期细胞比例、细胞凋亡率、caspase-3蛋白水平明显降低( P<0.05)。F组与D组miR-98-5p相对表达量、G 0/G 1期和S期细胞比例、细胞存活率、细胞凋亡率、Cyclin Dl蛋白水平、Bcl-2蛋白水平、caspase-3蛋白水平差异无统计学意义( P>0.05),F组G 2/M期细胞比例低于D组( P<0.05)。A组与G组细胞存活率、细胞凋亡率、细胞周期分布及Cyclin Dl、Bcl-2、caspase-3蛋白水平差异无统计学意义( P>0.05)。与G组比较,H组细胞存活率、S期及G 2/M期细胞比例、Cyclin Dl蛋白水平、Bcl-2蛋白水平明显降低( P<0.05),细胞凋亡率、G 0/G 1期细胞比例及caspase-3蛋白水平明显升高( P<0.05)。 结论:咪达唑仑通过上调miR-98-5p表达进而抑制乳腺癌细胞增殖,促进其凋亡。
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编辑人员丨6天前
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妊娠期高血压患者血清SFRP5、miR-124-3p表达及临床意义
编辑人员丨6天前
目的:探究妊娠期高血压疾病(HDCP)患者血清分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)、miR-124-3p表达水平及临床意义。方法:选取金华市妇幼保健院2019年1月至2022年2月确诊的98例HDCP患者为观察组,其中包括妊娠期高血压(GH)组41例,轻度子痫前期(PE)32例,重度PE 25例,另选取同期的80名健康体检者作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测SFRP5水平,实时荧光定量法(qRT-PCR)检测miR-124-3p表达水平。分析SFRP5、miR-124-3p水平与HDCP患者临床病理指标的关系,采用Pearson法分析SFRP5与miR-124-3p的相关性。HDCP的危险因素探究利用多因素Logistic回归。结果:与对照组相比,观察组血清SFRP5表达水平[(33.78±5.21)vs(43.34±8.56)ng/L]下调,而miR-124-3p水平[(2.16±0.41)vs(1.01±0.17)]上调,且观察组血清SFRP5水平随着疾病程度加重而降低[(38.43±6.37)vs(33.18±5.14)vs(26.94±3.38)ng/L],而miR-124-3p水平随疾病程度加重而升高[(1.62±0.24)(2.19±0.43)(3.01±0.69)],其差异均具有统计学意义( P<0.05)。HDCP患者血清中SFRP5、miR-124-3p表达水平与患者年龄、孕次、孕前BMI、空腹血糖水平有关( P<0.05),而与患者孕周无关( P>0.05)。生物信息学TargetScan网站显示,SFRP5和miR-124-3p存在结合位点。Pearson相关性分析结果显示,SFRP5和miR-124-3p呈负相关( r=-0.610, P<0.05)。回归分析显示,SFRP5是妊娠期孕妇发生HDCP的保护因素,miR-124-3p是危险因素( P<0.05)。 结论:HDCP患者血清SFRP5、miR-124-3p水平呈异常表达,且和疾病的程度存在一定的关系,二者均调控HDCP的发生和发展。
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编辑人员丨6天前
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miR-429靶向调控IKKβ对神经母细胞瘤细胞增殖、侵袭和转移的影响
编辑人员丨6天前
目的:探讨微小RNA-429(micro RNA-429,miR-429)对神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞增殖、侵袭和转移的影响,及其在NB细胞中对IKKβ是否有调控作用及其调控机制。方法:选择2016年6月至2018年6月青岛大学附属医院小儿外科术中切除的NB原发肿瘤组织和瘤旁正常组织。采用RT-PCR检测NB组织和正常对照组织中miR-429的表达水平;RT-PCR检测miR-429在NB细胞SH-SY5Y、SK-N-SH和对照细胞HUVEC中的表达情况;在SH-SY5Y和SK-N-SH中抑制miR-429的表达,采用细胞集落形成实验、细胞划痕实验、细胞侵袭实验和流式细胞术检测NB细胞增殖、侵袭和转移能力的变化;在SH-SY5Y和SK-N-SH中过度表达miR-429,采用细胞集落形成实验、细胞划痕实验、细胞侵袭实验和流式细胞术检测NB细胞增殖、侵袭和转移能力的变化;基因软件预测miR-429的靶基因并用荧光素酶报告实验进行验证;过度表达miR-429,采用RT-PCR和Western blot检测其对NF-κB通路下游基因cyclinD1、IL-8、Bcl2的影响,并用MTT检测过表达IKKβ后,miR-429对NB细胞抗肿瘤作用影响的变化。结果:RT-PCR检测显示miR-429在NB组织中的表达为0.46±0.08,明显低于对照组织1.11±0.12,且差异有统计学意义( P<0.05);miR-429在SH-SY5Y和SK-N-SH中的表达分别为0.37±0.06和0.45±0.08,明显低于HUVEC中的1.07±0.11,且差异有统计学意义( P<0.01)。抑制miR-429表达后,RT-PCR显示miR-429 mRNA在SH-SY5Y和SK-N-SH分别为0.42±0.07和0.27±0.03,与对照组相比抑制作用明显( P均<0.01)。抑制miR-429表达后,细胞集落形成实验显示,SH-SY5Y和SK-N-SH细胞集落形成分别为(255±6)个和(275±9)个,明显高于对照组(67±2)个和(82±3)个,且差异有统计学意义( P均<0.01);细胞划痕实验显示,SH-SY5Y和SK-N-SH细胞的愈合率分别为55%和61%,较对照组25%和36%高,且差异有统计学意义( P均<0.05);细胞侵袭实验显示,SH-SY5Y和SK-N-SH细胞侵袭数量分别为(74±2)个和(96±4)个,与对照组(34±1)个和(45±1)个比较,细胞侵袭能力明显增强( P均<0.05);流式细胞术显示,各组NB细胞的凋亡显著降低( P均<0.05)。过度表达miR-429后,RT-PCR显示miR-429 mRNA在SH-SY5Y和SK-N-SH的相对表达量为9.2±0.5和8.8±0.4,与对照组相比,过表达作用明显( P均<0.01)。过度表达miR-429后,SH-SY5Y和SK-N-SH细胞集落形成分别为(20±1)个和(29±2)个,较对照组(76±2)个和(98±3)个低,且差异有统计学意义( P均<0.01);划痕实验中SH-SY5Y和SK-N-SH细胞愈合率为5%和7%,均较对照组22%和30%低,且差异有统计学意义( P均<0.05);侵袭实验中,SH-SY5Y和SK-N-SH细胞侵袭数量分别为(15±1)个和(11±1)个,均较对照组(38±1)个和(43±2)个低,且差异有统计学意义( P均<0.05);流式细胞术中,各组NB细胞的凋亡增加( P均<0.05)。过度表达miR-429后,RT-PCR检测cyclinD1、IL-8、Bcl2在SH-SY5Y(0.73±0.04、0.71±0.03、0.78±0.04)和SK-N-SH(0.65±0.03、0.73±0.03、0.58±0.02)的表达均较对照组降低,Western blot显示cyclinD1、IL-8、Bcl2蛋白表达下降,MTT显示IKKβ的过度表达,与对照组相比细胞增殖增加上述指标组间比较,差异均有统计学意义( P<0.01或<0.05)。 结论:miR-429可能通过靶向调控IKKβ进而调节NF-κB炎症信号通路抑制NB细胞体外增殖、侵袭和转移,miR-429可以尝试作为阻断NB进展的潜在靶点。
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编辑人员丨6天前
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Argonaute 2和微小RNA-145-5p对肝癌细胞增殖和转移的影响
编辑人员丨6天前
目的:探讨Ago2和微小RNA(miRNA,miR)-145-5p对肝癌细胞增殖和转移的影响。方法:选取2018年6月至2022年12月商丘市第一人民医院收治的98例肝癌患者肿瘤组织和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质免疫印迹分析miR-145-5p和Ago2表达水平。采用慢病毒在人肝癌细胞系HepG2建立miR-145-5p过表达细胞系,分别为miRNA对照组和miR-145-5p组,采用蛋白质印迹法(Western blot)分析Ago2表达水平;采用慢病毒构建Ago2敲降细胞系,为对照组和Ago2组,采用荧光定量PCR分析miR-145-5p表达水平。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析不同细胞的增殖能力;采用划痕实验和Transwell实验分析不同细胞的迁移和侵袭能力;分析Ago2和miR-145-5p表达的关系。组间比较采用 t检验。 结果:肝癌组织中Ago2蛋白表达水平(1.99±0.18)高于癌旁组织(1.20±0.12),差异有统计学意义( t=25.260, P<0.05)。肝癌组织中miR-145-5p表达水平(0.64±0.13)低于癌旁组织(1.04±0.15),差异有统计学意义( t=14.060, P<0.05)。miRNA对照组细胞48 h吸光度( A)值(2.01±0.12)高于miR-145-5p组(1.45±0.13),差异有统计学意义( t=7.616, P<0.05)。对照组细胞48 h A值(1.90±0.15)低于Ago2组(2.44±0.13),差异有统计学意义( t=6.603, P<0.05)。miRNA对照组划痕愈合率[(72.74±3.06)%]高于miR-145-5p组[(51.50±5.85)%],差异有统计学意义( t=7.879, P<0.05)。对照组细胞划痕愈合率[(76.31±3.95)%]低于Ago2组[(88.69±2.63)%],差异有统计学意义( t=6.387, P<0.05)。miRNA对照组侵袭数量[(97.17±9.02)个]高于miR-145-5p组[(77.50±6.98)个],差异有统计学意义( t=4.224, P<0.05)。对照组细胞侵袭数量[(93.17±8.18)个]低于Ago2组[132.83±5.34)个],差异有统计学意义( t=9.941, P<0.05)。Ago2是miR-145-5的靶基因。miRNA对照组Ago2蛋白表达水平(1.46±0.14)高于miR-145-5p组(0.74±0.12),差异有统计学意义( t=9.625, P<0.05)。 结论:miR-145-5p调节Ago2蛋白表达水平,进而调节肝癌细胞的增殖和转移等恶性细胞生物学行为。
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