七跨膜G蛋白偶联受体183(G protein-coupled receptor183，GPR183)，也称Epstein-Barr病毒诱导的受体2(Epstein-Barr virus-induced gene 2，EBI2)，由Epstein-Barr病毒诱导表达。GPR183由一组氧化甾醇内源性配体激活，与趋化因子受体协同作用，控制免疫细胞迁移。近年来研究表明GPR183在免疫系统中发挥着重要的作用，不仅参与适应性免疫应答，同时也与人类疾病密切相关，其表达失调可能导致包括炎症性疾病、自身免疫性疾病和恶性肿瘤等在内的疾病发生。文章就GPR183的功能及其在相关疾病中的免疫调控机制和作用进行综述。

目的:通过生信分析筛选脓毒症相关性脑病(sepsis associated encephalopathy,SAE)中小胶质细胞介导神经炎症的核心基因,并通过体外细胞学实验验证.方法:从基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)中获取脓毒症患者外周血全转录组测序数据集GSE65682以及体外脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导小胶质细胞活化模型基因芯片数据集GSE103156.采用加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)筛选GSE65682数据集中与脓毒症临床诊断显著相关的模块,与GSE103156数据集中LPS处理前后小胶质细胞的差异表达基因(differentially expressed gene,DEG)相交,利用基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)对DEG进行功能富集分析.采用STRING构建蛋白质-蛋白质相互作用网络、Cytoscape以及Lasso回归分析筛选核心基因.构建LPS诱导BV2小胶质细胞活化体外细胞模型,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测基因表达;采用慢病毒载体法过表达组蛋白去乙酰化酶9(histone deacetylase 9,HDAC9),Western blot检测炎症相关分子表达.结果:WGCNA分析得到GSE65682数据集中与脓毒症临床诊断相关的9个模块、共332个基因,通过Limma分析得到GSE103156数据集中LPS刺激前后小胶质细胞的1 272个DEGs,二者取交集后得到18个交集基因,进一步采用Lasso回归分析筛选得到4个枢纽基因分别为七跨膜G蛋白偶联受体183(G protein-coupled receptor 183,GPR183)、HDAC9、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸激酶(nicotinamide adenine dinucleotide kinase,NADK)、富含亮氨酸重复蛋白 25(leucine rich repeat containing 25,LRRC25).RT-qPCR结果证实在LPS刺激的小胶质细胞炎性活化模型中,Gpr183和Hdac9基因的mRNA表达下调、Lrrc25表达上调,而Nafk表达无明显变化;Western blot显示过表达HDAC9可促进LPS诱导小胶质细胞促炎因子白介素(interleukin,IL)-1β、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达、促进JAK1-STAT3磷酸化.结论:本研究利用生物信息学筛选得到SAE中小胶质细胞介导神经炎症的4个关键基因,并初步证实HDAC9对于小胶质细胞具有促炎活性,为SAE的机制研究提供了新的思路和数据.

目的 了解三种重要的氧化型胆固醇(25-、27-羟基胆固醇及7α,25-羟基胆固醇)在炎症及免疫性疾病中的研究进展,为相关的基础研究及疾病治疗提供依据.方法 复习近年来关于这3种重要的氧化型胆固醇在炎症及免疫性疾病中研究进展的相关文献并加以综述.结果 25-及27-羟基胆固醇可通过多种机制干预多种病毒侵袭宿主的过程从而发挥抗病毒效应,不仅如此,二者还在多种炎性过程及炎性疾病中发挥着重要的调节作用.7α,25-羟基胆固醇主要通过作用于炎性及免疫细胞膜受体G蛋白偶联受体183亦即EB病毒诱导受体2而发挥趋化作用,从而在多种炎性免疫过程中发挥重要的调节作用.结论 25-、27-羟基胆固醇及7α,25-羟基胆固醇通过作用于多种核受体及膜受体在多种炎性免疫反应及炎性免疫性疾病的发生及发展过程中发挥着重要的作用.

目的 利用成簇的规律间隔短回文重复序列和相关蛋白9(CRISPR/Cas9)基因编辑技术构建Gpr183全基因敲除小鼠模型,并对Gpr183受体在淋巴细胞的调控功能和在急性肝损伤过程中的作用进行了初步分析.方法 根据CRISPR/Cas9基因编辑技术实验方法构建Gpr183全基因敲除纯合子F2代小鼠,随后通过Western blot方法检测野生型和敲除型小鼠肝脏和脾脏组织Gpr183基因蛋白表达水平,并通过免疫荧光(IF)技术分析了野生型和敲除型小鼠脾脏淋巴细胞的分布情况以及IL-17和IL-22的表达水平,最后我们对Gpr183受体敲除后在小鼠急性肝损伤模型中进行了初步分析?.结果 Gpr 183基因敲除小鼠可正常生长繁殖,F2代纯合子小鼠(KO)较野生小鼠(WT)相比基因片段部分缺失,同时Western blot结果显示KO小鼠肝脏、脾脏组织中Gpr183基因表达蛋白缺失,IF结果显示Gpr183受体可引起小鼠脾脏B淋巴细胞由滤泡中央区向滤泡边缘区迁移,并且减弱了脾脏淋巴细胞IL-17和IL-22的分泌功能(P＜0.05),同时在小鼠急性肝损伤诱导模型中,我们发现Gpr183受体敲除小鼠能明显缓解小鼠急性肝损伤过程(P＜0.01),差异具有统计学意义.结论 成功构建了Gpr183受体敲除小鼠模型,为Gpr183基因功能在体内研究提供了稳定的小鼠敲除模型,同时Gpr183受体敲除后能减轻小鼠急性肝损伤.

目的:探讨G蛋白偶联受体183(G protein-coupled receptor 183,GPR183)在喉鳞状细胞癌(以下简称喉鳞癌)中的表达及其对喉鳞癌细胞增殖的影响.方法:利用免疫组织化学方法检测42例喉鳞癌组织和5例癌旁组织中GPR183的表达,并分析GPR183表达与患者临床病理参数的关系.采用定量聚合酶链式反应(quantitative reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测正常人胚肾细胞HEK-293T和喉鳞癌FD-LSC-1和AMC-HN-8中GPR183表达水平.将GPR183小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转入喉鳞癌细胞株FD-LSC-1、AMC-HN-8后,采用qRT-PCR检测转染效果,CCK-8实验、细胞克隆形成实验检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞周期.并进行体内实验,以评估GPR183在体内对喉鳞癌生长的影响.结果:GPR183表达水平在喉鳞癌中显著上调,喉鳞癌患者组织中GPR183表达水平与临床T分期(P<0.001)、淋巴结转移(P=0.002)相关;下调喉鳞癌细胞中GPR183表达水平,显著抑制喉鳞癌细胞在体外的增殖能力,并诱导细胞周期阻滞于G1期;体内实验结果表明敲降GPR183延缓了喉鳞癌生长.结论:GPR183在喉鳞癌中呈高表达,下调GPR183能够抑制喉鳞状细胞癌的增殖.

目的:探究体重正常(lean)、肥胖代谢正常(metabolically healthy obesity,MHO)与肥胖代谢异常(metabolically un-healthy obesity,MUO)个体内脏脂肪组织(visceral adipose tissue,VAT)中免疫细胞占比差异.方法:内脏脂肪组织标本来源于南京医科大学第一附属医院因肥胖行代谢手术治疗的48例患者及体重和代谢指标正常但因其他非炎症性疾病(疝气、胆结石及肾囊肿等)行腹腔镜手术的11例患者.提取脂肪组织RNA,进行RNA-seq检测,根据RNA-seq结果统计分析3组间内脏脂肪免疫细胞构成比情况和差异基因表达情况,通过单因素方差分析及Pearson相关性分析等分析方法进行数据统计.结果:各组间调节性T细胞,激活的NK细胞及MO、M2型巨噬细胞占比存在差异,P值分别为0.031、0.002、0.004和0.024;与其他两组相比,MUO组M2型细胞占比下降(P=0.014);两组肥胖患者的内脏脂肪中SPP1、CHIT1、ITGAX、CD300LB、IL1RN及DCSTAMP等基因与M0、M1型巨噬细胞占比呈正相关关系,而与M2型巨噬细胞占比多呈负相关关系.C5a受体1(complement fragment 5a receptor 1,C5AR1)及G蛋白偶联受体 183(G-protein coupled receptor 183,GPR183)基因在 MHO组中表现为与 M0及 M1 型巨噬细胞占比正相关,与M2型巨噬细胞占比负相关;在MUO组中则呈现相反的关联性.结论:与体重正常组相比较,肥胖组人群的内脏脂肪组织存在显著巨噬细胞浸润;肥胖两组间比较,代谢异常者巨噬细胞亚类中M1型巨噬细胞占比升高,提示机体内高炎症水平与代谢能力受损有关;C5AR1、GPR183可能作为预测肥胖患者代谢状态的生物学指标.