为研究两栖类在冬眠期及其前后消化道嗜银细胞是否参与冬眠期的消化调节,本文以牛蛙(Rana catesbeiana)为实验对象,采用Grimelius银染法,对冬眠期前(n=10)、冬眠期(n=10)和冬眠期后(n=10)牛蛙消化道嗜银细胞的形态及密度进行比较研究.结果表明,牛蛙消化道各部位均有嗜银细胞分布;牛蛙消化道嗜银细胞形态在冬眠期、冬眠期前及冬眠期后无差异,均为锥体型、梭型和椭圆型;牛蛙消化道各部位具有外分泌功能的锥体型和梭形嗜银细胞密度在3个时期均显著高于具有内分泌功能的椭圆型嗜银细胞密度(P＜0.01);3个时期牛蛙消化道嗜银细胞分布密度高峰均位于空肠处,但低谷有所不同,冬眠期前和冬眠期后牛蛙消化道嗜银细胞的分布密度低谷位于食管,而冬眠期其分布密度低谷位于贲门;3个时期相比,冬眠期前和冬眠期幽门处分布密度差异不显著(P＞0.05),其余部位均有差异,且食管、胃、十二指肠、空肠、回肠和直肠中嗜银细胞分布密度在冬眠期显著高于冬眠期前和冬眠期后(P＜0.05);冬眠期前和冬眠期后消化道嗜银细胞分布密度呈倒"U"型趋势,冬眠期分布密度呈现"～"型趋势.结合相关研究,推测牛蛙嗜银细胞分布密度的改变可能与机体适应不同生理状态及消化功能的调节有关.

运用Grimelius银染法对菲牛蛭(Poecilobdella manillensis)消化管内嗜银细胞的分布和形态进行观察,并根据嗜银细胞的分布特点统计其分布密度.消化管除食道外各部位均有嗜银细胞分布,细胞染棕色或黑色;嗜银细胞基本位于上皮细胞之间和固有层内,主要呈圆形、椭圆形、锥体形和长条形等多种形态;部分细胞胞突明显,细胞内可见黑色分泌颗粒.嗜银细胞分布密度为颚片最高,嗉囊次之,直肠最低,食道内未检测出嗜银细胞.消化管各段嗜银细胞的形态特征和分布规律可能与其食性和消化生理活动密切相关.

目的 比较幼体、亚成体和成体花背蟾蜍(Pseudepidalea raddei)消化道嗜银细胞的形态学特点和分布密度的增龄变化.方法 取不同年龄组花背蟾蜍的食管、贲门、胃底、幽门、十二指肠、空肠、回肠和直肠等部位,用Grimelius银染法结合微波技术对各段的嗜银细胞进行染色.结果 消化道嗜银细胞分为闭合型和开放型细胞两种类型,从食管至直肠的形态学特征无明显的增龄变化.幼蟾食管嗜银细胞的分布密度显著高于贲门和空肠;亚成体蟾和成蟾都在食管最高,直肠最低,但无显著的部位差异.成蟾和亚成体蟾贲门、胃底和空肠嗜银细胞的分布密度都显著高于幼蟾,成蟾回肠与亚成体蟾接近,但高于幼蟾,食管、幽门和直肠未见年龄差异.结论 花背蟾蜍消化道嗜银细胞的形态学特征不随年龄而改变,但分布密度在贲门、胃底、空肠和回肠等部位表现出明显的增龄变化,这可能与食物的机械消化作用和吸收营养物质的能力随年龄而逐渐加强有关.

目的 比较幼体、亚成体和成体中华蟾蜍(Bufo gargarizans)消化道嗜银细胞的形态特征及各部位分布密度的差异.方法 结合微波技术改良的Grimelius银染法对幼体、亚成体和成体雄性中华蟾蜍消化道嗜银细胞染色.结果 中华蟾蜍消化道嗜银细胞分为闭合型和开放型两类.幼体胃底密度显著高于消化道其他各段,亚成体胃底和贲门密度显著高于幽门、空肠、回肠和直肠,成体胃底和贲门密度显著高于肠道各段.幼体和亚成体十二指肠的密度都高于成体,消化道其他部位的密度无年龄差异.结论 中华蟾蜍消化道嗜银细胞的形态无增龄变化,各年龄组均在胃部密度较高,十二指肠的密度有明显的年龄差异,这可能与其消化生理状态及十二指肠主要执行消化食物和吸收营养物质的功能有关.

为了研究循环饥饿投喂对大鼠(Rattus norvegicus)消化道内嗜银细胞的分布密度及形态功能的影响,本实验采用Grimelius银染法观察和测定循环饥饿投喂(饥饿1d,投喂1d,周期为14d)期间大鼠消化道嗜银细胞形态功能及密度分布.结果 表明,实验组(即循环饥饿投喂组)和对照组(正常喂食组)大鼠消化道嗜银细胞除食管外均有分布,形态上对照组嗜银细胞以椭圆形和锥体形为主,实验组嗜银细胞则主要以锥体形为主;两组大鼠消化道嗜银细胞的分布密度高峰都位于胃,密度低谷对照组位于空肠、盲肠、回肠和直肠,实验组位于空肠到直肠各段;实验组大鼠消化道嗜银细胞分布密度在贲门和幽门部极显著低于对照组(P＜0.01),结肠显著低于对照组(P＜0.05),说明循环饥饿投喂会明显改变消化道嗜银细胞的形态并降低细胞数量,这可能与内分泌细胞的功能改变有关.

为揭示青海沙蜥消化系统的组织结构,探索其高海拔适应的组织学基础,应用解剖学与石蜡切片、H.E染色和Grimelius银染法对青海沙蜥消化道组织结构和嗜银细胞进行研究.结果 显示:青海沙蜥的消化道管壁结构分为4层,从内到外依次是粘膜层、粘膜下层、肌层和浆膜.消化道各段的长度和壁厚均存在显著差异,其中小肠最长,胃幽门部的管壁最厚.粘膜皱襞和绒毛的分布也存在差异,空肠部位的小肠绒毛数量最多,其次是十二指肠和回肠.嗜银细胞形状多样,广泛分布在消化道各段的黏膜上皮基部和黏膜上皮之间.胃体是嗜银细胞分布密度最高的部位,其次是贲门,回肠最低.与栖息在低海拔的有鳞类相比,青海沙蜥为适应高海拔环境,小肠的相对长度变长,胃体部嗜银细胞增多.

本实验以相对半定量的全小肠嗜银染色计数嗜银细胞的方法对 60Coγ线不同剂量及不同时间全身一次性照射后小鼠全小肠嗜银细胞的变化进行了观察，发现1～7Gy照射后72小时，嗜银细胞数量随着照射剂量的增加逐渐增多，7Gy达峰值，8Gy后则随剂量的增加呈指数减少，至160Gy仅为对照的11%。变化最显著的区域在10～30Gy。照射后不同时间的变化结果表明，8、10Gy照后1天嗜银细胞减少60%，2天开始回升，4～7天出现超常，2周时恢复正常。15、20Gy照后1天减少显著，2天略见回升，3～5天又复减少。30Gy照后嗜银细胞呈进行性减少直至动物死亡。这一实验结果提示小肠嗜银细胞与电离辐射的量效关系有独特的规律性变化。

为了研究有氧运动对肥胖大鼠(Rattus norvegicus)消化道嗜银细胞形态及分布密度的影响,本实验采用Grimelius银染法观察8周运动组(n=9)与对照组(n=9)肥胖大鼠消化道嗜银细胞形态及分布密度.结果 显示,大鼠消化道各部位均有嗜银细胞分布;两组大鼠消化道嗜银细胞形态上无差异,均以圆形、椭圆形、锥体形、梭形为主;两组大鼠消化道嗜银细胞分布密度高峰均位于胃体,而低谷有所不同,对照组大鼠消化道嗜银细胞的分布密度低谷位于食管、贲门,运动组大鼠位于食管、贲门、空肠、回肠、直肠;两组相比,食管和直肠两部位分布密度差异不显著(P＞0.05),其余各部位均有差异,且运动组大鼠贲门、胃体、盲肠、结肠嗜银细胞分布密度极显著低于对照组(P＜0.01),幽门、空肠嗜银细胞分布密度极显著高于对照组(P＜0.01),运动组十二指肠、回肠嗜银细胞分布密度显著高于对照组(P＜0.05).两组动物嗜银细胞分泌密度的这种改变与动物机体所处不同生理状态以及消化道各部位功能有关.

目的:观察电针"足三里"和"肺俞"穴对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺神经内分泌细胞(PNECs)的激活及其分泌的神经活性物质降钙素基因相关肽(CGRP)、五羟色胺(5-HT)的影响,探讨电针治疗COPD的作用机制.方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,每组7只.采用香烟烟熏12周的方法复制COPD大鼠模型.电针组大鼠予电针双侧"足三里"和"肺俞"穴,每次30 min,每日1次,连续14 d.肺功能分析仪检测大鼠肺功能;HE染色法观察肺组织病理形态;Grimelius银染色法观察肺组织PNECs的免疫阳性反应;免疫组织化学法观察肺组织中CGRP、5-HT阳性表达;ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织中CGRP、5-HT及肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、转录生长因子(TGF)-β1的含量,并分析CGRP、5-HT含量分别与TNF-α、IL-1β含量的相关性;实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测肺组织中CGRP、三磷酸腺苷受体P2X配体门控离子通道3(P2X3)的mRNA和蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组用力肺活量(FVC)、第0.1秒用力呼气量(FEV0.1),第0.3秒用力呼气量(FEV0.3)、FEV0.1和FVC比值(FEV0.1/FVC)、FEV0.3和FVC比值(FEV0.3/FVC)均呈不同程度下降(P<0.05,P<0.01);小支气管管壁及肺泡间隔增厚,炎性细胞浸润;肺组织中小气道上皮银染的PNECs阳性表达显著升高(P<0.01);肺组织中CGRP、5-HT阳性表达显著升高(P<0.01);BALF和肺组织中CGRP、5-HT、TNF-α、IL-1β、TGF-β1含量显著升高(P<0.01,P<0.05);肺组织中CGRP、P2X3 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01).与模型组比较,电针组FVC、FEV0.1、FEV0.1/FVC、FEV0.3/FVC均显著升高(P<0.05,P<0.01);肺组织病理变化改善;肺组织中PNECs阳性表达显著降低(P<0.01);肺组织中CGRP、5-HT阳性表达显著降低(P<0.01);BALF和肺组织中CGRP、5-HT、TNF-α、IL-1β、TGF-β1含量显著降低(P<0.05,P<0.01),其中CGRP、5-HT和TNF-α、IL-1β均分别呈两两正相关(P<0.01);肺组织中CGRP、P2X3 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01).结论:电针COPD大鼠"足三里""肺俞"穴具有改善肺功能和抗炎的治疗作用,其作用机制可能与其抑制PNECs的激活及其神经活性物质的释放有关.

为探究有尾两栖类消化道内分泌细胞的特点,以分布于猫儿山保护区的猫儿山小鲵(Hynobius maoershanensis)和瑶山肥螈(Pachytriton inexpectatus)为研究对象,采用Grimelius银染法,对二者消化道嗜银细胞的形态特征、分布区域与分布密度进行了比较研究,为有尾两栖类消化道比较组织学和内分泌学研究积累基础资料,并为两栖类消化生理学研究提供形态学数据基础.结果显示,两种动物从食道至直肠均有嗜银细胞分布,分布型都呈波浪形,均在食道处分布密度(个/视野)最高,猫儿山小鲵为2.00±0.69,瑶山肥螈为3.42±0.31,在猫儿山小鲵回肠(1.45±0.50)和瑶山肥螈在直肠(1.63±0.97)分布密度最低.瑶山肥螈消化道各部位嗜银细胞的分布密度都高于猫儿山小鲵,两种动物嗜银细胞分布密度在食道、贲门、十二指肠和回肠中差异显著,但在胃体、幽门和直肠中差异不显著.对同一物种消化道不同部位嗜银细胞进行比较,猫儿山小鲵及瑶山肥螈的嗜银细胞分布密度高峰均出现在食道,其中,猫儿山小鲵食道与十二指肠、回肠、直肠差异显著(P＜0.05),瑶山肥螈食道与其他各部位差异显著(P＜0.05).嗜银细胞形状多样,有圆形、椭圆形、锥形和梭形等,可分为闭合型和开放型细胞.猫儿山小鲵生活环境多为沼泽地,富含淤泥、落叶,喜食蛙类蝌蚪、蚯蚓等个体较小且易消化的食物,瑶山肥螈生活环境为石块粗砂较多的山溪,以虾、蟹、螺等为食,这两种动物消化道嗜银细胞的形态特征和分布密度各具自身特点,可能与其生境及食性等因素有关.