人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)可直接入侵中枢神经系统造成原发性感染，导致相关症状。然而其往往发病隐匿，易被误诊。本研究报道1例因"左手抖动伴反应迟钝10余天"入院的青年患者，其初诊为"弥漫性星形细胞瘤？"，通过脑组织活检、脑脊液相关检查诊断为人类免疫缺陷病毒相关神经认知障碍(human immunodeficiency virus-associated neurocognitive disorder，HAND)，确诊后予以高效抗反转录病毒治疗(highly active anti-retroviral therapy，HAART)，治疗后症状消失。提示HIV感染的青年患者出现快速进展性痴呆时，应考虑HAND的可能，并尽快进行相关检查等以明确诊断，及时开展HAART。

目的:探讨HIV-1负调控因子(Nef)在HIV-1神经致病性中的作用。方法:从HIV-1相关痴呆(HIV-associated dementia, HAD)患者的中枢神经系统(central nervous system, CNS)和外周5个部位(基底结、额叶皮质、脑膜、颞叶皮质和脾)中获得5株不同的HIV-1 nef基因，与载体pcDNA3.1连接构建重组的pcDNA3.1- nef真核表达载体，转染人神经胶质瘤细胞U87。转染后22 h、27 h、32 h、37 h和42 h经免疫组化法和Western blot检测Nef蛋白表达情况，采用JEDA801D和JD-801软件对结果进行半定量分析。转染后27 h～62 h，每间隔5 h收集U87细胞的培养上清，ELISA测定上清中两种细胞因子TNF-α和IL-1β的含量，分析两种细胞因子的动态表达情况。 结果:成功构建5株来自一例HAD患者不同部位组织的 nef基因的重组的pcDNA3.1- nef真核表达载体，转染U87细胞。免疫组化实验的结果显示，Nef蛋白在转染后42 h开始表达，Western blot进一步证实了这一结果。ELISA结果显示，转染后22 h、27 h、32 h、37 h，各组上清中细胞因子的含量随时间逐渐增多，但各组间的差异均无统计学意义(TNF-α：F＝0.445, P＝0.837; F＝0.579, P＝0.742; F＝0.617, P＝0.714; F＝2.728, P＝0.057。IL-1β：F＝2.656, P＝0.062; F＝0.485, P＝0.809; F＝0.165, P＝0.982; F＝2.463, P＝0.093); 42 h后，各组细胞因子含量逐渐降低，57 h～62 h，TNF-α及IL-1β含量基本维持稳定；转染后42 h、47 h、52 h、57 h、62 h，实验组两种细胞因子的含量明显高于对照组，差异有统计学意义(TNF-α：F＝241.310, P<0.001; F＝242.638, P<0.001; F＝250.114, P<0.001; F＝143.877, P<0.001; F＝146.172, P<0.001。IL-1β：F＝251.578, P<0.001; F＝188.816, P<0.001; F＝276.240, P<0.001; F＝238.136, P<0.001; F＝163.361, P<0.001)，各对照组间或实验组间的差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:HIV-1 Nef蛋白能诱导并增强U87细胞分泌TNF-α和IL-1β的能力，而HAD患者体内不同来源的HIV-1 Nef蛋白发生氨基酸变异对U87细胞分泌TNF-α和IL-1β无影响。

目的:研究HAD和非HAD的艾滋病患者不同部位来源的Tat蛋白氨基酸位点变异及其对U87细胞氧化应激的影响。方法:采用BLAST和MEGA6对一例HAD患者(H)和一例非HAD患者(N)的基底节(BG)、脾脏(SPL)共4个部位来源的HIV-1 Tat蛋白进行序列分析，研究其氨基酸位点变异，并将 tat基因转染至U87细胞，显微镜观察绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)初步判断Tat蛋白表达情况，Western blot检测细胞Tat蛋白的表达；并使用cck-8法、Western blot、MDA检测试剂盒研究不同部位Tat蛋白对细胞活性、氧化应激指标GPX、MDA水平的影响。 结果:氨基酸序列分析显示N-BG、N-SPL、H-BG、H-SPL来源的HIV-1 Tat蛋白关键氨基酸位点存在差异；Tat蛋白可抑制U87细胞的活性，抑制作用可以被抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)逆转。与对照组相比，四个实验组MDA水平均升高，GPX蛋白表达量均降低，差异具有统计学意义( P＝0.012， P＝0.004， P＝0.000， P＝0.003； P＝0.000， P＝0.016， P＝0.000， P＝0.021)；且不同部位的Tat蛋白诱导细胞氧化应激的能力不同，H-BG组MDA水平高于N-BG部位，差异具有统计学意义( P＝0.023)；且无论是HAD还是非HAD患者BG组GPX含量均低于SPL组，差异有统计学意义( P＝0.01， P＝0.007， P＝0.01， P＝0.007)。 结论:HAD及非HAD患者外周及中枢神经系统中的Tat蛋白关键氨基酸位点存在差异，对细胞氧化应激的影响也不同。

目的:联合应用两种神经认知评价量表，探讨接受抗病毒治疗（ART）的HIV感染者神经认知损伤患病率、影响因素及其神经认知表现特征。方法:纳入浙江省台州市开展的HIV与衰老相关疾病前瞻性队列研究中2 250例接受ART的HIV感染者。使用中国版简易智能精神状态检查量表（MMSE）和国际HIV相关性痴呆量表（IHDS）评价其神经认知损伤情况，并对2个量表中的7个神经认知域进行聚类分析。结果:在接受ART的HIV感染者2 250例中，年龄集中在45~89岁（48.0%，1 080/2 250），男性占79.2%（1 782/2 250），小学及以下文化程度者占37.8%（852/2 250）。MMSE和IHDS判断的神经认知损伤的患病率分别为14.3%（321/2 250）和31.8%（716/2 250）。多因素logistic回归分析结果显示，HIV感染者MMSE判断的神经认知损伤危险因素包括60~89岁（a OR=2.63，95% CI：1.52~4.56）、抑郁症状（a OR=5.58，95% CI：4.20~7.40）和使用依非韦伦（EFV）治疗（a OR=2.86，95% CI：1.89~4.34）；男性（a OR=0.71，95% CI：0.51~1.00）、偏胖（a OR=0.63，95% CI：0.44~0.89）和文化程度较高（a OR=0.11，95% CI：0.05~0.25）为保护因素。IHDS判断的神经认知损伤危险因素包括60~89岁（a OR=3.10，95% CI：2.09~4.59）、抑郁症状（a OR=1.78，95% CI：1.44~2.20）和使用EFV治疗（a OR=1.79，95% CI：1.41~2.29）；男性（a OR=0.75，95% CI：0.58~0.97）、偏瘦（a OR=0.67，95% CI：0.47~0.96）、基线CD4 +T淋巴细胞（CD4）计数 ≥350个/μl（a OR=0.69，95% CI：0.53~0.91）和文化程度较高（a OR=0.23，95% CI：0.14~0.39）是保护因素。HIV感染者的神经认知表现分为4种主要类型，在年龄、性别、文化程度、饮酒、抑郁症状、腰臀比、高血压病史、糖尿病病史、基线CD4计数和使用EFV治疗的差异有统计学意义（均 P<0.05）。 结论:接受ART的HIV感染者神经认知表现分为4种类型，神经认知损伤患病率较高，需对不同类型者采取针对性的监测、预防与控制措施。

获得性免疫缺陷综合征(acquired immune defi-ciency syndrome ,AIDS ) ,简称艾滋病 ,是由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus ,HIV)引起的一种恶性传染病.A IDS在全世界飞速传播 ,现已成为威胁人类健康的公共卫生问题.目前 ,抗逆转录病毒治疗法(antiretroviral therapy ,ART )的开展 ,使A IDS患者存活期延长 ,加之新感染的老年人数不断增多 ,从而导致≥50岁的A IDS患者数量急剧上升[1] .美国疾病控制中心(Centers for Dis-ease Control ,CDC)[2]将≥50 岁的 AIDS 患者定义为老年AIDS患者.医学研究[3]证明 ,老年AIDS患者出现相关并发症的机率较年轻人更高 ,且预后更差.在由A IDS引起的各种并发症中 ,艾滋病相关神经系统疾病(HIV-associated neurocognitive dis-orders ,HAND)是临床最常见的 ,包括艾滋性痴呆(HIV associated dementia ,HAD )和轻度认知功能障碍(mild cognitive impairment ,MCI).据研究[4]显示 ,HAND中HAD的发生率虽然有所下降趋势 ,但M CI的发生率还是呈稳步增长趋势.M CI是正常老化与痴呆的过渡状态 ,是痴呆的临床前期[5 ] .因此 ,AIDS 患者有关的认知功能障碍已逐渐成为A IDS护理领域关注的重点.本研究对老年 A IDS患者的认知功能障碍现状进行了回顾并分析其影响因素 ,现介绍如下.

人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)具有嗜神经性,患者感染8 d病毒即可侵入至神经中枢,造成常规磁共振成像不能识别的神经损伤.随着对大脑的持续损害,约50％的患者会进一步发展为以认知、行为和运动障碍为特征的综合征,即HIV相关的神经认知功能障碍综合征(HIV-associated neurocognitive disorders,HAND).联合抗逆转录病毒治疗(combination antiretroviral therapy,cART)后,HAND较严重的形式,即HIV相关性痴呆(HIV-associated dementia,HAD)减少,但仍约40％的HIV感染者存在HAND中较轻的2种认知障碍,即无症状神经认知损害(asymptomatic neurocognitive impairment,ANI)和轻度认知障碍(mild neurocognitive disorder,MND).随着患者生存期的延长,认知障碍逐渐加重.HAND的诊断需要一系列神经认知量表评估,耗时约3 h,因此门诊患者中诊断HAND较困难.MRI具有无创、无辐射的优势,且应用不同的神经影像序列(包括扩散张量成像、3D T1结构像、功能MRI)能够从不同角度获知所需的信息,为HAND的早期诊断、潜在机制提供影像学的独特见解,也可以监测疾病进展,并有助于评估特定cART治疗方案的疗效.现对HAND的MRI神经影像研究进展进行综述.

HIV-1病毒蛋白R(Viral Protein R,Vpr)是HIV-1的辅助蛋白,可以增加HIV-1的感染性,激活潜伏期病毒,并可以协同其他辅助蛋白的功能.多项研究已经证明了Vpr在HIV-1相关神经系统疾病发病机制中的重要作用,Vpr可以破坏血脑屏障的完整性,诱导神经细胞凋亡,并且可能是艾滋病痴呆综合征(AIDS dementia complex,ADC)发生和发展的重要致病因子,但是其确切机制仍然不详,本文主要就HIV-1 Vpr蛋白的神经毒性作用作一综述.

人类免疫缺陷病毒(HIV)感染人体外周血的同时入侵中枢神经系统(CNS),可以引发HIV-1相关神经认知障碍(HAND),主要表现为注意力不集中、感情淡漠和记忆障碍,导致患者日常工作生活不便.根据神经认知功能受损程度,HAND分为无症状性神经认知损害(ANI)、轻度神经认知紊乱(MND)和HIV相关痴呆症(HAD)3种类型.HAND目前已经成为AIDS患者重要的中枢神经系统并发症,AIDS患者进行联合抗逆转录病毒治疗(cART),病毒复制受到抑制,并发严重HIV相关痴呆者显著减少,生存期延长.目前HAND发病机制尚未明确,相关危险因素也需要进一步探索.本文对HAND相关危险因素的研究进展进行综述,为HAND诊断和发病机制研究提供新思路.

目的 探讨HIV-1 Vpr蛋白对小鼠神经细胞的毒性作用.方法 巢式PCR扩增了1例HIV相关痴呆(HIV associated dementia,HAD)和1例非HAD的艾滋病患者脾(spleen,SPL)、脑膜(meninges,MG)共4个部位的HIV-1 vpr基因测序,对基因序列和氨基酸位点进行分析.构建pEGFP-N1-vpr真核表达载体,脂质体法转染N2a细胞,Western blot检测Vpr蛋白在N2a细胞中的表达,流式细胞术研究了不同来源的Vpr蛋白对N2a细胞活性和细胞周期的影响.结果 PCR扩增出HIV-1 vpr基因,序列分析显示vpr基因序列属于HIV-1B亚型,HAD和非HAD患者中枢来源的Vpr蛋白在C末端84、86和87位存在氨基酸位点的突变;Vpr蛋白可抑制神经细胞活性,导致G2周期阻滞,不同来源的Vpr作用存在差异,HAD患者MG来源的Vpr蛋白,表现出更强的抑制细胞活性和G2周期阻滞能力.结论 Vpr蛋白关键氨基酸位点的变异可致其生物学功能的明显改变,其在HAD发病机制中的意义仍待进一步研究.

目的 研究HIV-1 Nef蛋白氨基酸位点变异对其抑制神经细胞自噬的影响,探讨Nef蛋白致中枢神经系统损伤的机制.方法 分别扩增和克隆1例HIV相关性痴呆(HIV-associateddementia,HAD)患者(H)及1例非AIDS HAD患者(N)中枢神经系统颞叶(temporal cortex,TC)部位的HIV-1 nef基因,进行序列分析,研究氨基酸位点变异;构建H-TC和N-TC来源的Nef真核表达载体pEGFP-N1-nef,并分别转染U87细胞,观察绿色荧光蛋白并初步判断Nef蛋白表达情况;同时Westernblot检测U87细胞Nef蛋白及细胞自噬标记蛋白LC3-Ⅱ、p62蛋白的表达,分析不同来源的Nef对U87细胞自噬的影响.结果 PCR扩增并构建H-TC及N-TC nef基因克隆载体pMD-19T-nef,测序证实为HIV-1B亚型,氨基酸序列分析显示,H-TC与N-TC关键氨基酸位点存在差异;成功构建pEGFP-N1-nef重组质粒,在U87细胞内表达Nef蛋白,转染后48 h Nef蛋白表达量最高;Western blot结果分析表明,LC3-Ⅱ蛋白的表达量在组间的差异有统计学意义(F=11.764,P=0.001),两组细胞中LC3-Ⅱ含量较低,Western blot未能检测到.,空白组与空载体组之间LC3-Ⅱ的表达量差异无统计学意义(P=0.169),H-TC、N-TC及阳性对照CQ组LC3-Ⅱ表达升高,与空白对照或空载体相比,差异具有统计学意义(P=0.017,P=0.039,P=0.031),且H-TC组LC3-Ⅱ的表达量高于N-TC组(P=0.023);H-TC、N-TC及阳性对照CQ组p62蛋白的表达量较空白对照或空载体组有所升高,但组间差异无统计学意义(F=2.049,P=0.163).结论 HAD及非HAD患者中枢神经系统中HIV-1 Nef氨基酸位点存在差异,对U87细胞自噬的影响也因此不同,H-TC来源的Nef诱导自噬标记蛋白LC3-Ⅱ表达的能力更强.