目的:探讨长链非编码RNA (lncRNA)-抗分化非编码RNA(DANCR)对人脂肪来源间充质干细胞(hASCs)成脂、成骨分化能力的影响。方法:收集中国医学科学院整形外科医院的3例女性患者腹部脂肪抽吸术后废弃的脂肪组织(年龄25～35岁)，分离培养hASCs。构建DANCR敲减与过表达质粒，利用慢病毒感染的方式在hASCs中敲减或过表达DANCR，将实验分为5组：敲减DANCR的实验组(shDANCR1、shDANCR2)、敲减对照组(shScrmble)、过表达DANCR的实验组(pCDH-DANCR)、过表达对照组(pCDH-GFP)，每组样本量为3例。RT-PCR检测上述5组细胞中DANCR的表达量。将上述5组慢病毒感染成功后的hASCs进行成脂或成骨诱导，成脂诱导7 d进行油红O染色鉴定成脂效果，成骨诱导14 d进行茜素红染色鉴定成骨效果，并应用RT-PCR检测成脂分化关键转录因子 PPAR-γ、 C/EBPα、 FABP4、 Adiponectin和脂类合成酶基因 LPL、 GPDH、 FASN、 ACC1和 HSL，以及成骨分化关键转录因子 RUNX2、 OCN、 OPN、 BMP2及 ALP的表达。实验数据均采用均值±标准差表示，2组间数据采用 t检验(Student’s t-test)进行比较， P < 0.05为差异具有统计学意义。 结果:设计的2条shRNA敲减序列均可使hASCs中DANCR的表达显著减少，与对照组比较，DANCR表达量分别下降了86%和74%，差异具有统计学意义( t＝84.07、 P <0.001， t＝75.52、 P <0.001)。构建的DANCR过表达质粒可以有效增加hASCs中DANCR表达量，与对照组相比，增加了(15.067±1.986)倍，差异具有统计学意义( t＝12.24, P<0.001 )。成脂、成骨诱导实验显示，敲减DANCR会引起hASCs成脂诱导后脂滴数量显著多于对照组，2组敲减组与对照组相比，差异均具有统计学意义( t＝17.24、 P <0.001， t＝ 30.68、 P <0.001)，成脂分化关键转录因子 PPAR-γ、 C/EBPα、 FABP4、 Adiponectin以及脂类合成酶的关键基因 LPL、 GPDH、 FASN、 ACC1、 HSL的表达都显著高于对照组；而过表达DANCR后会抑制脂滴的形成及上述基因的表达。同样在成骨诱导中，敲减DANCR后hASCs成骨诱导14 d钙结节形成量显著多于对照组，差异具有统计学意义( t＝15.25、 P <0.001， t＝24.61， P <0.001)，成骨分化关键基因 RUNX2、 OCN、 OPN、 BMP2及 ALP的表达也显著高于对照组，而过表达DANCR后成骨诱导14 d钙结节形成量较对照组显著减少( t＝40.81、 P<0.001)，成骨分化关键转录因子表达水平也会降低。 结论:lncRNA-DANCR能够抑制hASCs的成脂、成骨分化，DANCR表达量的变化影响hASCs的成脂、成骨分化效果，可以作为调控hASCs成脂、成骨定向分化的潜在靶点。

目的:探讨胶质瘤干细胞(GSCs)微环境中恶变巨噬细胞(tMΦ)的脂代谢特征及其相关分子调控机制，为靶向tMΦ的精准治疗提供实验依据。方法:实验采用巨噬细胞(MΦ)、tMΦ细胞株(包括tMΦ 1、tMΦ 2)，通过检测细胞内的三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)的水平分析tMΦ的脂代谢特征，采用蛋白质免疫印迹(Western blot)实验检测调控脂代谢的关键分子钙调蛋白(CaM)、载脂蛋白E(ApoE)、激素敏感性三酰甘油脂肪酶(HSL)、肝X受体(LXR)的表达水平。构建tMΦ的差异表达长链非编码RNA(lncRNA)表达谱，选择HOXC-AS3为研究对象。建立HOXC-AS3过表达和低表达的tMΦ细胞株。采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测上调、沉默HOXC-AS3后tMΦ内CaM的表达水平。通过克隆形成实验观察HOXC-AS3沉默后tMΦ的集落形成能力，以Transwell实验检测其侵袭能力，通过建立在体移植瘤小鼠模型观察其致瘤能力。对与HOXC-AS3脂代谢相关的结合蛋白进行蛋白组学分析，应用RNA免疫共沉淀实验验证二者是否可形成复合体，进一步通过qRT-PCR、Western blot实验分析HOXC-AS3对其结合蛋白的调控作用。 结果:tMΦ中的TC、TG含量及CaM、ApoE、HSL、LXR蛋白的表达水平均高于正常MΦ(均 P<0.01)。LncRNA表达谱结果提示，与正常MΦ相比，HOXC-AS3在tMΦ 1、tMΦ 2中均呈高表达。克隆形成实验结果表明，沉默HOXC-AS3后的tMΦ 1、tMΦ 2(sh-HOXC-AS3组)的克隆数目明显少于空转染对照组(sh-NC组)(均 P<0.01)；Transwell实验结果表明，sh-HOXC-AS3组tMΦ 1、tMΦ 2的穿膜细胞数少于sh-NC组(均 P<0.01)；致瘤实验结果表明，sh-HOXC-AS3组小鼠的移植瘤体积均小于sh-NC组(均 P<0.01)。qRT-PCR结果提示，过表达HOXC-AS3可上调tMΦ中CaM的表达，而沉默HOXC-AS3可下调tMΦ中CaM的表达(均 P<0.01)。蛋白组学分析结果提示，与HOXC-AS3相关性最高的脂代谢相关蛋白为hnRNPA1。RNA免疫共沉淀结果证实，hnRNPA1与HOXC-AS3可形成复合体，沉默hnRNPA1后tMΦ内的CaM表达下调(均 P<0.01)，而沉默tMΦ内的HOXC-AS3后，hnRNPA1基因和蛋白水平的变化均无统计学意义(均 P>0.05)。 结论:tMΦ中的脂代谢合成水平高于正常MΦ，其机制可能为HOXC-AS3通过与hnRNPA1的结合，从而影响脂代谢分子CaM的表达，进而调控tMΦ的脂代谢重塑。靶向HOXC-AS3可抑制tMΦ在GSCs微环境的增殖和侵袭，HOXC-AS3可能为提高脑胶质瘤免疫治疗效果的潜在靶点。

Hill-Sachs损伤(HSL)是肩关节前脱位时造成的肱骨头后上方压缩性骨折,根据关节盂轨迹理论将其分为在轨型HSL和脱轨型HSL.脱轨型HSL保守治疗效果差,通常需要手术治疗,而手术方案选择不当易造成肩关节再次脱位.针对肱骨头或关节盂进行手术将脱轨型HSL转化为在轨型HSL是治疗目的,目前主流治疗方法包括Remplissage术、肱骨头骨移植术、Latarjet术及Eden-Hybinette术等,不同术式各有利弊,应根据关节孟与肱骨头的骨缺损程度制定手术方案.

目的 分析光动力疗法(PDT)联合CO2激光治疗阴道上皮内瘤变(VaIN)的临床疗效及安全性,为VaIN患者的治疗方案提供参考.方法 选取2022年6月至2023年2月就诊于河南大学人民医院并经阴道镜下活检确诊的VaIN患者80例,采用随机数字表法分为PDT联合CO2激光组和CO2激光组,每组40例.随访6个月,比较两组治愈率、人乳头瘤病毒(HPV)转阴率、不良反应及复发和进展情况.结果 治疗后3、6个月,PDT联合CO2激光组VaIN治愈率分别为77.50％和82.50％,CO2激光组分别为75.00％和70.00％,两组间比较差异均无统计学意义(P＞0.05).两组中低级别鳞状上皮内病变(LSIL)和高级别鳞状上皮内病变(HSL)治愈率在治疗后3、6个月亦均无明显差异(P＞0.05).治疗后3个月PDT联合CO2激光组与CO2激光组HPV转阴率无明显差异(71.79％vs.56.41％,P＞0.05),治疗后6个月PDT联合CO2激光组HPV转阴率明显高于CO2激光组(82.05％vs.58.97％,P＜0.05).在CO2激光组中,1例患者治疗期间出现阴道出血,2例患者出现轻度阴道壁粘连;PDT联合CO2激光组患者未见明显不良反应.治疗后6个月,两组患者均无病变进展;PDT联合CO2激光组1例(3.23％)复发,CO2激光组3例(10.00％)复发,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PDT联合CO2激光治疗VaIN具有较高的治愈率和HPV清除率,是治疗VaIN的一种安全有效的方法.

目的:探讨茶多酚从AMP活化蛋白激酶(AMPK)通路途径调控糖尿病大鼠糖脂代谢的机制.方法:经糖耐量试验筛选6周龄SD大鼠45只,按随机数字表法分为正常组10只和造模组35只,造模组糖尿病造模成功后剩余30只,根据体质量分层法和血糖水平分为模型组、二甲双胍组和茶多酚组,每组各10只.各组均于每日下午灌胃,正常组与模型组给予无菌生理盐水,二甲双胍组给予二甲双胍水溶液,茶多酚组给予茶多酚.干预120 d后,检测各组大鼠的空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);酶联免疫吸附试验法检测肝脏乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和激素敏感性脂肪酶(HSL);实时荧光定量法检测肝脏ACC mRNA、转录因子胆固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)mRNA、3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)mRNA;免疫印迹法检测肝脏AMPKα1、磷酸化AMP活化蛋白激酶α1(P-AMPKα1)、SREBP1、HMGCR、肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT1)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)和磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶(PEPCK).结果:与正常组比较,模型组大鼠的一般情况较差,FBG、TG、TC、LDL-C、ACC 升高(P＜0.05),SREBP1、HMGCR 蛋白及mRNA表达升高(P＜0.05),CPTI、PEPCK 蛋白表达升高(P＜0.05),HDL-C、HSL 降低(P＜0.05),AMPKα 1、P-AMPKα 1、GLUT4 蛋白表达降低(P＜0.05).与模型组比较,茶多酚组大鼠的一般情况改善,TG、LDL-C、ACC降低(P＜0.05),SREBP1、HMGCR蛋白及mRNA表达降低(P＜0.05),PEPCK 蛋白表达降低(P＜0.05),HDL-C、HSL 升高(P＜0.05),AMPKα1、P-AMPKα1、GLUT4、CPT1蛋白表达升高(P＜0.05).与二甲双胍组比较,茶多酚组TC升高(P＜0.05),FBG、TG、LDL-C、HDL-C、HSL、ACC、ACC mRNA、HMGCR mRNA、SREBP1 mRNA、AMPKα1、P-AMPKα1、SREBP1、HMGCR、CPT1、GLUT4、PEPCK相对表达量差异无统计学意义(P＞0.05).结论:茶多酚可能通过调节AMPK通路,影响HSL、HMGCR、SREBP1、CPTI、GLUT4和PEPCK,从而改善糖尿病大鼠糖脂代谢.

目的 探讨非良性脑膜瘤(NM)与良性脑膜瘤(BM)的临床、影像学征象.方法 回顾性分析118 例经手术证实为脑膜瘤患者的临床资料、影像学结果,根据2021 版WHO脑膜瘤组织学分型方法,将患者分为良性(Ⅰ级)组72 例和非良性组(Ⅱ～Ⅲ级)46 例,所有患者术前均行MRI平扫及增强扫描.采用多因素Logistic回归分析良性组和非良性组脑膜瘤的MRI影像学表现及特点.结果 非良性组与良性组在肿瘤最大径、强化方式、形状、边缘、HSL征、脑侵袭、中性粒细胞百分比(NEUT%)、淋巴细胞百分比(LY%)上比较,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析示肿瘤最大径、形状、边缘、HSL征、脑侵袭是非良性脑膜瘤的独立危险因素(P<0.05).结论 术前脑膜瘤MRI特征有助于判断脑膜瘤良恶性,可为术前临床治疗方案的确定提供有效临床辅助.

近年来,灵芝产业高速发展,但其主要药效成分灵芝三萜的含量较低,是影响其品质的重要原因,因此探索一种提高灵芝三萜含量的生物技术手段极具应用前景.本研究以 6 株斜盖伞Clitopilus spp.真菌为材料分别制备多种类型的真菌诱导子,将其添加到灵芝菌丝体液体摇瓶中,研究对灵芝菌丝体生物量和灵芝三萜积累的影响.其中,Clitopilus sp.HSL-YX-7-A 的高压灭菌发酵液(HSL FB)、C.hobsonii NL-19 的菌丝干粉(NL-19 DMP)、C.prunulus 84496 的发酵液提取物(84496 FBE)和Clitopilus sp.HSL-YX-7-A的菌丝提取物(HSL ME)显著提高了灵芝菌丝体生物量和灵芝三萜含量,相对于对照组,生物量分别提高了 450.09%、64.64%、46.97%和 66.14%,灵芝三萜分别提高了 53.01%、25.58%、25.17%和 20.47%,灵芝三萜总产量则分别提高了 585.15%、104.65%、86.43%和110.45%.进一步研究表明,经HSL FB、NL-19 DMP和HSL ME处理后,灵芝三萜生物合成途径关键酶基因hmgs、hmgr、mvd、fps、sqs和osc的表达量显著上调;但84496 FBE处理之后仅上调了hmgs和sqs的表达量.且6个基因的平均表达量与灵芝三萜总产量的提升率呈显著的正相关性(R2=0.972,P<0.05).本研究证实了斜盖伞诱导子能够有效提升灵芝菌丝体生物量和灵芝三萜含量,其中C.hobsonii NL-19 和Clitopilus sp.HSL-YX-7-A均为栎类树种的根系共生菌.本研究进一步为开发斜盖伞真菌作为微生物菌剂提供了基础,同时为提高栎树人工林的生产力和创建"以菌养菌"的药用真菌品质提升技术体系提供了重要策略.

为研究混合植物油替代鱼油对不同品种异育银鲫(Carassius gibelio)生长和脂肪代谢的影响,以鱼油(FO)和混合植物油(BVO,菜籽油:大豆油:棕榈油=55％:25％:20％,以模拟鱼油的脂肪酸组成)为饲料脂肪源,配制等氮等脂饲料配方,分别饲喂异育银鲫"中科3号"(5.01±0.05)g和"中科5号"(5.02±0.05)g,养殖周期70d.在饲料脂肪源效应上,BVO组摄食率显著高于而饲料效率显著低于FO组(P＜0.05).BVO组不同品种异育银鲫肌肉srebp-1c和acc的基因表达量显著升高,并造成体脂肪的显著积累(P＜0.05).BVO组显著改变了鱼体肌肉脂肪酸组成,分别上调和下调了肌肉Σn-6 PUFA和Σn-3 PUFA的相对含量(P＜0.05).在品种方面,不论摄食何种脂肪源,异育银鲫"中科5号"摄食率显著低于而饲料效率显著高于"中科3号"(P＜0.05)."中科5号"肌肉脂肪分解和脂肪酸β氧化基因hsl和aco3及肝脏aco3、fabp1b和fatp1的表达量均显著高于"中科3号"(P＜0.05),且鱼体脂肪含量显著低于"中科3号",表明"中科5号"可以更好地利用饲料脂肪来为机体供能.脂肪源和品种对异育银鲫特定生长率的影响存在交互作用,但"中科5号"摄食BVO组特定生长率与"中科3号"摄食FO组无显著性差异(P＞0.05),表明了植物脂肪源在"中科5号"饲料应用中的巨大潜力.综上,研究阐述了不同品种异育银鲫对饲料脂肪源的利用差异及分子机制,为异育银鲫饲料脂肪源筛选和品种选育提供了理论和实践依据.

目的:观察橙皮苷对高脂饮食诱导NAFLD小鼠及其PLIN1基因表达的影响,并探究其可能的作用机制.方法:4周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为4组,高脂饲料喂养诱导小鼠NAFLD模型,成模小鼠分为模型组、橙皮苷低剂量组(200 mg/kg)和橙皮苷高剂量组(400 mg/kg),另设正常对照组.喂养12 w后眼眶取血,颈椎脱臼处死小鼠,计算肝指数,检测小鼠血清TC、TG、LDL、HDL、ALT、AST水平,HE染色观察肝脏组织病理学,RT-PCR法检测肝组织PLIN1 mRNA表达,Western Blot检测肝脏组织PLIN1蛋白及ATGL、HSL等脂代谢相关蛋白表达.结果:与正常对照组比较,模型组肝组织病理学改变明显;肝指数及血清ALT、AST、TC、TG、LDL水平显著升高,HDL水平显著降低;肝组织ATGL、HSL、p-HSL蛋白表达显著降低,HDL水平,PLIN1及蛋白表达显著升高.经橙皮苷干预后,模型小鼠上述指标均显著改善,高剂量的作用更为明显.结论:高脂饮食可诱导小鼠NAFLD和肝脏脂代谢紊乱,橙皮苷能调节肝脏脂质代谢和PLIN1表达,从而改善小鼠NAFLD.

目的 探讨高脂饮食(high fat diet,HFD)引起的肥胖与低剂量持久性有机污染物——2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)联合作用对肝脏脂质代谢的影响.方法 采用 2×2 析因设计,研究 HFD 与低剂量TCDD(10 ng·kg-1·d-1)联合作用对10 周龄肥胖易感(obesity-prone,OP)雌性大鼠肝脏脂质代谢的影响.4 组实验动物分别为:普通饮食无TCDD处理组(Cont+TCDD 0)、普通饮食低剂量TCDD处理组(Cont+TCDD 10)、高脂饮食无TCDD处理组(HFD+ TCDD 0)及高脂饮食低剂量TCDD处理组(HFD+TCDD 10).油红O染色观察肝脏脂肪沉积,酶法测定肝脏超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)的活性,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测肝脏脂质代谢相关基因mRNA表达.结果 Cont+ TCDD 0 组、Cont+TCDD 10 组、HFD+TCDD 0 组及HFD+TCDD 10 组大鼠体质量分别为(301.29±18.47)g、(312.16±20.45)g、(358.20±27.11)g及(373.83±26.50)g(F=7.43,P<0.01);肝脏油红O阳性区域比值分别为(1.26±0.16)%、(1.66±0.50)%,(9.06±1.54)%、(32.56±2.66)%(F=11.32,P<0.01),肝脏SOD酶活性分别为:(1.54±0.06)U/mg、(1.41±0.15)U/mg、(1.25±0.08)U/mg及(0.76±0.11)U/mg(F=4.31,P<0.05);肝脏GSH-PX酶活性分别为:(1 511.00±69.30)U/mg、(1 409.00±60.81)U/mg、(1 232.00±65.05)U/mg及(965.00±83.44)U/mg(F=3.91,P<0.05).对上述指标进行交互作用分析显示,高脂饮食与低剂量TCDD联合作用使肥胖易感的雌性SD大鼠体质量(F=6.33,P<0.05)及肝脏脂肪积聚(F=12.51,P<0.01)出现协同增加,肝脏抗氧化酶类SOD酶活性(F=4.15,P<0.05)和GPX酶活性(F=3.97,P<0.05)协同降低.对 12 种肝脏脂质代谢相关基因mRNA表达水平检测发现,高脂饮食与低剂量TCDD联合作用增加三酰甘油脂肪酶的限速酶(adipose triglyceride lipase,ATGL)(F=3.69,P<0.05)及脂肪酸转位酶(cluster of differentiation 36,CD36)的mRNA表达(F=5.58,P<0.01),抑制激素敏感脂肪酶(hormone-sensitive lipase,HSL)的mRNA表达(F=4.01,P<0.05),其余 9 种基因表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 高脂饮食与低剂量TCDD联合作用可能协同增加肥胖诱导雌性大鼠肝脏脂质代谢异常.