目的:观察分析Leber先天性黑矇（LCA）致病基因类型及临床表型特征。方法:回顾性临床研究。2019年至2020年于天津医科大学眼科医院就诊并经基因检测确诊的LCA患者2例及其家系成员6名纳入研究。2例患者来自2个无血缘关系家系，均为先证者。详细询问患者病史并行裂隙灯显微镜、超广角眼底照相、自身荧光（AF）、闪光视觉诱发电位（F-VEP）检查。采集所有受检者外周静脉血3~5 ml，提取全基因组DNA。采用新一代目标区域捕获测序技术对包含381个致病基因的遗传眼病捕获芯片进行测序以获得致病基因及突变。对可疑致病突变位点进行Sanger验证，生物信息学分析确定突变位点的致病性。Sanger测序、实时定量聚合酶链反应、家系内共分离验证突变位点。结果:2例患者均为男性，年龄分别为3、27岁。自幼双眼视物不见，伴眼球震颤、指压眼征1例。家系1先证者（F1-Ⅱ-3），视盘边界清楚，视网膜血管走行及黄斑中心凹未见异常。F-VEP检查可见双眼最大正向波隐含期大致正常，振幅大幅下降。家系2先证者（F2-Ⅱ-1），视盘蜡黄，视网膜骨细胞样色素沉着，黄斑区视网膜脉络膜萎缩呈"金箔样"改变。双眼视网膜大片弱AF。家系成员眼部表型未见异常。基因检测结果显示，F1-Ⅱ-3携带 GUCY2D基因c.835G>A（p.D279N）（M1）及等位基因外显子9~19号缺失（M2）复合杂合突变。其父亲、母亲分别携带M2、M1杂合突变。F2-Ⅱ-1携带 CRB1基因c.1576C>T（R526X）（M3）、c.1522T>C（C508R）（M4）复合杂合突变。其父亲、母亲分别携带M3、M4杂合突变。M2、M4为新发现突变位点。 结论:GUCY2D、 CRB1基因的相关致病性突变分别导致家系1和家系2患者罹患LCA1型、LCA8型；不同致病基因其临床表型存在明显差异。

目的:确定1个汉族Leber先天性黑矇（LCA）家系的致病基因突变。方法:回顾性研究。2018年10月在河南省立眼科医院就诊的LCA一家系1例患者和3名家系成员纳入研究。详细询问患者病史并行物体注视性质、追随试验、裂隙灯显微镜、散瞳验光、眼底照相及全视野ERG检查；家系成员行BCVA、裂隙灯显微镜联合前置镜、验光、眼底照相及全视野ERG检查。采集先证者及其兄长、父母的外周静脉血5 ml，提取全基因组DNA。应用包含441个致病基因的遗传眼病捕获芯片进行靶向捕获富集高通量测序以获得致病基因及突变。对可疑致病突变位点通过Sanger进行验证，并行生物信息学分析确定基因突变位点的致病性。结果:患者表现为自幼不追物但有明显畏光和眼球震颤；双眼眼前节及眼底无异常；全视野ERG检查可见双眼视锥、视杆系统功能严重下降。基因检测结果显示，患者RPGRIP1基因存在c.1635dupA和c.3565C> T两个突变。其中，RPGRIP1 c.1635dupA为新发突变。RPGRIP1基因c.1635dupA和c.3565C> T构成复合杂合突变。生物信息学分析结果显示，c.3565C> T为致病突变，c.1635dupA为可能致病突变。结论:RPGRIP1基因新发突变c.1635dupA与c.3565C> T构成复合杂合突变可能是本家系的致病原因。

纤毛是在人体内几乎所有细胞上均有的毛发状突起，在机体各组织器官的形成与维持中发挥着重要功能。纤毛结构和功能异常几乎影响机体的每一个系统，如脑、眼、肝脏、肾脏、骨骼以及生殖系统等。视网膜光感受器细胞是一类可将光信号转化为神经反应的感觉神经元，这个过程称为光转导，发生在视锥细胞及视杆细胞的外节。外节是一种特殊的感觉纤毛，非综合征性纤毛疾病眼部病变几乎都与其缺陷相关，如视网膜色素变性、Leber先天性黑矇等。这些疾病具有遗传异质性，涉及大量基因的突变。它们可以显示相当大的临床和遗传重叠。到目前为止，针对于视网膜纤毛病的研究为数不多，也尚未有较好的临床治疗策略，总结纤毛功能障碍与视觉发育相关疾病的关系，有助于整体了解这些疾病的特征从而进行早期干预。

目的:观察 CRB1突变型Leber先天性黑矇（LCA）和早发视网膜萎缩（EOSRD）患儿基因型与表型关系特征。 方法:回顾性临床研究。2013年1月至2019年12月于上海交通大学医学院附属新华医院眼科临床及基因诊断的 CRB1突变LCA和EOSRD患儿10例纳入研究。二代测序及致病性分析为 CRB1基因突变，并经一代验证及家系共分离分析予以明确鉴定为 CRB1突变型。患儿均行视网膜电图（ERG ）、眼底检查。同时行光相干断层扫描（OCT）检查6例，荧光素眼底血管造影（FFA）检查1例，广角激光扫描检眼镜（UWF SLO ）检查7例。 结果:10例患儿中，LCA 6例，EOSRD 4例。首次就诊平均年龄3.61岁。ERG明暗适应波形平坦6例，重度下降4例。成功检测到致病性突变位点19个，其中新发现突变位点9个。纯合突变1例，复合杂合突变9例。眼底视网膜呈"铜钱"样、"椒盐"样、"骨细胞"样色素改变分别为4、2、1例，"结晶"样色素改变1例，黄斑区色素瘢痕2例。行UWF SLO检查的7例，眼底中周部均可见不同程度小动脉旁色素上皮保留（PPRPE ）。行OCT检查的6例，视网膜外层萎缩，椭圆体带消失。双眼对称性黄斑囊样水肿、黄斑区劈裂样囊变以及右眼黄斑前膜与视盘及黄斑区粘连各1例；视网膜结构粗糙增厚，中心凹变薄3例。FFA检查，晚期视盘荧光素染色，黄斑区荧光素积聚，各象限沿血管走形呈弥漫性强荧光，周边PPRPE呈"霜枝"样强荧光，呈类葡萄膜炎样改变1例。结论:CRB1突变型患者基因型和表型关系复杂，PPRPE是其特征性共性改变。

过去30年来，基因疗法给多种遗传性和获得性视网膜疾病患者带来了很大希望。在大量临床前研究的基础上，全球已进行了60多项视网膜疾病基因疗法的各期临床试验，且Luxturna，一种用于由 RPE65突变导致的2型Leber先天性黑朦(LCA2)的基因治疗产品已批准用于临床。目前的基因传递系统虽然在临床研究中取得了一些成功，但为保证安全性和有效性，仍然需要在载体和眼内给药方式上加以改进和变通。新的腺相关病毒载体技术的发展使大基因传递和小创伤载体注射方式的研究都有所进展。规律间隔成簇短回文重复序列(CRISPR)技术也丰富了基因疗法的手段，必将在视网膜疾病的治疗中得到广泛应用。虽然基因疗法仍面临许多挑战，但预计在未来若干年中，它将成为目前许多不可治性视网膜疾病的临床治疗选择。

目的:观察分析Leber先天性黑矇（LCA）致病基因类型及临床表型特征。方法:回顾性临床研究。基因检测确诊的LCA患者6例及其家系成员18名纳入研究。患者分别来自6个无血缘关系家系。采集所有受检者外周静脉血，提取全基因组DNA。应用包含463个致病基因的遗传眼病捕获芯片进行靶向捕获富集高通量测序，对 TULP1、 RPGRIP1、 GUCY2D基因致病突变位点进行Sanger测序验证；通过相关数据库和PubMed文献检索基因变异的致病性，通过蛋白质预测软件阐释其功能。 结果:6例患者中，男性3例，女性3例；年龄3~33岁。眼球震颤、指压眼征、畏光、夜盲5例；视网膜电图呈熄灭或近熄灭型3例；视网膜病变4例。基因检测结果显示，家系1、2、5患者分别存在 TULP1基因c.1318C> T （p.R440X）、c.1142T>G （p.V381G）复合杂合突变，c.1318C> T （p.R440X）纯合变异以及c.1153G> A （p.G385R）、c.1561C> T （p.P521S）复合杂合变异；家系3、6患者分别存在 RPGRIP1基因c.391delG （p.V131Sfs*39）、c.1468-2A> G （splicing）和c.715delA （p.K239Sfs*36）、c.1765C> T （p.Q589X）复合杂合变异；家系4患者存在 GUCY2D基因c.3177_3178delAC （p.R1060Rfs*11）纯合变异。父母均为相应杂合变异携带者。 TULP1基因c.1142T> G （p.V381G）、 RPGRIP1基因c.391delG （p.V131Sfs*39）、c.715delA （p.K239Sfs*36）及c.1765C> T （p.Q589X）和 GUCY2D基因c.3177_3178delAC （p.R1060Rfs*11）变异为致病性新变异。 TULP1基因产物蛋白381氨基酸位点在物种间具有高度保守性，蛋白质预测软件预测该变异为有害变异。 RPGRIP1基因c.391delG、c.715delA及c.1765C> T变异和 GUCY2D基因c.3177_3178delAC变异可导致各自的产物蛋白提前终止翻译，为致病性变异。 结论:TULP1、 RPGRIP1、 GUCY2D基因的相关致病性变异分别导致了本研究6个家系不同患者罹患LCA 15型、LCA 6型或LCA 1型。

Leber先天性黑朦(Leber congenital amaurosis,LCA)是一种导致儿童先天性盲的严重遗传性视网膜疾病,占儿童先天性双眼盲的10％～20％,占遗传性视网膜病变类疾病的5％[1].由于其症状和体征的非特异性,很多患者较易被诊断为原发性视网膜色素变性或视锥视杆细胞营养不良症,这也为针对该病的治疗增加了难度.因此,遗传学的基因诊断对于LCA的确诊就显得尤为重要.近期在北京同仁医院眼科中心遇到一个RDH12纯合突变型LCA病例,现报道如下.

基因治疗最初的概念是将包含正常基因的DNA序列通过载体导入细胞内以矫正由于该基因缺陷所导致的疾病.由于这个概念非常直观且易于接受,而临床上众多基因缺陷导致的遗传性疾病基本无药可治,因此基因治疗产生伊始便受到了高度关注.随着20世纪七八十年代以来基因工程技术的长足发展,基因治疗从实验室研究进入了临床探索,并于1990年完成了第一个基因治疗的临床试验,进入了一个高速发展期.10年后由于美国的一项基因治疗临床试验发生了患者的意外死亡,全球的基因治疗研究明显放缓.基因治疗的重新兴起以美国食品药品管理局(FDA)批准的治疗Leber先天性黑朦的Luxturna(2017)和用于治疗脊髓性肌萎缩症(SMA)的Zolgensma(2019)上市为标志,疗效确切、价格昂贵的基因药物终于成为临床医生手中能够为以往束手无策的患者解除病痛的有力武器.而除了基因替代性基因补充疗法,针对临床不同需求的基因编辑性基因矫正疗法、基于反义寡核苷酸和小干扰RNA的基因抑制疗法、基于基因开关的基因调控疗法等多种基因治疗方法均在综合研发中.为促进我国基因治疗的发展,本研究概述了基因治疗的发展过程和近年来的发展现状,并展望了基因治疗未来的发展.