毒蕈碱型乙酰胆碱受体(muscarinic acetylcholine receptor，M-AChR)是胆碱能受体的一种，近年来关于各类M-AChR在抑郁症中的机制研究很多，本次主要对M-AChR在抑郁症发病和治疗中的相关机制进行阐述和总结，并且对相关药物的研究进行总结和展望。M1-AChR、M2-AChR在抗抑郁方面发挥重要作用，其可能机制涉及海马和前额叶皮质(prefrontal cortex，PFC)等脑区雷帕霉素靶蛋白复合体1(mammalian target of rapamycin complex 1，mTORC1)信号通路的激活、兴奋性神经递质和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)等因子的释放等，同时蛋白激酶A(protein kinase A，PKA)-α-氨基羟甲基恶唑丙酸(α-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-propionieacid，AMPA)通路的激活在M2-AChR介导的抗抑郁效应中起重要调节作用，但是具体机制以及各类M-AChR间的相互作用仍有待于探究，这也可能成为接下来的研究重点。目前，相关药物的临床试验主要集中在东莨菪碱，随着临床试验的进展，该药物的量效曲线和副作用耐受性等会更加明确，相信更多患者能够从中受益。

目的:利用网络药理学方法研究补阳还五汤治疗缺血性脑卒中涉及的重要信号通路和保护神经血管单元的作用机制。方法:使用TCMSP、上海有机所中药与化学成分数据库和相关文献获取并筛选补阳还五汤的活性成分及作用靶点；使用DrugBank数据库、药物靶标数据库(TTD)、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)和GeneCards数据库获取缺血性脑卒中靶点。使用Cytoscape 3.7.2软件建立活性成分-治疗靶点网络，分析网络获取关键靶点。使用Metascape数据库对治疗靶点进行GO富集分析和KEGG信号通路富集分析。使用AlzData数据库分析治疗靶点的基因表达情况。结果:通过网络分析，获得了补阳还五汤治疗缺血性脑卒中的关键靶点，包括前列腺素内过氧化物合酶2、前列腺素内过氧化物合酶1、毒蕈碱型乙酰胆碱受体M1、β2肾上腺素能受体等；通过富集分析获取了补阳还五汤治疗缺血性脑卒中的多条关键信号通路，包括PI3K-Akt信号通路、钙信号通路、IL-17信号通路、血小板活化、Apelin信号通路、NF-κB信号通路、AMPK信号通路和花生四烯酸代谢通路等；通过基因表达分析了补阳还五汤对不同组织细胞的作用，发现治疗靶点在内皮细胞、星形胶质细胞、小胶质细胞、少突胶质细胞、少突胶质细胞前体细胞和神经元中调控多种生物过程、细胞组成和分子功能。结论:补阳还五汤治疗缺血性脑卒中具有多成分、多靶点、多通路、联系复杂的特点，在基因的细胞表达层面与神经血管单元密切相关，治疗作用机制包括神经保护、神经发生、抗血栓、促血管再生、胶质细胞调控等。

小儿遗尿症是儿科临床常见疾病之一,近年来其患病率逐渐上升.遗尿症不仅可能影响患儿神经精神发育,甚至对患儿身心成长造成不利影响.缩泉丸是临床治疗小儿遗尿疗效较为显著的方剂之一,文章通过查阅近年来发表的相关文献,简要说明缩泉丸通过维持调控β3 肾上腺素能受体(β3-AR)与M3 毒蕈碱乙酰胆碱受体(M3 受体)的平衡、调节盆神经异常放电、调控离子通道从而稳定逼尿肌来实现温化肾气和缩尿止遗的功效,为缩泉丸的临床疗效机制提供一定的客观依据.

目的 研究胃肠安丸(Weichang'an pill,WCA)、胃肠安丸醇提物(Ethanol extract of Weichang'an pill,EE)、胃肠安丸水提物(Water extract of Weichang'an pill,WE)及其活性成分对乙酰胆碱(Acetylcholine,ACh)诱导的大鼠离体回肠平滑肌收缩的影响及机制.方法 采用离体组织浴实验,在ACh的作用下,加入WCA、EE、WE或其活性成分,记录离体大鼠回肠平滑肌的收缩张力;通过分子对接的方法探究活性成分与毒蕈碱型乙酰胆碱M3受体的结合亲和力.结果 WCA、EE、WE均可明显抑制ACh诱导的回肠平滑肌兴奋性收缩.活性成分木香烃内酯、去氢木香内酯、檀香醇、麝香酮、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、巴豆苷、厚朴酚及和厚朴酚也对ACh诱导的回肠平滑肌收缩有明显的抑制作用.结论 WCA、EE、WE及其活性成分可能通过阻断回肠平滑肌细胞膜上的M3受体与ACh的结合,发挥促进肠平滑肌松弛的作用.

目的:探讨不同同源模板所获得M1毒蕈碱乙酰胆碱受体模型的合理性及可靠性.方法:以牛视紫红素受体、人源β2-肾上腺素受体、M2胆碱受体和M3胆碱受体为模板,分别对M1胆碱受体进行同源建模;采用分子对接获得各M1胆碱受体同源模板与配体的互作模式,并与已报道的M胆碱受体晶体结构进行静态比对,得到最佳M1胆碱受体同源模板;采用分子动力学模拟分析配体与关键残基距离的变化,对M1胆碱受体同源模板进行动态验证.结果:M2胆碱受体与M1胆碱受体的序列相似度较高,为67.9％;以Inactive M2胆碱受体为模板构建的M1胆碱受体(M1Rinactive-M2R)与其他晶体结构间RMSD值的均值最低,为1.39 (A);M1Rinactive-M2R别构位点K392及E397残基侧链与结合口袋距离更近,与配体结合构象更匹配;分子对接结果显示,双位点别构激动剂VU0184670与M1Rinactive-M2R别构结合位点Y85、Y381的距离分别为4.8 (A)、6.8 (A),优于其他模型;分子动力学模拟后,配体与Q177残基的距离由7.4 (A)降至2.9(A),提示配体VU0184670向Q177方向偏转,与文献结果一致.结论:以Inactive M2受体结构为模板构建的M1胆碱受体模型最为合理,更接近M1胆碱受体的晶体结构.本研究为M1胆碱受体药物开发提供重要工具,为其他GPCRs受体同源建模提供创新范式.

抑郁症(major depressive disorder,MDD)全球患病率约为4.4％,患病人数高达3.22亿人,已成为世界范围内的首要致残原因[1].目前,抗抑郁药治疗的总体有效率为60％～70％,但一般需要2～4周才能起效[2-3],不利于患者的功能恢复,并在一定程度上增加了自杀风险.因此,缩短抗抑郁药起效时间具有重要的临床意义.东莨菪碱(scopolamine)是毒蕈碱型乙酰胆碱受体(muscarinic acetylcholine receptor,M受体)的非选择性拮抗剂.近年来研究表明东莨菪碱具有和氯胺酮相似的快速抗抑郁效应,我们拟对其抗抑郁的临床研究现状及相关机制进行探讨.

目的:M1毒蕈碱型乙酰胆碱受体(M1受体)在改善学习和记忆等高级认知功能障碍中起重要作用,本文利用计算机辅助药物设计和高表达各M受体亚型的CHO细胞(Chinese hamster ovary cell,中国仓鼠卵巢细胞),以期筛选获得新型M1受体选择性别构激动剂.方法:通过计算机辅助药物设计方法,对已知具有M1受体选择性作用别构激动剂与M1受体的晶体结构进行对接,确定活性对接口袋,据此进行化合物库虚拟筛选;利用高表达各M受体亚型的CHO细胞,对化合物进行体外活性检测.结果:虚拟筛选得到184个化合物,其中,体外实验显示化合物AJ-292和AG-205-6对M1受体有明显的激动效果,而对M3、M5受体则无影响.结论:综合利用虚拟筛选、结构分析以及特异性活性分析,筛选出具有M1受体高选择性激动作用的化合物AJ-292和AG-205-6,为设计开发新型的M1选择性别构激动剂奠定了基础.

目的:探讨小陷胸汤功效作用机制.方法:采用中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)及网络文献收集小陷胸汤中三味中药的化合物,确定候选化合物后通过Pharm Mapper进行靶标预测,将成分、靶标导入Cytoscape 3.2.1软件,进行成分-靶标作用网络构建;并采用Cytoscape中的BiNGO APP对潜在靶标进行GO分析.结果:以口服生物利用度(OB)≥40％、类药性(DL)≥0.18为筛选条件,确定候选化合物15种,进一步对应潜在靶标74个;成分-靶标作用网络发现黄连中的氢化小檗碱[(R)-Canadine]和半夏中的豆甾烯醇(Stigmasterol)可能是其主要的活性成分;GO分析发现信号传导、信号处理过程及相关分子功能和细胞组件变化最为显著,毒蕈碱的乙酰胆碱受体M(CHRM)、雌激素受体3(NR3)和β2肾上腺素能受体(ADRB)各亚基出现的频率最高.结论:小陷胸汤可能是通过细胞中各细胞器膜蛋白变化,引起跨膜信息传导过程改变,最终作用于相关蛋白而发挥作用的.

目的:基于网络药理学预测二至丸治疗良性前列腺增生的作用靶点,探讨其多成分-多靶点-多通路的作用机制,对其治疗良性前列腺增生的分子机制进行科学阐释.方法:采用网络药理学软件生物反应路径分析(IPA)构建“化合物-靶点-疾病”的网络;对二至丸作用靶点构建蛋白互作网络(PPI),进行基因富集分析(GO)功能注释和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,预测二至丸治疗前列腺增生的作用机制.结果:二至丸总共有19个化合物在IPA中,并且芹菜素(Apigenin),木犀草素(Luteolin),熊果酸(Oleanolic acid)和槲皮苷(Quercitrin)4个化合物是女贞子和墨旱莲共有化合物,是二至丸的主要物质基础;毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3(CHRM3),毒蕈碱型乙酰胆碱受体M2(CHRM2),尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR),激肽释放酶3(KLK3),钙黏蛋白1(CDH1),趋化因子3(CCL3)和金属蛋白酶1(MMP1)等二至丸治疗前列腺增生的关键靶点;PPI网络靶点蛋白有20条GO功能富集和5条主要的KEGG通路富集,并对相关靶点进行Docking验证.结论:二至丸通过激活MMP1和抑制KLK3以及CCL3蛋白表达,诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖,干预丝裂原活化蛋白激酶/胞外信号调节激酶(MAPK/ERK),核转录因子-κB(NF-κB)等信号通路发挥抑制前列腺增生的作用.

目的 观察雌激素和黑升麻对去势大鼠下颌下腺神经型一氧化氮合酶(neuronal nitricoxide synthase,nNOS)及瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)表达的影响,探讨雌激素和黑升麻的作用机制,为临床用药提供参考.方法 将成年SD雌性大鼠40只分为对照组(假手术)、去卵巢组(去除卵巢)、雌激素治疗组(去除卵巢+雌激素治疗)和黑升麻治疗组(去除卵巢+黑升麻治疗),每组10只.大鼠术后恢复2周,对照组和去卵巢组用蒸馏水,雌激素和黑升麻治疗组分别用β-雌二醇和黑升麻治疗,4周后免疫组化法比较各组大鼠下颌下腺nNOS、TRPV1、M1和M3型毒蕈碱型乙酰胆碱受体(muscarinic acetylcholine receptor,member 1 and 3,简称M1和M3受体)的表达.利用乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)染色比较各组大鼠下颌下腺AChE的表达.结果 去卵巢组nNOS、TRPV1、M1和M3受体表达(0.16±0.01、0.21±0.01、0.15±0.02、0.09±0.02)较对照组(0.23±0.02、0.28±0.01、0.25±0.03、0.19±0.03)均显著降低(P＜0.05);雌激素治疗组(0.23±0.01、0.28±0.02、0.23±0.03、0.19±0.01)与对照组差异无统计学意义(P＞0.05);但黑升麻治疗组与去卵巢组相比,nNOS、TRPV1和M3受体表达未见显著改变,仅M1受体表达(0.22±0.03)显著增加(P＜0.05).去卵巢组和雌激素治疗组AChE表达(0.14±0.01和0.15±0.01)较对照组(0.10±0.01)显著增加(P＜0.05);黑升麻治疗组AChE表达(0.09±0.01)与对照组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 雌激素可显著增加大鼠下颌下腺nNOS和TRPV1表达,雌激素可能通过nNOS和TRPV1调控下颌下腺唾液分泌功能.黑升麻和雌激素的作用机制并不相同,黑升麻不经nNOS和TRPV1发挥调控作用.