目的 比较分级诊疗下某基层医院和三甲儿童医院的儿童急性呼吸道感染病原谱差异.方法 收集2021年11月至2022年3月北京某基层医院及某三甲儿童医院临床诊断为急性呼吸道感染患儿的呼吸道标本,采用多重逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)与毛细电泳联用技术检测13种呼吸道病原,统计学方法分析两家医院急性呼吸道感染儿童病原谱差异.结果 基层医院纳入患儿112例,男女比例为1∶1,呼吸道病原总阳性检出率为71.43％(80/112),单种病原感染72例(64.29％,72/112),混合感染8例(7.14％,8/112,均为2种病原);三甲儿童医院纳入患儿115例,男女比例1.02∶1,呼吸道病原总阳性检出率为70.43％(81/115),单种病原感染66例(57.39％,66/115),混合感染15例(包括2种病原感染12例,10.43％,12/115;3种病原感染3例,2.61％,3/115).0～3岁婴幼儿中,基层医院与三甲儿童医院HMPV阳性检出率(52.9％,9/17;5.3％,4/75)差异有统计学意义(x2=38.10,P<0.05);三甲儿童医院儿童RSV阳性检出率(44.0％,33/75)高于基层医院(23.5％,4/17),但差异无统计学意义(x2=2.415,P>0.05).4～15岁儿童中,基层医院Flu B阳性检出率为31.58％(30/95),三甲儿童医院为20.0％(8/40),差异有统计学意义(x2=6.96,P<0.05);三甲儿童医院MP阳性检出率为37.5％(15/40),基层医院未检出,差异有统计学意义(x2=40.08,P<0.05).结论 2021-2022年冬春季节北京某基层医院与三甲儿童医院的儿童呼吸道感染病原谱构成存在差异,各年龄段病原谱分布也不同,提示分级诊疗以及基层医院开展核酸检测的必要性.

目的:动态观察重型颅脑损伤（sTBI）急性期大鼠神经功能缺损评分（NSS）、Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路、脑源性神经营养因子（BDNF）与神经生长因子（NGF）的表达规律，探讨活血化瘀方剂的干预作用。方法:将126只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组（生理盐水2 kg/L）、模型组（生理盐水2 kg/L）、脑蛋白水解物组（BP组，5.6 g/kg）、桃红四物汤组（TH组，10.2 g/kg）、血府逐瘀汤组（XF组，15.6 g/kg）、通窍活血汤组（TQ组，9.6 g/kg）、补阳还五汤组（BY组，28.7 g/kg）7组，每组18只。采用改良Feeney自由落体法建立sTBI大鼠模型；对照组不予创伤处理。各组分别于伤后6 h灌胃相应药物，伤后1、3、7 d进行NSS评分；取大鼠海马组织，采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测Wnt3a和β-catenin的mRNA表达；采用免疫组化法检测BDNF和NGF的阳性表达。结果:与对照组比较，模型组大鼠伤后1 d即出现明显的颅脑损伤症状，表现为NSS评分明显升高，Wnt3a和β-catenin的mRNA表达明显上调，BDNF和NGF阳性表达明显增加，说明sTBI大鼠模型制备成功，并随时间延长呈现一定自我修复能力。与模型组相比，XF组、TQ组和BY组NSS评分于伤后1 d即明显下降（分：6.6±1.5、6.1±2.0、5.7±2.4比9.4±1.5，均 P<0.05），而BP组及TH组NSS评分于伤后7 d才明显下降，且TQ组和BY组NSS评分下降幅度较其他药物组更加显著。与模型组比较，BP组海马组织Wnt3a和β-catenin的mRNA表达分别于伤后1 d、3 d明显升高，并随时间延长持续升高；4个活血化瘀方剂组Wnt3a和β-catenin的mRNA表达于伤后1～3 d均有不同程度的波动，但均于伤后7 d明显高于模型组，以BY组升高更为显著〔Wnt3a mRNA（2 -ΔΔCt）：154.7±4.1比17.4±1.0，β-catenin mRNA（2 -ΔΔCt）：17.05±0.45比2.74±0.13，均 P<0.05〕，其次为TQ组〔Wnt3a mRNA（2 -ΔΔCt）：126.6±2.8比17.4±1.0，β-catenin mRNA（2 -ΔΔCt）：8.70±1.19比2.74±0.13，均 P<0.05〕。与模型组比较，BP组BDNF和NGF的阳性表达在伤后1 d升高，但3 d达峰值后有所下降；4个活血化瘀方剂组BDNF和NGF的阳性表达于伤后1～3 d均有不同程度的波动，但均于伤后7 d明显高于模型组，其中TQ组和BY组在伤后1 d即明显高于模型组〔BDNF阳性细胞（个/MP）：56.4±6.2、61.6±7.0比37.4±2.0，NGF阳性细胞（个/MP）：58.4±5.0、62.4±4.4比53.4±3.6，均 P<0.05〕，且伤后7 d时升高幅度较其他药物组更为显著。 结论:桃红四物汤、血府逐瘀汤、通窍活血汤和补阳还五汤对sTBI急性期大鼠的神经再生修复均有一定疗效，但作用强度有所不同，以补阳还五汤和通窍活血汤起效更快、效果更好。

目的:了解苏州市2021年7月至2022年1月流感流行期间乙型流感病毒(influenza B virus, FluB)的基因组和遗传进化特征。方法:采用实时荧光－逆转录聚合酶链反应(Real-time fluorescence reverse transcription polymerase chain reaction, Real-time RT-PCR)法对标本进行流感病毒(influenza virus, Flu)分型检测。对检出的FluB毒株，经全基因组捕获和文库构建，利用Miseq高通量测序平台对样本进行测序。采用MEGA X软件以邻接法(Neighbor-Joining method, NJ)构建FluB血凝素(hemagglutinin, HA)、神经氨酸酶(neuraminidase, NA)和基质蛋白(matrix protein，MP)基因系统发育树；采用NetNGlyc 1.0 server软件预测HA和NA蛋白潜在N-糖基化位点。结果:在送检的1 500份咽拭子样本中，280份检出FluB，对其中53株样本完成了FluB全基因组序列测定。序列分析显示，FluB毒株8个基因节段(PB1、PB2、PA、HA、NP、NA、MP、NS)核苷酸序列相似性分别为99.3%~100%、98.1%~100%、98.8%~100%、98.0%~100%、99.2%~100%、98.4%~100%、98.2%~100%、99.0%~100%。除2021年7月4份样本的FluB为V1A.3进化分支外，其余样本均为V1A.3a.2进化分支。与疫苗株B/Washington/02/2019相比，2021年10月份以后样本的FluB HA蛋白氨基酸序列存在9~11个差异位点，共享9个突变位点(H122Q、A127T、R133G、P144L、N150K、G184E、N197D、K203R、R279K)；未发现奥司他韦等NA抑制剂相关耐药突变。FluB HA和NA蛋白分别具有11个和4个潜在糖基化位点。结论:2021年7月至2022年1月期间，苏州市流行的FluB以V1A.3a.2毒株为优势流行株，HA和NA蛋白氨基酸序列发生多位点突变。

目的:通过转录组学确定结核表位疫苗MP3RT在人源化动物模型上诱导的差异表达基因（DEG），为阐明MP3RT潜在的分子机制提供新思路。方法:本研究于2019年8月开始至2022年2月完成。本研究采用edgeR软件以差异倍数≥1.5且 P<0.05为筛选条件筛DEG，对筛选出的DEG进行基因本体论（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析以及蛋白互作网络分析。并对上述DEG通过RT-qPCR进行实验验证，采用GraphPad Prism 8软件进行统计学分析。 结果:转录组学鉴定了367个DEG（214个上调，153个下调）。生物信息学分析发现，上述DEG的GO富集显著聚焦于细胞代谢、生长、凋亡、炎症等词条，KEGG富集显著聚焦于MAPK信号通路等炎症相关通路。蛋白互作网络分析显示，蛋白Abl1聚集度最大，聚集系数最高，连通性最好。RT-qPCR结果显示，与磷酸盐缓冲液（PBS）组相比，MP3RT疫苗组中 cpne4（ t=2.48， P=0.048 0）、 h2-q10（ t=2.95， P=0.025 6）、 mef2c（ t=2.87， P=0.028 4）、 cr2（ t=3.23， P=0.178）、 ablim1（ t=2.91， P=0.033 5）、 dll1（ t=2.70， P=0.027 3）和 ms4a2（ t=3.03， P=0.019 2）基因表达水平显著上调， cd163l1（ t=2.56， P=0.043 0）、 il1r1（ t=2.91， P=0.022 7）和 cd34（ t=2.42， P=0.046 2）基因表达水平显著下调。 结论:MP3RT表位疫苗在人源化动物模型上诱导了367个DEG，这些DEG与新陈代谢和免疫反应相关，p38 MAPK和JNK/MAPK信号通路在MP3RT疫苗分子机制中扮演着重要的角色。

目的:了解河南地区呼吸道感染住院儿童鼻病毒（human rhinovirus，HRV）的流行病学情况。方法:选取2019年3月至2020年2月就诊于郑州大学附属儿童医院的11 214例呼吸道感染住院患儿，采用RT-PCR与毛细管电泳联用技术对HRV等12种病原体进行检测，分析HRV感染与患儿性别、年龄及发病季节的关系。结果:HRV检出率为25.33%（2 841/11 214）。HRV阳性标本中，与其它病原混合感染的构成比为41.08%（1 167/2 841），其中与肺炎支原体（mycoplasma pneumoniae，MP）合并感染最多（28.36%，331/1 167）。咽拭子（25.16%）和痰液（33.40%）HRV检出率较高，肺泡灌洗液（13.94%）最低（ x2=32.345， P<0.01）。不同年龄段患儿HRV检出率差异有统计学意义（ x2=76.433， P<0.01）。咽拭子样本中男童HRV感染率（26.55%）较女童（23.16%）高（ x2=15.523， P<0.01）。夏季（37.31%）、秋季（37.11%）HRV检出率较高（ x2=1 056.254， P<0.01），且HRV合并感染夏、秋季（13.74%、14.18%）较春、冬季（6.50%、5.78%）高（ x2=329.094， P<0.01）。 结论:河南地区呼吸道感染住院患儿夏、秋季HRV的检出率较高，以上呼吸道感染为主，3岁以下婴幼儿期是HRV的易感人群。HRV常与其他病原合并感染，其中以MP、RSV和HPIV最为常见，且夏、秋季合并感染较高。

目的:对新疆乌鲁木齐市活禽市场家禽中分离的H5N8亚型禽流感病毒(avian influenza virus, AIV)进行遗传进化和分子特征分析。方法:2016年于乌鲁木齐市某活禽市场采集家禽咽和泄殖腔拭子，经接种鸡胚、血凝试验和RT-PCR等方法分离鉴定AIV，以AIV通用引物扩增病毒基因并进行全基因组测序，利用BLAST、Clustal W、MEGA-X和DNAStar等软件进行序列比对、系统进化和分子特征分析。结果:从家禽双腔拭子样品分离到5株H5N8 AIVs，其各基因的一致性在99.70%~100.00%之间，说明5株病毒为同一来源，统一命名为XJ-H5N8/2016。系统进化分析表明，该病毒株血凝素基因( HA)、 PB2和 NS均与2016—2017年湖北、山西和三门峡等地迁徙天鹅以及印度水鸭中分离的H5N8 AIVs聚在一起，同时，3个基因还与国内水貂中分离的H5N6 AIVs以及福建首例人感染H5N6 AIVs聚在一起；神经氨酸酶基因( NA)与2016年印度水鸭中分离的H5N8 AIVs聚在同一终末分支； PB1、 MP、 PA和 NP均与2017年自埃及、喀麦隆、乌干达、刚果等非洲国家野鸟和家禽中分离的H5N8 AIVs聚在一起。XJ-H5N8/2016的HA裂解位点均含5个连续的碱性氨基酸，为高致病性，病毒基因发生的多个突变可增强病毒对哺乳动物的毒力和致病力。 结论:从活禽市场分离的5株H5N8 AIVs呈高致病性，与2016—2017年湖北、山西、三门峡等地区以及非洲和印度等地迁徙候鸟和家禽中分离的H5N8 AIVs进化关系密切，部分基因还与国内水貂中分离以及感染人的H5N6 AIVs的遗传关系较近，其多个突变可增强AIV对哺乳动物的感染力和致病力，潜在感染人类和威胁公共卫生安全的风险。

目的:了解宁波市儿童呼吸道感染病原体的流行特征，为临床防控和诊治提供参考依据。方法:收集2019年7～10月份间宁波市妇女儿童医院就诊急性呼吸道感染患儿的标本共3 103例，通过基于毛细电泳的多重RT-PCR法检测常见的13种呼吸道病原体，并对结果进行统计分析。结果:3 103例患儿中2 053例呼吸道病原体检测阳性，总阳性率为66.16%。检出率前3位分别为肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae, Mp)33.19%(1 030/3 103)、鼻病毒(human rhinovirus, HRV)24.20%(751/3 103)和腺病毒(human adenovirus, HADV)8.77%(272/3 103)。病原体在男性患儿和女性患儿中的检出率分别为65.70%(1 157/1 761)和66.77%(896/1 342)，差异无统计学意义( χ2＝0.386, P＝0.535)；在年龄≤1岁组、1～≤3岁组、3～≤6岁组和6～≤16岁组检出率分别为58.02%(626/1 079)、74.37%(589/792)、73.78%(543/736)和59.48%(295/496)，组间差异具有统计学意义( χ2＝84.770, P＝0.000)；7～10月份检出率依次为71.64%(341/476)、68.81%(536/779)、67.01%(648/967)和59.93%(528/881)，差异具有统计学意义( χ2＝24.395, P＝0.000)；单一感染率为52.30%(1 623/3 103)，2种及以上病原体混合感染率为13.86%(430/3 103)，其中以2种病原体混合感染多见。 结论:宁波市儿童呼吸道病原体检出以Mp和HRV为主，病原体检出率在不同年龄阶段和不同月份间存在一定差异。

目的 了解分析合肥地区住院儿童13种呼吸道病原体感染情况.方法 选取2020年9月至2023年9月安徽省立医院感染病院呼吸道病毒检测标本3 643例,采用多重反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增了解13种呼吸道感染病毒:甲型流感病毒(InfA)、甲型流感病毒H1N1病毒(H1N1)、甲型流感病毒H3N2(H3N2)、副流感病毒(HPIV)、偏肺病毒(HMPV)、肺炎支原体(MP)、呼吸道合胞病毒(HRSV)、腺病毒(HADV)、鼻病毒(HRV)、博卡病毒(Boca)、衣原体(Ch)、乙型流感病毒(InfB)和冠状病毒(HCOV)的流行病学特点.结果 3 643例标本中阳性标本共计2 222例,阳性率为60.99％,354例为混合病毒感染,多重感染阳性率为9.72％,1868例为单一病毒感染(除InfA未检出外),阳性率为51.27％.1299例男性呼吸道病毒检测阳性(60.96％),923例女性呼吸道病毒检测阳性(61.04％),男女患儿感染的阳性率差异无统计学意义,感染患者主要集中于＜1岁组(61.94％).春季以HRV检出为主(20.50％),夏季以MP和HRV检出为主(24.79％和12.39％),秋季以HRSV和MP检出为主(15.09％和14.30％),HRSV在冬季检出率最高(19.05％).结论 呼吸道病毒感染在合肥住院儿童中非常普遍,近年来MP、HRV和HRSV是非常突出的呼吸道感染的重要病原体,呼吸道病毒感染与患儿年龄和季节分布有关,这些发现可能为合肥住院儿童呼吸道易感染患者的临床诊断治疗及合理用药提供有力的证据.

目的 观察加味宣白承气汤对肺炎支原体肺炎(MPP)小鼠肠道菌群及免疫的影响.方法 选取30只雄性BALB/c小鼠,随机分为空白组、模型组和加味宣白承气汤组,每组10只.除空白组外,其余小鼠以肺炎支原体国际标准株(MPFH)滴鼻造模,加味宣白承气汤组同时以加味宣白承气汤灌胃,连续3 d.第4天取小鼠肺、肠组织,苏木精-伊红(HE)染色观察其病理变化;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测小鼠肺组织肺炎支原体脱氧核糖体(MP-DNA)定量及小鼠粪便中丁酸梭菌、黄瘤胃球菌数量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子[γ干扰素(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、白介素-17(IL-17)]水平及粪便中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)水平;Western blot法检测肺、肠组织Toll样受体4(TLR4)蛋白表达.结果 ①模型组肺、肠组织病理切片可见炎性浸润最为严重,加味宣白承气汤组炎性浸润较轻.②与模型组比较,加味宣白承气汤组MP-DNA含量显著下降(P<0.05).③与空白组比较,模型组及加味宣白承气汤组黄瘤胃球菌、丁酸梭菌均显著减少(P<0.05);与模型组比较,加味宣白承气汤组黄瘤胃球菌、丁酸梭菌均显著增加(P<0.05).④与空白组比较,模型组及加味宣白承气汤组sIgA含量显著减少(P<0.05);与模型组比较,加味宣白承气汤组sIgA含量显著增加(P<0.05).⑤与空白组比较,模型组、加味宣白承气汤组BALF中IFN-γ、TGF-β、IL-6、IL-10、IL-17水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,加味宣白承气汤组上述指标均显著降低(P<0.05).⑥黄瘤胃球菌、丁酸梭菌与sIgA含量均呈正相关(P<0.05).⑦与空白组比较,模型组、加味宣白承气汤组肺、肠组织中TLR4蛋白表达量均显著增加(P<0.05);与模型组比较,加味宣白承气汤组肺、肠组织中TLR4蛋白表达量均显著降低(P<0.05).结论 加味宣白承气汤可下调TLR4的表达,降低MPP炎症因子水平,有良好的抗炎作用;同时该方能有效修复肺、肠组织损伤,增加肠道黄瘤胃球菌及丁酸梭菌菌群数量,促进肠道黏膜sIgA水平升高.

目的 探讨支原体感染儿童肺泡灌洗液RT-PCR检测的早期诊断和病情评估.方法 选取2016年1月至12月安徽省儿童医院收治的235例感染肺炎支原体(MP)的患儿,检测重症肺炎和轻症肺炎肺泡灌洗液MP-DNA和血清MP-IgM,根据2项指标的差异和MP-DNA拷贝量的高低,分析MP-DNA与病情的关系.结果 男患儿MP-IgM阳性率低于女患儿,>3~14岁患儿MP-DNA阳性率高于1~3岁患儿,入院前病程≤7 d患儿MP-IgM阳性率低于入院前病程>7 d患儿,差异有统计学意义(P<0.05).重症肺炎患儿中,MP-DNA高拷贝量占85.71%,高于轻症肺炎患儿,差异有统计学意义(P<0.05);重症肺炎的MP-DNA拷贝量高于轻症肺炎患儿,差异有统计学意义(P <0.05).结论 RT -PCR 法检测支原体肺炎患儿肺泡灌洗液MP-DNA拷贝量可为快速确诊和判断患儿病情提供参考.