目的:评价组织蛋白酶B(CTSB)在大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)中的作用及其与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的关系。方法:SPF级健康雄性SD大鼠36只，6~8周龄，体重220~300 g，采用随机数字表法分为3组( n＝12)：对照组(C组)、VILI组(V组)和VILI+CA074-me组(Me组)。C组和V组大鼠气管插管前1 h腹腔注射等量生理盐水，Me组腹腔注射CA074-me 5 mg/kg。C组自主呼吸4 h，V组和Me组行机械通气4 h，通气参数：V T 20 ml/kg，通气频率80次/min，FiO 2 21%，PEEP 0 cmH 2O。气管插管前和自主呼吸或通气结束后采集股动脉血行动脉血气分析，记录PaO 2，随后处死大鼠，收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和取肺组织，确定肺组织湿重/干重(W/D)比值，HE染色法观察病理学结果并进行肺损伤评分，采用ELISA法检测BALF及血清IL-1β和IL-18浓度。采用qRT-PCR法检测肺组织CTSB、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和caspase-1的mRNA表达，Western blot法检测肺组织CTSB、NLRP3、ASC和caspase-1的表达。 结果:与C组比较，V组和Me组通气结束后PaO 2降低，肺损伤评分和W/D比值、BALF及血清IL-1β和IL-18浓度升高，肺组织CTSB、NLRP3、ASC、caspase-1及其mRNA表达上调( P<0.01)；与V组比较，Me组通气结束后PaO 2升高，肺损伤评分和W/D比值、BALF及血清IL-18和IL-1β浓度降低，肺组织CTSB、NLRP3、ASC、caspase-1及其mRNA表达下调( P<0.01)。 结论:CTSB参与了大鼠VILI的过程，其机制与激活NLRP3炎症小体有关。

目的:建立预测糖尿病足患者并发脓毒症风险的列线图预测模型，为临床防治提供参考。方法:回顾并收集2022年1月至2023年3月在天津医科大学朱宪彝纪念医院住院的430例糖尿病足患者的临床资料，包括患者的年龄、性别、既往史、吸烟饮酒史、家族史、糖尿病病程、糖尿病足Texas分级及入院24 h内实验室指标。根据患者住院期间是否并发脓毒症分为脓毒症组和非脓毒症组；比较两组患者临床资料的差异；采用多因素Logistic回归分析筛选糖尿病足患者住院期间并发脓毒症的影响因素，并建立列线图预测模型；通过受试者工作特征曲线（ROC曲线）、校准曲线和决策曲线分析（DCA）对预测模型的效能进行评价；使用Bootstrap法进行内部验证。结果:430例患者均纳入最终分析，其中90例患者在住院期间并发脓毒症，340例未并发脓毒症。两组患者糖尿病病程、糖尿病足Texas分级、白细胞计数（WBC）、中性粒细胞计数（NEU）、淋巴细胞计数（LYM）、中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）、血红蛋白（Hb）、白蛋白（Alb）、糖化血红蛋白（HbA1c）、C-反应蛋白（CRP）、血尿素氮（BUN）差异均有统计学意义。多因素Logistic回归分析显示，糖尿病病程〔优势比（ OR）＝2.774，95%可信区间（95% CI）为1.053～7.308， P＝0.039〕、糖尿病足Texas分级（ OR＝2.312，95% CI为1.014～5.273， P＝0.046）、WBC（ OR＝1.160，95% CI为1.042～1.291， P＝0.007）、HbA1c（ OR＝1.510，95% CI为1.278～1.784， P<0.001）、CRP（ OR＝1.007，95% CI为1.000～1.014， P＝0.036）是糖尿病足患者住院期间并发脓毒症的独立危险因素，而Alb为保护因素（ OR＝0.885，95% CI为0.805～0.972， P＝0.011）；基于以上6个指标构建列线图预测模型。ROC曲线分析显示，列线图预测模型识别脓毒症患者的ROC曲线下面积（AUC）为0.919（95% CI为0.889～0.948）；内部验证显示，该预测模型的AUC为0.918（95% CI为0.887～0.946）。Hosmer-Lemeshow检验显示， χ2＝2.978， P＝0.936，说明预测模型的校准度较好；校准曲线显示，该模型对脓毒症的预测概率与实际概率一致性较好。DCA曲线提示该模型具有良好的临床有效性。 结论:基于糖尿病病程、糖尿病足Texas分级、WBC、HbA1c、CRP、Alb 6个影响因素构建的列线图预测模型对于糖尿病足患者住院期间脓毒症的发生具有良好的预测价值，有助于临床医师筛查糖尿病足患者进展为脓毒症的可能性，及时针对不同患者进行个体化干预。

目的:评价富氢液对小鼠肾缺血再灌注时NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体活性的影响。方法:雄性C57BL/6J小鼠30只，体重20～25 g，6～8周龄，采用随机数字表法分为5组( n＝6)：假手术组(S组)、肾缺血再灌注组(I/R组)、肾缺血再灌注＋NLRP3抑制剂MCC950组(I/R＋M组)、肾缺血再灌注＋富氢液组(I/R＋H组)和肾缺血再灌注＋MCC950＋富氢液组(I/R＋M＋H组)。采用夹闭双侧肾蒂30 min后恢复灌注的方法制备肾缺血再灌注损伤模型。I/R＋M组和I/R＋M＋H组术前连续14 d腹腔注射MCC950 20 mg/kg；I/R＋H组和I/R＋M＋H组术后1 h腹腔注射富氢液5 ml/kg，其余各组给予等容量生理盐水。于再灌注24 h时，心脏采集血标本，检测BUN、Cr和肾损伤分子-1(Kim-1)水平，采用ELISA法测定血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度。然后处死小鼠，取肾组织，光镜下观察病理学结果，采用TUNEL法测定凋亡细胞计数，分别采用Western blot法和RT-PCR法检测NLRP3、凋亡相关微粒蛋白(ASC)和caspase-1及其mRNA表达水平。 结果:与S组比较，I/R组、I/R＋M组、I/R＋H组和I/R＋M＋H组血清Cr、BUN、Kim-1、TNF-α、IL-1β和IL-6水平升高，肾损伤评分和凋亡细胞计数升高，肾组织NLRP3、ASC、caspase-1及其mRNA表达上调( P<0.05)；与I/R组比较，I/R＋M组、I/R＋H组和I/R＋M＋H组血清Cr、BUN、Kim-1、TNF-α、IL-1β和IL-6水平降低，肾损伤评分和凋亡细胞计数降低，肾组织NLRP3、ASC、caspase-1及其mRNA表达下调( P<0.05)；与I/R＋H组比较，I/R＋M＋H组血清Cr、BUN、Kim-1、TNF-α、IL-1β和IL-6水平降低，肾损伤评分和凋亡细胞计数降低，肾组织NLRP3、ASC、caspase-1及其mRNA表达下调( P<0.05)。 结论:富氢液减轻小鼠肾缺血再灌注损伤的机制与抑制NLRP3炎症小体激活有关。

目的:评价冷缺血期氢气膨肺对大鼠移植肺NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活性的影响。方法:清洁级健康雄性Wistar大鼠56只，8～10周龄，体重250～300 g，其中24只大鼠作为供体。取32只大鼠为受体，采用随机数字表法分为4组( n＝8)：假手术组(Sham组)行侧开胸手术，但不进行肺移植术；肺移植组(LT组)供肺冷缺血期不膨肺，进行肺移植术；氧气组(O组)和氢气组(H组)供肺冷缺血期分别以5 ml/kg的40%氧气-60%氮气和3%氢气-40%氧气-57%氮气膨肺，每20 min置换1次，持续120 min后行肺移植术。于移植前、再灌注3、60和120 min(T 0～T 3)时行动脉血气分析，计算氧合指数(OI)，记录pH值和碱剩余(BE)。T 3时取血结束后，放血法处死大鼠，光镜下观察移植肺组织病理学结果，并行肺组织损伤评分(LIS)，Western blot法测定移植肺NLRP3、凋亡相关微粒蛋白(ASC)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-1 p20表达。 结果:与Sham组比较，LT组T 1～3时OI、T 2，3时pH值和BE降低，LIS升高，NLRP3、ASC和caspase-1 p20表达上调( P<0.05)；与LT组比较，O组和H组T 2，3时OI和BE升高，O组T 3时和H组T 2，3时的pH值升高，LIS降低，H组NLRP3、ASC和caspase-1 p20表达下调( P<0.05)，O组NLRP3、ASC和caspase-1 p20表达差异无统计学意义( P>0.05)；与O组比较，H组T 2，3时BE升高，LIS降低，NLRP3、ASC和caspase-1 p20表达下调( P<0.05)，OI和pH值差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:冷缺血期氢气膨肺减轻大鼠移植肺损伤的机制可能与抑制NLRP3炎症小体活性有关。

目的:评价肿瘤坏死因子-α诱导蛋白家族8-样蛋白2(TIPE2)在脓毒症小鼠急性肺损伤内源性保护机制中的作用及其与髓样细胞表达触发受体-1(TREM-1)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路的关系。方法:雄性野生型小鼠和TIPE2基因敲除小鼠各20只，分别采用随机数字表法分为野生型假手术组(WT-sham组)、野生型急性肺损伤组(WT-ALI组)、TIPE2基因敲除型假手术组(KO-sham组)及TIPE2基因敲除急性肺损伤组(KO-ALI组)，每组10只。采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症小鼠急性肺损伤模型。术后24 h时腹主动脉釆血样后处死小鼠取肺组织，光镜下观察肺组织病理学结果并行肺损伤评分，确定湿重/干重(W/D)比值，检测髓过氧化物酶(MPO)活性，采用Western blot法检测TIPE2、TREM-1、NLRP3、caspase-1和GSDMD的表达，采用ELISA法检测血清IL-1β和IL-18的浓度。结果:与WT-sham组比较，WT-ALI组和KO-ALI组肺损伤评分、W/D比值、MPO活性、肺组织TREM-1、NLRP3、caspase-1、GSDMD表达水平及血清IL-1β和IL-18浓度升高，TIPE2表达下调( P<0.05)；与WT-ALI组比较，KO-ALI组肺损伤评分、W/D比值、MPO活性、TREM-1、NLRP3、caspase-1、GSDMD表达水平及血清IL-1β和IL-18的浓度升高，TIPE2表达下调( P<0.05)。 结论:TIPE2参与了脓毒症小鼠急性肺损伤的内源性保护机制，与抑制TREM-1/NLRP3炎症小体信号通路激活有关。

目的:探讨髓系细胞触发受体1(Trem1)在创伤性脑损伤(TBI)后炎性反应中的调控机制。方法:将成年野生型C57雄性小鼠按随机数字表法分为假手术组和TBI组，采用电子可控皮层撞击设备构建小鼠TBI模型，每组各6只，通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)和免疫荧光检测Trem1的表达；将野生型C57雄性小鼠随机分为假手术组和TBI组，Trem1基因敲除(Trem1 －/－)雄性小鼠随机分为假手术组和TBI组，每组各6只，通过Western blot检测各组脑组织Trem1、白细胞介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、P-Syk、Nod样受体家族包含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-1(Caspase-1)和ASC蛋白表达，通过干湿重量比法测定各组脑含水量；将野生型C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组、TBI组、TBI＋LR12(10 mg/kg)药物干预组，每组各6只，通过改良神经缺损评分和挂线实验评估各组神经功能。两组样本比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:TBI造模后3 d后Trem1的mRNA和蛋白水平均高于假手术组(1.693±0.194比1.015±0.072， t＝5.666， P<0.01；2.840±0.295比1.033±0.134， t＝8.618， P<0.01)。免疫荧光实验显示假手术组小胶质细胞不表达Trem1，而TBI组小鼠中的Trem1与小胶质细胞共标。在野生型小鼠中，TBI组的IL-1β、IL-18、TNF-α、P-Syk、NLRP3、Caspase-1和ASC蛋白相对表达量高于假手术组(2.623±0.412比1.000±0.000， t＝17.920， P<0.01；1.640±0.195比1.000±0.000， t＝7.066， P<0.01；2.307±0.284比1.000±0.000， t＝14.430， P<0.01；2.163±0.206比1.000±0.000， t＝12.840， P<0.01；2.820±0.282比1.000±0.000， t＝20.510， P<0.01；1.923±0.132比1.000±0.000， t＝10.410， P<0.01；2.170±0.149比1.000±0.000， t＝13.180， P<0.01；1.823±0.134比1.000±0.000， t＝9.278， P<0.01)；而在Trem1 －/－小鼠中，TBI组的IL-1β、IL-18、TNF-α、P-Syk、NLRP3、Caspase-1和ASC蛋白相对表达量蛋白相对表达量低于野生型小鼠TBI组(1.287±0.065比1.640±0.195， t＝3.901， P<0.05；1.897±0.122比2.307±0.284， t＝4.527， P<0.05；1.760±0.104比2.163±0.206， t＝4.453， P<0.05；1.513±0.263比2.820±0.282， t＝14.730， P<0.01；1.503±0.156比1.923±0.132， t＝4.733， P<0.05；1.593±0.194比2.170±0.149， t＝6.499， P<0.01；1.420±0.171比1.823±0.134， t＝4.545， P<0.05)，且脑含水量明显减少[(76.330±1.041)%比(81.330±1.756)%， t＝4.549， P<0.05]。野生型TBI组小鼠改良神经缺损评分明显高于野生型假手术组(10.500±1.517比2.167±1.169， t＝14.850， P<0.01)，挂线实验在金属线上保持的时间明显减少(51.000±9.899比104.200±14.050， t＝10.920， P<0.01)；与创伤性脑损伤组比较，创伤性脑损伤后给予LR12治疗组小鼠改良神经缺损评分明显降低(8.000±1.414比10.500±1.517， t＝4.456， P<0.05)，在金属线上保持的时间明显增加(73.830±11.440比51.000±9.899， t＝4.692， P<0.05)。 结论:Trem1参与TBI后小胶质细胞诱导的神经炎症，使用特异性靶向Trem1的抑制剂能够改善TBI后神经功能缺损。

目的:评价Toll样受体4(TLR4)/Src信号通路在肝缺血再灌注大鼠海马NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体激活中的作用。方法:清洁级健康雄性SD大鼠32只，8周龄，体重约200 g。采用随机数字表法分为4组( n＝8)：假手术组(Sham组)、肝缺血再灌注组(HIR组)、TLR4抑制剂TAK-242组(TAK-242组)和Src抑制剂PP2组(PP2组)。采用夹闭肝脏血管1.5 h恢复灌注的方法制备大鼠肝缺血再灌注损伤模型，TAK-242组于模型制备前30 min尾静脉注射TAK-242 0.5 mg/kg，PP2组于模型制备前3 d连续腹腔注射PP2 0.03 mg/kg。于再灌注6 h时处死大鼠取海马，采用ELISA法检测IL-1β和IL-18含量；采用TBA法检测MDA含量，采用总超氧化物歧化酶法检测SOD活性；采用Western blot法检测NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、c-Src、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1前体(pro caspase-1)、裂解含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(cleaved caspase-1)、TLR4和p-Src的表达。 结果:与Sham组比较，其余3组海马IL-1β、IL-18和MDA含量升高，SOD活性降低，NLRP3、cleaved caspase-1、ASC、TLR4和p-Src表达上调( P<0.05)；与HIR组比较，TAK-242组和PP2组IL-1β、IL-18和MDA含量降低，SOD活性升高，NLRP3、cleaved caspase-1、ASC、TLR4和p-Src表达下调( P<0.05)；TAK-242组和PP2组各指标比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:肝缺血再灌注大鼠海马NLRP3炎症小体激活的机制与活化TLR4/Src信号通路有关。

目的:评价核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)在小鼠脓毒症相关性脑病中的作用及其与小胶质细胞焦亡的关系。方法:SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠24只，6~8周龄，体质量18~22 g，采用随机数字表法分为3组( n＝6)：假手术组(Sham组)、脓毒症相关性脑病组(SAE组)和脓毒症相关性脑病+NLRP3抑制剂MCC950组(SAE+MCC950组)。采用盲肠结扎穿孔法制备小鼠脓毒症相关性脑病模型。SAE+MCC950组小鼠造模后1 h时腹腔注射MCC950 20 mg/kg，余组注射等容量生理盐水。造模后1 d时行旷场实验，记录站立次数和中央区停留时间；造模后2~3 d行新物体识别实验，记录探索指数。造模后3 d行为学实验结束后，处死小鼠取脑海马组织，采用Western blot法检测NLRP3的表达，采用免疫荧光技术计数NLRP3与小胶质细胞特异性离子钙结合衔接分子1(Iba-1)共表达细胞，采用ELISA法检测caspase-1活性、IL-1β和IL-18含量。 结果:与Sham组比较，SAE组和SAE+MCC950组站立次数减少，中央区停留时间缩短，探索指数降低，海马NLRP3表达上调，NLRP3 +-Iba-1 +细胞计数增加，caspase-1活性、IL-1β和IL-18含量升高( P<0.05)；与SAE组比较，SAE+MCC950组站立次数增多，中央区停留时间延长，探索指数升高，NLRP3表达下调，NLRP3 +-Iba-1 +细胞计数减少，caspase-1活性、IL-1β和IL-18含量降低( P<0.05)。 结论:NLRP3参与了小鼠脓毒症相关性脑病的发生，与其介导小胶质细胞焦亡有关。

目的:评价下丘脑外侧区星形胶质细胞NOD样受体相关蛋白3(NLRP3)在小鼠失血性休克复苏后焦虑样行为中的作用。方法:清洁级雄性C57BL/6小鼠48只，10周龄，体质量25~30 g，采用随机数字表法分为4组( n＝12)：假手术组(C组)、失血性休克复苏组(H组)、失血性休克复苏＋腺病毒组(HI组)和失血性休克复苏＋对照腺病毒组(HIV组)。H组、HI组和HIV组小鼠通过股静脉放血-回输法建立失血性休克复苏模型；建模前21 d时，HI组小鼠在立体定位仪引导下向双侧下丘脑外侧区注射AAV-GfaABC1D-EGFP-Cre腺病毒，HIV组注射AAV-GfaABC1D-EGFP对照腺病毒。复苏后14 d时，采用埋珠实验和高架十字迷宫实验评估焦虑样行为；行为学实验结束后立即处死小鼠，取含有下丘脑外侧区的脑组织，采用免疫荧光染色法，测定紫藤凝集素荧光强度反映细胞外基质表达，测定NLRP3和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)共定位情况，计算cleaved caspase-1/GFAP、IL-18/GFAP阳性细胞数占总细胞的百分比。 结果:与C组比较，H组、HI组和HIV组埋珠数量减少，开放臂停留时间百分比降低，下丘脑外侧区细胞外基质表达下调，cleaved caspase-1/GFAP和IL-18/GFAP阳性细胞百分比增加，HI组NLRP3与GFAP共定位系数降低( P<0.01)。与H组比较，HI组埋珠数量增加，开放臂停留时间百分比降低，下丘脑外侧区细胞外基质表达上调，NLRP3与GFAP共定位系数降低，cleaved caspase-1/GFAP和IL-18/GFAP阳性细胞百分比降低( P<0.01)，HIV组上述指标差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:小鼠失血性休克复苏后焦虑样行为与下丘脑外侧区星形胶质细胞NLRP3诱发焦亡，减少细胞外基质有关。

目的:评价内质网肌醇需要酶1α/X盒结合蛋白1(IRE1α/XBP1)信号通路在小鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)中的作用及其与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的关系。方法:SPF级健康雄性C57BL/6小鼠36只，6~8周龄，体质量25~30 g，采用随机数字表法分为3组( n＝12)：对照组(C组)、内毒素性ALI组(ALI组)和内毒素性ALI+STF-083010组(ST组)。ALI组和ST组雾化吸入LPS 3 mg/ml 30 min制备小鼠内毒素性ALI模型，C组雾化吸入等量生理盐水，ST组于雾化吸入LPS前1 h时腹腔注射IRE1α/XBP1信号通路阻断剂STF-083010 50 mg/kg，其余2组腹腔注射等容量生理盐水。LPS或生理盐水雾化吸入后24 h时处死小鼠，收集支气管肺泡灌洗液(BALF)并取肺组织标本，肺组织HE染色后光镜观察病理学结果，行肺损伤评分并计算肺湿重/干重(W/D)比值；ELISA法测定BALF上清液IL-1β和IL-18浓度；Western blot法检测肺组织p-IRE1α、XBP1s、NLRP3、ASC和caspase-1的表达。 结果:与C组比较，ALI组和ST组肺W/D比值、肺损伤评分、BALF IL-1β和IL-18浓度升高，肺组织p-IRE1α、XBP1s、NLRP3、ASC和caspase-1表达上调( P<0.001)；与ALI组比较，ST组肺W/D比值、肺损伤评分、BALF IL-1β和IL-18浓度降低、肺组织p-IRE1α、XBP1s、NLRP3、ASC和caspase-1表达下调( P<0.001)。 结论:IRE1α/XBP1信号通路参与了小鼠内毒素性ALI的过程，其机制与活化NLRP3炎症小体有关。