目的:评价雷帕霉素对大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)时NOD样受体C4(NLRC4)炎症小体活性的影响。方法:清洁级健康雄性SD大鼠36只，6～8周龄，体重200～250 g，采用随机数字表法分为3组( n＝12)：对照组(C组)、VILI组和雷帕霉素组(RAPA组)。RAPA组造模前连续3 d腹腔注射雷帕霉素4 mg·kg -1·d -1，C组和VILI组给予等容量生理盐水。VILI组和RAPA组行机械通气4 h，通气参数设置：RR 80次/min，FiO 2 21%，PEEP 0 cmH 2O，I∶E 1∶1，V T 20 ml/kg。机械通气结束后采集股动脉血样行血气分析，记录PaO 2；采用ELISA法检测血清IL-1β和IL-18浓度。收集左肺支气管肺泡灌洗液(BALF)，采用ELISA法测定中性粒细胞计数及IL-1β、IL-18浓度。取肺组织，HE染色后光镜下观察病理学结果，并进行肺损伤评分，测定湿重/干重(W/D)比值，采用Western blot法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、NLRC4和caspase-1的表达，采用RT-PCR法检测NLRC4 mRNA表达。 结果:与C组比较，VILI组和RAPA组肺组织W/D比值、肺损伤评分、BALF中性粒细胞计数及血清、BALF IL-1β、IL-18浓度均升高，PaO 2下降，肺组织mTOR、NLRC4、caspase-1及NLRC4 mRNA表达上调( P<0.01)；与VILI组比较，RAPA组肺组织W/D比值、肺损伤评分、BALF中性粒细胞计数及血清、BALF IL-1β、IL-18浓度均降低，PaO 2升高，肺组织mTOR、NLRC4、caspase-1及NLRC4 mRNA表达下调( P<0.05)。 结论:雷帕霉素减轻大鼠VILI的机制可能与抑制mTOR信号通路激活，进而抑制NLRC4炎症小体活性有关。

目的:探讨应用细胞分裂周期蛋白42（CDC42）对胰腺癌动脉灌注化疗效果及预后评估的价值。方法:回顾性分析2018年1月至2020年1月芜湖市第二人民医院收治的100例行动脉灌注化疗的胰腺癌患者的临床资料。根据CT检查判定的化疗效果分为有效组（完全缓解+部分缓解）和无效组（疾病稳定+疾病进展），比较两组患者的临床病理特征。采用多因素logistic回归模型分析患者化疗效果的影响因素。以CT检查评估的疗效为金标准，采用受试者工作特征（ROC）曲线分析灌注化疗前CDC42水平对胰腺癌患者动脉灌注化疗效果的预测价值。生存分析采用Kaplan-Meier法，并进行log-rank检验。结果:100例胰腺癌患者中，完全缓解13例，部分缓解30例，疾病稳定20例，疾病进展37例；有效组43例，无效组57例。无效组中肿瘤长径>4 cm、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期及灌注前糖类抗原199（CA199）>37 U/ml、癌胚抗原（CEA）>5 ng/ml、中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）>2.8、血清总胆红素>34.2 μmol/L、CDC42≤1.11 μg/L、分化程度低以及有血管侵犯的患者比例均较有效组高（均 P<0.05）。肿瘤长径>4 cm、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、灌注前CA199>37 U/ml、灌注前CEA>5 ng/ml、分化程度低、有血管侵犯以及CDC42≤1.11 μg/L是动脉灌注化疗有效的独立危险因素（均 P<0.05）。依据CDC42预测胰腺癌患者动脉灌注化疗无效的ROC曲线下面积为0.810（95% CI 0.781~0.839， P<0.01），最佳临界值为1.11 μg/L，灵敏度为96.25%，特异度为63.13%。CDC42>1.11μg/L患者2年总生存率为58.93%，CDC42≤1.11 μg/L患者为22.73%，差异有统计学意义（ χ2=14.99， P<0.001）。 结论:CDC42水平是胰腺癌患者动脉灌注化疗效果的独立影响因素，对预测患者预后有一定价值。

目的:评价沉默信息调节因子1(SIRT1)在电针减轻大鼠脑卒中后中枢性痛(CPSP)中的作用及其与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)的关系。方法:SPF级健康雄性SD大鼠50只，6周龄，体重180～220 g，采用随机数字表法分为5组( n＝10)：假手术组(Sham组)、CPSP组、CPSP+假电针组(SEA组)、CPSP+电针组(EA组)和CPSP+电针+ SIRT1抑制剂EX527组(EX527组)。除Sham组外，其余大鼠采用丘脑腹后外侧核内注射Ⅳ型胶原酶制备CPSP模型。于模型制备成功后24 h时EA组电针(2/15 Hz，30 min/d，持续5 d)刺激大鼠内关、人中和三阴交穴；SEA组电针刺激内关、人中和三阴交穴旁开5 mm处，其他处理同EA组；EX527组于电针刺激前30 min腹腔注射SIRT1抑制剂EX527 5 mg/kg，其他处理同EA组。于模型制备前1 d(T 0)和模型制备后1、3和5 d(T 1～3)时测定热缩足潜伏期(TWL)和机械缩足反应阈(MWT)，随后处死大鼠取脑组织，采用Western blot法检测SIRT1、NLRP3、IL-18和IL-1β的表达。 结果:与Sham组比较，CPSP组、SEA组、EA组和EX527组大鼠T 1～3时TWL和MWT降低，脑组织SIRT1表达下调，NLRP3、IL-18和IL-1β表达上调( P<0.05)；与CPSP组比较，EA组大鼠T 1～3时TWL和MWT升高，脑组织SIRT1表达上调，NLRP3、IL-18和IL-1β表达下调( P<0.05)，SEA组各指标比较差异无统计学意义( P>0.05)；与EA组比较，EX527组大鼠T 1～3时TWL和MWT降低，脑组织SIRT1表达下调，NLRP3、IL-18和IL-1β表达上调( P<0.05)。 结论:SIRT1参与了电针减轻大鼠CPSP的过程，与抑制NLRP3表达有关。

目的:评价ErbB2相互作用蛋白(Erbin)在小鼠脓毒症相关性脑病(SAE)中的作用及其与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体在其中的作用。方法:SPF级健康雄性野生型C57BL/6小鼠和Erbin (-/-) C57BL/6小鼠各60只，8~10周龄，体重20~25g，采用随机数字表法分为4组( n＝30)：野生型假手术组(WT+Sham组)、野生型SAE组(WT+SAE)、Erbin (-/-)假手术组(EKO+Sham组)和Erbin (-/-)+SAE组(EKO+SAE组)。采用盲肠结扎穿孔法制备小鼠SAE模型。于造模后7 d时行旷场实验(移动总距离)，造模后8 d时行新物体识别实验(识别指数)，造模后10 d时行Morris水迷宫实验(目标象限停留时间)。于造模后24 h时处死小鼠取海马组织，采用HE染色观察海马组织病理学结果，并计数神经元，计算神经元存活率；采用Western blot法检测NLRP3、caspase-1和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)表达；采用免疫组化法计数NLRP3阳性细胞；采用ELISA法检测IL-1β、TNF-α和IL-18含量。 结果:与WT+Sham组比较，WT+SAE组目标象限停留时间缩短，识别指数和神经元存活率降低，海马组织IL-1β、IL-18、TNF-α含量和NLRP3阳性细胞计数升高，NLRP3、caspase-1和ASC表达上调( P<0.05)；与EKO+Sham组比较，EKO+SAE组目标象限停留时间缩短，识别指数和神经元存活率降低，海马组织IL-1β、IL-18、TNF-α含量和NLRP3阳性细胞计数升高，NLRP3、caspase-1和ASC表达上调( P<0.05)；与WT+SAE组比较，EKO+SAE组目标象限停留时间缩短，识别指数和神经元存活率降低，海马组织IL-1β、IL-18、TNF-α含量和NLRP3阳性细胞计数升高，NLRP3、caspase-1和ASC表达上调( P<0.05)；4组移动总距离比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:Erbin可通过抑制NLRP3炎症小体的活化，对SAE小鼠产生内源性保护作用。

目的:评价蛋白激酶C(PKC)-δ在大鼠机械通气相关性肺损伤中的作用及其与NOD样受体包含CARD结构域蛋白4(NLRC4)的关系。方法:清洁级健康雄性SD大鼠36只，6～8周龄，体重200～250 g，采用随机数字表法分为3组( n＝12)：对照组(C组)、机械通气相关性肺损伤组(V组)和机械通气相关性肺损伤＋KAI 9803组(VK组)。气管切开后置入气管导管行机械通气，设置V T 40 ml/kg，通气频率60次/min，I∶E为1∶2，吸入空气。C组气管插管后不行机械通气。气管插管完成后即刻VK组于气管内滴注PKC-δ特异性抑制剂KAI 9803 200 μg/kg，余2组滴入等量PBS。机械通气4 h时，股动脉采血行血气分析，记录PaO 2。开胸取肺组织，行左侧肺灌洗，收集肺泡灌洗液。光镜下观察肺组织病理学结果并行肺损伤评分；采用ELISA法检测肺泡灌洗液IL-1β和IL-18浓度，Western blot法检测右肺下叶NLRC4、caspase-1和PKC-δ表达，RT-PCR法检测右肺下叶NLRC4 mRNA表达，计算右肺中叶湿重/干重(W/D)比值。 结果:与C组比较，余2组肺损伤评分和W/D比值升高，PaO 2降低，肺泡灌洗液IL-18和IL-1β浓度升高，肺组织NLRC4、caspase-1和NLRC4 mRNA表达上调，V组肺组织PKC-δ表达上调( P<0.01)，肺泡腔内可见大量水肿液渗出并伴炎性细胞浸润；与V组比较，VK组肺损伤评分和W/D比值降低，PaO 2升高，肺泡灌洗液IL-18和IL-1β浓度降低，肺组织NLRC4、caspase-1、PKC-δ和NLRC4 mRNA表达下调( P<0.05)，肺泡腔液体渗出和炎性细胞浸润程度减轻。 结论:PKC-δ参与了大鼠机械通气相关性肺损伤的过程，与抑制NLRC4表达有关。

目的:评价小鼠内毒素性心肌损伤时Sestrin2与线粒体DNA(mtDNA)-NOD样受体相关蛋白3(NLRP3)炎性小体通路的关系。方法:清洁级健康雄性ICR小鼠184只，8~12周龄，体质量20~25 g。取小鼠168只，采用随机数字表法分为7组( n＝24)：正常对照组(N组)、LPS组(L组)、mtDNA组、LPS+mtDNA组(M组)、正常对照+阴性对照腺相关病毒(AAV-NC)组(NC组)、LPS+mtDNA+AAV-NC组(MC组)和LPS+mtDNA+Sestrin2过表达腺相关病毒(AAV-Sestrin2)组(MS组)。另取10只小鼠用于检测AAV-Sestrin2转染效果，其余6只小鼠用于提取mtDNA。采用腹腔注射LPS 10 mg/kg制备内毒素性心肌损伤模型。mtDNA组腹腔注射mtDNA 5 mg/kg；M组腹腔注射LPS后30 min时腹腔注射mtDNA 5 mg/kg；MS组尾静脉注射AAV-Sestrin2 150 μl，MC组和NC组尾静脉注射等容量AAV-NC。病毒注射后4周，MS和MC组腹腔注射LPS 10 mg/kg，30 min后腹腔注射mtDNA 5 mg/kg。注射LPS后24 h时收集血液标本，采用全自动生化分析仪测定血清CK-MB和LDH活性，ELISA法测定血清cTnI、IL-18和IL-1β浓度，qRT-PCR法检测血清mtDNA表达水平。取血结束后处死小鼠，取心肌组织，采用DHE染色法测定ROS含量，铁离子还原/抗氧化能力法测定总抗氧能力(T-AOC)含量，化学发光法测定ATP含量，Western blot法测定NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1活性亚基p20(caspase-1p20)、凋亡相关点样蛋白(ASC)表达，HE染色观察病理学结果。 结果:与N组比较，L组和mtDNA组血清CK-MB、LDH、cTnI、IL-1β和IL-18水平升高，mtDNA表达上调，心肌组织ROS含量升高，T-AOC和ATP含量降低，NLRP3、caspase-1p20和ASC表达上调( P<0.05)，心肌病理学损伤加重。与L组和mtDNA组比较，M组血清CK-MB、LDH、cTnI、IL-1β、IL-18水平升高，mtDNA表达上调，心肌组织ROS含量升高，T-AOC和ATP含量降低，NLRP3、caspase-1p20和ASC表达上调( P<0.05)，心肌病理学损伤加重。与M组比较，MS组血清CK-MB、LDH、cTnI、IL-1β、IL-18水平降低，mtDNA表达下调，心肌组织ROS含量降低，T-AOC和ATP含量升高，NLRP3、caspase-1p20和ASC表达下调( P<0.05)，心肌病理学损伤减轻。 结论:Sestrin2可通过减轻线粒体损伤、抑制氧化应激，保护mtDNA免受氧化损伤，进而抑制mtDNA-NLRP3炎性小体通路，减轻小鼠内毒素性心肌损伤。

目的 观察清解化攻方对重症急性胰腺炎(SAP)小鼠模型的治疗作用,探索清解化攻方抗炎症反应的作用机制.方法 将36只C57BL/6J雄性小鼠随机分成空白组,模型组,清解化攻方低、中、高剂量组,西药组(乌司他丁),每组6只,除空白组小鼠,余各组小鼠采用逆行胰胆管注射5%牛黄胆酸钠建立SAP模型,清解化攻方低、中、高剂量组在造模后分别予以清解化攻方1、2、4 g/kg灌胃,西药组在造模后予以腹腔注射乌司他丁(5×104 U/kg),共干预7 d.采用苏木素-伊红染色观察胰腺组织病理改变;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18和TNF-α水平;RT-qPCR检测胰腺组织NOD样受体蛋白3(NLRP3)、Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)mRNA表达水平;免疫组化检测胰腺组织NLRP3、TLR4、NF-κB的阳性表达率;Western Blot技术检测NLRP3、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6蛋白的表达水平.计量资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验.结果 与空白组相比,模型组小鼠胰腺组织结构弥漫性破坏、胰腺小叶间隔局灶性扩张、腺泡萎缩和大量炎症细胞浸润,α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18和TNF-α含量明显升高(P值均<0.05),NLRP3、TLR4、NF-κB mRNA表达水平及阳性表达率均明显上升(P值均<0.05),NLRP3、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6蛋白表达均明显上调(P值均<0.05).与模型组相比,清解化攻方各剂量组和西药组可见小鼠胰腺组织结构稍紧密、完整,胰腺腺泡细胞排列有序,伴少量炎症细胞浸润和胰腺小叶出血灶,α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18和TNF-α含量明显下降(P值均<0.05),NLRP3、TLR4、NF-κB mRNA表达水平及阳性表达率均明显降低(P值均<0.05),NLRP3、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6蛋白表达水平均明显减弱(P值均<0.05).结论 清解化攻方可能通过抑制NLRP3/TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白的激活,减少炎症介质的释放,防止炎症级联反应增强,进而对SAP小鼠胰腺组织发挥保护作用.

目的 寻找对结直肠癌具有理想诊断效能的敏感且特异的微创生物标志物.方法 应用蛋白质印迹法及酶联免疫吸附试验(ELISA)分析 2021-07-30-2021-12-31 山东省肿瘤医院收治的 224 例结直肠癌患者(包括 117 例早期患者)与 210 名健康志愿者血浆外泌体脂多糖结合蛋白(LBP)的表达差异.使用SPSS 26.0 分析LBP作为诊断标志物的灵敏度和特异度.通过 Wilcoxon符号秩检验分析配对样本 LBP浓度与手术的关系.采用 Spearman相关性分析判断 LBP不同表达浓度与患者发生肝转移以及血液学指标是否存在关系.结果 蛋白质印迹法及 ELISA验证均发现结直肠癌患者血浆外泌体 LBP表达水平高于健康志愿者,均P＜0.001.受试者工作特征(ROC)曲线结果显示,外泌体 LBP对结直肠癌与早期结直肠癌的诊断效能分别为 0.871 和 0.861,联合癌胚抗原(CEA)、糖类抗原 19-9(CA19-9)后诊断结直肠癌及早期结直肠癌的 AUC值分别为 0.879 和 0.846.相较于未发生转移的患者,发生肝转移的结直肠癌患者外泌体LBP水平更高(P＜0.001),联合CEA后对肝转移的诊断效能为 0.863.去除肿瘤后 2 周内,血液学指标血小板/淋巴细胞比值(PLR,rs=0.506,P＜0.01)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR,rs=0.533,P＜0.01)水平与患者血浆外泌体 LBP水平呈正向相关关系,均表现为水平上调,均P＜0.001;而淋巴细胞/单核细胞比值(LMR,rs=-0.325,P=0.031)与LBP水平呈负向相关关系,出现水平下调,P＜0.001.结论 血浆外泌体 LBP可以作为结直肠癌尤其是早期结直肠癌的新型诊断标志物,可以用于临床监测肿瘤进展.

[目的]探讨肠脂肪酸结合蛋白(IFABP)联合中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、降钙素原(PCT)检测对小儿绞窄性肠梗阻的诊断价值.[方法]以两院收治的96例肠梗阻患儿作为观察组,另选取同期来医院体检的84例健康小儿为对照组.比较两组对象的血清IFABP、NLR、PCT水平.统计绞窄性肠梗阻患儿的发生情况,比较绞窄性肠梗阻患儿与单纯肠梗阻患儿的临床特征,采用Logistic多元回归分析影响绞窄性肠梗阻发生的因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IFABP联合NLR、PCT水平诊断小儿绞窄性肠梗阻的价值.[结果]观察组患儿血清IFABP、NLR、PCT水平均高于对照组(P＜0.05);96肠梗阻患儿中绞窄性肠梗阻的发生率为43.75％(42/96).绞窄性肠梗阻患儿腹膜刺激征、腹部手术史构成比及血清IFABP、NLR、PCT水平均高于单纯肠梗阻患儿,且差异有统计学意义(P＜0.05).Logistic多因素回归分析显示:血清IFABP、NLR、PCT水平及腹部手术史均是小儿发生绞窄性肠梗阻的独立危险因素(P＜0.05);ROC分析显示,血清IFABP、NLR、PCT水平诊断小儿绞窄性肠梗阻的最佳截断点分别为375.80 pg/mL、3.82 ng/mL、0.34 ng/mL,曲线下面积(AUC)分别为0.818、0.786、0.821,联合诊断时特异度和AUC均最高.[结论]绞窄性肠梗阻患儿血清IFABP、NLR、PCT水平均异常升高,其均可作为诊断小儿绞窄性肠梗阻的敏感指标,且联合诊断时价值更高.

目的:探讨血清Smac检测在上皮性卵巢癌(EOC)诊断和病情监测中的临床意义.方法:选取2015年12月—2017年1月于天津市中心妇产科医院经手术治疗的100例卵巢肿物患者,术后病理诊断明确,根据良恶性分为卵巢良性肿瘤组40例,上皮性卵巢癌组60例;另选取本院体检合格的健康对照组40例.分别收集手术前后及化疗过程中的清晨空腹血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清Smac水平.结果:血清Smac在上皮性卵巢癌组中的表达水平低于健康对照组和卵巢良性肿瘤组(P<0.05);根据受试者工作特征(ROC)曲线,确定血清Smac表达的临界值为429.39 pmol/L,Smac检测的敏感度为91.67%,特异度为95%;Smac在Ⅰ+Ⅱ期EOC的阳性数为14例,阳性率为87.50%;在Ⅲ+Ⅳ期的阳性数为41例,阳性率为93.18%,差异无统计学意义(P>0.05);在EOC中,血清Smac与患者年龄、病理类型、有无腹水、中性粒细胞/淋巴细胞(NLR)和血小板/淋巴细胞(PLR)无关,与国际妇产科联盟(FIGO)分期和淋巴结转移有关;手术后血清Smac的表达水平高于术前,差异有统计学意义(P=0.000),随着化疗次数的增加,Smac表达水平逐渐升高,Smac在第2疗程结束后升至正常.结论:血清Smac表达水平对EOC的早期诊断,鉴别卵巢良恶性肿瘤及EOC术后的病情监测均有一定临床价值.